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豚鼠源马链球菌兽疫亚种的分离鉴定与耐药性分析
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作者 陈巧丹 陈怡洁 +7 位作者 程菊芬 袁秀芳 余斌 苏菲 叶十一 徐丽华 张晖 李军星 《浙江农业科学》 2025年第6期1496-1500,共5页
为鉴定引起某豚鼠养殖场发生急性死亡的病原,对疑似细菌感染的豚鼠进行临床观察、病理剖检,并进行细菌分离纯化,对分离菌株进行革兰氏染色、16S rDNA序列分析及药敏试验。结果显示,死亡豚鼠多脏器中均能分离到同一种致病菌,该菌具有明... 为鉴定引起某豚鼠养殖场发生急性死亡的病原,对疑似细菌感染的豚鼠进行临床观察、病理剖检,并进行细菌分离纯化,对分离菌株进行革兰氏染色、16S rDNA序列分析及药敏试验。结果显示,死亡豚鼠多脏器中均能分离到同一种致病菌,该菌具有明显的β溶血环,革兰氏染色呈阳性,成对或短链状排列;该分离菌株与马链球菌兽疫亚种(MK614224)16S rDNA同源性高达99.77%。药敏试验结果表明,该分离株对头孢噻呋、多西环素等4种药物敏感;对红霉素、环丙沙星中度敏感;对头孢噻肟、青霉素等15种药物耐药。本试验结果确定了马链球菌兽疫亚种是引起豚鼠急性死亡的病原,该分离株具有较强的耐药性,为后期豚鼠马链球菌兽疫亚种的防治提供了参考依据。 展开更多
关键词 豚鼠 链球菌亚种 分离鉴定 耐药性
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马/驴源马链球菌马亚种新疆分离株小鼠感染模型的建立及验证
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作者 刘丹丹 李金荣 +10 位作者 高函雅 李姝怡 彭菲 徐李依娜 王馨 郝宝山 买占海 阿得力江·吾斯曼 赛福丁·阿不拉 刘建华 张伟 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1342-1351,共10页
【目的】探索采用马/驴源马链球菌马亚种诱导小鼠感染模型的条件及方法,为马腺疫新药研发及其他相关研究奠定试验基础。【方法】选择昆明小鼠100只,将马源马链球菌马亚种新疆株(SEE-M)和驴源马链球菌马亚种新疆株(LXY019)分别设置相应... 【目的】探索采用马/驴源马链球菌马亚种诱导小鼠感染模型的条件及方法,为马腺疫新药研发及其他相关研究奠定试验基础。【方法】选择昆明小鼠100只,将马源马链球菌马亚种新疆株(SEE-M)和驴源马链球菌马亚种新疆株(LXY019)分别设置相应梯度浓度感染小鼠,测定菌株感染小鼠的最低完全致死量(minimum complete lethal dose,MLD)。将30只昆明小鼠随机分为3组(模型Ⅰ组:SEE-M株感染;模型Ⅱ组:LXY019株感染;空白对照组:生理盐水),每组10只,分别以80%MLD浓度的相应菌株感染小鼠建立马腺疫感染模型,观察小鼠死亡情况。通过对小鼠脏器系数、内脏载菌量、血清炎性因子及组织病理学等进行检测,验证小鼠感染模型的构建情况。【结果】马源和驴源马链球菌马亚种感染小鼠的MLD分别为1.875×10^(9)和8.750×10^(8) CFU。以80%MLD的马源和驴源马链球菌马亚种感染小鼠建立马腺疫动物模型,死亡率分别为60%和70%,体重呈下降趋势。小鼠感染模型验证结果表明,与对照组相比,模型Ⅰ、Ⅱ组小鼠肝脏、肺脏、肾脏指数显著升高(P<0.05);模型Ⅰ、Ⅱ组小鼠各脏器组织均表现为马链球菌马亚种感染阳性,其中肝脏、脾脏、肺脏和肾脏的载菌量显著高于心脏和脑(P<0.05);模型Ⅰ、Ⅱ组小鼠血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量极显著高于对照组(P<0.01)。病理切片观察结果显示,模型Ⅰ、Ⅱ组小鼠内脏均有明显的炎性细胞浸润、出血、结构被破坏、内脏细胞坏死脱落等病理变化。【结论】以1.5×10^(9) CFU马源马链球马亚种和7×10^(8) CFU驴源马链球菌马亚种感染小鼠可成功建立马腺疫动物模型,小鼠感染模型各内脏均会被侵染,其中对肺脏、肝脏、脾脏、肾脏的影响最为显著,本研究结果为马腺疫的防治及靶向药物研发奠定试验基础。 展开更多
关键词 链球菌亚种 动物模型 细胞因子
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驴源马链球菌马亚种的分离鉴定及生物学特性分析
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作者 李金荣 张伟 +8 位作者 郝宝山 王馨 高函雅 徐李依娜 揭郑昊 赛福丁·阿不拉 阿得力江·吾斯曼 况玲 刘丹丹 《西北农业学报》 北大核心 2025年第2期337-345,共9页
