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人食管鳞癌Eca109细胞株中肿瘤干细胞的分离与鉴定 被引量:6
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作者 黄燕燕 赵生霞 +2 位作者 李秋霞 刘洋 慕晓玲 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2014年第3期335-339,共5页
为分离富集人食管鳞癌Eca109细胞株中肿瘤干细胞,并对其"干细胞"特性进行鉴定。采用无血清(DMEM/F12 1∶1,无血清)成球培养法获得细胞球,应用免疫荧光细胞化学技术检测Eca109细胞株中细胞球细胞中干性相关转录因子的表达;平... 为分离富集人食管鳞癌Eca109细胞株中肿瘤干细胞,并对其"干细胞"特性进行鉴定。采用无血清(DMEM/F12 1∶1,无血清)成球培养法获得细胞球,应用免疫荧光细胞化学技术检测Eca109细胞株中细胞球细胞中干性相关转录因子的表达;平板克隆和MTT法检测细胞体外增殖情况;Transwell小室法检测其细胞侵袭能力。结果显示,无血清培养4 d获得Eca109细胞球;P75NTR和Oct-4荧光定位于细胞球细胞的细胞核上,Eca109细胞为细胞核和细胞浆表达,但是Oct-4荧光强度比P75NTR弱;MTT法测增殖显示细胞细胞球增殖率明显高于Eca109细胞,差异有统计学意义(P<0.001);平板克隆实验显示细胞球细胞形成克隆团数高于Eca109细胞;Transwell小室法结果显示细胞球细胞侵袭力高于Eca109细胞。由此可知,食管鳞癌Eca109细胞系通过无血清成球培养法获得细胞球,细胞球存在肿瘤干细胞。 展开更多
关键词 食管鳞癌eca109细胞 肿瘤干细胞 P75NTR OCT-4
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lncRNA NUP50-AS1在食管鳞癌组织中的表达及其对Eca109细胞恶性生物学行为的影响 被引量:4
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作者 梁佳 吴璇 +6 位作者 邝钢 任利兵 沈素朋 郭炜 郭艳丽 朱景云 董稚明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1290-1295,共6页
目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)NUP50-AS1在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer, ESCC)组织及细胞株中的表达及其对人食管癌Eca109细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:选取自2015年1月至2016年12月... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)NUP50-AS1在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer, ESCC)组织及细胞株中的表达及其对人食管癌Eca109细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:选取自2015年1月至2016年12月河北医科大学第四医院生物标本库的49例ESCC手术患者的癌组织和相应癌旁组织,qRT-PCR检测ESCC癌组织、癌旁组织及5种食管癌细胞株(TE1、TE13、Eca109、Kyse150和Kyse170)中NUP50-AS1表达水平。shRNA转染NUP50-AS1后,选用sh2-NUP50-AS1进行后续功能实验。采用MTS法、克隆形成实验检测敲减NUP50-AS1表达对Eca109细胞增殖的影响,划痕实验检测敲减NUP50-AS1表达对细胞迁移的影响,Transwell小室实验检测敲减NUP50-AS1表达对细胞侵袭的影响。结果:NUP50-AS1在ESCC组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(2.003±0.870 vs 1.000±0.000,P<0.05);NUP50-AS1在ESCC组织中的表达水平与淋巴结转移及TNM分期相关(均P<0.01),NUP50-AS1在5株食管癌细胞系中相对表达量均明显上调(P<0.05),其中Eca109细胞的NUP50-AS1表达水平最高。转染后,sh2-NUP50-AS1转染组干扰效率最高,敲低NUP50-AS1可明显抑制Eca109细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论:ESCC组织中lncRNA NUP50-AS1表达明显高于癌旁组织,且与癌症分期和淋巴结转移有关,敲减其表达明显抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,NUP50-AS1的高表达可能与ESCC的发生发展密切相关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA NUP50-AS1 食管鳞状细胞 eca109细胞 生物学行为
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表皮生长因子对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及其调控因子的影响 被引量:1
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作者 李倩倩 朱红 +2 位作者 王朝莉 黎仕娟 胡为民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1616-1620,共5页
