马传染性贫血病病毒驴白细胞弱毒疫苗株前病毒全基因组核苷酸序列分析 被引量：2

1

作者 杨志彪 王柳 +2 位作者 童光志 孔宪刚 仇华吉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期161-166,共6页

马传染性贫血病病毒 (EIAV)是马传染性贫血病 (简称马传贫 ,EIA)的病原。我国的EIAV弱毒疫苗是迄今为止世界上唯一投入应用的慢病毒疫苗 ,成功地控制了我国EIA的流行。本研究从EIAV弱毒疫苗株 (DLA)感染的驴白细胞中提取前病毒DNA ,以... 马传染性贫血病病毒 (EIAV)是马传染性贫血病 (简称马传贫 ,EIA)的病原。我国的EIAV弱毒疫苗是迄今为止世界上唯一投入应用的慢病毒疫苗 ,成功地控制了我国EIA的流行。本研究从EIAV弱毒疫苗株 (DLA)感染的驴白细胞中提取前病毒DNA ,以提取的前病毒DNA为模板 ,利用PCR技术分 3个片段扩增EIAV前病毒 ,这 3个片段覆盖全部前病毒DNA。将这 3个片段分别克隆到载体质粒pBluescrtiptsK中 ,得到 3个重组质粒P2 .8,P2 .4,P4.1,经酶切鉴定后 ,测序。对测序结果分析、拼接 ,得到EIAV驴白细胞弱毒疫苗株前病毒基因组全序列。EIAVDLA株前病毒基因组全长 82 6 6bp。基因组两端是长为334bp的LTR ,其中U3为 2 14bp ,R为 81bp ,U5为 39bp。前病毒基因组有 3个较大的开放阅读框架 (ORF) ,分别编码gag、pol和env基因。gag基因位于 732～ 1931位碱基之间 ,全长 12 0 0bp ;pol基因位于 172 7～ 5 12 8位碱基之间 ,全长 34 0 2bp ;env基因位于5 32 4～ 7912之间 ,长为 2 5 89bp。此外前病毒还有 3个小的ORF ,S1位于 5 132～ 5 2 84位碱基之间 ,长为 15 3bp ;S2位于 5 2 98～ 5 5 0 1位碱基之间 ,长为 2 0 4bp ;S3位于 72 5 8～ 76 5 9位碱基之间 ,长为 40 2bp。本研究结果为进一步确定EIAV的基因功能、揭示马传贫疫苗毒的致弱? 展开更多

关键词 马传染性贫血病毒 驴白细胞弱母疫苗株 前病毒 核苷酸序列分析 基因组

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马传染性贫血病病毒弱毒疫苗株感染性分子克隆的构建

2

作者 王柳 杨志彪 +3 位作者 刘红全 智海东 仇华吉 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期175-,共1页

采用ＰＣＲ方法分三段扩增出马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株（ＥＬＡＶ　 ＤＬＡ）的前病毒ＤＮＡ，这三个片段覆盖马传染性贫血病毒的全部基因组，ＰＣＲ产物经克隆后顺次连接，获得一个含有ＥＬＡＶ全基因（８．０Ｋｂ）的重组... 采用ＰＣＲ方法分三段扩增出马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株（ＥＬＡＶ　 ＤＬＡ）的前病毒ＤＮＡ，这三个片段覆盖马传染性贫血病毒的全部基因组，ＰＣＲ产物经克隆后顺次连接，获得一个含有ＥＬＡＶ全基因（８．０Ｋｂ）的重组质粒，将其命名为ｐ８．０。将此８．０Ｋｂ ＥＩＡＶ全基因再亚克隆到含有一完整 ＥＩＡＶ ＤＬＡ株长末端重复序列的质粒中，获得一含有 ＥＩＡＶ驴白细胞弱毒前病毒全基因的重组质粒，将其命名为ｐ８．２，经核苷酸序列分析，证明ｐ８．２含有ＥＩＡＶ前病毒的全基因。用ｐ８．２转染驴白细胞，将其作为种毒进行传代，于感染该克隆毒的细胞培养上清中检测出了反转录酶，说明在驴白细胞中由ｐ８．２衍生出了ＥＩＡ病毒。驴白细胞经该克隆毒感染后，第４天出现病变，经透射电镜可观察到典型的马传染性贫血病毒粒子，进一步证明ｐ８．２具有感染性，我们获得了马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株的感染性分子克隆，为进一步在分子水平上阐明我国ＥＩＡＶ疫苗株的减毒机理和免疫保护机制奠定了基础。 展开更多