为探究新疆喀什某驴场驴腺疫病的病原菌及其相关生物学特性,应用绵羊鲜血培养基对采集样品进行细菌的分离纯化,通过革兰氏染色、镜检及PCR扩增对分离菌进行鉴定,并利用MEGA 7.0生物软件绘制分离菌的遗传进化树;绘制分离菌生长曲线,通过... 为探究新疆喀什某驴场驴腺疫病的病原菌及其相关生物学特性,应用绵羊鲜血培养基对采集样品进行细菌的分离纯化,通过革兰氏染色、镜检及PCR扩增对分离菌进行鉴定,并利用MEGA 7.0生物软件绘制分离菌的遗传进化树;绘制分离菌生长曲线,通过分离菌体内致病性试验、毒力基因检测试验以及药物敏感性试验等对分离菌进行生物学特性分析。结果显示,获得一株具有β溶血特性且革兰氏染色阳性的链球菌,测序结果通过GenBank的Blast比对,与已注册马链球菌马亚种同源性高达99.01%,遗传进化树分析发现该分离菌与新疆马链球菌马亚种HTP133(MT815602.1)遗传距离最近,命名为LXY019株;从生长曲线可以看出该分离菌在培养8 h后达到平台期,18 h后走向衰亡;致病性试验结果显示,分离菌对小鼠的LD_(50)为1.58×10^(7)CFU/mL,毒力基因鉴定结果提示该分离菌携带fneB和seM;药敏试验结果显示该分离菌对β-内酰胺类抗生素和大环内酯类抗生素高度敏感,对氨基苷类抗生素的敏感性相对较低。以上结果表明,分离纯化的驴源马链球菌马亚种对小鼠具有明显的致病性,临床治疗可优先选用β-内酰胺类抗生素和大环内酯类抗生素,结果可以为驴源马链球菌马亚种感染引起的驴腺疫的防治提供参考。 展开更多
关键词 驴腺 链球菌亚种 致病性 毒力基因 药物敏感性
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马链球菌兽疫亚种重组表面蛋白rSeseC-02147免疫效力评价 被引量:1
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作者 林永进 冯佩然 +6 位作者 杨亚林 郭政 李亚娟 李舜 孙芹芹 黄云飞 付强 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1843-1853,共11页
【目的】通过原核表达系统制备马链球菌兽疫亚种(SEZ)重组表面蛋白rSeseC-02147,并系统评价其抵御SEZ感染的免疫效力,为SEZ亚单位疫苗的研发提供候选抗原。【方法】构建原核表达载体pCold I-SeseC-02147,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细... 【目的】通过原核表达系统制备马链球菌兽疫亚种(SEZ)重组表面蛋白rSeseC-02147,并系统评价其抵御SEZ感染的免疫效力,为SEZ亚单位疫苗的研发提供候选抗原。【方法】构建原核表达载体pCold I-SeseC-02147,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,纯化回收重组蛋白rSeseC-02147并免疫BALB/c小鼠,以SEZ灭活疫苗为阳性对照、PBS为阴性对照,二免后第14 d于小鼠颌下静脉采集血清,分别采用Western blotting和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组蛋白rSeseC-02147反应原性及小鼠血清抗体效价和抗体亚型属性;并通过小鼠免疫保护试验、腹腔灌洗液细菌载量测定及脏器组织病理学观察,系统评估重组蛋白rSeseC-02147对小鼠的免疫保护力。【结果】构建的原核表达载体pCold I-SeseC-02147经IPTG诱导能成功表达获得重组蛋白rSeseC-02147,其纯化后的浓度为2.86 mg/mL。重组蛋白rSeseC-02147能与免疫组和阳性对照组小鼠血清发生特异性反应,而与阴性对照组小鼠血清未发生特异性反应,表明重组蛋白rSeseC-02147具有良好的反应原性与特异性;以重组蛋白rSeseC-02147免疫小鼠产生的血清抗体效价远高于SEZ灭活疫苗,且IgG1亚型极显著高于IgG2a亚型(P<0.01,下同)。重组蛋白rSeseC-02147可为小鼠提供抵御SEZ感染的免疫保护力,攻毒后14 d内的存活率60%;此外,重组蛋白rSeseC-02147免疫小鼠后的腹腔灌洗液细菌载量极显著低于阴性对照组小鼠,且肺脏、肾脏和脾脏等组织的病理损伤程度较轻。【结论】通过原核表达系统制备获得的重组蛋白rSeseC-02147具有良好的特异性与反应原性,通过抑制SEZ增殖及减轻SEZ对机体脏器的损伤而发挥免疫保护作用。可见,重组蛋白rSeseC-02147具有开发成SEZ亚单位疫苗的潜力。 展开更多
关键词 链球菌亚种(sez) 表面蛋白 SeseC-02147基因 效力 亚单位
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豚鼠源马链球菌兽疫亚种的分离鉴定