目的:探讨表皮生长因子(EGF)对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及相关调控因子的影响。方法:20 ng/ml重组人EGF(rh EGF)作用于血清饥饿的Eca109细胞24 h,采用流式细胞术检测EGF对Eca109细胞周期的影响,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-P... 目的:探讨表皮生长因子(EGF)对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及相关调控因子的影响。方法:20 ng/ml重组人EGF(rh EGF)作用于血清饥饿的Eca109细胞24 h,采用流式细胞术检测EGF对Eca109细胞周期的影响,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测p21CIP1/WAF1(p21)、p27KIP1(p27)mRNA的表达情况,Western blot检测p21、p27蛋白的表达情况。结果:EGF组和对照组G1期细胞所占比例分别为(54.90±0.82)%和(65.94±0.74)%(P<0.01);qRTPCR结果显示p21 mRNA表达水平EGF组明显高于对照组,p27 mRNA表达水平EGF组明显低于对照组(P<0.01);Western blot结果显示,p21蛋白表达水平EGF组明显高于对照组,p27蛋白表达水平EGF组明显低于对照组(P<0.01)。结论:EGF有利于Eca109细胞从G1期过渡到S期,促进细胞增殖,可能与调节p21、p27的mRNA和蛋白的表达相关。 展开更多
关键词 表皮生长因子 食管鳞癌 eca109细胞 细胞周期 P21CIP1/WAF1 P27KIP1
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RNA干扰HIF-1α对食管鳞癌细胞Eca-109抑制效应的体内体外表达分析
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作者 郭爱平 杭兆康 李苏宜 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2014年第9期23-26,共4页
目的探讨分析RNA干扰缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对食管鳞癌细胞Eca-109抑制效应的体外及体内的表达情况。方法选取研究用Eca-109细胞,设计RNA干扰片断h-EGFR构建重组质粒pGensil-1-EGFR转染目的基因片段。测定EGFR蛋白/mRNA表达,挑选转... 目的探讨分析RNA干扰缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对食管鳞癌细胞Eca-109抑制效应的体外及体内的表达情况。方法选取研究用Eca-109细胞,设计RNA干扰片断h-EGFR构建重组质粒pGensil-1-EGFR转染目的基因片段。测定EGFR蛋白/mRNA表达,挑选转染成功的基因修饰细胞株分别植入裸鼠体内,构建移植瘤模型,且随机分为未转染组与实验组。运用免疫组化技术检测各组裸鼠HIF-1α蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组HIF-1αmRNA表达,最后测量裸鼠移植瘤的重量及体积。结果 Eca-109中HIF-1α蛋白伴随氯化钴浓度的升高而升高。并且HIF-1α蛋白水平在缺氧后12小时升高,24小时后降低,且持续减少。转染后EGFR mRNA的阳性表达率为26.55%、9.48%、4.60%,依次降低,P<0.01。其中EGFR siRNA水平最低。转染后EGFR mRNA阳性表达率为24.30%、34.11%、34.05%,与未转染组(78.27%)相比显著降低(P<0.01)。经RTPCR分析,实验组裸鼠EIF-1αmRNA表达较少,与未转染组相比差异无显著性(P>0.05)。实验组裸鼠HIF-1α蛋白表达的灰度值显著低于未转染组(P<0.01)。接种1周后裸鼠均出现肿瘤,实验组裸鼠移植瘤体积为(0.20±0.13)cm3,重量为(0.21±0.05)g,均显著少于未转染组。结论 HIF-1α蛋白的表达与氯化钴浓度及缺氧有关,RNA干扰缺氧诱导的HIF-1α只发生在蛋白水平,而非基因水平,RNA干扰技术可以成功抑制食管鳞癌细胞HIF-1α基因,阻碍肿瘤细胞生长、增殖,降低肿瘤恶性程度,值得临床应用与推广。 展开更多
关键词 食管鳞癌 eca-109细胞 抑制效应 HIF-1Α RNA干扰 体外及体内表达
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香加皮三萜类化合物抑制食管癌Eca109细胞裸鼠成瘤及其机制 被引量:9
5
作者 王丽芳 刘丽华 +3 位作者 马毓梅 孟凡茹 单铁强 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期620-624,共5页
目的:研究香加皮三萜类化合物(triterpenes compounde xtracted from cortex periplocae,TCCP)对荧光素酶(luciferase)标记的人食管鳞癌细胞株Eca109(Eca109-luc细胞)在裸鼠体内成瘤的作用及其机制。方法:Eca109-luc细胞经皮下接种裸鼠... 目的:研究香加皮三萜类化合物(triterpenes compounde xtracted from cortex periplocae,TCCP)对荧光素酶(luciferase)标记的人食管鳞癌细胞株Eca109(Eca109-luc细胞)在裸鼠体内成瘤的作用及其机制。方法:Eca109-luc细胞经皮下接种裸鼠,构建Eca109-luc细胞裸鼠移植瘤模型,观察TCPP治疗后移植瘤体积和质量的变化,应用活体成像系统观察移植瘤生长情况,H-E染色观察移植瘤组织形态学变化,流式细胞仪检测移植瘤细胞的凋亡,Westernblotting检测移植瘤组织中survivin的表达。结果:TCPP在体内能明显抑制裸鼠Eca109-luc移植瘤的生长,移植瘤体积和质量明显减少,抑瘤率为40.7%。TCPP治疗组小鼠移植瘤组织出现明显炎性细胞浸润及肿瘤细胞坏死,移植瘤细胞的凋亡率明显高于大豆油对照组(P<0.05),移植瘤组织中survivin蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论:TCCP在体内能抑制人食管癌Eca109细胞的生长,其作用机制可能与下调survivin的表达诱导肿瘤细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 香加皮三萜类化合物 食管肿瘤 eca109细胞 SURVIVIN 凋亡
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戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡的机制研究 被引量:9
6
作者 张玉军 刘淑霞 +2 位作者 齐凤英 左连富 郭建文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期629-633,共5页
