烟草感染马铃薯Y病毒脉坏死株系后PPO活性及其同工酶变化的研究 被引量：13

1

作者 文才艺 吴元华 张艳红 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期328-330,共3页

感染马铃薯Y病毒脉坏死株系 (PVYN)后 ,敏感烟草体内的多酚氧化酶 (PPO)活性升高 ,而抗性烟草的PPO活性降低 ,但其活性值均高于敏感烟草健康植株 ;敏感烟草从接种PVYN 后第 8d起出现 2条新的PPO同工酶谱带 ,而且随着病害程度的加重其强... 感染马铃薯Y病毒脉坏死株系 (PVYN)后 ,敏感烟草体内的多酚氧化酶 (PPO)活性升高 ,而抗性烟草的PPO活性降低 ,但其活性值均高于敏感烟草健康植株 ;敏感烟草从接种PVYN 后第 8d起出现 2条新的PPO同工酶谱带 ,而且随着病害程度的加重其强度增加 ,抗性烟草则没有新的PPO同工酶谱带出现 .在未接种的情况下 ,抗性烟草体内的PPO活性明显高于敏感烟草 ,其PPO同工酶谱带数比敏感烟草多 展开更多

关键词 烟草 马铃薯y病毒脉坏死株系 多酚氧化酶 同工酶

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烟草感染马铃薯Y病毒脉坏死株系后内源激素的变化 被引量：6

2

作者 钟丽娟 赵秀香 +2 位作者 贾玉才 宋影 吴元华 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第15期3724-3725,共2页

研究了烟草抗病品种VAM和感病品种K326感染马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)后体内乙烯和吲哚乙酸(IAA)的变化及其与发病的关系。结果表明,乙烯生成速率增加和IAA含量的升高与PVYN引起的烟草叶脉坏死密切相关。抗病品种VAM随接种时间的延长... 研究了烟草抗病品种VAM和感病品种K326感染马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)后体内乙烯和吲哚乙酸(IAA)的变化及其与发病的关系。结果表明,乙烯生成速率增加和IAA含量的升高与PVYN引起的烟草叶脉坏死密切相关。抗病品种VAM随接种时间的延长,乙烯生成速率和IAA含量的变化比较平缓,而感病品种K326随症状表现的加重,乙烯生成速率和IAA含量的变化非常显著。 展开更多

关键词 烟草 马铃薯y病毒脉坏死株系(PVy^N) 乙烯 吲哚乙酸

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中国部分马铃薯产区马铃薯Y病毒(PVY)的株系分化与鉴定 被引量：19

3

作者 陈士华 刘晓磊 +1 位作者 张晓婷 吴兴泉 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期548-551,共4页

分别克隆了黑龙江、山西、贵州等3省内的4个马铃薯产区的PVY p1基因和cp基因,通过系统地基因序列分析对各分离物的株系种类进行了鉴定.结果表明中国马铃薯产区PVY株系分化现象明显,其中黑龙江省克山农场分离为PVYNTN株系;贵州省贵阳市... 分别克隆了黑龙江、山西、贵州等3省内的4个马铃薯产区的PVY p1基因和cp基因,通过系统地基因序列分析对各分离物的株系种类进行了鉴定.结果表明中国马铃薯产区PVY株系分化现象明显,其中黑龙江省克山农场分离为PVYNTN株系;贵州省贵阳市分离物、威宁自治县分离物、山西省临县分离物为PVYN:O株系.PVYN:O株系分布普遍,可能已经成为中国部分马铃薯产区PVY的主要流行株系. 展开更多

关键词 马铃薯y病毒 株系 分子鉴定

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河北省马铃薯Y病毒株系分子鉴定及其RT-PCR检测 被引量：12

4

作者 吴志明 时星 +2 位作者 谢晓亮 温春秀 张庆良 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期54-59,共6页

