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白芍总苷对骨关节炎软骨细胞增殖及分泌表达的影响 被引量:31
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作者 杜旭召 杨豪 +2 位作者 邓素玲 史栋梁 孟庆良 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1375-1379,1385,共6页
目的研究白芍总苷(TGP)对人骨关节炎软骨细胞(HOCs)增殖、凋亡、分泌表达的影响及其作用机制,为白芍总苷在骨关节炎治疗方面提供初步的实验依据。方法组织块法培养原代人骨关节炎软骨细胞;TGP处理人骨关节炎软骨细胞并培养12、24和48 h... 目的研究白芍总苷(TGP)对人骨关节炎软骨细胞(HOCs)增殖、凋亡、分泌表达的影响及其作用机制,为白芍总苷在骨关节炎治疗方面提供初步的实验依据。方法组织块法培养原代人骨关节炎软骨细胞;TGP处理人骨关节炎软骨细胞并培养12、24和48 h;采用CCK-8检测细胞存活率;ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)以及Caspase-3表达水平;Western blotting检测Bcl-2、Bax、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和核转录因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平。结果 TGP能促进细胞增殖,并存在时间和浓度依赖性,其中8μmol/L TGP作用24 h时细胞存活率最高,存在显著性差异(P<0.05);TGP可以显著抑制凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3表达,并促进抗凋亡蛋白Bcl-2表达(P<0.05);TGP可以显著降低与软骨退化相关的MMP-13/TIMP-1比值(P<0.05);TGP可以抑制炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8表达(P<0.05);TGP可以抑制NF-κB的表达(P<0.05)。结论 TGP促进人骨关节炎软骨细胞增殖,抑制细胞凋亡、降低MMP-13/TIMP-1比值以及炎症因子的分泌,其机制可能是与抑制NF-κB的表达相关。 展开更多
关键词 中医中药 白芍总苷 骨关节炎软骨细胞 增殖 分泌表达
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黄芪总黄酮对骨关节炎软骨细胞氧化应激和炎症因子分泌的影响 被引量:14
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作者 任伟亮 焦永伟 +3 位作者 张健 王响 齐立卿 杜双庆 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第4期603-606,共4页
目的:研究黄芪总黄酮对骨关节炎软骨细胞氧化应激和炎症因子分泌的影响及机制。方法:分离培养骨关节炎软骨细胞,分别用0、5、10、20mg/L的黄芪总黄酮处理细胞,72h后采用MTT方法检测细胞的增殖能力,收集培养上清,ELISA法检测白细胞介素-6... 目的:研究黄芪总黄酮对骨关节炎软骨细胞氧化应激和炎症因子分泌的影响及机制。方法:分离培养骨关节炎软骨细胞,分别用0、5、10、20mg/L的黄芪总黄酮处理细胞,72h后采用MTT方法检测细胞的增殖能力,收集培养上清,ELISA法检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量,WST-8法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,Westernblot法检测细胞中NF-κBp65亚型(NF-κBp65)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)蛋白表达水平。结果:5、10、20mg/L黄芪总黄酮处理后的骨关节炎软骨细胞的增殖能力升高,细胞培养上清中IL-6、IL-1β含量下降,SOD和GSH-Px活性升高,细胞中NF-κBp65、MMP-13蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:黄芪总黄酮可抑制骨关节炎软骨细胞氧化应激和炎症因子分泌,作用机制可能与下调NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 黄芪总黄酮 骨关节炎软骨细胞 NF-ΚB 炎症 氧化应激
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人髌下脂肪垫干细胞与骨关节炎软骨细胞间接共培养可促进其向软骨细胞分化 被引量:4
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作者 杨君君 陈诚 +4 位作者 杨柳 宋雄波 谢文斌 黄术 刘宝荣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期196-201,共6页
目的将人髌下脂肪垫干细胞(IPFPSC)及骨关节炎软骨细胞(OAC)进行间接共培养,促进OAC软骨表型的恢复及诱导IPFPSC向软骨细胞分化。方法体外分离、培养人IPFPSC及OAC,分为单独IPFPSC组、单独OAC组及IPFPSC和OAC间接共培养组,体外成软骨诱... 目的将人髌下脂肪垫干细胞(IPFPSC)及骨关节炎软骨细胞(OAC)进行间接共培养,促进OAC软骨表型的恢复及诱导IPFPSC向软骨细胞分化。方法体外分离、培养人IPFPSC及OAC,分为单独IPFPSC组、单独OAC组及IPFPSC和OAC间接共培养组,体外成软骨诱导21 d后,通过HE染色、Alcian蓝染色、免疫荧光细胞化学染色检测细胞1型胶原蛋白(Col1)、Col2、Col10、聚集蛋白聚糖(aggrecan)及SOX-9的表达情况。结果共培养组OAC聚集成微球,IPFPSC呈椭圆形;单独组OAC聚集分布,排列松散,单独组IPFPSC呈长梭形。HE染色显示共培养组OAC聚集成团,核染色深,IPFPSC呈椭圆形,胞质丰富,呈旋涡状生长;单独组OAC聚集分布,核染色浅;单独组IPFPSC呈长梭形,核染色浅。Alcian蓝染色显示共培养组OAC及IPFPSC蛋白多糖分泌多,单独OAC及单独IPFPSC组分泌少。免疫荧光细胞化学染色显示共培养组IPFPSC及OAC中Col2、aggrecan及SOX-9表达较强,Col1与Col10表达较弱;而单独培养的IPFPSC及OAC组则相反。结论 IPFPSC和OAC间接共培养可以促进OAC软骨细胞表型的恢复及诱导IPFPSC向软骨细胞分化。 展开更多
