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骨形态发生蛋白9、6双表达腺病毒载体的构建及其成骨诱导作用 被引量:3
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作者 迭小红 罗庆 +2 位作者 陈聪 罗光金 康权 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1273-1279,共7页
目的构建双表达骨形态发生蛋白(BMP)9、6重组腺病毒并探讨其对C3H10细胞成骨的影响。方法以单一表达的BMP9或BMP6 AdEasy质粒为模板,PCR自扩增BMP9和BMP6基因序列,先后将其插入穿梭质粒pASG2,获得双表达穿梭质粒pASG2-BMP9、6,然后与腺... 目的构建双表达骨形态发生蛋白(BMP)9、6重组腺病毒并探讨其对C3H10细胞成骨的影响。方法以单一表达的BMP9或BMP6 AdEasy质粒为模板,PCR自扩增BMP9和BMP6基因序列,先后将其插入穿梭质粒pASG2,获得双表达穿梭质粒pASG2-BMP9、6,然后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183中同源重组,酶切鉴定成功后,转染至HEK293细胞中包装和扩增得到高滴度双表达腺病毒AdBMP9、6,体外转染C3H10细胞,RT-PCR方法检测BMP9、BMP6 mRNA水平的表达,早期成骨指标碱性磷酸酶染色、晚期指标钙茜素红染色检测其成骨作用。结果成功构建双表达重组腺病毒AdBMP9、6,RT-PCR证实双表达腺病毒能成功转染C3H10细胞,并且转染的C3H10细胞早晚期成骨指标碱性磷酸酶染色及钙茜素红染色活性较单一表达BMP9或BMP6的腺病毒组均增强。结论双表达重组腺病毒载体AdBMP9、6具有定向诱导C3H10细胞成骨分化的能力,且较单一表达BMP9或BMP6强。 展开更多
关键词 双表达载体 形态发生蛋白9 形态发生蛋白6 重组腺病毒
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骨形态发生蛋白-6对氧化应激状态下的视网膜色素上皮细胞基质金属蛋白酶及其抑制剂的影响 被引量:6
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作者 陈丽 刘明 刘勇 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第11期1017-1020,共4页
目的探讨骨形态发生蛋白-6(bone morphogenetic protein-6,BMP-6)保护视网膜色素上皮细胞免受氧化应激损伤的可能作用机制。方法将ARPE-19细胞分别置正常对照、75μmol·L-1 H2O2(H2O2组)、75μmol·L-1 H2O2+150 ng·mL-1 ... 目的探讨骨形态发生蛋白-6(bone morphogenetic protein-6,BMP-6)保护视网膜色素上皮细胞免受氧化应激损伤的可能作用机制。方法将ARPE-19细胞分别置正常对照、75μmol·L-1 H2O2(H2O2组)、75μmol·L-1 H2O2+150 ng·mL-1 BMP-6(H2O2+BMP-6组)及150 ng·mL-1BMP-6(BMP-6组)环境中培养0 h、3 h、6 h、9 h及12 h后,用MTT法观察细胞的活性,确定试剂的干预时间。选定作用时间后采用Western blot及RT-qPCR测定基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)以及基质金属蛋白酶抑制剂(the inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)蛋白及mRNA水平的变化。结果作用3 h及6 h后,H2O2组、BMP-6组及H2O2+BMP-6组细胞活性(3 h为0.524 8±0.024 0、1.012 5±0.017 7、0.591 7±0.099 8;6 h为0.459 3±0.030 9、1.077 5±0.021 4、0.582 0±0.013 9)差异均有统计学意义(均为P<0.05)。MMP-2、MMP-9、TIMP-1的mRNA及蛋白水平的检测结果是一致的,H2O2组、BMP-6组及H2O2+BMP-6组两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05),各组的不同时间差异也均有统计学意义(均为P<0.05)。H2O2组随着作用时间的延长,MMP-2、MMP-9在蛋白及mRNA水平的含量表达明显增加,而TIMP-1在蛋白及mRNA水平的表达均是降低的。BMP-6组MMP-2、MMP-9在蛋白及mRNA水平的表达明显降低,而TIMP-1在蛋白及mRNA水平的表达均是升高的。BMP-6+H2O2组MMP-2、MMP-9的水平均较单纯H2O2组的水平低,而TIMP-1的水平是升高的。结论 H2O2是通过打破基质金属蛋白及其抑制剂的平衡起到氧化损伤作用。而BMP-6可以保护视网膜色素上皮细胞免受氧化应激的损伤,其可能机制是通过基质金属蛋白酶系统起作用的。 展开更多
关键词 形态发生蛋白-6 氧化应激 年龄相关性黄斑变性 基质金属蛋白 基质金属蛋白酶抑制剂
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猪骨形态发生蛋白-6基因多态性及其与产仔性能的关联性分析 被引量:3