根据马铃薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,从感染PVY的马铃薯田间病叶组织中提取出病毒的RNA,进行cDNA合成及PCR扩增,得到一条长度约800bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的基因片段大小一致,本... 根据马铃薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,从感染PVY的马铃薯田间病叶组织中提取出病毒的RNA,进行cDNA合成及PCR扩增,得到一条长度约800bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的基因片段大小一致,本试验建立了快速、灵敏、简便的PVY检测的方法。将RT-PCR扩增产物克隆到质粒pGEM-T上,并进行了序列分析。结果表明,克隆的cDNA片段由801个核苷酸组成,编码267个氨基酸组成的理论分子量为29kD蛋白,与PVY外壳蛋白的大小一致,与基因库登记的代表性株系相比,它们之间的核苷酸序列同源性为89 6%～98 8%,氨基酸序列的同源性为93 3%～98 5%,说明PVYCP基因具有高度的保守性(记为PVY-HBEI),与国内报道的PVY-CHU、PVY-ZHJ和PVY-ZHOU株系的氨基酸序列同源性分别为96 6%、98 5%和97 8%,与PVYN和PVYO株系的氨基酸序列同源性分别为93 6%和97 8%,从分子水平上确定PVY-HBEI归属于普通株系(PVYO株系)。 展开更多

关键词 马铃薯y病毒 反转录-聚合酶链式反应 病毒检测 外壳蛋白基因(CP) 序列分析 株系鉴定

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马铃薯Y病毒的株系种类、分子特征及鉴定方法研究进展 被引量：2

5

作者 吴兴泉 李月 +2 位作者 孙强 李萌萌 王梦科 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第3期5-8,共4页

马铃薯Y病毒(PVY)株系分化现象明显,具有多个株系类型。随着分子生物学技术和免疫学技术逐渐被引入PVY的株系鉴定中,产生了一系列的株系鉴定方法。为此,对PVY的主要株系、亚株系的种类及分类依据、分子特征以及近年来应用于PVY株系鉴定... 马铃薯Y病毒(PVY)株系分化现象明显,具有多个株系类型。随着分子生物学技术和免疫学技术逐渐被引入PVY的株系鉴定中,产生了一系列的株系鉴定方法。为此,对PVY的主要株系、亚株系的种类及分类依据、分子特征以及近年来应用于PVY株系鉴定的传统生物学方法、分子生物学方法、免疫学方法等进行了综述。 展开更多

关键词 马铃薯y病毒 株系 分子特征 鉴定

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马铃薯Y病毒株系分化研究进展 被引量：2

6

作者 陈士华 时妍 吴兴泉 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第10期10-12,共3页

马铃薯Y病毒(PVY)是我国马铃薯上最重要的病毒之一,分布广泛,危害严重。PVY株系分化现象明显,已被广泛认同的PVY株系种类包括3种:PVYO株系、PVYN株系和PVYC株系。近年来,有很多研究表明,PVY可通过基因突变或基因重组等方式分化出多种不... 马铃薯Y病毒(PVY)是我国马铃薯上最重要的病毒之一,分布广泛,危害严重。PVY株系分化现象明显,已被广泛认同的PVY株系种类包括3种:PVYO株系、PVYN株系和PVYC株系。近年来,有很多研究表明,PVY可通过基因突变或基因重组等方式分化出多种不同类型的株系,引致更为严重的症状。鉴此,从PVY各株系的特征、产生的分子机制、检测与鉴定方法、我国PVY株系分化情况等方面对目前PVY株系分化方面已取得的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 马铃薯y病毒 株系 分化 鉴定方法

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青海省部分地区马铃薯病毒种类与Y病毒株系类型研究 被引量：4

7

作者 张永鹏 杨钰泽 +1 位作者 咸文荣 马永强 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第8期1818-1825,共8页