关键词 马传染性贫血病毒弱毒疫苗株 感染性分子克降

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马传染性贫血弱毒疫苗免疫马与自然感染马酶联免疫吸附试验血清抗体耐热性比较研究 被引量：1

3

作者 朱远茂 薛飞 +5 位作者 赵立平 杨建德 王晓钧 吕晓玲 相文华 沈荣显 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期46-49,共4页

本试验对马传贫血清抗体酶联免疫吸附试验 (ELISA)的耐热性进行了比较研究。对 2匹弱毒疫苗免疫马跟踪检测 17个月 ,在接种 3周后ELISA检测均呈阳性 ,其中一匹马ELISA抗体阳性持续到接种后 10个月 ,另一匹马ELISA抗体阳性可持续到接种... 本试验对马传贫血清抗体酶联免疫吸附试验 (ELISA)的耐热性进行了比较研究。对 2匹弱毒疫苗免疫马跟踪检测 17个月 ,在接种 3周后ELISA检测均呈阳性 ,其中一匹马ELISA抗体阳性持续到接种后 10个月 ,另一匹马ELISA抗体阳性可持续到接种后一年。对两匹马的所有不同时期采集的血清样品经 75℃加热 5min处理后 ,用ELISA检测均为阴性。另选 6匹马传贫弱毒疫苗免疫马血清且ELISA检测抗体呈阳性的 30个样品 ,经 75℃加热 5min处理后 ,均由阳性转变成阴性。 4匹经马传贫病毒辽毒株 (LN_EIAV)实验感染马且ELISA检测抗体呈阳性的血清样品 ,经 75℃加热 5min处理后 ,结果仍为阳性。 2 3匹ELISA检测抗体呈阳性的自然感染马血清样品 ,经加热处理后 ,19匹马血清样品仍为阳性 ,4匹马血清样品由阳性转变成阴性。 展开更多

关键词 马传染性贫血 弱毒疫苗 免疫接种 自然感染 酶联免疫吸附试验 血清抗体 耐热性

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中国马传染性贫血病毒DLV株前病毒gp90基因在马体内的变异分析

4

作者 杨彬 王雪峰 +1 位作者 周建华 王凤龙 《动物医学进展》 CSCD 2008年第11期20-24,共5页

分别以EIAV辽宁马强毒株(EIAVliao)前病毒DNA和马传染性贫血驴白细胞弱毒疫苗株(EIAVDLV)前病毒DNA为模板,从免疫接种后不同时期马血清中利用nested-PCR技术,扩增了约1.4kb的gp90基因。将其克隆后进行了测序,测序结果表明,免疫EIAVDLV... 分别以EIAV辽宁马强毒株(EIAVliao)前病毒DNA和马传染性贫血驴白细胞弱毒疫苗株(EIAVDLV)前病毒DNA为模板,从免疫接种后不同时期马血清中利用nested-PCR技术,扩增了约1.4kb的gp90基因。将其克隆后进行了测序,测序结果表明,免疫EIAVDLV后的第1时期至第5时期,与EIAV-liao比较核苷酸序列平均差异率分别为3.2956%、3.1456%、3.36%、3.1856%和3.6456%。EIAVliao有20个N-连接糖基化位点,EIAVDLV平均是17.2个,其中有11个N-连接糖基化位点是高度保守的。 展开更多

关键词 马传染性贫血弱毒疫苗株 GP90基因 N-连接糖基化 序列分析 突变

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马传染性贫血病毒弱毒疫苗gp90多样性及其对病毒体外增殖的影响 被引量：1