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作者 李艳红 白和平 +5 位作者 信玉春 郭柯宇 王金锋 夏力亮 吴同垒 史秋梅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期86-91,共6页
为了查明河北省唐山市某豚鼠养殖场发病豚鼠感染的病原菌,本试验采集发病豚鼠的眼角脓性分泌物,采用细菌分离纯化、革兰染色、生化鉴定、16S rRNA基因PCR扩增方法对分离菌进行鉴定,通过K-B试纸法检测分离菌株对24种抗菌药的敏感性,试管... 为了查明河北省唐山市某豚鼠养殖场发病豚鼠感染的病原菌,本试验采集发病豚鼠的眼角脓性分泌物,采用细菌分离纯化、革兰染色、生化鉴定、16S rRNA基因PCR扩增方法对分离菌进行鉴定,通过K-B试纸法检测分离菌株对24种抗菌药的敏感性,试管二倍稀释法测定19种中药对该分离菌株的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并通过动物回归试验检测该分离菌株的致病性。结果显示,分离菌株在血琼脂培养基培养24 h生长为针尖状透明菌落、呈β溶血,革兰染色为阳性圆球状、3~5个连接呈短链状,生化特性与马链球菌兽疫亚种相符,将其命名为MLQJ-1;16S rRNA序列比对结果显示,MLQJ-1与马链球菌兽疫亚种同源性高达99.72%,在系统进化树中处于同一分支,鉴定为马链球菌兽疫亚种;MLQJ-1对24种抗菌药的敏感性不同,对青霉素、头孢曲松和阿莫西林等8种抗菌药敏感,对阿米卡星、新霉素和卡那霉素等10种抗菌药耐药;苦地丁、苦参、黄芩和千里光对MLQJ-1的MIC值介于1.9~15.6 mg/mL,MBC值介于1.9~31.2 mg/mL;小鼠腹腔接种MLQJ-1菌液后24 h内全部死亡。结果表明,马链球菌兽疫亚种为本次发病豚鼠的病原菌,青霉素、头孢曲松和苦地丁等药物对该菌具有较强的抑菌效果。 展开更多
关键词 豚鼠 链球菌亚种 分离鉴定 药敏试验
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马链球菌兽疫亚种表面蛋白FIPP的免疫效力评价
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作者 郭政 李亚娟 +5 位作者 林永进 黄坚仪 巫兆如 黄云飞 李舜 付强 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期263-271,共9页
【目的】评价马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp. zooepidemicus,SEZ)表面蛋白FIPP(纤维蛋白原和Ig结合蛋白前体)的免疫效力,为预防SEZ感染提供新的候选疫苗抗原。【方法】根据NCBI数据库公布的FIPP基因序列设计引物进行PCR扩增... 【目的】评价马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp. zooepidemicus,SEZ)表面蛋白FIPP(纤维蛋白原和Ig结合蛋白前体)的免疫效力,为预防SEZ感染提供新的候选疫苗抗原。【方法】根据NCBI数据库公布的FIPP基因序列设计引物进行PCR扩增,将扩增片段克隆到原核表达载体pColdⅠ,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,FIPP蛋白通过IPTG诱导在大肠杆菌中表达及纯化,以SDS-PAGE进行鉴定。纯化后的重组蛋白FIPP(rFIPP)对BALB/c小鼠进行免疫,二免14 d后对小鼠进行免疫保护试验并采集血清;解剖感染SEZ小鼠的肝脏、脾脏和肺脏进行病理组织学观察。以酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测小鼠血清中的特异性抗体IgG水平,以蛋白质印迹(Western blotting)方法检测重组蛋白的反应原性,通过全血杀菌试验检测血清的杀菌活性。【结果】通过SDS-PAGE电泳可观察到约96 k D的蛋白片段,与FIPP蛋白的理论分子量相符。重组蛋白rFIPP免疫小鼠后对SEZ攻击的保护率达70.0%。ELISA方法检测结果表明,重组蛋白rFIPP免疫小鼠后可诱导产生特异性抗体免疫球蛋白G(IgG),且极显著高于阴性对照(P<0.01,下同),通过IgG亚型分析,发现IgG1的抗体水平显著高于IgG2a(P<0.05),说明重组蛋白rFIPP免疫后产生的抗体亚型以IgG1为主。全血杀菌试验结果表明,重组蛋白rFIPP超免血清对SEZ具有极显著杀灭作用。组织病理学观察结果显示,重组蛋白rFIPP免疫后能有效减弱小鼠各类器官的病理损伤。【结论】经表达纯化的重组蛋白rFIPP在小鼠感染SEZ模型中具有良好的免疫保护效力,可用作制备SEZ亚单位疫苗的有效候选抗原。 展开更多