【目的】了解马铃薯主要病毒对青海省部分地区马铃薯生产的危害,明确青海省部分马铃薯产区主要病毒类型及PVY株系类别,对马铃薯病毒病的防治和品种选育工作提供科学依据。【方法】利用DAS-ELISA和RT-PCR结合生物信息学分析方法对采自青... 【目的】了解马铃薯主要病毒对青海省部分地区马铃薯生产的危害,明确青海省部分马铃薯产区主要病毒类型及PVY株系类别,对马铃薯病毒病的防治和品种选育工作提供科学依据。【方法】利用DAS-ELISA和RT-PCR结合生物信息学分析方法对采自青海省大通县和互助县的181份疑似马铃薯病毒病样品进行病毒种类检测和Y病毒株系类型分析。【结果】181份样品中,PVY、PVS、PVM和PLRV病毒的检出率分别为17.68%、19.34%、4.42%和4.42%,其中,PVY单独侵染率最高,达14.92%,其次PVS为12.71%,样品中未检出PVX、PVA和AMV病毒。复合侵染中以2种病毒复合侵染为主,其中PVS+PVM、PVY+PVS和PVS+PLRV发生情况较为常见。DAS-ELISA检测PVY单独侵染结合RT-PCR混检获得20份PVY阳性样品,对其进行马铃薯Y病毒株系血清学检测分析发现,青海省部分地区马铃薯Y病毒株系以PVY^(O+C)血清型为主,其中PVY^(O+C)血清型阳性株系19份,占比为95%,PVY^(N)与PVY^(C)血清型阳性株系各1份,均占比为5%。为进一步明确PVY亚株系,根据血清学检测结果,对获得的19个PVY分离物的基因序列进行分析,发现PVY病毒核苷酸一致率为97.0%~100%,氨基酸一致率为95.8%~100%,且未发现重组位点,种群基因较稳定,PVY分离物系统发育分析发现,16个PVY分离物与PVY^(N:O)株系亲缘关系较近,3个PVY分离物PVY^(NTN-NW)株系亲缘关系较近,青海省部分地区马铃薯Y病毒株系类型以PVY^(N:O)、PVY^(NTN-NW)株系为主,与血清学检测结果一致。【结论】青海省部分地区主要马铃薯病毒种类有PVY、PVS、PVM和PLRV,PVY和PVS是青海地区马铃薯病毒的主要流行种类,其中Y病毒株系类型以PVY^(N:O)和PVY^(NTN-NW)株系为主,且同源性很高,PVY的种群基因较稳定。 展开更多

关键词 马铃薯病毒种类 DAS-ELIAS RT-PCR y病毒株系 青海

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贵州黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的血清学鉴定 被引量：5

8

作者 罗红香 李余湘 +6 位作者 刘会忠 徐明勇 王林玉 赵中汇 何玉安 李章海 江彤 《中国烟草科学》 CSCD 2012年第5期60-62,共3页

2010年从贵州省黔南州烟草产区共采集201个表现明显马铃薯Y病毒病症状的烟草样本。采用Tas-ELISA检测PVY的3个株系PVYN、PVYO和PVYC。结果显示,201个样本中共检测出171个样本受到PVY侵染,其中PVYN37个,占21.6%;PVYO133个,占77.8%;PVYC0... 2010年从贵州省黔南州烟草产区共采集201个表现明显马铃薯Y病毒病症状的烟草样本。采用Tas-ELISA检测PVY的3个株系PVYN、PVYO和PVYC。结果显示,201个样本中共检测出171个样本受到PVY侵染,其中PVYN37个,占21.6%;PVYO133个,占77.8%;PVYC0个,PVYN和PVYO复合侵染1个,占0.6%。PVY株系分布具有一定规律,侵染黔南州烟草的PVY以PVYO为主要株系,PVYN侵染相对较少,为次要株系,所有样本均没有检测到PVYC侵染,复合侵染零星发生。 展开更多

关键词 贵州 烟草 马铃薯y病毒 ELISA 株系鉴定

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黑龙江省部分地区马铃薯Y病毒株系检测 被引量：8

9

作者 刘洪义 梁五生 +2 位作者 刘忠梅 张洪祥 杨立群 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期47-52,共6页