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作者 崔羽 杨少成 +1 位作者 刘娣 华育平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第12期137-141,共5页
试验旨在研究猪骨形态发生蛋白-6(bone morphogenetic protein 6,BMP-6)基因多态性及其与产仔性能的关联。采用PCR-SSCP技术检测了野猪、民猪、长白猪、北京黑猪、法系大白猪5个猪种268个个体BMP-6基因的多态性,并分析了BMP-6基因多态... 试验旨在研究猪骨形态发生蛋白-6(bone morphogenetic protein 6,BMP-6)基因多态性及其与产仔性能的关联。采用PCR-SSCP技术检测了野猪、民猪、长白猪、北京黑猪、法系大白猪5个猪种268个个体BMP-6基因的多态性,并分析了BMP-6基因多态性与法系大白猪产仔性能的关联性。结果表明,猪BMP-6基因CDS区1104位存在1个G→A的同义突变,产生AA、AB、BB 3种基因型,其中在野猪和民猪中,A等位基因频率高;在长白猪、北京黑猪和法系大白猪中,B等位基因频率高。不同基因型对法系大白猪产仔数和产活仔数的影响差异显著(P<0.05),初步认为BMP-6基因多态性与产仔性能显著关联。 展开更多
关键词 形态发生蛋白-6基因 多态性 产仔数
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不同分子类型乳腺癌骨形态发生蛋白6表达的临床意义
4
作者 丁梅 胡芬 +4 位作者 王增辉 杨艳玲 马振玲 李宗富 李润华 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1305-1309,共5页
目的探讨不同分子类型乳腺癌患者骨形态发生蛋白6(BMP-6)表达情况及其与临床病理特征的关系。方法选取2013年1月—2015年3月在唐山市协和医院普外科接受手术并经病理证实的女性乳腺癌患者426例,其中Luminal A型149例,Luminal B型97例,... 目的探讨不同分子类型乳腺癌患者骨形态发生蛋白6(BMP-6)表达情况及其与临床病理特征的关系。方法选取2013年1月—2015年3月在唐山市协和医院普外科接受手术并经病理证实的女性乳腺癌患者426例,其中Luminal A型149例,Luminal B型97例,表皮生长因子受体2(Her-2)阳性型72例,Basal-like型108例。采用实时荧光定量反转录PCR检测不同分子类型乳腺癌BMP-6 mRNA表达情况,采用免疫组织化学染色法检测不同分子类型乳腺癌BMP-6表达情况,并对不同分子类型乳腺癌患者临床特征进行比较。结果不同分子类型乳腺癌组织BMP-6mRNA表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中Basal-like型BMP-6 mRNA表达水平低于Luminal A型(P<0.05)。不同分子类型乳腺癌组织BMP-6 mRNA表达水平均低于癌旁组织(P<0.01)。不同分子类型乳腺癌组织BMP-6表达水平比较,差异有统计学意义(χ2=19.01,P=0.02);其中Luminal A型阴性(-)率低于Basal-like型(χ2=5.17,P=0.002);Luminal A型强阳性(+++)率高于Basal-like型(χ2=8.84,P<0.001)。不同分子类型乳腺癌患者淋巴结转移率比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同分子类型乳腺癌患者肿瘤最大径分布、内脏转移率比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其中Basal-like型内脏转移率高于Luminal A型(χ2=14.71,P<0.001)。结论BMP-6在不同分子类型乳腺癌中的表达具有差异性,临床或可对不同类型的乳腺癌患者采取不同的BMP-6治疗方案。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 形态发生蛋白6 分子分类
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淇河鲫bmp6基因的克隆及表达特性分析
5
作者 马峻 连凯琪 +5 位作者 闪金研 刘玉玲 李晓龙 赵黎明 李学军 彭仁海 《华北农学报》 北大核心 2025年第2期218-229,共12页
骨形态发生蛋白6(bmp6)基因对鱼类肌间刺的形成发育具有重要的调控作用。为探究淇河鲫bmp6基因的序列特征和表达特性,通过克隆获得淇河鲫bmp6基因的编码序列(CDS),并进行生物信息学分析;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测,分析bmp6基因... 骨形态发生蛋白6(bmp6)基因对鱼类肌间刺的形成发育具有重要的调控作用。为探究淇河鲫bmp6基因的序列特征和表达特性,通过克隆获得淇河鲫bmp6基因的编码序列(CDS),并进行生物信息学分析;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测,分析bmp6基因在淇河鲫不同组织和发育时期的表达差异。结果显示,淇河鲫bmp6基因由两部分同源基因各3个等位基因组成,分别是bmp6a-1、bmp6a-2、bmp6a-3和bmp6b-1、bmp6b-2、bmp6b-3,其CDS序列全长分别为1245,1257 bp,编码414,418个氨基酸。