关键词 链球菌亚种 FIPP蛋白 保护 评价
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马链球菌兽疫亚种类M基因和猪链球菌2型mrp基因片段的融合表达及仔猪免疫试验 被引量:13
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作者 范红结 陆承平 唐家琪 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期78-81,共4页
将含猪链球菌 2型mrp及马链球菌兽疫亚种类M基因融合片段的重组质粒转化大肠杆菌BL 2 1,经异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,表达了相对分子质量为 6 0 0 0 0左右的融合蛋白。利用组氨酸亲和层析柱 ,获得了纯化的融合蛋白 ,质量... 将含猪链球菌 2型mrp及马链球菌兽疫亚种类M基因融合片段的重组质粒转化大肠杆菌BL 2 1,经异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,表达了相对分子质量为 6 0 0 0 0左右的融合蛋白。利用组氨酸亲和层析柱 ,获得了纯化的融合蛋白 ,质量浓度为 4 2 μg·mL-1。以纯化的融合蛋白、宿主菌BL 2 1经IPTG诱导表达后的超声波破碎上清、马链球菌兽疫亚种ATCC 35 2 4 6株和猪链球菌 2型HA 980 1株制备的二联灭活苗为免疫原 ,分别免疫 30头仔猪。初次免疫 1月后 ,以同样的剂量再次免疫 ,3周后以 5×LD50 的ATCC 35 2 4 6和HA 980 1强毒株进行攻击。结果 ,纯化融合蛋白免疫组的免疫保护率达 6 0 % ,BL 2 1上清免疫组的免疫保护率为 5 0 % ,全菌二联灭活菌苗的免疫保护率达 90 %。 展开更多
关键词 链球菌亚种M基因 链球菌2型mrp基因 融合表达 仔猪 试验 链球菌 二联
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快速鉴定猪链球菌和马链球菌兽疫亚种双重PCR方法的建立 被引量:15
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作者 李书光 李天芝 +2 位作者 李峰 胡琳琳 沈志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期43-46,共4页
本试验旨在建立一种快速、特异、敏感的双重PCR鉴定猪链球菌和马链球菌兽疫亚种病原检测方法。根据猪链球菌GDH蛋白和马链球菌类M蛋白的基因保守区分别设计引物,优化了该双重PCR检测方法的引物浓度及比例,并筛选了其最佳退火温度;用该双... 本试验旨在建立一种快速、特异、敏感的双重PCR鉴定猪链球菌和马链球菌兽疫亚种病原检测方法。根据猪链球菌GDH蛋白和马链球菌类M蛋白的基因保守区分别设计引物,优化了该双重PCR检测方法的引物浓度及比例,并筛选了其最佳退火温度;用该双重PCR反应体系以其他几株阴性菌株为对照,检测了该反应体系的特异性。以新鲜培养的猪链球菌倍比稀释后进行菌落计数,对该检测方法的敏感性进行了鉴定。M-like和GDH引物的加入量均为1μL(20pmol/L),最佳退火温度为52.3℃;该双重PCR反应体系有较高敏感性,检测马链球菌兽疫亚种和猪链球菌的敏感度分别达100和10CFU;特异性试验结果显示,常见的5种病原菌在该双重PCR体系中无特异性条带出现;临床应用该方法分离鉴定了1株猪链球菌和2株马链球菌兽疫亚种。本试验建立了一种能同时检测猪链球菌和马链球菌兽疫亚种的双重PCR方法,且该方法应用快速、特异且敏感。 展开更多
关键词 链球菌 链球菌亚种 双重PCR
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马源马链球菌兽疫亚种新疆株的分离鉴定及遗传特性分析 被引量:7
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作者 冯凯 王浩 +4 位作者 周婷婷 马晓慧 恩克.博力德 佘明江 苏艳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期231-238,共8页