从黑龙江省克山、讷河、五大连池和北安大田种植的马铃薯上采集马铃薯病叶,提取总RNA,利用之前验证过的引物,进行反转录、PCR扩增,以及焦磷酸测序,以鉴定感染的马铃薯Y病毒(PVY)株系。结果表明,克山有2个样品分别感染PVYN:O和PVYN-Wi;... 从黑龙江省克山、讷河、五大连池和北安大田种植的马铃薯上采集马铃薯病叶,提取总RNA,利用之前验证过的引物,进行反转录、PCR扩增,以及焦磷酸测序,以鉴定感染的马铃薯Y病毒(PVY)株系。结果表明,克山有2个样品分别感染PVYN:O和PVYN-Wi;讷河有2个样品感染PVYN-Wi;五大连池有2个样品分别感染PVYN:O和PVYN-Wi;北安有1个样品感染PVYN-Wi。结合之前报道的9份黑龙江省马铃薯病样的PVY株系鉴定结果,表明黑龙江省大田种植的马铃薯至少存在PVYN-Wi、PVYN:O、PVYNTN和PVYN4种PVY株系侵染;而且,由于PVYN-Wi侵染了16份已鉴定病样中的7份,而其余3种株系均仅侵染3份病样,显示PVYN-Wi可能为优势株系。 展开更多

关键词 黑龙江省 马铃薯 马铃薯y病毒 病毒株系鉴定 焦磷酸测序

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青岛烟区马铃薯Y病毒株系鉴定及系统传导特性 被引量：1

10

作者 郭光耀 宋丽云 +5 位作者 江连强 沈广材 张富强 董文凤 何青云 申莉莉 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2023年第6期59-68,共10页

为明确引起青岛试验田烟草脉坏死及花叶的PVY的发生规律、分子进化和系统传导特性,通过病毒病害表型,发病率和病情指数明确青岛试验田病毒病害流行规律;利用MEGA7构建系统发育树鉴定PVY青岛分离物的株系;通过q RT-PCR,western blotting... 为明确引起青岛试验田烟草脉坏死及花叶的PVY的发生规律、分子进化和系统传导特性,通过病毒病害表型,发病率和病情指数明确青岛试验田病毒病害流行规律;利用MEGA7构建系统发育树鉴定PVY青岛分离物的株系;通过q RT-PCR,western blotting和PVY-GFP荧光明确PVY侵染烟株的传导路径;通过不同叶位、不同症状病叶取样,利用q RT-PCR检测PVYCPm RNA相对含量,明确显症和隐症叶片的病毒含量差异,以及TMV、CMV、PVY单独、两者混合、三者混合侵染时的干扰或协生作用。结果显示:烟株成熟期,PVY与TMV和CMV混合发生严重,PVY分离物为N:O株系,未突破va基因抗性。在侵染早期,病毒从接种叶沿叶脉进入茎,开始双向运输时,先向根部移动,进而到达苗端;再扩散至上部叶,较慢移动至下部叶;最后伴随烟株生长持续向两端新生部位运输。侵染中期病株上部叶隐症现象显著,病叶症状与病毒浓度呈正相关。烟田中后期,PVY与TMV和CMV混合侵染,病毒间的干扰和协生作用导致症状复杂多变。研究结果有助于提高品种抗性鉴定试验的准确性和药效试验的靶标性。 展开更多

关键词 马铃薯y病毒 株系鉴定 系统传导 隐症 混合侵染

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实时定量PCR鉴定贵州马铃薯Y病毒的主要株系 被引量：2

11

作者 邓宽平 丁海兵 雷尊国 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第12期7-9,共3页

为了解贵州的马铃薯Y病毒株系的分布和组成,结合RT-PCR与实时定量PCR技术,对贵州省马铃薯主产区采集的355份马铃薯样品进行检测鉴定。结果表明:经RT-PCR检测获得157份PVY阳性样品,应用实时定量PCR技术鉴定,150份为PVYN株系侵染,占总样... 为了解贵州的马铃薯Y病毒株系的分布和组成,结合RT-PCR与实时定量PCR技术,对贵州省马铃薯主产区采集的355份马铃薯样品进行检测鉴定。结果表明:经RT-PCR检测获得157份PVY阳性样品,应用实时定量PCR技术鉴定,150份为PVYN株系侵染,占总样品数的95.54%;4份为PVYO株系侵染,仅占2.55%。结论:危害贵州省马铃薯的PVY病毒主要是N株系。 展开更多

关键词 马铃薯y病毒 RT—PCR 实时定量PCR株系鉴定

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贵州烟草马铃薯Y病毒株系分析

12

作者 王莉爽 陈文 +2 位作者 谭清群 吴石平 袁洁 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1415-1419,共5页