bmp6a和bmp6b均是含有一个信号肽序列且无跨膜结构的不稳定疏水性分泌蛋白,bmp6a主要分布在线粒体、细胞核和细胞质中,而bmp6b主要分布在细胞核与线粒体上。bmp6a和bmp6b二级结构都以无规则卷曲为主,与三级结构预测的结果一致,且都具有1个TGF-β-rel家族保守结构域。氨基酸序列同源性分析表明,淇河鲫bmp6a氨基酸序列与团头鲂bmp6具有较高的相似性,与哺乳动物的相似性较低,而淇河鲫bmp6b氨基酸序列与鲫鱼和银鲫的bmp6b具有较高的相似性。系统发育树分析显示,淇河鲫bmp6a与鲤鱼bmp6a聚于同一进化支,而淇河鲫bmp6b与鲫鱼和银鲫bmp6b聚于同一进化支。qRT-PCR检测结果表明,bmp6a和bmp6b基因在淇河鲫的脑、肌肉、鳃、脾脏、肠、性腺、肝脏和肾脏组织中均有表达,但在肝脏、鳃组织和肾脏中表达量较高;二者在淇河鲫幼鱼不同发育时期具有相似的表达模式,在肌间刺骨化前,bmp6a和bmp6b的表达量最高,之后随着肌间刺的发育形成,bmp6a和bmp6b的表达量降低。综上,通过克隆获得淇河鲫bmp6基因CDS序列,并进行生物信息学分析和qRT-PCR检测,为进一步创制淇河鲫无肌间刺新品系提供了参考依据。 展开更多
关键词 淇河鲫 形态发生蛋白6(bmp6) 基因克隆 序列分析 基因表达
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骨形态发生蛋白-6对转化生长因子-β2所致视网膜色素上皮细胞迁移的影响
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作者 吉梦 刘明 +3 位作者 马波 刘轩 裴澄 陈丽 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第8期717-721,共5页
目的探讨骨形态发生蛋白-6(BMP-6)对转化生长因子-β2(TGF-β2)所致视网膜色素上皮(RPE)细胞迁移的影响。方法RPE细胞常规培养后,用5μg·L-1 TGF-β2处理48 h,Western blot检测细胞中BMP-6蛋白水平的变化,Transwell法检测细胞迁移... 目的探讨骨形态发生蛋白-6(BMP-6)对转化生长因子-β2(TGF-β2)所致视网膜色素上皮(RPE)细胞迁移的影响。方法RPE细胞常规培养后,用5μg·L-1 TGF-β2处理48 h,Western blot检测细胞中BMP-6蛋白水平的变化,Transwell法检测细胞迁移能力变化。随后,筛选BMP-6 siRNA抑制率最高的片段用于后续实验,构建BMP-6过表达质粒并进行鉴定后用于后续实验,RPE细胞随机分组,即(1)对照组加入正常培养基培养48 h;(2)TGF-β2组培养基中加入5μg·L-1 TGF-β2培养48 h;(3)BMP-6 siRNA组转染BMP-6-homo-1087后培养48 h;(4)BMP-6过表达组转染BMP-6过表达质粒后培养48 h;(5)TGF-β2+BMP-6过表达组转染BMP-6过表达质粒24 h后,加入5μg·L-1TGF-β2继续培养48 h。Transwell法检测细胞迁移数的变化,倒置显微镜观察细胞形态的变化。结果TGF-β2组迁移细胞数为(122.00±5.57)个,与对照组(63.67±4.04)个相比差异有统计学意义(P=0.000)。TGF-β2组BMP-6蛋白表达水平为0.41±0.13,与对照组(0.70±0.08)相比差异具有统计学意义(P=0.031)。BMP-6 siRNA组迁移细胞数为(115.67±1.53)个,与对照组(57.00±7.00)个相比差异具有统计学意义(P=0.000)。BMP-6过表达组迁移细胞数为(44.33±5.51)个,与对照组(60.00±6.25)个相比差异无统计学意义(P=0.076)。TGF-β2+BMP-6过表达组迁移细胞数为(90.33±3.51)个,与TGF-β2组(112.00±9.64)个相比差异具有统计学意义(P=0.016)。结论BMP-6可以阻止TGF-β2所致的RPE细胞的迁移,为增生性玻璃体视网膜病变的防治提供新的视角。 展开更多
关键词 形态发生蛋白-6 转化生长因子-Β2 视网膜色素上皮细胞 增生性玻璃体视网膜病变 细胞迁移
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绵羊骨形态发生蛋白4(BMP4)的生物信息学分析 被引量:3
7
作者 樊振华 张秋月 +1 位作者 范瑞文 任玉红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期1370-1376,共7页
为探究绵羊骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)的生物学特性,本试验综合运用NCBI、DNAMAN、DNAStar、TMHMM Server v.2.0、PsortⅡ、SignalP等多种生物信息学软件推测绵羊BMP4基因序列性质及编码蛋白的理化性质、疏水... 为探究绵羊骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)的生物学特性,本试验综合运用NCBI、DNAMAN、DNAStar、TMHMM Server v.2.0、PsortⅡ、SignalP等多种生物信息学软件推测绵羊BMP4基因序列性质及编码蛋白的理化性质、疏水性、磷酸化位点、保守性结构域和二级结构,并用SWISS-MODEL Workspace预测三维结构。结果显示,绵羊BMP4基因与各物种的BMP4基因存在很高的同源性,编码蛋白是一个不稳定的亲水蛋白,不存在跨膜区,很可能位于细胞核中,且存在信号肽。BMP4具有18个磷酸化位点,通过功能域的预测发现,含有2个功能域,即TGF-β超家族和TGF-β前肽超家族。这与BMP4基因家族的功能相一致,证明了绵羊BMP4是一种生长因子,具有信号传导功能。蛋白三维结构预测结果与模板3bmp.1.A同源性达到了88.29%。绵羊BMP4基因的生物信息学分析可为以后实践中深入研究其功能提供参考。 展开更多