5

作者 秦玉寅 王雪峰 +6 位作者 韦华冕 王帅 林跃智 杜承 王晓钧 周建华 胡建军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期182-186,共5页

为研究马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗gp90基因多样性的生物学意义,本研究对EIAV驴胎皮肤细胞弱毒疫苗(EIAVFDDV13)gp90基因进行测序,在随机获得的15个克隆中,不同克隆推导的氨基酸平均差异率为2.7%(0~5.8%),其中克隆F13-15与感染性克... 为研究马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗gp90基因多样性的生物学意义,本研究对EIAV驴胎皮肤细胞弱毒疫苗(EIAVFDDV13)gp90基因进行测序,在随机获得的15个克隆中,不同克隆推导的氨基酸平均差异率为2.7%(0~5.8%),其中克隆F13-15与感染性克隆pLGFD3-8的gp90之间的差异率均为4.8%。以pLGFD3-8为骨架,通过对gp90基因的替换方法构建了感染性克隆pLGFD13-15。将pLGFD13-15转染驴胎皮肤细胞后,拯救出一株衍生病毒vpLGFD13-15。比较vpLGFD13-15和vpLGFD3-8在驴胎皮肤细胞和马单核细胞来源的巨噬细胞中的复制特性显示,vpLGFD13-15在感染驴胎皮肤细胞后4 d^6 d内,上清液中的病毒含量明显高于vpLGFD3-8。但vpLGFD13-15在巨噬细胞中的复制较vpLGFD3-8明显延迟。结果表明,EIAV疫苗株中不同gp90基因的病毒克隆在体外复制特性存在差异。该研究结果为进一步分析EIAV弱毒疫苗基因多样性的生物学意义,特别是对其诱导免疫保护作用的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 马传染性贫血病毒 弱毒疫苗 gp90 基因多样性

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国内外主要鸡传染性支气管炎弱毒疫苗与广东NIB野毒株交互免疫试验 被引量：6

6

作者 梁眷衡 魏光伟 +3 位作者 尹烨华 陈天杰 王秉红 罗庆芳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2000年第9期14-15,共2页

关键词 鸡传染性支气管炎弱毒疫苗 DIB野毒株 交互免疫

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马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒株LTR启动子功能的研究 被引量：1

7

作者 王柳 杨志彪 +3 位作者 仇华吉 张绍杰 孟松树 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第6期1-3,共3页

为了证明我国马传染性贫血病毒 (EIAV)驴白细胞弱毒株的长末端重复序列 (LTR)是否能够启动基因的表达 ,我们将该LTR克隆于含CAT基因的载体中 ,获得重组质粒pCAT_LTR ,用pCAT_LTR分别转染驴胎皮肤细胞 (FDD)、胶质母细胞瘤(TJ_90 5 )细... 为了证明我国马传染性贫血病毒 (EIAV)驴白细胞弱毒株的长末端重复序列 (LTR)是否能够启动基因的表达 ,我们将该LTR克隆于含CAT基因的载体中 ,获得重组质粒pCAT_LTR ,用pCAT_LTR分别转染驴胎皮肤细胞 (FDD)、胶质母细胞瘤(TJ_90 5 )细胞、驴白细胞及接种EIAV弱毒的FDD及驴白细胞 ,结果以EIAV弱毒的LTR为启动子 ,CAT在这几种细胞中均获得了不同程度的表达 ,证实了我国EIAV弱毒株的LTR在FDD、TJ_90 5及驴白细胞中确实具有一定的启动子功能 ,并能被反式激活表达 。 展开更多