目的探讨特异选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡及其作用机制。方法流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;电子显微镜进一步检测细胞凋亡;采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定Eca109细胞的LDH含量;... 目的探讨特异选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡及其作用机制。方法流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;电子显微镜进一步检测细胞凋亡;采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定Eca109细胞的LDH含量;流式细胞术检测p-p38MAPK及凋亡基因Fas和FasL蛋白的表达。结果戊地昔布(25—400μmol·L^-1)可诱导人食管癌Eca109细胞发生凋亡,凋亡率由(2.95±0.83)%增力口到(48.46±0.73)%;50—400μmol·L^-1时增殖指数和S期的细胞比例则明显降低,G0/G1期的细胞比例增加;同时,流式细胞术显示,25μmol·L^-1戊地昔布即可上调人食管癌Eca109细胞p-p38MAPK蛋白的表达,并随剂量的增加而增强;50—400μmol·L^-1的戊地昔布可上调Eca109细胞Fas及FasL的表达。结论戊地昔布可诱导人Eca109细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能部分是通过激活p-p38MAPK/Fas、FasL途径实现的。 展开更多
关键词 戊地昔布 食管eca109细胞 凋亡 P-P38MAPK FAS FASL
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CHFR基因CpG岛甲基化对食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响 被引量:6
7
作者 朱应超 田辉 +3 位作者 岳韦名 高存 亓磊 司立博 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期139-143,共5页
目的:研究CHFR基因启动子甲基化状态与食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的关系。方法:分别用不同浓度(2、5、10μmol/L)5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理Eca109细胞,未经药物处理的细胞为对照组。甲基化特... 目的:研究CHFR基因启动子甲基化状态与食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的关系。方法:分别用不同浓度(2、5、10μmol/L)5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理Eca109细胞,未经药物处理的细胞为对照组。甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测CHRF基因CpG岛的甲基化状态,RT-PCR检测CHFR mRNA的表达情况,MTT法及流式细胞术检测不同浓度5-Aza-CdR处理对Eca109细胞增殖及凋亡的影响。结果:对照组Eca109细胞CHFR CpG岛处于高甲基化状态,5-Aza-CdR处理后CHFR CpG岛可发生不同程度的剂量依赖性的去甲基化。对照组Eca109细胞无CHFR mRNA表达,5-Aza-CdR处理组(2、5、10μmol/L)CHFR mRNA相对表达量显著增加(0.174±0.010、0.221±0.013、0.356±0.014)。不同浓度5-Aza-CdR处理后,Eca109细胞增殖受到抑制[作用72 h时的抑制率分别为(30.87±0.74)%、(44.60±0.79)%、(56.67±0.35)%],细胞凋亡显著增加[(7.46±1.46)%、(16.27±1.61)%、(25.29±2.25)%vs(1.83±0.41)%,P<0.01]。结论:食管癌Eca109细胞经5-Aza-CdR处理后,CHFR基因CpG岛发生部分去甲基化,出现CHFRmRNA表达,并抑制Eca109细胞增殖和促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 CHFR基因 甲基化 食管 eca109细胞 增殖 凋亡
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LINC01140通过miR-452-5p/Wnt/β-catenin轴调控食管鳞状细胞癌Eca109细胞的增殖与侵袭 被引量:3
8
作者 郭艳丽 尹情 +4 位作者 韩俊淑 郭炜 沈素朋 梁佳 董稚明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期900-907,共8页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01140在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织及细胞中的表达及其对Eca109细胞增殖与侵袭的影响及其分子机制。方法:选取2012年3月至2015年5月河北医科大学第四医院收治的13... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01140在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织及细胞中的表达及其对Eca109细胞增殖与侵袭的影响及其分子机制。方法:选取2012年3月至2015年5月河北医科大学第四医院收治的133例ESCC患者的临床资料和GEPIA数据库中收集的182例ESCC组织及286例食管正常黏膜组织的LINC01140表达数据,以及ESCC细胞系Kyse150、Eca109和TE13。用qPCR法检测癌组织和细胞中LINC01140的表达水平,分析其表达水平与患者临床病理特征及预后的关系。分别将pcDNA3.1-LINC01140、阴性对照(pcDNA3.1-NC)或miR-452-5p mimic及阴性对照(miR-NC)转染到Eca109细胞,MTS、Transwell实验分别检测细胞的增殖与侵袭能力。用双荧光报告基因实验及TOP/FOP报告基因系统检测LINC01140与miR-452-5p的靶向结合作用及LINC01140对Wnt/β-catenin通路活化水平的影响。结果:LINC01140在ESCC组织和细胞中表达均显著下调(均P<0.01),LINC01140低表达与ESCC患者年龄、淋巴结转移、TNM分期及OS密切相关(均P<0.05)。LINC01140过表达明显抑制Eca109细胞的增殖及侵袭能力(均P<0.01)。机制研究表明,LINC01140可能通过竞争结合miR-452-5p影响Wnt/β-catenin信号通路的活化水平继而调控Eca109细胞的恶性生物学行为。结论:LINC01140通过靶向miR-452-5p/Wnt/β-catenin轴促进ESCC细胞的增殖与侵袭能力,其有望成为ESCC患者靶向治疗的潜在靶点及预后评估的标志物。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞 eca109细胞 LINC01140 miR-452-5p WNT/Β-CATENIN信号通路 增殖 侵袭
