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山东、河南、河北驴群马动脉炎病毒和马疱疹病毒8型的检测与分析被引量：2: 1; 作者王彤彤黄泽统 +7 位作者陈丽郭瑞宏董宇婷刘文强刘桂芹王长法任慧英李亮亮《动物医学进展》北大核心 2022年第5期30-35,共6页; 为了解我国山东省、河南省、河北省驴群中马动脉炎病毒(EAV)和马疱疹病毒8型(EHV-8)的感染现状,于2020年从3个省份的屠宰场和驴场收集驴血样品共计860份。通过RT-PCR和PCR方法分别对血样进行EAV和EHV-8检测,统计其阳性率和混合感染率,... 展开更多; 关键词驴马动脉炎病毒马疱疹病毒8型遗传分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

马疱疹病毒8型荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用: 2; 作者李亮亮于跃 +7 位作者王天娇丁相丹胡乐玉王长法刘文强刘桂芹任慧英王彤彤《动物医学进展》北大核心 2022年第12期15-19,共5页; 马疱疹病毒8型(EHV-8)是近年来在规模化养驴场发现的一种病毒,其主要导致马属动物呼吸困难、繁殖障碍(流产、产弱驹等),严重危害养驴业的健康发展。为建立EHV-8的分子生物学检测方法,用于该病原感染的流行病学调查和致病机制研究,根据N... 展开更多; 关键词马疱疹病毒8型 ORF70 实时荧光定量PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

马疱疹病毒8型gD蛋白的生物信息学分析及多克隆抗体制备: 3; 作者徐萌郗灿坤 +7 位作者王天娇李瑞博丁相丹孙祺胡乐玉任慧英李亮亮王彤彤《动物医学进展》北大核心 2023年第8期11-16,共6页; 旨在探索马疱疹病毒8型(Equine herpesvirus type 8,EHV-8)囊膜蛋白gD的生物信息学特性、原核表达和多克隆抗体制备。用生物信息学分析软件对gD基因编码蛋白质的理化性质、亲/疏水性和跨膜区进行分析,以EHV-8 SDLC66毒株为模板,通过PCR... 展开更多; 关键词马疱疹病毒8型囊膜蛋白gD 生物信息学分析多克隆抗体原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