【目的】探明贵州省烟草主产区马铃薯Y病毒（PVY）的主要株系,为制定烟草PVY的综合防治策略提供理论依据。【方法】采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（DAS-ELISA）对从贵州省24个县（市）48个乡（镇）采集到的254份烟草病毒病疑似样品进行... 【目的】探明贵州省烟草主产区马铃薯Y病毒（PVY）的主要株系,为制定烟草PVY的综合防治策略提供理论依据。【方法】采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（DAS-ELISA）对从贵州省24个县（市）48个乡（镇）采集到的254份烟草病毒病疑似样品进行检测,每个乡镇选出一个代表性PVY阳性样品运用生物学方法并依据pl基因和cp基因序列联合分析鉴定PVY株系。【结果】源于贵州省24个县（市）的48个烟草PVY分离物与已知PVY分离物的p1基因和cp基因的核苷酸相似性在84.1%-98.6%,氨基酸序列同源性为86.1%-99.1%。其中与PVYN株系核苷酸相似性最高,达98.6%,氨基酸同源性为99.1%;其次是PVY^N∶O株系,核苷酸相似性为97.0%,氨基酸同源性为97.8%。由构建的系统发育进化树可知,17个县（市）的34条PVY分离物属于PVY^N∶O株系,7个县（市）的14条PVY分离物属于PVYN株系。【结论】贵州省烟草主产区PVY已具有明显的株系分化现象,且有一定的地域性。 展开更多

关键词 烟草 马铃薯y病毒 病毒株系 分子变异

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青岛及周边地区马铃薯Y病毒株系类型分析

13

作者 赵亮 张兆良 +3 位作者 邢明祯 孙殿林 迟胜起 张剑峰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2023年第2期97-103,共7页

马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)是目前马铃薯生产中的重要病毒,PVY侵染马铃薯会造成产量、质量的严重下降。为了探明青岛及周边地区PVY株系类型,本次共采集青岛及周边地区485份马铃薯疑似PVY样本,共检测出298份PVY阳性样本。对PVY样... 马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)是目前马铃薯生产中的重要病毒,PVY侵染马铃薯会造成产量、质量的严重下降。为了探明青岛及周边地区PVY株系类型,本次共采集青岛及周边地区485份马铃薯疑似PVY样本,共检测出298份PVY阳性样本。对PVY样本进行RT-PCR扩增,结果显示:本地区的主要株系为PVY^(NTN-NW)(SYR-Ⅱ型),占比为62.4%;PVY^(N-Wi)株系占比为31.6%;复合侵染株系占比为6.0%。对复合侵染株系的单株块茎(编号ShouGuang)进行测序、BLSAT比对及Simplot和RDP软件分析,显示PVY复合侵染的马铃薯植株体内存在两种重组类型(ShouGuang-Y1和ShouGuang-Y2);发生重组的位点主要集中在P1-1、HC-Pro/P3、6K2/VPg 3个区域。通过对PVY的不同变异株系分析,可为PVY株系的遗传多样性提供理论基础,为青岛及周边地区PVY防控提供理论依据。 展开更多

关键词 马铃薯y病毒 PVy^(NTN-NW)(SyR-Ⅱ型)株系 PVy^(N-Wi)株系 复合侵染 青岛

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马铃薯Y病毒对不同马铃薯品种的致病力 被引量：8

14

作者 白艳菊 韩树鑫 +8 位作者 高艳玲 张威 范国权 邱彩玲 申宇 张抒 尚慧 聂先舟 文景芝 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1713-1720,共8页