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新疆家蚕抗菌肽与化疗药物联用对食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
9
作者 夏丽洁 张富春 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期402-407,共6页
目的:研究新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ,CE-XJ)与4种化疗药物联用对人食管癌Eca109细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测CE-XJ联合不同浓度的多柔比星(doxorubicin,ADM)、卡铂(carboplatin,CBP)、顺铂(cisplatin,DDP)和环磷... 目的:研究新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ,CE-XJ)与4种化疗药物联用对人食管癌Eca109细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测CE-XJ联合不同浓度的多柔比星(doxorubicin,ADM)、卡铂(carboplatin,CBP)、顺铂(cisplatin,DDP)和环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对人食管癌Eca109细胞增殖的影响,流式细胞术分析CE-XJ与ADM、CBP、DDP、CTX联用对Eca109细胞凋亡、活性氧及线粒体膜电位的影响。结果:单独使用CE-XJ(1~50μmol/L)可依剂量依赖方式显著抑制Eca109细胞的增殖(P〈0.05或P〈0.01)。CE-XJ分别与ADM、DDP、CTX联合用药,与单独用药相比,Eca109细胞的增殖抑制明显加强、细胞凋亡率显著增加(均P〈0.05或P〈0.01),细胞内活性氧水平显著增加(P〈0.05),而线粒体膜电位显著降低(均P〈0.05)。但CE-XJ与CBP联用时出现拮抗现象,与单独用药相比,细胞增殖抑制变化不大,细胞凋亡率反而降低。结论:CE-XJ与化疗药物ADM、DDP和CTX联用对人食管癌Eca109细胞的增殖抑制和凋亡诱导有明显促进作用,其机制可能与细胞内活性氧和线粒体膜电位变化有关。但CE-XJ与CBP联用则起拮抗作用,其机制有待进一步探讨。 展开更多
关键词 新疆家蚕抗菌肽 食管 eca109细胞 多柔比星 卡铂 顺铂 环磷酰胺 增殖 凋亡
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戊地昔布对人食管癌Eca109细胞系的抑制作用及其调控 被引量:1
10
作者 张玉军 齐凤英 +3 位作者 刘淑霞 左连富 郭建文 刘江惠 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期508-512,共5页
目的:探讨特异选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布对人食管癌Eca109细胞的抑制作用及其调控机制。方法:采用MTT法检测戊地昔布对人食管癌Eca109细胞生长的作用;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;采用流式细胞术和免疫组织化学... 目的:探讨特异选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布对人食管癌Eca109细胞的抑制作用及其调控机制。方法:采用MTT法检测戊地昔布对人食管癌Eca109细胞生长的作用;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;采用流式细胞术和免疫组织化学检测人食管癌Eca109细胞中p-p38MAPK、c-jun和c-fos的表达。结果:戊地昔布(25~400μmol/L)可按时间和浓度依赖性抑制人食管癌Eca109细胞的生长,作用72小时后,对细胞生长的抑制率可达85.95%,凋亡率由(2.38±0.42)%增加到(48.46±0.73)%;50~400μmol/L时增殖指数和S期的细胞比例则明显降低,G0/G1期的细胞比例增加。戊地昔布在给药72小时后,食管癌Eca109细胞中p-p38MAPK、c-fos、c-jun蛋白表达均增强,并且随浓度的增加而增强。结论:戊地昔布可通过诱导细胞凋亡和细胞周期停滞而抑制人Eca109细胞生长,其诱导凋亡的机制可能部分是通过激活p-p38MAPK、c-jun、c-fos途径实现的。 展开更多
关键词 戊地昔布 环氧化酶-2人食管eca109细胞 凋亡p-p38MAPK
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PTPN6基因对人食管鳞状细胞癌Eca109和Yes-2细胞恶性生物学行为的影响 被引量:1
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作者 刘磊 杨柳 +2 位作者 牛云峰 梁佳 沈素朋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期273-279,共7页