关键词 马 传染性贫血病毒 弱毒株 LTR 启动子功能

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传染性法氏囊病病毒变异株二价弱毒疫苗的研究 被引量：1

8

作者 周继勇 李建荣 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期233-236,共4页

选用传染性法氏囊病病毒变异株 JD1、NB、HZ1弱毒株配制成 JN(JD1+NB毒株组成 )和 JH(JD1+HZ1毒株组成 )两种二价弱毒疫苗 .分别在 14日龄首免和 2 8日龄二免 SPF鸡 ,并于一免后 14d、2 1d,二免后 12 d分别用强毒株传染性法氏囊病病毒 (... 选用传染性法氏囊病病毒变异株 JD1、NB、HZ1弱毒株配制成 JN(JD1+NB毒株组成 )和 JH(JD1+HZ1毒株组成 )两种二价弱毒疫苗 .分别在 14日龄首免和 2 8日龄二免 SPF鸡 ,并于一免后 14d、2 1d,二免后 12 d分别用强毒株传染性法氏囊病病毒 (IBDV) BC6 / 85株攻击 ;同时观察疫苗的安全性 .结果表明 JN和 JH疫苗均能诱导 SPF免疫鸡产生优良的免疫应答反应 ,并能使免疫鸡对 IBDV-BC6 / 85株的攻击产生 10 0 %的保护 . JN和 JH疫苗的最佳免疫剂量分别为 6 0 0 0 TCID50 和 10 0 0 展开更多

关键词 鸡 传染性法氏囊病病毒 变异株 二价弱毒疫苗

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马传染性贫血病毒第1 9、26代驴胎皮肤细胞弱毒前病毒DNA全基因序列分析

9

作者 全滟平 赵立平 +4 位作者 韩秀娥 沈楠 吕晓玲 沈荣显 相文华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期487-491,518,共6页

不同代次马传染性贫血驴胎皮肤细胞弱毒(Fetal donkey dermal virus,FDDV)的免疫保护效果各不相同,只有第10～15代驴胎皮肤细胞弱毒具有良好的免疫保护效果,可作为疫苗使用,继续传代则疫苗的保护率下降。为确定有、无免疫保护效果的FDD... 不同代次马传染性贫血驴胎皮肤细胞弱毒(Fetal donkey dermal virus,FDDV)的免疫保护效果各不相同,只有第10～15代驴胎皮肤细胞弱毒具有良好的免疫保护效果,可作为疫苗使用,继续传代则疫苗的保护率下降。为确定有、无免疫保护效果的FDDV在基因水平上的差异,本实验对无免疫保护效果的第19、26代驴胎皮肤细胞弱毒前病毒DNA进行了全基因序列测定,并与已测序的疫苗毒株进行序列比较。第19代和第26代FDDV全基因核苷酸序列同源性高达99.5%,与疫苗毒株全基因核苷酸序列的同源性分别为96.9%、96.7%。LTR是EIAV在细胞传代中变异最显著的区域,第19、26代FDDV的LTR与疫苗毒的LTR同源性仅为89.6%、89.3%。马传贫病毒的gag基因高度保守,第19、26代FDDV与疫苗毒株的gag基因推导氨基酸序列仅有2个氨基酸不同。第19、26代FDDV与疫苗毒株的pol基因、env基因的推导氨基酸序列的同源性分别为98.9%、98.8%、93.7%、93.6%。由序列比较结果可以推断,第19代、第26代FDDV不具有免疫保护效果的主要原因可能是由于LTR和env基因的变异,导致病毒复制能力下降或免疫原性丧失,不能诱导机体产生良好的免疫反应。 展开更多

关键词 马传染性贫血 驴胎皮肤细胞弱毒 全基因序列分析

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鸡传染性支气管炎病毒(IBV)地方SF株弱毒疫苗免疫期检验

10

作者 朱岩丽 陈秀梅 +2 位作者 密晓霞 李咏红 李明义 《中兽医医药杂志》 2009年第5期32-34,共3页

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 弱毒疫苗 肾型传染性支气管炎 免疫期 传染性支气管病毒 检验 F株 接触性传染病

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鸡传染性贫血病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用 被引量：14

11

作者 任志浩 房立春 +5 位作者 栾怀彪 李阳 王一新 崔治中 常爽 赵鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1459-1464,共6页