为明确不同马铃薯Y病毒(PVY)株系对马铃薯的影响及危害,采用PVYN:O、PVYN-Wi、PVYNTN-NW(SYRⅠ)和PVYNTN-NW(SYRⅡ)株系分离物人工侵染马铃薯,并通过透射电子显微镜观察经PVY侵染后马铃薯植株细胞的超微结构。结果表明,敏感品种更适用于... 为明确不同马铃薯Y病毒(PVY)株系对马铃薯的影响及危害,采用PVYN:O、PVYN-Wi、PVYNTN-NW(SYRⅠ)和PVYNTN-NW(SYRⅡ)株系分离物人工侵染马铃薯,并通过透射电子显微镜观察经PVY侵染后马铃薯植株细胞的超微结构。结果表明,敏感品种更适用于PVY病毒致病力鉴定,敏感品种‘克新13’和‘克新18’对PVY不同分离物的反应强烈,差异显著,而‘兴加2号’对4个PVY分离株均表现耐病,虽然细胞内均出现叶绿体变形、单层膜小囊泡和典型的风轮状内含体,但症状只表现为不同程度的花叶。同时,发现PVYN-Wi致病力较弱,侵染后,4个马铃薯品种均出现花叶症状,细胞内部产生多膜结构、风轮状内含体,引起敏感品种‘克新13’和‘克新18’细胞变形、叶绿体变形和髓鞘样结构;PVYNTN-NW致病力最强,感病的‘克新13’和‘克新18’植株受害症状明显加重,且植株早衰、细胞破坏严重,有些死亡较快的植株甚至未产生特征性内含体结构;PVYN:O致病力中等,植株受害症状和超微结构变化也介于PVYN-Wi和PVYNTN-NW之间。不同马铃薯品种对PVY病毒的感病程度有较大差异,‘兴加2号’为耐病品种。 展开更多

关键词 马铃薯y病毒(PVy) 株系 马铃薯品种 超显微结构 症状

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马铃薯块茎坏死环斑病研究进展 被引量：1

15

作者 李萌萌 陈士华 吴兴泉 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第4期143-146,共4页

马铃薯块茎坏死环斑病(potato tuber necrotic ringspot disease,PTNRD)是新发现的一种马铃薯病毒病,可引致马铃薯块茎坏死环斑,不但降低马铃薯产量,而且影响马铃薯品质,造成严重的经济损失。近年来该病害在中国虽有报道,但相关研究仍... 马铃薯块茎坏死环斑病(potato tuber necrotic ringspot disease,PTNRD)是新发现的一种马铃薯病毒病,可引致马铃薯块茎坏死环斑,不但降低马铃薯产量,而且影响马铃薯品质,造成严重的经济损失。近年来该病害在中国虽有报道,但相关研究仍处于起步阶段。对PTNRD的症状、分布、病原及其分子特征、鉴定方法、病毒与寄主互作关系及病害防治等方面的新进展进行了综述,以期为我国深入开展相关研究提供理论依据。 展开更多

关键词 马铃薯块茎坏死环斑病 分布 PVy株系 病毒-寄主互作

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四川烟区CMV和PVY株系分化研究 被引量：7

16

作者 赵雪君 刘世超 +7 位作者 李斌 赵城钢 刘旭旭 杜丽娟 魏周玲 青玲 陈德鑫 孙现超 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期8-16,共9页

为了明确当前四川烟区蚜传病毒的株系分化情况,该研究利用RT-PCR技术对四川烟区的CMV和PVY两种蚜传病毒病进行了检测和鉴定.依据病毒的CP基因序列合成引物,以烟草病叶的总RNA为模版,RT-PCR扩增得到了657bp的CMVCP片段和759bp的PVYCP片段... 为了明确当前四川烟区蚜传病毒的株系分化情况,该研究利用RT-PCR技术对四川烟区的CMV和PVY两种蚜传病毒病进行了检测和鉴定.依据病毒的CP基因序列合成引物,以烟草病叶的总RNA为模版,RT-PCR扩增得到了657bp的CMVCP片段和759bp的PVYCP片段,获得的基因片段连接到pGEM-T Easy载体上,测序.样品检测结果显示,在252份样品中CMV和PVY的检出率分别为33.33%和34.52%,两者复合侵染率为15.87%.构建的系统发育树分析结果表明,四川烟区的CMV株系分化不明显,主要属于IB亚组.PVY有着明显的株系分化现象,PVY^(N:O)株系、PVY^O株系、PVY^N株系在四川烟区均有发生.研究结果可能对培育抗病品种,控制这两种蚜传病毒具有一定的参考价值. 展开更多