关键词 髌下脂肪垫干细胞 骨关节炎软骨细胞 间接共培养 软骨表型
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桑寄生提取物联合miR-375对骨关节炎软骨细胞活力和凋亡的影响 被引量:32
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作者 卓泽铭 范忠诚 郭祥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1082-1088,共7页
目的:研究桑寄生提取物(SJS)联合微小RNA-375(miR-375)对骨关节炎软骨细胞活力和凋亡的影响及其作用机制。方法:将人原代骨性关节软骨细胞RPOC分为对照组(control)组、白细胞介素1β(IL-1β)组、IL-1β+SJS低剂量(SJS-L)组、IL-1β+SJS... 目的:研究桑寄生提取物(SJS)联合微小RNA-375(miR-375)对骨关节炎软骨细胞活力和凋亡的影响及其作用机制。方法:将人原代骨性关节软骨细胞RPOC分为对照组(control)组、白细胞介素1β(IL-1β)组、IL-1β+SJS低剂量(SJS-L)组、IL-1β+SJS中剂量(SJS-M)组、IL-1β+SJS高剂量(SJS-H)组、IL-1β+anti-miR-NC组、IL-1β+anti-miR-375组、IL-1β+SJS-H+miR-NC组、IL-1β+SJS-H+miR-375组。MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,qPCR检测miR-375的表达,Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、P21、Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白的水平。结果:与control组比较,IL-1β组的RPOC活力(24 h、48 h和72 h)及cyclin D1和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0. 05),而P21、Bax和caspase-3蛋白的水平、细胞凋亡率及miR-375表达量均显著升高(P<0. 05)。与IL-1β组比较,IL-1β+SJS-M组和IL-1β+SJS-H组RPOC的活力(24 h、48 h和72 h)和cyclin D1表达显著升高(P<0. 05),P21表达量显著降低(P<0. 05);IL-1β+SJS-H组细胞的凋亡率、Bax及caspase-3蛋白水平、miR-375表达量明显减少(P<0. 05),Bcl-2蛋白水平显著提高(P<0. 05)。与IL-1β+anti-miR-NC组比较,IL-1β+anti-miR-375组RPOC中miR-375表达量、P21、Bax、caspase-3蛋白水平、细胞凋亡率明显下降(P<0. 05),cyclin D1、Bcl-2蛋白水平、细胞活力(24 h、48 h和72h)显著升高(P<0. 05)。过表达miR-375能逆转SJS对IL-1β作用的RPOC活力、凋亡的影响。结论:桑寄生提取物可以促进IL-1β作用的RPOC活力,并抑制其凋亡,其机制与调控miR-375表达有关。 展开更多
关键词 微小RNA-375 桑寄生提取物 细胞介素1Β 骨关节炎软骨细胞 细胞活力 细胞凋亡
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lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴研究P-15对软骨损伤的保护作用
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作者 邓长弓 李源力 +1 位作者 聂君兰 李洪 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1750-1755,共6页
目的探究P-15对人骨关节炎软骨细胞(HC-OA)的保护作用及与lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴的关系。方法分离HC-OA胞核、胞质RNA,RT-qPCR检测lncRNA NEAT1在细胞中的分布;P-15处理HC-OA细胞,转染siRNA NC和siRNA SFPQ后,RT-qPCR检测lncRNA NE... 目的探究P-15对人骨关节炎软骨细胞(HC-OA)的保护作用及与lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴的关系。方法分离HC-OA胞核、胞质RNA,RT-qPCR检测lncRNA NEAT1在细胞中的分布;P-15处理HC-OA细胞,转染siRNA NC和siRNA SFPQ后,RT-qPCR检测lncRNA NEAT1表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测RUNX2、SFPQ、Beclin-1、LC3B和P62表达水平。结果lncRNA NEAT1同时存在于HC-OA胞质和胞核,且更多分布于细胞核;P-15可降低胞内lncRNA NEAT1水平(P<0.05),抑制骨关节炎软骨细胞凋亡(P<0.05);P-15可通过调控lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴上调SFPQ表达和抑制RUNX2表达(P<0.01);P-15调控lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴促进软骨细胞发生自噬(P<0.05)。结论P-15可调控lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴抑制HC-OA凋亡并促进自噬,保护软骨细胞免受损伤。 展开更多
关键词 P-15肽 lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴 骨关节炎软骨细胞 凋亡 自噬
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