关键词 绵羊 形态发生蛋白4(bmp4) 功能预测 生物信息学
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新疆北疆地区类风湿关节炎患者中医证候分布规律及不同证型IL-1β、BMP6的差异性分析 被引量:3
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作者 欧阳文柏 张道雨 +3 位作者 薛萌萌 刘永丰 唐琪 刘新 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第8期568-574,共7页
目的:探究新疆北疆地区类风湿关节炎(RA)的中医证候分布规律及其与相关因子的内在关系,为类风湿关节炎的治疗提供帮助。方法:收集北疆地区类风湿关节炎患者217例,对其中医证型、舌苔、脉象、症状、病程、DAS28疾病活动度及用ELISA法测得... 目的:探究新疆北疆地区类风湿关节炎(RA)的中医证候分布规律及其与相关因子的内在关系,为类风湿关节炎的治疗提供帮助。方法:收集北疆地区类风湿关节炎患者217例,对其中医证型、舌苔、脉象、症状、病程、DAS28疾病活动度及用ELISA法测得的IL-1β、BMP6等指标进行统计分析。结果:RA患者女性多于男性,中医证型比例为寒湿痹阻证>肝肾不足证>痰瘀痹阻证>湿热痹阻证>风湿痹阻症>气血两虚证,不同中医证型RA患者性别、年龄分布无统计学差异(P>0.05),该地区RA患者主要证候特点以关节晨僵、关节痛有定处、关节疼痛喜按、遇寒痛增、阴雨天加重、日轻夜重、关节屈伸不利、腰膝酸软、肢体沉重等症状较为常见,不同证型间的病程、DAS28疾病活动度、C反应蛋白、BMP6存在统计学差异(P<0.05),IL-6、IL-1β、RF、抗环瓜氨酸多肽抗体不存在统计学差异(P>0.05)。与其他证型相比,风湿痹阻症的C反应蛋白高于肝肾不足证、寒湿痹阻证的DAS28疾病活动度水平高于肝肾不足证、湿热痹阻证的BMP6水平高于风湿痹阻证、寒湿痹阻证,痰瘀痹阻证BMP6水平高于风湿痹阻证。结论:新疆北疆地区的RA患者中医证候特点以“寒”“湿”“虚”为主,证型以寒湿痹阻证最为多见,且疾病活动度较高,湿热痹阻证及痰瘀痹阻证的骨关节异常表现较为突出,BMP6水平相对较高。年龄和性别对RA的发病有影响,病程长短对RA的中医证型分布有影响。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 中医证候 形态发生蛋白6
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骨形态发生蛋白研究的某些进展 被引量:2
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作者 刘昌乙 李晓勇 王纯 《成都体育学院学报》 CSSCI 北大核心 1995年第1期81-85,共5页
骨科基础研究近年有了很大进展,尤以骨形态发生蛋白(BMP)的研究最为活跃,成为一大热点,认为BMP对骨发育、骨重建、骨修复等有根本性的科学意义。在全球范围内开展了大量的工作,成果丰硕,令人瞩目。本文就BMP的来源和生... 骨科基础研究近年有了很大进展,尤以骨形态发生蛋白(BMP)的研究最为活跃,成为一大热点,认为BMP对骨发育、骨重建、骨修复等有根本性的科学意义。在全球范围内开展了大量的工作,成果丰硕,令人瞩目。本文就BMP的来源和生化特性、提取、分子生物学的研究,BMP诱导成骨机制,BMP的载体及其释放系统和BMP在骨科应用等方面研究的某些进展作一概述。 展开更多
关键词 形态发生蛋白 bmp 分子生物学 载体
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骨形态发生蛋白7对胰岛素分泌的影响及机制研究 被引量:1
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作者 姜友昭 曾俊 陈兵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期879-882,共4页