关键词 烟草植株 黄瓜花叶病毒 马铃薯y病毒 株系 分化

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利用qRT-PCR技术对PVY重组株系的鉴定 被引量：4

17

作者 尚慧 韩树鑫 +6 位作者 高艳玲 张威 范国权 申宇 聂先舟 吕文河 白艳菊 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期238-244,共7页

【目的】马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)作为制约马铃薯生产的重要病毒之一,株系分化繁杂。近年被科学家研究分离的PVY^(N-Wi)和PVY^(NTN-NW)株系而言,其基因组结构极为相似但致病性差异较大。【方法】本研究利用qRT-PCR方法,方便快... 【目的】马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)作为制约马铃薯生产的重要病毒之一,株系分化繁杂。近年被科学家研究分离的PVY^(N-Wi)和PVY^(NTN-NW)株系而言,其基因组结构极为相似但致病性差异较大。【方法】本研究利用qRT-PCR方法,方便快捷的检测出马铃薯Y病毒的这2种不同株系,同时并使之可成功且稳定的应用于马铃薯生产中。通过查找Gen Bank已公布的PVY^(N-Wi)和PVY^(NTN-NW)株系的全基因组序列,设计用于qRT-PCR检测,扩增目的片段大小为150 bp左右的特异性引物,应用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)进行检测。【结果】通过设计的引物对保存的试管苗毒源进行检测,可以成功的精准鉴别出PVY^(N-Wi)和PVY^(NTN-NW)株系;同时对100份田间采集的叶片样品进行检测,成功的检测出100份样品中32份样品,受到PVY^(N-Wi)株系侵染;27份样品,受到PVY^(NTN-NW)株系侵染;同时存在9份样品,可能同时受到PVY^(N-Wi)、PVY^(NTN-NW)株系的侵染。【结论】实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)可适用于马铃薯叶片样品的检测,为株系的快速鉴定提供了可靠的方法,可用于生产中大规模样品的检测,有利于及时采取防控措施,降低损失。 展开更多

关键词 马铃薯y病毒(PVy) 株系分化 实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)

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PVY株系间的分子变异及分子鉴定方法 被引量：8

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作者 杨庆东 吴兴泉 +1 位作者 陈士华 刘晓磊 《中国马铃薯》 2011年第3期166-169,共4页

马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)株系分化现象明显,难于准确鉴定。本研究利用核酸序列分析工具对PVY主要株系的全基因组序列、cp基因序列和p1基因序列进行了系统分析,探明了PVY主要株系的分子特征。结果表明,具有PVYN株系血清型的PVYN... 马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)株系分化现象明显,难于准确鉴定。本研究利用核酸序列分析工具对PVY主要株系的全基因组序列、cp基因序列和p1基因序列进行了系统分析,探明了PVY主要株系的分子特征。结果表明,具有PVYN株系血清型的PVYN、PVYNTN株系与具有PVYO株系血清型的PVYO、PVYN:O、PVYNW株系间在cp基因第50位和第86位核苷酸处存在特异性分子变异;将p1基因与cp基因联合进行序列分析可对PVY各主要株系进行准确的鉴定,并建立了具体的分析方法。 展开更多

关键词 马铃薯y病毒 株系 分子变异 分子鉴定

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基于小RNA深度测序的烟草脉坏死病病原分子鉴定及其全基因组序列分析

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作者 莫翠萍 陈锦清 +7 位作者 韦学平 崔丽贤 罗婉笛 李金哲 谢慧婷 秦碧霞 蔡健和 李战彪 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1387-1396,共10页