目的:探讨非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶6(non-receptor protein tyrosine phosphatase 6,PTPN6)基因在不同食管鳞状细胞癌细胞株中的表达及其对Eca109、Yes-2细胞恶性生物学行为的影响。方法:应用qPCR法检测不同食管鳞癌细胞株(TE1、Eca109... 目的:探讨非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶6(non-receptor protein tyrosine phosphatase 6,PTPN6)基因在不同食管鳞状细胞癌细胞株中的表达及其对Eca109、Yes-2细胞恶性生物学行为的影响。方法:应用qPCR法检测不同食管鳞癌细胞株(TE1、Eca109、Kyse150、Kyse170、Yes-2)中PTPN6 m RNA的表达水平,以pcDNA3.1-PTPN6质粒分别瞬时转染食管鳞癌细胞株Eca109和Yes-2,应用qPCR和Wb法检测PTPN6 m RNA和蛋白的表达水平,并应用MTS、克隆形成实验、划痕实验和Transwell法检测过表达PTPN6基因对食管鳞癌细胞恶性生物学行为的影响。结果:PTPN6基因在5种食管鳞癌细胞侏中表达均明显下调(均P<0.05)。与转染空载体的对照组相比,经pcDNA3.1-PTPN6转染后,Eca109和Yes-2细胞均高水平表达PTPN6(P<0.05或P<0.01);过表达PTPN6基因后,Eca109和Yes-2细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显被抑制(均P<0.05)。结论:PTPN6基因高表达能抑制食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其可能是影响食管鳞癌细胞生物学特性的一个重要因素。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞 非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶6基因 eca109细胞 Yes-2细胞 增殖 迁移 侵袭
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低氧下三氧化二砷对食管癌Eca109细胞放射敏感性的影响
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作者 景绍武 王雅棣 +4 位作者 王军 孙国贵 刘青 程云杰 杨从容 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期41-46,共6页
目的:观察三氧化二砷(As2O3)在低氧条件下对食管癌Eca109细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,探讨其发挥放射增敏作用的可能机制。方法:Co Cl2处理模拟肿瘤细胞模拟低氧微环境,MTT法分别检测常氧和低氧条件下不同浓度As2O3及不同剂量放射... 目的:观察三氧化二砷(As2O3)在低氧条件下对食管癌Eca109细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,探讨其发挥放射增敏作用的可能机制。方法:Co Cl2处理模拟肿瘤细胞模拟低氧微环境,MTT法分别检测常氧和低氧条件下不同浓度As2O3及不同剂量放射线对食管癌Eca109细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测低氧下As2O3、放射线单独及两者联合对细胞周期及凋亡的影响,Western blotting检测经As2O3、放射线单独及两者联合作用后Eca109细胞中HIF-1α、p27蛋白的表达情况。结果:在常氧和低氧两种条件下,As2O3均呈时间和剂量依赖方式抑制Eca109细胞增殖,相同时间和相同剂量条件下,其抑制水平相当(P>0.05);而低氧下放射线对Eca109细胞增殖的抑制作用较常氧下明显减弱(P<0.05)。低氧下Eca109细胞周期出现G0/G1期阻滞、G2/M期细胞比例明显减少(P<0.05),As2O3在低氧条件下可诱导G2/M期阻滞、G0/G1期细胞比例减少。As2O3与放射线联合作用时,Eca109细胞的凋亡率大于两者单独作用之和。低氧条件下,Eca109细胞HIF-1α、p27蛋白表达均明显增强,As2O3可逆转HIF-1α、p27表达水平的升高。结论:低氧条件下,As2O3对食管癌Eca109细胞有放射增敏作用,其机制可能与下调HIF-1α进而降低p27表达水平、解除G0/G1期细胞周期阻滞和促进细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 低氧 三氧化二砷 食管肿瘤 eca109细胞 细胞周期 放射敏感性
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外源性p53基因转导对食管癌细胞株Eca109的生长抑制
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作者 李万波 黄建华 +7 位作者 郭兰君 王丽君 李鸣 叶军 马跃文 鞠丽梅 蔡有余 张蘅■ 《中国实验动物学杂志》 1994年第3期151-156,共6页
本文首次报道了逆转录病毒载体介导的外源性p53基困导入对食管癌细胞株Eca109的生长抑制效应。我们将野生型p53基因全长编码区克隆进逆转录病毒载体pDOR-Neo中,构建了重组病毒pDORp53。转染Bca109细... 本文首次报道了逆转录病毒载体介导的外源性p53基困导入对食管癌细胞株Eca109的生长抑制效应。我们将野生型p53基因全长编码区克隆进逆转录病毒载体pDOR-Neo中,构建了重组病毒pDORp53。转染Bca109细胞后,获得G418抗性细胞克隆Eca-p53。细胞生物学行为研究显示:生长曲线压低42%;GO/G_1期细胞比例显著增加;细胞增殖指数<PI>降低36.3%;软琼脂中集落形成能力受抑;对裸鼠的致瘤性丧失。结果证明,外源性野生型p53基因转导,对抑制食管癌细胞的恶性行为具有显著的生物学意义。 展开更多
关键词 P53基因 食管 细胞 eca109 克隆 细胞生物学
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过表达lncRNA LINC00886抑制食管鳞状细胞癌Eca109细胞的恶性生物学行为 被引量:3
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作者 杨柳 梁佳 +4 位作者 沈素朋 刘磊 任利兵 郭炜 董稚明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期751-756,共6页