目的探讨骨形态发生蛋白7(bone morphorgenetic protein 7,BMP7)对胰岛细胞胰岛素分泌的影响。方法Western blot检测小鼠胰岛细胞株MIN6中3种BMP7的Ⅰ型受体BMPR1A、BMPR1B、ACVR1A的表达情况。将MIN6细胞分为4组:PBS对照组,重组人BMP7(... 目的探讨骨形态发生蛋白7(bone morphorgenetic protein 7,BMP7)对胰岛细胞胰岛素分泌的影响。方法Western blot检测小鼠胰岛细胞株MIN6中3种BMP7的Ⅰ型受体BMPR1A、BMPR1B、ACVR1A的表达情况。将MIN6细胞分为4组:PBS对照组,重组人BMP7(rhBMP7)低、中、高剂量组(rhBMP7终浓度分别为10、50、100 ng/ml),每组设5个复孔。ELISA检测各组细胞培养基中的胰岛素分泌情况。激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度变化。结果BMPR1A、BMPR1B、ACVR1A均表达于MIN6细胞。PBS对照组及rhBMP7低、中、高剂量组的胰岛素浓度分别为(0.42±0.11)、(0.63±0.22)、(0.82±0.19)、(1.24±0.26)ng/(ml.μg)。与对照组相比,rhBMP7低、中、高剂量组的胰岛素分泌均明显增加(P<0.05)。PBS对照组及rhBMP7低、中、高剂量组的细胞内钙离子浓度增加分别为(3.5±2.1)%、(4.2±2.3)%、(5.1±3.5)%、(4.9±2.7)%,4组间差异不显著(P>0.05)。结论 BMP7可显著促进胰岛细胞的胰岛素分泌,其作用机制可能是调控非钙离子浓度依赖的胞吐环节。 展开更多
关键词 形态发生蛋白7 胰岛素分泌 MIN6细胞
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骨形态发生蛋白在椎间盘退变过程中作用及相关机制的研究进展
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作者 陈智 沈洪兴 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期458-461,共4页
骨形态发生蛋白bone morphogenetic proteins.BMPs)作为促进植骨融合的经典生长因子为大众熟知,近年来BMPs在椎间盘退变过程中的作用及相关机制被广泛关注和研究。BMP-2、-5、-6、-8、-9和-14对软骨细胞的作用被相继发现。越来越多... 骨形态发生蛋白bone morphogenetic proteins.BMPs)作为促进植骨融合的经典生长因子为大众熟知,近年来BMPs在椎间盘退变过程中的作用及相关机制被广泛关注和研究。BMP-2、-5、-6、-8、-9和-14对软骨细胞的作用被相继发现。越来越多的研究学者认为, 展开更多
关键词 形态发生蛋白 椎间盘退变 关机 bmp-2 生长因子 融合 bmpS 细胞
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Wnt10b与骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的关系 被引量:4
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作者 胡莹 廖云鹏 +4 位作者 李福书 周娅 李沁 孙文娟 何百成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1420-1428,共9页
目的研究Wnt10b与骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导间充质干细胞(MSCs)骨向分化的关系,以及相关的分子机制。方法利用PCR、Westernblot、组织化学染色等方法,检测BMP9对Wnt10b表达的影响,以及Wnt10b对BMP9诱导的成骨分化的影响。同时,通过定量... 目的研究Wnt10b与骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导间充质干细胞(MSCs)骨向分化的关系,以及相关的分子机制。方法利用PCR、Westernblot、组织化学染色等方法,检测BMP9对Wnt10b表达的影响,以及Wnt10b对BMP9诱导的成骨分化的影响。同时,通过定量PCR、Westernblot、油红O染色、流式细胞术等,分析Wnt10b影响BMP9成骨分化诱导作用的可能机制。结果Wnt10b在C3H10T1/2、C2C12、MEFs和MC3T3-E1细胞中均有表达,BMP9在C3H10T1/2细胞中上调Wnt10b的表达水平。Wnt10b增强BMP9在C3H10T1/2细胞中增加OCN蛋白水平和促进钙盐沉积的能力,沉默Wnt10b减弱BMP9的作用。Wnt10b并不改变BMP9对细胞周期的影响,但能增强BMP9诱导的Smad1/5/8磷酸化,沉默Wnt10b减弱BMP9对Smad1/5/8磷酸化的促进作用。此外,Wnt10b抑制BMP9在C3H10T1/2细胞中诱导的成脂分化,沉默Wnt10b则促进BMP9的成脂分化诱导作用。结论Wnt10b可以促进BMP9诱导的MSCs骨向分化,这种作用可能与增强BMP/Smad信号转导有关。 展开更多
关键词 形态发生蛋白9 Wnt10b 间充质干细胞 分化 bmp/Smad信号 成脂分化
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PTEN在骨形态发生蛋白9诱导小鼠胚胎成纤细胞骨向分化中的作用 被引量:1
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作者 伍秋香 任春美 +8 位作者 陈振华 陈前昭 袁霜雪 王东旭 曾于桦 李洋 邵英 黄军 何百成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期264-269,共6页