【目的】明确引起广西河池市南丹县烟草呈现斑驳花叶、叶脉坏死等症状的病毒病原,为烟草病毒病的综合防治提供理论依据。【方法】2022年5月,从河池市南丹县采集5份表现叶脉坏死、花叶等症状的烟草叶片样品,采用小RNA深度测序技术、反转... 【目的】明确引起广西河池市南丹县烟草呈现斑驳花叶、叶脉坏死等症状的病毒病原,为烟草病毒病的综合防治提供理论依据。【方法】2022年5月,从河池市南丹县采集5份表现叶脉坏死、花叶等症状的烟草叶片样品,采用小RNA深度测序技术、反转录PCR(RT-PCR)、摩擦接种、分段克隆、系统进化及重组分析等方法对样品进行鉴定及遗传进化分析。【结果】小RNA深度测序获得与GenBank数据库中马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)不同分离物具有较高核苷酸相似性(99.00%~100.00%)的5条序列,将5条序列拼接后获得1条全长为9708 nt的全基因组序列;通过鉴别寄主苋色藜(Chenopodium amaranticolor)单斑分离的方法获得单一病毒,利用该分离纯化后的病毒单斑接种普通烟K326和本氏烟,其中K326的新叶产生坏死症状,而本氏烟的新叶呈不规则深绿色病斑症状;分别提取K326和本氏烟的叶片样品总RNA,通过RT-PCR检测、分段克隆的方法获得病毒分离物的全基因组序列,结果显示2个烟草品种中的病毒序列与小RNA深度测序获得的序列相似性达99.90%;将序列在GenBank中进行BLAST分析发现,研究获得的序列与已登录GenBank的PVY各分离物具有较高的核苷酸相似性,其中与我国黑龙江省马铃薯分离物PVY HLJ26(MF134425)的核苷酸相似性最高,为99.01%,表明研究获得的病毒序列为PVY分离物,命名为PVY-GXnd1(OP131591)。重组分析发现,PVY-GXnd1是由PVYO-139(U09509.1)、PVYN-Mont(AY884983.1)和PVYN-605(X97895.1)重组而来的新PVY分离物,重组主要发生在3个区域,分别是1~498、2415~5816和8555~9373 nt,覆盖PVY的P1、P3、6K1、CI、6K2、Vpg、Nib和CP蛋白编码区,包含了PVYN-Wi和PVYNTN株系的2种不同重组结构特征,表明PVYGXnd1株系更接近PVYNTN-NW株系;基于PVY编码区构建的系统发育进化树分析表明,PVY-GXnd1与我国黑龙江省分离物PVY HLJ26处于同一小分支,具有较近的亲缘关系,而该分离物归属于PVYNTN-NW(SYR-II)株系,与重组分析结果一致。【结论】侵染广西河池市南丹县烟草引起叶脉坏死症状的病毒PVY-GXnd1为一株PVYNTN-NW(SYR-II型)重组株系。 展开更多

关键词 烟草 小RNA深度测序 马铃薯y病毒 重组 叶脉坏死 广西

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铜元素诱导烟草抗PVY^N相关生理生化及信号物质的研究 被引量：6

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作者 李鑫 吴元华 +1 位作者 顾晶晶 赵秀香 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期536-540,共5页

通过气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及生理生化指标的测定,研究了铜(Cu)元素诱导感染PVYN的烟株信号物质的积累及对系统抗性的影响。结果表明:喷施Cu元素能延迟烟株显症和叶脉出现褐色坏死时间,降低发病程度,病毒增殖受到抑制,烟株... 通过气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及生理生化指标的测定,研究了铜(Cu)元素诱导感染PVYN的烟株信号物质的积累及对系统抗性的影响。结果表明:喷施Cu元素能延迟烟株显症和叶脉出现褐色坏死时间,降低发病程度,病毒增殖受到抑制,烟株体内的与抗性相关物质如脯氨酸及可溶性糖含量升高,电解质的外渗减少。此外,Cu元素处理能诱导信号物质水杨酸和乙烯的积累,水杨酸含量在接种后15d达到最大量3.93μg·g-1,为接种对照的1.3倍;而乙烯释放量在3～9d内均高于接种对照,在12d时乙烯释放量显著低于接种对照,分析认为前期Cu元素处理后诱导了乙烯释放的增强,进行抗性信号的传递。因此,喷施Cu元素后可以诱导烟草植株产生抗病性,增强烟草对PVYN侵染的抵抗力,并且诱导了相关抗性信号的传递。 展开更多

关键词 烟草 铜 马铃薯y病毒脉坏死株系(PVyN) 诱导抗性 信号物质

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