为了解马源马链球菌兽疫亚种(S.zooepidemicus)新疆分离株马链球菌兽疫亚种类M蛋白(SzM)基因的分子进化与变异情况,为该菌引起的感染性疾病的防控提供依据,本试验对新疆地区某马场采集的病马淋巴结样品进行病原菌的分离培养和生化鉴定,... 为了解马源马链球菌兽疫亚种(S.zooepidemicus)新疆分离株马链球菌兽疫亚种类M蛋白(SzM)基因的分子进化与变异情况,为该菌引起的感染性疾病的防控提供依据,本试验对新疆地区某马场采集的病马淋巴结样品进行病原菌的分离培养和生化鉴定,并对分离菌株进行药物敏感性试验。根据已发表的马源SzM基因序列设计引物,对其SzM基因进行PCR扩增及序列测定。将获得的SzM序列与GenBank中不同动物源马链球菌兽疫亚种分离株序列进行同源性比对和遗传进化分析。结果显示,分离得到了一株革兰氏阳性链球菌,将其命名为马链球菌兽疫亚种ZMSY15-1。药物敏感性试验结果表明,分离菌株对青霉素、磺胺嘧啶钠耐药,对其他14种药物均敏感。序列分析结果显示,马链球菌兽疫亚种ZMSY15-1与国内外不同动物源分离株SzM基因氨基酸同源性为56.0%~70.0%。遗传进化分析结果显示,这些菌株可分为4个群。马链球菌兽疫亚种ZMSY15-1与猪源分离株SzM蛋白的氨基酸同源性为59.9%,分别属于2个不同的群,其与美国马源分离株NH55426亲缘关系最近。本试验结果可丰富国内马源马链球菌兽疫亚种SzM基因的信息数据,为马链球菌兽疫亚种的致病机制研究和预防控制提供参考依据。 展开更多
关键词 链球菌亚种 分离鉴定 SzM基因 序列分析
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马链球菌兽疫亚种毒力因子 被引量:10
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作者 范红结 陆承平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期279-281,共3页
关键词 链球菌亚种 毒力因子 金属结合蛋白 sp. sub 注射 心内膜炎 密切接触 链球菌 细菌毒力
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马链球菌兽疫亚种10株国内猪源分离株对小鼠免疫效力的评价 被引量:4
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作者 耿建新 陆承平 范红结 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期201-204,共4页
目的近年来马链球菌兽疫亚种引起的猪链球菌病在我国造成重大损失。为评价猪源兽疫亚种分离株的抗原变异,取国内10省市分离的10株猪源兽疫亚种分离株,分别制备灭活抗原,加入弗氏完全佐剂免疫12 w龄ICR小鼠,4 w后加入弗氏不完全佐剂进行... 目的近年来马链球菌兽疫亚种引起的猪链球菌病在我国造成重大损失。为评价猪源兽疫亚种分离株的抗原变异,取国内10省市分离的10株猪源兽疫亚种分离株,分别制备灭活抗原,加入弗氏完全佐剂免疫12 w龄ICR小鼠,4 w后加入弗氏不完全佐剂进行再次免疫,再次免疫2 w后分别用5 LD50同源菌株和1.6×105CFU ATCC35246株攻击。结果表明,同源菌株攻击,免疫保护率均在90%以上;而以ATCC35246攻击的异源菌免疫小鼠,免疫保护率为80%-100%。可见我国不同地区的猪源马链球菌兽疫亚种分离株的抗原性差异不大,单一菌株制备的疫苗具有应用前景。 展开更多
关键词 链球菌亚种 分离株
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猪源马链球菌兽疫亚种类 M蛋白原核表达及其小鼠免疫保护力分析 被引量:2
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作者 周俊明 何孔旺 +10 位作者 倪艳秀 祝昊丹 俞正玉 茅爱华 吕立新 温立斌 张雪寒 王小敏 汪伟 李彬 郭容利 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期590-594,共5页
为了原核表达猪源马链球菌兽疫亚种去除信号肽的类M蛋白质,并分析该蛋白质对小鼠的免疫保护力,克隆了马链球菌兽疫亚种CY菌株去除信号肽的类M蛋白质基因Szp,并将Szp基因插入p ET28a表达载体,IPTG诱导,获得重组类M蛋白质,弗氏佐剂乳化重... 为了原核表达猪源马链球菌兽疫亚种去除信号肽的类M蛋白质,并分析该蛋白质对小鼠的免疫保护力,克隆了马链球菌兽疫亚种CY菌株去除信号肽的类M蛋白质基因Szp,并将Szp基因插入p ET28a表达载体,IPTG诱导,获得重组类M蛋白质,弗氏佐剂乳化重组类M蛋白质后,3次免疫小鼠,用同源菌株CY攻击。诱导获得分子量约5.8×104的重组蛋白质,免疫印迹结果表明该重组类M蛋白质能够被马链球菌兽疫亚种猪多抗识别。类M蛋白质免疫小鼠的存活率为60%,弗氏佐剂乳化灭活CY免疫小鼠的存活率为70%,PBS对照组小鼠攻毒后6 d内全部死亡。表达的类M蛋白质可以给予ICR小鼠部分的免疫保护力,保护效果略低于CY全菌灭活苗,提示可以对马链球菌兽疫亚种多种免疫保护性抗原进行联合,从而进一步提高对动物的免疫保护力。 展开更多