目的研究PTEN对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)成骨分化的影响,并分析PTEN调节BMP9功能的可能机制。方法采用定量PCR检测PTEN在间充质干细胞(mesenchyma... 目的研究PTEN对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)成骨分化的影响,并分析PTEN调节BMP9功能的可能机制。方法采用定量PCR检测PTEN在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)中的表达,分析在MEFs中BMP9对PTEN表达的影响。采用组织化学染色法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,PCR检测OPN和OCN的表达水平,茜素红染色检测钙盐沉积,分析PTEN对BMP9诱导MEFs成骨分化的影响;利用荧光素酶报告质粒和蛋白印迹等方法分析PTEN对骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)/Smads信号转导的影响。结果 PTEN在几种常见MSCs中均有表达;BMP9在MEFs中明显抑制PTEN的表达。抑制PTEN能促进BMP9诱导MEFs的ALP活性增加,但过表达PTEN对BMP9诱导MEFs的ALP活性有明显抑制作用。抑制PTEN明显促进BMP9在MEFs细胞中诱导的OCN表达,并增强钙盐沉积。报告质粒分析结果显示,抑制PTEN能明显增强BMPR-Smad报告质粒的转录活性,并增加Smad1/5/8的磷酸化水平。结论下调PTEN表达可能是BMP9诱导MEFs成骨分化重要途径之一,其机制可能与促进BMPs/Smads信号转导有关。 展开更多
关键词 形态发生蛋白9 PTEN 小鼠胚胎成纤维细胞 分化 bmps/Smads
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鸭骨形态发生蛋白SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立
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作者 刘鸿威 林昶 +6 位作者 王劭 肖世峰 程晓霞 郑敏 陈少莺 曾显成 陈仕龙 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1509-1518,共10页
【目的】旨在建立一种检测鸭骨形态发生蛋白(BMPs)mRNA转录水平的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RTPCR检测方法。【方法】根据GenBank中BMP1、BMP2、BMP3、BMP4、BMP5、BMP6、BMP7、BMP8a、BMP10和BMP15的核苷酸序列设计并合成特异性引物进行... 【目的】旨在建立一种检测鸭骨形态发生蛋白(BMPs)mRNA转录水平的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RTPCR检测方法。【方法】根据GenBank中BMP1、BMP2、BMP3、BMP4、BMP5、BMP6、BMP7、BMP8a、BMP10和BMP15的核苷酸序列设计并合成特异性引物进行PCR扩增,产物回收后克隆至pMD-18-T载体,构建阳性重组质粒作为标准品,优化SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件,建立其标准曲线,对建立的方法进行特异性、敏感性和重复性试验。【结果】建立的BMP1、BMP2、BMP3、BMP4、BMP5、BMP6、BMP7、BMP8a、BMP10和BMP15基因实时荧光定量检测方法特异性强,无引物二聚体及非特异性产物,熔解曲线为单峰,相关系数R2均大于0.998,组间和组内变异系数均小于1%。应用该方法检测BMPs基因在半番鸭组织中的表达水平,结果显示,BMP1、 BMP2、 BMP5和BMP7基因在心脏中表达量较高,分别为5.5×10^(4)、 1.1×10^(5)、 5.1×10^(5)和7.7×10^(5)拷贝·μL^(-1);BMP6和BMP10基因在肝脏中表达量较高,分别为7.5×10^(4)和7.6×10^(3)拷贝·μL^(-1);而BMP3、 BMP4、BMP8a和BMP15分别在法氏囊、胸腺、喙和脾脏中表达量最高,分别为1.5×10^(5)、2.1×10^(4)、1.8×10^(3)和3.3×10^(3)拷贝·μL^(-1)。【结论】本研究建立的实时荧光定量PCR方法特异性强、重复性好,为检测鸭BMPs表达水平提供了技术手段。 展开更多
关键词 形态发生蛋白(bmps) 荧光定量PCR SYBR GreenⅠ
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肌瓣作为BMP载体构建血管化骨组织修复骨缺损的形态学研究 被引量:1
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作者 魏宽海 裴国献 +5 位作者 王珂 田雪梅 金丹 陈滨 郑晓勇 马忠立 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期480-481,T001,共3页