马疱疹病毒8型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立: 4; 作者纪言霏齐来勇 +4 位作者张健鹏许丹丹张敬文赵霞刘文强《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期24-28,共5页; 为了建立一种能够快速检测马疱疹病毒8型(EHV-8)的方法,本试验以EHV-8的全基因组序列为模板,针对糖蛋白B(gB)基因的保守序列,进行对比分析,设计EHV-8的特异性引物和探针,优化反应条件,建立EHV-8 TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,并对该... 展开更多; 关键词驴马疱疹病毒8型糖蛋白B(gB)基因实时荧光定量PCR TAQMAN探针; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名山东、河南、河北驴群马动脉炎病毒和马疱疹病毒8型的检测与分析被引量：2: 1; 作者王彤彤黄泽统陈丽郭瑞宏董宇婷刘文强刘桂芹王长法任慧英李亮亮; 机构聊城大学毛驴高效繁育与生态饲养研究院青岛农业大学动物医学院; 出处《动物医学进展》北大核心 2022年第5期30-35,共6页; 基金聊城大学大学生创新项目(CXCY2021239) 聊城大学博士启动基金项目(318051918,318051919) 山东省农业良种工程(2017LZGC020)。; 文摘为了解我国山东省、河南省、河北省驴群中马动脉炎病毒(EAV)和马疱疹病毒8型(EHV-8)的感染现状,于2020年从3个省份的屠宰场和驴场收集驴血样品共计860份。通过RT-PCR和PCR方法分别对血样进行EAV和EHV-8检测,统计其阳性率和混合感染率,并分析其流行情况;同时,对3个省份EAV和EHV-8阳性样品的ORF7基因和ORF70部分基因序列进行克隆、测序及遗传进化分析。结果显示,EAV的阳性率为5.7%(49/860),EHV-8的阳性19.7%(169/860),混合感染率为1.9%(16/860)。分析显示,3个省份扩增的EAV ORF7基因测序结果均与经典毒株EAV Bucyrus同源性最高,亲缘关系最近;河北EHV-8 ORF70基因与EHV-8 IR/2010/16亲缘关系最近,河南EHV-8 ORF70基因与EHV-8 IR/2010/47亲缘关系最近,山东EHV-8 ORF70基因与EHV-8 wh亲缘关系最近。论文首次报道EAV和EHV-8在驴群感染情况,为下一步防控EAV和EHV-8奠定了基础。; 关键词驴马动脉炎病毒马疱疹病毒8型遗传分析; Keywords donkey Equine arteritis virus Equine herpesviruses 8 genetic analysis; 分类号 S852.652 [农业科学—基础兽医学] S858.21 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马疱疹病毒8型荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用: 2; 作者李亮亮于跃王天娇丁相丹胡乐玉王长法刘文强刘桂芹任慧英王彤彤; 机构聊城大学毛驴高效繁育与生态饲养研究院青岛农业大学动物医学院; 出处《动物医学进展》北大核心 2022年第12期15-19,共5页; 基金聊城大学博士启动基金项目(318051918,318051919) 聊城大学畜牧学高水平学科建设项目(319312101-23,319312101-22)。; 文摘马疱疹病毒8型(EHV-8)是近年来在规模化养驴场发现的一种病毒,其主要导致马属动物呼吸困难、繁殖障碍(流产、产弱驹等),严重危害养驴业的健康发展。为建立EHV-8的分子生物学检测方法,用于该病原感染的流行病学调查和致病机制研究,根据NCBI数据库中EHV-8参考毒株ORF 70基因序列的高度保守区域,设计特异性引物,优化程序,建立检测EHV-8的荧光定量PCR方法。结果表明,该方法灵敏度高,最小检测浓度为100拷贝/μL,灵敏度是常规PCR的100倍;特异性强,与EHV-1、EHV-4均无交叉反应;重复性好,组内和组间重复试验变异系数分别为0.15%~0.83%和0.06%~0.47%。利用新建立的方法对120份临床驴血样本进行检测,阳性检出率为32.5%,研究结果为EHV-8的检测和致病性研究提供了可靠的技术支撑。; 关键词马疱疹病毒8型 ORF70 实时荧光定量PCR 检测; Keywords Equine herpesvirus 8 ORF70 real-time PCR detection; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学] S858.21 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马疱疹病毒8型gD蛋白的生物信息学分析及多克隆抗体制备: 3; 作者徐萌郗灿坤王天娇李瑞博丁相丹孙祺胡乐玉任慧英李亮亮王彤彤; 机构聊城大学毛驴高效繁育与生态饲养研究院青岛农业大学动物医学院; 出处《动物医学进展》北大核心 2023年第8期11-16,共6页; 基金聊城大学大学生创新项目(CXCY2022121,CXCY2022250,CYCX2022434) 国家自然科学基金(32002248) 山东省自然科学基金(ZR2020QC016,ZR2020QC017)。; 文摘旨在探索马疱疹病毒8型(Equine herpesvirus type 8,EHV-8)囊膜蛋白gD的生物信息学特性、原核表达和多克隆抗体制备。用生物信息学分析软件对gD基因编码蛋白质的理化性质、亲/疏水性和跨膜区进行分析,以EHV-8 SDLC66毒株为模板,通过PCR扩增gD蛋白的胞外区并克隆至pET-32a(+)载体中,将重组质粒pET-32a-gD转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,收集菌体超声破碎,纯化并获得重组gD蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,用间接ELISA测定所制备多克隆抗体的效价,同时用Western blot与间接免疫荧光试验(IFA)明确所制备多克隆抗体的特异性。结果表明,EHV-8 gD编码的蛋白稳定,是亲水性蛋白,有跨膜区,位于30-330 aa。gD蛋白跨膜区正确克隆入pET-32a(+)载体,获得重组质粒pET-32a-gD。重组gD蛋白在大肠埃希氏菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达,分子质量约为55 ku,将其纯化后免疫新西兰兔获得抗gD多克隆抗体,该抗体的效价高达1∶200 000,Western blot与IFA结果表明该多克隆抗体具有良好的特异性。; 关键词马疱疹病毒8型囊膜蛋白gD 生物信息学分析多克隆抗体原核表达; Keywords EHV-8 envelope protein gD bioinformatic analysis polyclonal antibody; 分类号 S852.652 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马疱疹病毒8型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立: 4; 作者纪言霏齐来勇张健鹏许丹丹张敬文赵霞刘文强; 机构聊城大学农学与农业工程学院聊城市东昌府区农业农村局; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期24-28,共5页; 基金山东省驴产业技术体系基金(SDAIT-27-11) 聊城大学理工科研项目(318011701)。; 文摘为了建立一种能够快速检测马疱疹病毒8型(EHV-8)的方法,本试验以EHV-8的全基因组序列为模板,针对糖蛋白B(gB)基因的保守序列,进行对比分析,设计EHV-8的特异性引物和探针,优化反应条件,建立EHV-8 TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,并对该方法的敏感性、特异性和重复性进行验证,使用该方法进行临床样本检测。结果显示,建立的EHV-8 TaqMan实时荧光定量PCR检测方法对EHV-8 DNA模板的最低检测限为1.1×10^(2)copies/μL,敏感性高;EHV-8与EHV-1、EHV-4、马流产沙门氏菌和肠产毒性大肠杆菌均无交叉反应,特异性强;批内重复性试验和批间重复性试验均表明该方法重复性好。对132份临床样本的检测结果显示,阳性检出率为10.61%,基因测序正确。由此可见,本试验建立的EHV-8 TaqMan实时荧光定量PCR检测方法能够满足EHV-8的检测需求,且该方法敏感性高、特异性强、重复性好,为EHV-8的进一步研究提供了有效的辅助检测手段。; 关键词驴马疱疹病毒8型糖蛋白B(gB)基因实时荧光定量PCR TAQMAN探针; Keywords donkey equine herpesvirus type 8 glycoprotein B(gB)gene real-time fluorescence quantitative PCR TaqMan probe; 分类号 S822 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	山东、河南、河北驴群马动脉炎病毒和马疱疹病毒8型的检测与分析	王彤彤黄泽统陈丽郭瑞宏董宇婷刘文强刘桂芹王长法任慧英李亮亮	《动物医学进展》北大核心	2022	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	马疱疹病毒8型荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用	李亮亮于跃王天娇丁相丹胡乐玉王长法刘文强刘桂芹任慧英王彤彤	《动物医学进展》北大核心	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	马疱疹病毒8型gD蛋白的生物信息学分析及多克隆抗体制备	徐萌郗灿坤王天娇李瑞博丁相丹孙祺胡乐玉任慧英李亮亮王彤彤	《动物医学进展》北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	马疱疹病毒8型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立	纪言霏齐来勇张健鹏许丹丹张敬文赵霞刘文强	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料