为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒(CIAV)的污染,根据CIAV基因组保守序列设计合成了引物及TaqMan探针,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达10拷贝·... 为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒(CIAV)的污染,根据CIAV基因组保守序列设计合成了引物及TaqMan探针,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达10拷贝·μL^(-1),比常规PCR灵敏度高100倍。该方法与禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒以及马立克病病毒等病毒基因均无交叉反应,具有很好的特异性;批内重复和批间重复显示变异系数均小于2%,呈现良好的可重复性。在模拟试验中,该方法能够检测到1 000羽份弱毒疫苗中1个EID50的低剂量污染,应用该方法从送检的39种(批)商品化禽用弱毒疫苗中检测到2份为CIAV阳性。上述结果表明,本研究建立的荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,可用于检测疫苗中CIAV低剂量的污染。 展开更多

关键词 鸡传染性贫血病毒 实时荧光定量PCR 弱毒疫苗 污染

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马传贫驴白细胞弱毒疫苗株基质蛋白基因的克隆与表达 被引量：2

12

作者 薛飞 朱远茂 +6 位作者 王晓钧 杨建德 相文华 刘志英 赵立平 吕晓玲 沈荣显 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-4,共4页

从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码基质蛋白 (p1 5 )的基因 ,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的蛋白是一种可溶性的融合蛋白 ,其氨基端带有 6个组氨酸的标签 ,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非... 从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码基质蛋白 (p1 5 )的基因 ,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的蛋白是一种可溶性的融合蛋白 ,其氨基端带有 6个组氨酸的标签 ,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接ELISA和免疫印迹试验中 ,重组的基质蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应 ,而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性 ,可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制及在接种马体内免疫应答的研究中。 展开更多

关键词 基质蛋白 马 传染性贫血病 马传贫驴白细胞弱毒疫苗株 基因克隆 基因表达 P15基因

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马传贫驴白细胞弱毒疫苗株跨膜蛋白主要免疫决定区基因的克隆与表达 被引量：2

13

作者 薛飞 贾斌 +6 位作者 朱远茂 杨建德 王晓钧 相文华 赵立平 吕晓玲 沈荣显 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期321-325,共5页

从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区 (TMIR)的基因 ,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的 ,其氨基端带有 6个组氨酸的标签 ,因此可以用固定化金属离子亲和... 从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区 (TMIR)的基因 ,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的 ,其氨基端带有 6个组氨酸的标签 ,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)和免疫印迹试验中 ,重组的TMIR蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应 ,而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性 ,可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制、接种马体内免疫应答及马传贫诊断的研究。 展开更多

关键词 马传染性贫血 跨膜蛋白主要免疫决定区重组蛋白(TMIR) 间接ELISA 免疫印迹试验 马传贫驴 白细胞弱毒疫苗株

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传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的免疫原性研究 被引量：2

14

作者 李建荣 周继勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第5期347-351,共5页

传染性法氏囊病病毒 (IBDV)JD1、JD2 、NB变异株和HZ1、SC经典株弱毒分别以 30 0 0TCID50 、5 0 0 0TCID50 、10 0 0 0TCID50 、5 0 0 0TCID50 剂量免疫SPF鸡后的攻毒试验结果表明 :IBDV_NB、JD1、HZ1弱毒株可诱导SPF鸡产生很高的血清... 传染性法氏囊病病毒 (IBDV)JD1、JD2 、NB变异株和HZ1、SC经典株弱毒分别以 30 0 0TCID50 、5 0 0 0TCID50 、10 0 0 0TCID50 、5 0 0 0TCID50 剂量免疫SPF鸡后的攻毒试验结果表明 :IBDV_NB、JD1、HZ1弱毒株可诱导SPF鸡产生很高的血清中和抗体 ,具有优良的免疫原性 ,强毒攻击保护率均达 10 0 %。IBDV_NB毒株的最佳免疫剂量为 30 0 0TCID50 ,IBDV_JD1和HZ1毒株的最佳免疫剂量为 5 0 0 0TCID50 。抗体消长规律表明NB毒株一次免疫的有效保护期可达 2 74天 ,JD1和HZ1毒株为 2 展开更多