为探讨肌瓣作为骨形态发生蛋白 (BMP)载体构建血管化骨组织修复骨缺损的可行性及其生物学特征 ,制作兔桡骨下段15mm骨缺损 ,将去神经化的指深屈肌肌瓣转位至缺损区 ,作为BMP载体来修复骨缺损 ,通过大体、X线、组织学、原位末端标记 (TUN... 为探讨肌瓣作为骨形态发生蛋白 (BMP)载体构建血管化骨组织修复骨缺损的可行性及其生物学特征 ,制作兔桡骨下段15mm骨缺损 ,将去神经化的指深屈肌肌瓣转位至缺损区 ,作为BMP载体来修复骨缺损 ,通过大体、X线、组织学、原位末端标记 (TUNEL)等方法观察骨缺损的修复过程及生物学变化。结果发现 ,骨骼肌逐渐发生萎缩 ,2周时肌瓣内可触及串珠状团块 ,有大量软骨细胞生成 ,沿肌间隙分布 ;6周时骨桥与宿主骨紧密结合 ,软骨溶解区有大量编织骨形成 ,出现骨髓腔并与宿主骨髓腔再通 ,肌纤维被增殖的间充质细胞、软骨细胞及结缔组织所分割 ;8周时肌纤维几乎完全消失 ,新生骨组织呈条索状桥接两断端 ;组织学显示骨骼肌萎缩的同时 ,部分细胞核出现崩解 ,并有凋亡小体出现 ;TUNEL染色呈阳性。 展开更多
关键词 肌瓣 bmp载体构建 形态 形态发生蛋白质类 新生血管化 缺损
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5个绵羊品种BMP6基因部分片段的多态及序列分析 被引量:1
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作者 肖朝庭 狄冉 +5 位作者 储明星 傅衍 方丽 马月辉 李奎 徐作鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1631-1639,共9页
根据GenBank发表的绵羊骨形态发生蛋白6(Bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因部分序列所包含的外显子5、6、7和小鼠BMP6基因外显子5、6、7序列设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测BMP6基因外显子5、6和7在小尾寒羊、湖羊、多赛特、特... 根据GenBank发表的绵羊骨形态发生蛋白6(Bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因部分序列所包含的外显子5、6、7和小鼠BMP6基因外显子5、6、7序列设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测BMP6基因外显子5、6和7在小尾寒羊、湖羊、多赛特、特克塞尔、考力代5个绵羊品种301个个体中的单核苷酸多态性。结果发现这3对引物的扩增片段在检测的5个品种中均无多态性,说明所检测的BMP6外显子5、6、7序列比较保守。同时克隆了小尾寒羊(695 bp)和济宁青山羊(699 bp)部分BMP6 mRNA以及小尾寒羊BMP6基因外显子3-4的内含子序列和两端部分外显子序列(785 bp)。发现小尾寒羊和济宁青山羊的核苷酸和氨基酸序列差异很小,两者的核苷酸序列同源性高达99.28%,氨基酸序列同源性为98.1%,除济宁青山羊中插入一个丙氨酸外,两者只有4个氨基酸的差异。绵羊与牛、人、小鼠和大鼠的核苷酸同源性分别为97.04%、81.82%、84.68%和85.06%;氨基酸序列同源性分别为99.05%、91.43%、90.48%和92.38%,均大于90%,表明各物种BMP6核苷酸序列虽然差异较大,但氨基酸序列却非常保守。 展开更多
关键词 绵羊 形态发生蛋白6基因 PCR-SSCP
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4个山羊品种BMP6基因部分片段的多态性分析 被引量:2
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作者 储明星 肖杰文 +1 位作者 李学伟 方丽 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第1期55-58,共4页
根据GenBank发表的绵羊骨形态发生蛋白6(bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因部分序列所包含的外显子5、6、7和小鼠BMP6基因外显子5、6、7序列设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测BMP6基因外显子5、6和7在济宁青山羊、安哥拉山羊、波... 根据GenBank发表的绵羊骨形态发生蛋白6(bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因部分序列所包含的外显子5、6、7和小鼠BMP6基因外显子5、6、7序列设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测BMP6基因外显子5、6和7在济宁青山羊、安哥拉山羊、波尔山羊、内蒙古绒山羊4个山羊品种250个个体中的单核苷酸多态性。结果发现这3对引物的扩增片段在检测的4个品种中均无多态性,说明所检测的BMP6基因外显子5、6、7序列比较保守。 展开更多
关键词 山羊 形态发生蛋白6基因 PCR-SSCP
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髓芯减压联合骨形成蛋白活性诱导棒植入术治疗早期股骨头坏死的效果 被引量:5
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作者 郑力铭 文峰 +1 位作者 王威 张志文 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期1280-1285,共6页