目的:检测lncRNA LINC00886在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织及细胞系中的表达及其对Eca109细胞体外增殖、迁移及侵袭的影响。方法:收集2014年6月至2016年12月河北医科大学第四医院生物标本库69例ESCC手术患者的癌及对应的癌旁组织标本,以及E... 目的:检测lncRNA LINC00886在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织及细胞系中的表达及其对Eca109细胞体外增殖、迁移及侵袭的影响。方法:收集2014年6月至2016年12月河北医科大学第四医院生物标本库69例ESCC手术患者的癌及对应的癌旁组织标本,以及ESCC细胞系Eca109、TE13、TE1、Kyse150、Yes-2和Kyse170,用qPCR法检测LINC00886在ESCC组织及细胞系中的表达情况。分别用pIRES2-LINC00886、p IRES2-NC转染Eca109细胞,用qPCR法检测pIRES2-LINC00886转染Eca109细胞后LINC00886的过表达效率;用MTS、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell侵袭实验分别检测过表达LINC00886对Eca109细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果:在ESCC组织中LINC00886表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01),其表达水平与肿瘤TNM分期和淋巴结转移相关(均P<0.05)。LINC00886在ESCC细胞中的表达水平也低于对照组(均P<0.01)。转染pIRES2-LINC00886后,Eca109细胞中LINC00886的表达水平显著高于对照组(均P<0.05)。与对照组相比,过表达LINC00886明显抑制Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。结论:lncRNA LINC00886低表达可能与ESCC的发生发展相关,过表达LINC00886可抑制ESCC细胞的增殖、迁移与侵袭能力。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞 eca109细胞 长链非编码RNA LINC00886 增殖 迁移 侵袭
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连翘苷对食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞的抑制作用及机制 被引量:7
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作者 郭子琪 王少康 +2 位作者 桂兰兰 夏惠 孙桂菊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第15期176-184,共9页
目的:探究连翘苷对食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞增殖、周期、凋亡、迁移、侵袭的影响,分析其对这两种细胞的抑制效果及其作用机制。方法:取食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞,使用不同浓度(10、100μmol/L)的连翘苷... 目的:探究连翘苷对食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞增殖、周期、凋亡、迁移、侵袭的影响,分析其对这两种细胞的抑制效果及其作用机制。方法:取食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞,使用不同浓度(10、100μmol/L)的连翘苷处理干预细胞24 h,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK8)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期、凋亡,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB),(也称为AKT)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated phosphatidylinositol-3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-PKB)(也称为p-AKT)、p21蛋白、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9,MMP9)表达水平。结果:连翘苷对食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC_(50))分别为308.4μmol/L和322.0μmol/L。10、100μmol/L连翘苷可显著抑制食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞增殖(P<0.05),对人食管正常上皮细胞无毒性作用。10、100μmol/L连翘苷可诱导食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞周期改变,促进细胞凋亡。10、100μmol/L连翘苷可显著抑制食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞迁移及侵袭(P<0.05)。10、100μmol/L连翘苷可显著降低食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞中p-PI3K、p-AKT、Bcl-2和MMP9蛋白的表达水平(P<0.05),100μmol/L连翘苷可显著提高食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞中p21蛋白的表达水平(P<0.05)。结论:连翘苷可显著抑制食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与PI3K/AKT通路失活有关。 展开更多
关键词 连翘苷 食管上皮恶性转变细胞 eca109细胞 PI3K/AKT
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Bufalin对食管癌ECA109细胞中FAK活化和上皮-间质转化的影响 被引量:2
