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‘海黄’牡丹香叶醇合酶基因PsGES的克隆及功能验证
1
作者
王佩云
李子昂
+3 位作者
白杨
杨萍
尹承芃
宋秀华
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2024年第4期52-61,共10页
[目的]探究植物释放的萜类化合物合成代谢的机理,为进一步解析牡丹萜类合酶基因家族的生物学功能提供理论依据。[方法]以芳香型牡丹品种‘海黄’(Paeonia×lemoinei‘High Noon’)为材料,根据转录组测序所得片段,克隆得到PsGES基因...
[目的]探究植物释放的萜类化合物合成代谢的机理,为进一步解析牡丹萜类合酶基因家族的生物学功能提供理论依据。[方法]以芳香型牡丹品种‘海黄’(Paeonia×lemoinei‘High Noon’)为材料,根据转录组测序所得片段,克隆得到PsGES基因。同时利用瞬时表达方法将PsGES基因过表达载体注射进烟草叶片和‘凤丹’花瓣中验证基因功能。[结果]该结构基因的完整CDS序列长897 bp,编码298个氨基酸,氨基酸序列分析发现该蛋白具有较高的保守性,有1个保守结构域Terpene_cyclase_plant_C1。PsGES基因在盛开期花瓣中表达量最高且明显高于其他器官。亚细胞定位分析表明PsGES主要定位于叶绿体中。通过GC-MS方法可检测到烟草叶片和‘凤丹’花瓣中香叶醇的释放,同时烟草叶片和‘凤丹’花瓣中PsGES基因呈现高表达。[结论]本研究表明PsGES基因在植物体内调控香叶醇的合成。
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关键词
牡丹
香叶醇
香叶醇合酶
基因
基因克隆
功能验证
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职称材料
广藿香香叶醇合酶基因克隆及表达分析
被引量：
8
2
作者
欧阳蒲月
曾少华
莫小路
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期896-901,共6页
香叶醇合酶(geraniol synthase,GES)是香叶醇形成过程中非常重要的酶,是萜类代谢途径的限速酶。根据课题组广藿香转录组数据中的GES转录本序列设计基因全长扩增引物,采用RT-PCR方法克隆了广藿香GES基因的全长cDNA序列。对该基因进行了...
香叶醇合酶(geraniol synthase,GES)是香叶醇形成过程中非常重要的酶,是萜类代谢途径的限速酶。根据课题组广藿香转录组数据中的GES转录本序列设计基因全长扩增引物,采用RT-PCR方法克隆了广藿香GES基因的全长cDNA序列。对该基因进行了相关的生物信息学分析,并利用荧光实时定量PCR法检测了PcGES1基因在4个广藿香栽培种中不同时期茎、叶中的表达情况。结果显示:广藿香GES基因包含一个完整的ORF框,长1 734bp,编码577个氨基酸,命名为PcGES1,GenBank登录号为KF926075;PcGES1基因编码的氨基酸序列与罗勒GES基因编码的氨基酸序列最为相近。广藿香GES蛋白定位在叶绿体中,无跨膜区域。PcGES1主要在叶中表达,老叶中表达量最高;从不同栽培种来看,PcGES1在石牌广藿香和高要广藿香中表达模式相似,在海南广藿香与印尼广藿香中表达相似,在海南广藿香老叶中表达最高。该研究结果为进一步阐明广藿香萜类代谢途径奠定了基础。
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关键词
广藿香
香叶醇合酶
萜类
合
成
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职称材料
滇龙胆香叶醇合酶基因的克隆与表达分析
被引量：
4
3
作者
刘倩倩
李彩霞
+2 位作者
赵静
谷从璟
张晓东
《广东农业科学》
CAS
2017年第9期48-55,共8页
对滇龙胆香叶醇合酶基因Gr GES进行克隆和表达分析,为研究其在香叶醇和龙胆苦苷生物合成中的作用奠定基础。根据滇龙胆转录组Gr GES序列,采用RT-PCR技术从滇龙胆叶片克隆该基因,获得Gr GES序列(Gen Bank登录号为KJ917168)。序列分析结...