关键词 链球菌亚种 类M蛋白质 原核表达
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猪链球菌2型与马链球菌兽疫亚种生物学特性的初步比较 被引量:2
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作者 王继春 何家惠 +6 位作者 侯继波 徐筠遐 刘冬霞 褚长贵 王伟峰 刘跃兴 杨英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期66-68,共3页
1998年从病死猪分离了数株链球菌(其中2株编号为9801,9802),经鉴定,9801株为猪链球菌2型,9802株为马链球菌兽疫亚种。9801株系从暴发流行地区的病猪中分离,同时在该流行地区还发生畜禽从业人员感染相... 1998年从病死猪分离了数株链球菌(其中2株编号为9801,9802),经鉴定,9801株为猪链球菌2型,9802株为马链球菌兽疫亚种。9801株系从暴发流行地区的病猪中分离,同时在该流行地区还发生畜禽从业人员感染相同血清型的链球菌而死亡的病例;9802株系从散发病猪中分离。临床有共同点,又有各自特点。病理变化均呈现典型的败血症变化,但肝、脾、肺等病变上有一些差别,而染色镜检基本一致。对兔均敏感,对小鼠和猪的敏感性有所不同。9801株菌落灰色,中心浑浊,直径0.5mm,α溶血,有草绿色色素沉着;9802株菌落湿润,半透明,直径1.5-2mm,β溶血。9801株对氧哌嗪青霉素、头孢他啶、氨苄青霉素最敏感;9802株对氧哌嗪青霉素、复方磺胺、头孢哌酮、呋喃妥因最敏感。 展开更多
关键词 链球菌2型 链球菌亚种 生物学特性
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马链球菌兽疫亚种中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的克隆与表达 被引量:6
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作者 苏良科 陆承平 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第7期633-636,共4页
目的 构建马链球菌兽疫亚种 (Streptococcusequisubsp zooepidemicus)中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的重组表达质粒 (pET -Szp) ,并检测表达产物的免疫反应性。 方法 根据GenBank登录的马链球菌兽疫亚种纽约分离株w6 0类M蛋白基因... 目的 构建马链球菌兽疫亚种 (Streptococcusequisubsp zooepidemicus)中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的重组表达质粒 (pET -Szp) ,并检测表达产物的免疫反应性。 方法 根据GenBank登录的马链球菌兽疫亚种纽约分离株w6 0类M蛋白基因序列设计和合成引物 ,以该菌中国分离株ATCC35 2 4 6的基因组DNA为模板 ,扩增类M蛋白基因 5’端第 5 83~ 10 6 8bp片段 ,并按正确的阅读框架定向克隆到表达载体pET - 32a(+)中 ,将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1株 ,用IPTG诱导表达 ,并通过SDS -PAGE和免疫印迹对表达蛋白进行初步分析。结果 扩增出 4 86bp的马链球菌兽疫亚种ATCC35 2 4 6的类M蛋白基因片段 ,该基因在大肠杆菌表达系统中经诱导 ,得到分子量为 5 0 0 0 0的表达产物 ,免疫印迹表明该产物具有特异的免疫反应性。结论 成功构建了表达马链球菌兽疫亚种中国株类M蛋白片段的重组表达质粒 ,并实现在大肠杆菌中表达 ,为重组类M蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 链球菌亚种 类M基因 克隆 表达 重组表达质粒 反应性
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猪源马链球菌兽疫亚种的分离与鉴定 被引量:5
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作者 付强 许华明 +2 位作者 陈秋玉 林志娴 李锋莹 《中国畜禽种业》 2016年第7期31-32,共2页