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作者 刘雪姣 岳萌 +2 位作者 张玲玲 贾迎 刘月平 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期846-850,共5页
目的探讨Bufalin对食管鳞状细胞癌ECA109细胞中FAK活化和上皮-间质转化(epithelial-mesenehymal transition,EMT)的影响。方法采用RT-PCR法检测不同浓度Bufalin对食管鳞状细胞癌ECA109细胞中FAK、E-cadherin、vimentin mRNA表达的影响。... 目的探讨Bufalin对食管鳞状细胞癌ECA109细胞中FAK活化和上皮-间质转化(epithelial-mesenehymal transition,EMT)的影响。方法采用RT-PCR法检测不同浓度Bufalin对食管鳞状细胞癌ECA109细胞中FAK、E-cadherin、vimentin mRNA表达的影响。Western blot法检测不同浓度Bufalin对ECA109细胞中FAK活化水平及FAK、E-cadherin、vimentin蛋白表达的影响。采用Transwell小室实验检测不同浓度Bufalin对ECA109细胞迁移与侵袭能力的影响。结果 RT-PCR结果表明Bufalin抑制FAK、E-cadherin、vimentin的mRNA表达。Western blot结果表明Bufalin抑制E-cadherin、vimentin的表达和FAK的活化。Transwell实验结果表明Bufalin可以抑制ECA109细胞的迁移及侵袭。药物干预组(20、40、60、80、100 nmol/L Bufalin及PF562271组)与阳性对照组相比,Transwell迁移实验结果显示穿过基膜的细胞个数由107.00±8.19下降至78.67±3.06、61.67±3.06、42.67±3.512、24.33±2.517、10.33±3.215、9.00±2.65;Transwell侵袭实验结果显示穿过基膜的细胞个数由127.67±8.02下降至102.33±4.51、87.33±7.10、73.00±4.58、57.33±2.52、39.00±3.61、37.33±2.52,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Bufalin可以抑制食管鳞状细胞癌中FAK的活化,提示Bufalin可能是通过下调FAK来抑制食管鳞状细胞癌EMT过程及食管癌的迁移及侵袭。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞 上皮-间质转化 黏着斑激酶 BUFALIN eca109
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DEC1基因过表达对人食管癌ECA109细胞增殖及侵袭能力的影响 被引量:4
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作者 杨纯平 王华川 温剑虎 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期620-624,共5页
目的:探讨DEC1基因过表达对人食管癌ECA109细胞增殖和侵袭能力的影响及可能机制。方法:将质粒pc DNA3.1(-)/DEC1(DEC1组)和pc DNA3.1(-)(vector组)利用脂质体分别转染至人食管癌ECA109细胞中,通过real-time PCR检测转染48 h后的细胞内DE... 目的:探讨DEC1基因过表达对人食管癌ECA109细胞增殖和侵袭能力的影响及可能机制。方法:将质粒pc DNA3.1(-)/DEC1(DEC1组)和pc DNA3.1(-)(vector组)利用脂质体分别转染至人食管癌ECA109细胞中,通过real-time PCR检测转染48 h后的细胞内DEC1 mRNA表达,Western blot分别检测转染72 h后细胞内DEC1、基质金属蛋白酶9(MMP9)及细胞周期蛋白cyclin D1的蛋白表达;采用CCK-8实验、平板集落实验及Transwell实验分别检测DEC1过表达对细胞的增殖和侵袭能力的影响。结果:与vector组相比,DEC1组中DEC1的表达明显增高(P<0.01);cyclin D1和MMP9的表达明显降低(P<0.05);细胞增殖与侵袭能力明显受到抑制(P<0.01)。结论:过表达DEC1可明显抑制ECA109细胞的增殖和侵袭能力,DEC1可能通过影响MMP9和cyclin D1参与其中。 展开更多
关键词 DEC1基因 食管 eca109细胞 细胞增殖 细胞侵袭
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柚皮苷通过阻断JAK/STAT信号通路抑制Eca109人食管癌细胞的增殖、侵袭并促进其凋亡 被引量:7
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作者 杨锋 姜涛 +2 位作者 张利宏 齐亚刚 杨占祥 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1085-1091,共7页
目的探究柚皮苷(NAR)对Eca109食管癌细胞的增殖活性的抑制作用和凋亡的促进作用及其作用机制。方法培养Eca109细胞,采用(0、15、30、45)μmol/LNAR处理24、48、72 h。采用细胞集落形成试验评估Eca109食管癌细胞的集落形成能力,噻唑蓝(M... 目的探究柚皮苷(NAR)对Eca109食管癌细胞的增殖活性的抑制作用和凋亡的促进作用及其作用机制。方法培养Eca109细胞,采用(0、15、30、45)μmol/LNAR处理24、48、72 h。采用细胞集落形成试验评估Eca109食管癌细胞的集落形成能力,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,Transwell^(TM)实验检测癌细胞侵袭能力;采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)染色检测细胞凋亡,Western blot法检测B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、细胞色素C(CytC)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、Janus激酶2(JAK2)、磷酸化的JAK2(p-JAK2)、信号转导子与转录激活子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)蛋白表达。结果柚皮苷抑制Eca109细胞增殖活性和细胞集落形成,抑制Eca109细胞的侵袭并促进Eca109细胞凋亡;柚皮苷能够促进BAX、CytC、caspase-3、caspase-9、p-STAT3、p-AKT、AKT和p-JAK2表达,抑制Bcl2表达。结论柚皮苷能通过阻断JAK/STAT信号通路活化抑制Eca109细胞的增殖、侵袭和细胞集落形成并促进其凋亡。 展开更多