目的探讨髓芯减压联合骨形成蛋白(BMP)活性诱导棒植入术治疗早期股骨头坏死的效果。方法回顾性分析2018年6月至2022年6月收治的116例早期股骨头坏死患者,按照不同的手术方式分为髓芯减压联合BMP活性诱导棒组(BMP组)和同种异体骨组。BMP... 目的探讨髓芯减压联合骨形成蛋白(BMP)活性诱导棒植入术治疗早期股骨头坏死的效果。方法回顾性分析2018年6月至2022年6月收治的116例早期股骨头坏死患者,按照不同的手术方式分为髓芯减压联合BMP活性诱导棒组(BMP组)和同种异体骨组。BMP组60例,采用髓芯减压联合BMP活性诱导棒植入术治疗。同种异体骨组56例,采用髓芯减压联合同种异体骨打压植骨术治疗。对比两组患者术前、术后6个月和术后1年的髋关节Harris评分、疼痛视觉模拟评分(VAS)的差异,并对患者术后1年疗效和股骨头存活率进行比较。结果所有患者均获得随访,两组患者术前VAS评分、Harris评分差异无统计学意义(P>0.05),术后6个月、1年时两组患者VAS评分、Harris评分均显著改善,且BMP组优于同种异体骨组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1年时,BMP组Harris髋关节评分优良率高于同种异体骨组,差异有统计学意义(P<0.05);BMP组股骨头存活率高于同种异体骨组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论髓芯减压联合BMP活性诱导棒植入术治疗早期股骨头坏死早期具有疗效,能够加速诱导新骨生成,提高新骨质量,为股骨头提供生物力学支撑,有效避免股骨头塌陷,且生物相容性好、能够在体内降解吸收,值得在临床上推广。 展开更多
关键词 早期股头坏死 髓芯减压 自固化磷酸钙人工 重组人形态发生蛋白-2 bmp活性诱导棒
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磷酸钙/BMP复合生物活性骨水泥水化性能及诱导成骨特性研究 被引量:10
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作者 杨为中 周大利 +2 位作者 尹光福 尹绍雅 郑昌琼 《无机材料学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期1174-1180,共7页
采用微细α-磷酸三钙(α-TCP)粉料、辅助料与冻干牛骨形态发生蛋白(BMP)预先固相混合制备了新型磷酸钙(CPC)/BMP复合生物骨水泥.通过水化、凝固性能研究优化了配料成分、调和液和促凝剂组成;通过大鼠肌袋种植实验研究了骨水泥的异位成... 采用微细α-磷酸三钙(α-TCP)粉料、辅助料与冻干牛骨形态发生蛋白(BMP)预先固相混合制备了新型磷酸钙(CPC)/BMP复合生物骨水泥.通过水化、凝固性能研究优化了配料成分、调和液和促凝剂组成;通过大鼠肌袋种植实验研究了骨水泥的异位成骨性能.结果表明:以α-TCP:CaHPO4:CaO(0.95:0.025:0.025)为固相配料,以0.25mol/LNaH2PO4/Na2HPO4混合液([P]T=0.5mol/L)作为调合液可制备性能优异的骨水泥材料,骨水泥初凝时间为6min,终凝时间为30min,固化强度达33MPa,达到临床手术的要求;α-TCP粉料粒度对骨水泥凝固性能影响显著,实验选用α-TCP粉料粒径d50为1.3μm;骨水泥在Hank's溶液中浸泡5天抗压强度可达最大值;骨水泥块经浸泡后内部生成针状羟基磷灰石晶体的网状结构.新型CPC/BMP复合骨水泥异位成骨作用明显,4周即能快速形成板层骨结构,证明该新型复合材料具有较强的诱导成骨活性.该生物活性骨水泥复合材料可望成为一类新型组织工程骨修复材料. 展开更多
关键词 磷酸钙 水泥 水化性能 形态发生蛋白(bmp)
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BMP/α-磷酸三钙生物活性骨水泥的BMP释放动力学及成骨性能研究 被引量:2
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作者 杨为中 周大利 +3 位作者 尹光福 尹绍雅 郑昌琼 高立达 《无机材料学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期1359-1366,共8页
以骨组织工程学的方法制备了一种新型BMP/α-TCP复合骨水泥材料.通过体外蛋白质释放实验、强度实验及X射线衍射分析,考察了BMP在复合材料中的释放规律;通过组织学分析和X射线检查,研究了新型复合骨水泥材料对兔颅骨缺损的修复实验.结果... 以骨组织工程学的方法制备了一种新型BMP/α-TCP复合骨水泥材料.通过体外蛋白质释放实验、强度实验及X射线衍射分析,考察了BMP在复合材料中的释放规律;通过组织学分析和X射线检查,研究了新型复合骨水泥材料对兔颅骨缺损的修复实验.结果表明:在模拟体内环境中,BMP自BMP/α-TCP复合材料中的释放规律符合Higuchi方程,BMP以扩散方式释放,BMF和α-TCP骨水泥复合后固化时间不受影响,BMP释放后材料强度随浸泡时间延长而增高,BMP释放4周后强度达到纯α-TCP骨水泥固化强度,X射线衍射分析表明材料向羟基磷灰石转化.骨缺损修复实验表明:新型骨水泥成骨能力强,能在短期内完全修复兔颅骨缺损. 展开更多
关键词 Α-磷酸三钙 形态发生蛋白(bmp) 水泥 释放动力学
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