从广东省佛山市某养殖场患呼吸道疾病的生猪体内分离到一株致病菌(SSgd0511),通过细菌微量生化鉴定管、革兰氏染色法镜检及16S r DNA基因序列分析鉴定该菌。结果表明,该菌为革兰氏阳性球菌,能利用乳糖、七叶苷、棉子糖、菊糖阳性;16S r ... 从广东省佛山市某养殖场患呼吸道疾病的生猪体内分离到一株致病菌(SSgd0511),通过细菌微量生化鉴定管、革兰氏染色法镜检及16S r DNA基因序列分析鉴定该菌。结果表明,该菌为革兰氏阳性球菌,能利用乳糖、七叶苷、棉子糖、菊糖阳性;16S r DNA基因序列与BLAST比对,结果与马链球菌兽疫亚种的同源性最高,表明本试验分离得到一株马链球菌兽疫亚种。 展开更多
关键词 链球菌亚种 鉴定
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马链球菌兽疫亚种的研究进展 被引量:2
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作者 付强 李雯雯 +1 位作者 周庆国 马春全 《中国畜禽种业》 2015年第7期117-118,共2页
猪链球菌病是当今危害养猪业的一种重要细菌性疾病,严重危害着我国乃至世界养猪业的发展。马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus, SEZ)是引起我国猪链球菌病的主要病原之一。SEZ主要引起猪败血症、脑膜炎、关节... 猪链球菌病是当今危害养猪业的一种重要细菌性疾病,严重危害着我国乃至世界养猪业的发展。马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus, SEZ)是引起我国猪链球菌病的主要病原之一。SEZ主要引起猪败血症、脑膜炎、关节炎.肺炎以及突发性死亡等症状。此外,该菌能感染马、牛、羊、猫等多种动物,实验动物小鼠、兔对该菌也极为易感。 展开更多
关键词 链球菌亚种 链球菌 实验动物 细菌性疾病 养猪业 败血症 脑膜炎 突发性
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马链球菌兽疫亚种烯醇化酶对小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响 被引量:3
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作者 陈楷文 华承薇 +4 位作者 袁宸 潘飞 蔺辉星 范红结 马喆 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2576-2583,共8页
旨在研究马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp.zooepidemicus,SEZ)烯醇化酶(enolase,Eno)对小鼠肺泡巨噬细胞(RAW264.7)吞噬能力的影响。通过构建原核表达质粒获得重组烯醇化酶(rEno),采用台盼蓝活细胞计数法,判定在不同处理浓度... 旨在研究马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp.zooepidemicus,SEZ)烯醇化酶(enolase,Eno)对小鼠肺泡巨噬细胞(RAW264.7)吞噬能力的影响。通过构建原核表达质粒获得重组烯醇化酶(rEno),采用台盼蓝活细胞计数法,判定在不同处理浓度和时间下rEno蛋白对RAW264.7细胞的细胞毒性。将rEno蛋白与RAW264.7细胞共孵育后,用SEZ作用于细胞并检测细胞吞菌数量,判断RAW264.7细胞对SEZ的吞噬活性。进一步通过活细胞稳定同位素标记技术(SILAC)和蛋白质谱分析技术(LC-MS/MS),筛选到RAW264.7细胞中可能与SEZ Eno存在相互作用的候选蛋白。结果发现,10μg·mL^-1 rEno蛋白处理对RAW264.7细胞有明显的细胞毒性,且10μg·mL^-1 rEno蛋白处理RAW264.7细胞2和4 h可显著抑制其对SEZ的吞噬作用(P<0.01、P<0.05)。初步筛选到RAW264.7细胞中动力蛋白激活蛋白亚单位蛋白(dynactin subunit protein 2,Dctn)、整合素α-M蛋白(integrin alpha-M)等17种可能与Eno发生互作的蛋白。本研究获得了rEno重组表达蛋白,发现rEno可减少RAW264.7细胞对SEZ的吞噬,互作蛋白的初步筛选也为进一步揭示Eno在SEZ抗吞噬中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 链球菌亚种 烯醇化酶 RAW264.7细胞 吞噬作用 蛋白互作
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马链球菌兽疫亚种SclE蛋白原核表达;及其免疫效力评价 被引量:3
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作者 徐宇萌 郭政 +4 位作者 李亚娟 邓静飞 何颍欣 黄云飞 付强 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2465-2473,共9页