关键词 食管 eca109细胞 Janus激酶2(JAK2) 信号转导子与转录激活子3(STAT3) 细胞增殖 细胞凋亡
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塞来西布对食管癌ECA-109细胞系放射增敏效应的研究
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作者 王朝霞 陈意红 +2 位作者 谈文霞 胡琴 吉兆宁 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第10期1095-1100,共6页
目的:了解环氧化物酶-2(COX-2)选择性抑制剂——塞来西布对食管癌ECA-109细胞系的放射增敏作用。方法:选择ECA-109细胞系作为试验对象,检测ECA-109细胞系的COX-2表达水平,设塞来西布0.25、50、100μmol/L4个实验组,分别予6MV-X线照射0、... 目的:了解环氧化物酶-2(COX-2)选择性抑制剂——塞来西布对食管癌ECA-109细胞系的放射增敏作用。方法:选择ECA-109细胞系作为试验对象,检测ECA-109细胞系的COX-2表达水平,设塞来西布0.25、50、100μmol/L4个实验组,分别予6MV-X线照射0、2、4、6Gy后,再分别行MTT比色试验、克隆形成实验、流式细胞仪计数,检测细胞的增殖能力、克隆形成能力及凋亡3项指标。结果:不同辐射剂量与不同浓度的塞来西布对ECA-109细胞的增殖、凋亡率作用有统计学差异(P<0.05),塞来西布与放射对ECA-109细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用随塞来西布的浓度和照射剂量的增加而增强;塞来西布联合放射对ECA-109细胞的存活率、D0值和Dq值作用均小于单纯放射组,Dq变小;塞来西布和4Gy(6MV-X)联合用于ECA-109细胞其凋亡率有统计学差异(P<0.05)。结论:塞来西布能抑制ECA-109细胞增殖,诱导其凋亡。塞来西布与放射联合应用对ECA-109细胞的增殖抑制、诱导凋亡有协同增强的作用。 展开更多
关键词 食管肿瘤 塞来西布 eca109细胞 放射增敏 凋亡
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芝麻酚通过AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路调控食管鳞状细胞癌Eca109细胞的自噬和凋亡 被引量:3
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作者 刘山 王华兵 +1 位作者 刘冲 张倬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期123-128,共6页
目的:探讨芝麻酚(SEM)通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB(NF-κB)通路影响食管鳞状细胞癌(ESCC)Eca109细胞自噬和凋亡的机制。方法:用不同浓度的SEM(0、1.5625、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200、... 目的:探讨芝麻酚(SEM)通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB(NF-κB)通路影响食管鳞状细胞癌(ESCC)Eca109细胞自噬和凋亡的机制。方法:用不同浓度的SEM(0、1.5625、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200、400μmol/L)分别处理Eca109细胞、人食管上皮细胞HEEpiC 48 h,CCK-8法检测细胞增殖率,筛选适宜的SEM浓度用于后续实验。将Eca109细胞分为对照组(CK组,0μmol/L)、低剂量SEM组(SEM-L组,25μmol/L)、中剂量SEM组(SEM-M组,50μmol/L)、高剂量SEM组(SEM-H组,100μmol/L)、高剂量SEM+Compound C(AMPK抑制剂)组(SEM-H+Compound C组,100μmol/L+10μmol/L),所有各组Eca109细胞在对应的药物浓度下处理48 h后,CCK-8法检测Eca109细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,透射电镜观察Eca109细胞内自噬小体,WB法检测Eca109细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、B淋巴细胞瘤2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、p-AMPK、SIRT1、p-NF-κB p65的表达。结果:通过预实验选择SEM实验浓度为25、50、100μmol/L用于正式研究。在SEM处理下,与CK组比较,SEM-L组、SEM-M组、SEM-H组Eca109细胞的增殖水平(24、48 h)和Bcl2、p-NF-κB p65蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率和自噬小体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、BAX、p-AMPK、SIRT1蛋白表达显著升高,且呈剂量依赖性(均P<0.05);与SEM-H组比较,SEM-H+Compound C组Eca109细胞增殖水平(24、48 h)和Bcl2、p-NF-κB p65蛋白表达均显著升高,细胞凋亡率和自噬小体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、BAX、p-AMPK、SIRT1蛋白表达均显著降低(均P<0.05)。结论:SEM可能通过激活AMPK/SIRT1信号通路而抑制NF-κB活性来促进Eca109细胞自噬与凋亡。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞 eca109细胞 芝麻酚 腺苷酸活化蛋白激酶通路 沉默信息调节因子1通路 核因子κB通路 细胞自噬 凋亡
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