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香蕉细菌性鞘腐病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 麦桂婉 肖文超 +2 位作者 李云锋 李华平 饶雪琴 《华中农业大学学报》 北大核心 2025年第5期308-313,共6页
为实现香蕉细菌性鞘腐病的早期准确检测,基于香蕉细菌性鞘腐病菌的管家基因fusA设计特异性引物,优化扩增条件,建立了SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,并与常规PCR进行比较。结果显示,SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测质粒DNA的灵... 为实现香蕉细菌性鞘腐病的早期准确检测,基于香蕉细菌性鞘腐病菌的管家基因fusA设计特异性引物,优化扩增条件,建立了SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,并与常规PCR进行比较。结果显示,SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测质粒DNA的灵敏度为3.3×10^(−5)ng/μL,是常规PCR的100倍。利用建立的方法对接种香蕉细菌性鞘腐病菌XJ5-1的香蕉叶鞘和土样进行检测,结果发现该方法能检测到香蕉叶鞘中拷贝数为4.31×10^(3)copies/μL和土样中拷贝数为1.07×10^(9)copies/μL的XJ5-1;能检测出接种浓度为1×10^(3)CFU/mL的温室土样中的XJ5-1,灵敏度是常规PCR的100倍。结果表明,建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法快速简便、灵敏度高,可实现香蕉细菌性鞘腐病的早期诊断。 展开更多
关键词 香蕉细菌性鞘腐病 Dickeya dadantii SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR
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