对滇龙胆香叶醇合酶基因Gr GES进行克隆和表达分析,为研究其在香叶醇和龙胆苦苷生物合成中的作用奠定基础。根据滇龙胆转录组Gr GES序列,采用RT-PCR技术从滇龙胆叶片克隆该基因,获得Gr GES序列(Gen Bank登录号为KJ917168)。序列分析结果表明,Gr GES基因长1 767 bp,编码588氨基酸;Gr GES蛋白相对分子质量为67.84 ku,理论p I为5.56。该蛋白定位于叶绿体,包含叶绿体转运肽,为亲水不稳定蛋白,主要由α-螺旋(62.41%)和环(39.57%)构成。该蛋白具有其他GES蛋白的活性位点、萜类合酶N端结构域(IPR001906,81~273)和萜类合酶结构域(IPR005630,263~588)。Gr GES蛋白与长春花Cr GES蛋白亲缘关系最近。原核表达结果表明,Gr GES基因在大肠杆菌中表达的重组蛋白相对分子质量约为78.22 ku,与预期的大小一致。组织特异性表达分析结果表明,Gr GES基因主要在叶中表达。
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关键词
滇龙胆
香叶醇合酶
基因克隆
表达分析
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职称材料
题名
‘海黄’牡丹香叶醇合酶基因PsGES的克隆及功能验证
1
作者
王佩云
李子昂
白杨
杨萍
尹承芃
宋秀华
机构
山东农业大学园艺科学与工程学院
出处
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2024年第4期52-61,共10页
基金
教育部产学合作协同育人项目(202101280004)。
文摘
[目的]探究植物释放的萜类化合物合成代谢的机理,为进一步解析牡丹萜类合酶基因家族的生物学功能提供理论依据。[方法]以芳香型牡丹品种‘海黄’(Paeonia×lemoinei‘High Noon’)为材料,根据转录组测序所得片段,克隆得到PsGES基因。同时利用瞬时表达方法将PsGES基因过表达载体注射进烟草叶片和‘凤丹’花瓣中验证基因功能。[结果]该结构基因的完整CDS序列长897 bp,编码298个氨基酸,氨基酸序列分析发现该蛋白具有较高的保守性,有1个保守结构域Terpene_cyclase_plant_C1。PsGES基因在盛开期花瓣中表达量最高且明显高于其他器官。亚细胞定位分析表明PsGES主要定位于叶绿体中。通过GC-MS方法可检测到烟草叶片和‘凤丹’花瓣中香叶醇的释放,同时烟草叶片和‘凤丹’花瓣中PsGES基因呈现高表达。[结论]本研究表明PsGES基因在植物体内调控香叶醇的合成。
关键词
牡丹
香叶醇
香叶醇合酶
基因
基因克隆
功能验证
Keywords
tree peony
geraniol
geraniol synthase
gene cloning
functional verification
分类号
S685.11 [农业科学—观赏园艺]
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职称材料
题名
广藿香香叶醇合酶基因克隆及表达分析
被引量：
8
2
作者
欧阳蒲月
曾少华
莫小路
机构
广东食品药品职业学院
中国科学院华南植物园
出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期896-901,共6页
基金
广东省科技计划项目(2015A040404029)
广东食品药品职业学院自然科学研究项目(2015YZ007)
文摘
香叶醇合酶(geraniol synthase,GES)是香叶醇形成过程中非常重要的酶,是萜类代谢途径的限速酶。根据课题组广藿香转录组数据中的GES转录本序列设计基因全长扩增引物,采用RT-PCR方法克隆了广藿香GES基因的全长cDNA序列。对该基因进行了相关的生物信息学分析,并利用荧光实时定量PCR法检测了PcGES1基因在4个广藿香栽培种中不同时期茎、叶中的表达情况。结果显示:广藿香GES基因包含一个完整的ORF框,长1 734bp,编码577个氨基酸,命名为PcGES1,GenBank登录号为KF926075;PcGES1基因编码的氨基酸序列与罗勒GES基因编码的氨基酸序列最为相近。广藿香GES蛋白定位在叶绿体中,无跨膜区域。PcGES1主要在叶中表达,老叶中表达量最高;从不同栽培种来看,PcGES1在石牌广藿香和高要广藿香中表达模式相似,在海南广藿香与印尼广藿香中表达相似,在海南广藿香老叶中表达最高。该研究结果为进一步阐明广藿香萜类代谢途径奠定了基础。
关键词
广藿香
香叶醇合酶
萜类
合
成
Keywords
Pogostemon cablin
geraniol synthase
terpenoids synthesis
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
滇龙胆香叶醇合酶基因的克隆与表达分析
被引量：
4
3
作者
刘倩倩
李彩霞
赵静
谷从璟
张晓东
机构
玉溪师范学院资源环境学院
出处
《广东农业科学》
CAS
2017年第9期48-55,共8页
基金
云南省大学生创新项目(201511390005
201511390006)
云南省教育厅重点项目(2015Z171)
文摘
对滇龙胆香叶醇合酶基因Gr GES进行克隆和表达分析,为研究其在香叶醇和龙胆苦苷生物合成中的作用奠定基础。根据滇龙胆转录组Gr GES序列,采用RT-PCR技术从滇龙胆叶片克隆该基因,获得Gr GES序列(Gen Bank登录号为KJ917168)。序列分析结果表明,Gr GES基因长1 767 bp,编码588氨基酸;Gr GES蛋白相对分子质量为67.84 ku,理论p I为5.56。该蛋白定位于叶绿体,包含叶绿体转运肽,为亲水不稳定蛋白,主要由α-螺旋(62.41%)和环(39.57%)构成。该蛋白具有其他GES蛋白的活性位点、萜类合酶N端结构域(IPR001906,81~273)和萜类合酶结构域(IPR005630,263~588)。Gr GES蛋白与长春花Cr GES蛋白亲缘关系最近。原核表达结果表明,Gr GES基因在大肠杆菌中表达的重组蛋白相对分子质量约为78.22 ku,与预期的大小一致。组织特异性表达分析结果表明,Gr GES基因主要在叶中表达。
关键词
滇龙胆
香叶醇合酶
基因克隆
表达分析
Keywords
Gentiana rigescens
geraniol synthase
gene cloning
expression analysis
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
‘海黄’牡丹香叶醇合酶基因PsGES的克隆及功能验证
王佩云
李子昂
白杨
杨萍
尹承芃
宋秀华
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
广藿香香叶醇合酶基因克隆及表达分析
欧阳蒲月
曾少华
莫小路
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
8
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职称材料
3
滇龙胆香叶醇合酶基因的克隆与表达分析
刘倩倩
李彩霞
赵静
谷从璟
张晓东
《广东农业科学》
CAS
2017
4
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