关键词 传染性法氏囊病病毒 变异株 弱毒疫苗 免疫原性

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马传染性贫血病毒免疫学研究进展 被引量：1

15

作者 涂亚斌 仇华吉 +1 位作者 王柳 童光志 《畜牧兽医科技信息》 2002年第1期14-16,共3页

马传染性贫血病病毒(equine infctious anemiavirus EIAV)导致马持续性感染和反复病毒血症,与人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)同属反转录病毒科慢病毒属,二者有很多相似的特性[2].EIAV是遗传结构最简单的慢病毒,其感染的潜伏期只有几天至几周... 马传染性贫血病病毒(equine infctious anemiavirus EIAV)导致马持续性感染和反复病毒血症,与人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)同属反转录病毒科慢病毒属,二者有很多相似的特性[2].EIAV是遗传结构最简单的慢病毒,其感染的潜伏期只有几天至几周,而且在EIAV感染过程中新的抗原变异株的出现与疾病的反复发作相关,这使EIAV有可能作为研究HIV-1分子致病机理及免疫机制的动物模型[3]. 展开更多

关键词 白细胞弱毒疫苗株 致弱机理 免疫保护性 马 传染性贫血病毒 免疫学

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鸡肾型传染性支气管炎(SF株)活疫苗毒种的纯粹及其生产条件的探索

16

作者 朱岩丽 李明义 周海亮 《中兽医医药杂志》 2008年第2期32-34,共3页

关键词 鸡肾型传染性支气管炎 弱毒活疫苗 生产条件 F株 肾型IBV 毒种 分离鉴定 流行趋势

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鸡传染性贫血病毒SYBR Green Ⅰ法荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用 被引量：5

17

作者 付佳媛 李丹 +5 位作者 常臻 李阳 房立春 崔治中 常爽 赵鹏 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第3期34-39,共6页

为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中可能存在的鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)污染,根据CIAV基因组保守区域VP2部分基因设计和合成了1对特异性引物,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的SYBR GreenⅠ荧光定... 为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中可能存在的鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)污染,根据CIAV基因组保守区域VP2部分基因设计和合成了1对特异性引物,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达6.36 copies/μL,是常规PCR灵敏度的1000倍。该方法与禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)、禽白血病病毒(Avian leukemia virus,ALV)、鸡马立克氏病病毒(Mareks disease virus,MDV)等均无交叉反应,特异性良好;批内和批间重复试验显示变异系数均小于2.5%,呈现良好的可重复性。在模拟试验中,建立的SYBR Green I荧光定量PCR能够检测到1000羽份弱毒疫苗中1个EID50的低剂量污染,应用该方法从送检的14种(批)商品化禽用弱毒疫苗中检测到2份为CIAV阳性,阳性样品按照经典的SPF鸡检查法进行检测也为CIAV阳性。因此,本研究建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,适合用于疫苗中CIAV污染的检验。 展开更多

关键词 鸡传染性贫血病毒 弱毒疫苗 污染 荧光定量PCR SYBR Green Ⅰ

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马传染性贫血病毒通过线粒体调控细胞炎症反应和凋亡的机制研究 被引量：3

18

作者 Du Cheng Duan Ying-yi Wang Xue-feng 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期984-984,共1页

马传染性贫血病毒(EIAV)与艾滋病病毒相似,在体内的主要靶细胞是免疫细胞,并且可以在马体内长期潜伏感染,给养马业造成了重大的经济损失。由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所研制的EIAV弱毒疫苗,是首例经大规模应用证实安全、有效的慢病... 马传染性贫血病毒(EIAV)与艾滋病病毒相似,在体内的主要靶细胞是免疫细胞,并且可以在马体内长期潜伏感染,给养马业造成了重大的经济损失。由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所研制的EIAV弱毒疫苗,是首例经大规模应用证实安全、有效的慢病毒疫苗。阐明该疫苗的作用机理,将为其它慢病毒疫苗的研究提供借鉴。研究表明,EIAV强毒株(EIAVDLV34)感染可造成宿主的“炎症风暴”,并引起致病性损伤,而弱毒疫苗株(EIAVDLV121)感染的宿主细胞可发生高水平的细胞凋亡,进而被清除。该现象与EIAV弱毒疫苗的免疫保护作用机理密切相关,但关于EIAV强弱毒感染引起不同细胞反应的具体机制还未知。 展开更多