【目的】探究马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp.zooepidemicus,SEZ)表面蛋白SclE的免疫效力,为预防SEZ引起的链球菌病提供理论依据。【方法】采用PCR扩增SEZ的SclE基因,再将该片段克隆至原核表达pCold I载体上,然后转化大肠杆菌... 【目的】探究马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp.zooepidemicus,SEZ)表面蛋白SclE的免疫效力,为预防SEZ引起的链球菌病提供理论依据。【方法】采用PCR扩增SEZ的SclE基因,再将该片段克隆至原核表达pCold I载体上,然后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后以SDS-PAGE进行分析鉴定,获得的重组蛋白SclE(rSclE)(100μg/mL,0.5 mL)以腹腔注射形式免疫BALB/c小鼠(n=10,一免、二免的周期均为14 d)。一免、二免14 d后收集血清,通过ELISA和Western blotting检测抗体水平和特异性。二免后进行免疫保护试验,并对攻毒后小鼠的肝、脾、肺、肾进行细菌载量检测和病理组织学观察。【结果】SDS-PAGE检测到大小约为93 kD的蛋白表达,与SclE的理论分子量大小一致;Western blotting检测显示,表达所得重组蛋白能与SEZ阳性对照组(腹腔注射0.5 mL SEZ灭活疫苗)小鼠血清发生特异性结合,表明其具有良好的反应原性。ELISA检测显示,二免后小鼠血清中特异性抗体水平与一免后相比均有显著提升(P<0.05,下同),且可诱导小鼠产生高滴度的IgG,其中IgG1抗体水平(0.436±0.031)显著高于IgG2a(0.161±0.009),表明rSclE诱导的抗体亚型以IgG1为主;rSclE免疫小鼠可显著抑制SEZ在各脏器中的增殖能力,肝脏、脾脏出血及炎性细胞浸润的症状得到改善,肺脏和肾脏出血等病理损伤减轻;在小鼠免疫攻毒保护试验中保护70%小鼠免受致死剂量SEZ毒株的攻击。【结论】成功表达获得的rSclE能诱导小鼠产生SclE特异性抗体,且具有较好的保护效果,可作为一种SEZ潜在的疫苗候选抗原。 展开更多
关键词 链球菌亚种(sez) SCLE 亚单位
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一例豚鼠铜绿假单胞杆菌和马链球菌兽疫亚种混合感染的诊断 被引量:2
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作者 余思义 项玉 +4 位作者 金陶 谷长勤 张万坡 程国富 胡薛英 《湖北农业科学》 2015年第19期4783-4786,共4页
对一只突发死亡的宠物豚鼠进行病理学检查、细菌分离培养及鉴定。结果表明,该豚鼠为铜绿假单胞杆菌和马链球菌兽疫亚种的混合感染。豚鼠易携带人畜共患病病菌,人们在饲养应该重视人畜共患病,及时控制人畜共患病的传播,防止其成为人类疾... 对一只突发死亡的宠物豚鼠进行病理学检查、细菌分离培养及鉴定。结果表明,该豚鼠为铜绿假单胞杆菌和马链球菌兽疫亚种的混合感染。豚鼠易携带人畜共患病病菌,人们在饲养应该重视人畜共患病,及时控制人畜共患病的传播,防止其成为人类疾病传染源。 展开更多
关键词 豚鼠 链球菌亚种 铜绿假单胞杆菌 混合感染
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马链球菌兽疫亚种毒力因子研究进展 被引量:3
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作者 贺名叶 李润成 《畜牧兽医科技信息》 2013年第3期18-20,共3页
马链球菌兽疫亚种(Streptococcusequissp.Zooepidemi—cus,SEZ)属于兰氏分类C群,旧称兽疫链球菌,普遍存在于动物的黏膜,尤其是马属动物的皮肤、上呼吸道黏膜、扁桃体以及生殖道等处。可致多种家畜的炎症及败血病。毒力因子是指... 马链球菌兽疫亚种(Streptococcusequissp.Zooepidemi—cus,SEZ)属于兰氏分类C群,旧称兽疫链球菌,普遍存在于动物的黏膜,尤其是马属动物的皮肤、上呼吸道黏膜、扁桃体以及生殖道等处。可致多种家畜的炎症及败血病。毒力因子是指构成细菌毒力的物质。马链球菌兽疫亚种具有类M蛋白、金属结合蛋白、链激酶、IgG结合蛋白、纤连蛋白、透明质酸荚膜等毒力因子,在该菌感染、侵袭以及抵抗机体吞噬的过程中,起着重要的作用。 展开更多
关键词 链球菌亚种 毒力因子 金属结合蛋白 属动物 链球菌 上呼吸道 类M蛋白
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