关键词 马传染性贫血病毒 中国农业科学院 弱毒疫苗 细胞反应 EIAV 免疫保护作用 养马业 免疫细胞

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马传染性贫血病毒编码一个新转录后调控因子Grev

19

作者 LI JI-WEI ZHANG XIANG-MIN BAI BO-WEN 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1354-1354,共1页

马传染性贫血病毒(EIAV)是反转录病毒科慢病毒属成员,它与人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)等其他慢病毒属成员在病毒形态、复制分子机制、生活周期和宿主相互作用等方面具有高度相似性。我国科学家在上世纪70年代研制了EIAV弱毒疫苗,该疫苗... 马传染性贫血病毒(EIAV)是反转录病毒科慢病毒属成员,它与人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)等其他慢病毒属成员在病毒形态、复制分子机制、生活周期和宿主相互作用等方面具有高度相似性。我国科学家在上世纪70年代研制了EIAV弱毒疫苗,该疫苗是唯一成功大规模应用的慢病毒弱毒疫苗。因此,EIAV是研究慢病毒复制机制和免疫应答机理的重要模式病毒。病毒的基因组结构组成是决定其生物学特性的基础。 展开更多

关键词 马传染性贫血病毒 弱毒疫苗 病毒形态 反转录病毒科 EIAV 基因组结构 免疫应答 复制机制

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EIAV弱毒疫苗株和强毒株诱导的特异性体液免疫应答差别 被引量：2

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作者 朱振营 林跃智 +3 位作者 王宇宏 赵立平 朱远茂 周建华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1079-1083,共5页

目的:通过研究EIAV弱毒疫苗株和强毒株在诱导多种特异性抗体方面的差异,初步探讨特异性体液免疫应答在EIAV弱毒疫苗株保护性免疫中的作用。方法:试验马匹根据接种毒株分为疫苗组和强毒隐性感染组,应用ELISA方法对血清中病毒囊膜蛋白Env... 目的:通过研究EIAV弱毒疫苗株和强毒株在诱导多种特异性抗体方面的差异,初步探讨特异性体液免疫应答在EIAV弱毒疫苗株保护性免疫中的作用。方法:试验马匹根据接种毒株分为疫苗组和强毒隐性感染组,应用ELISA方法对血清中病毒囊膜蛋白Env和衣壳蛋白P26结合抗体的滴度、亲和力及Env结合抗体的构象依赖性进行动态实相检测,同时采用细胞蚀斑染色和逆转录酶活性检测方法对中和抗体水平进行同期检测。结果:Env和P26结合抗体的滴度、亲和力、构象依赖性及中和抗体的中和活性均存在一个缓慢上升的过程。对于P26抗体滴度及Env抗体亲和力,疫苗组和强毒隐性感染组仅在病毒接种2个月内,表现为统计学差异(P<0.05)。疫苗组从接种后14d开始,Env抗体的构象依赖性高于强毒隐性感染组(P<0.05),并持续至最后一个监测点。最明显的是,疫苗组诱导产生具有中和强毒特性毒株(EIAVDLV34)和弱毒特性毒株(EIAVFDDV)活性的中和抗体均高于强毒隐性感染组(P<0.05)。结论:弱毒疫苗株和强毒株诱导机体产生结合抗体和中和抗体的时间、水平和性质均存在明显差异,其中中和抗体和构象依赖性抗体的差异,可能是EIAV弱毒疫苗诱导保护性免疫的主要因素之一。 展开更多

关键词 马传染性贫血病毒 弱毒疫苗株 抗体亲和力 构象依赖性 中和抗体

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