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eIF4E反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4EHPA表达的影响 被引量：1
1
作者 陈奎生 楚丽 +3 位作者 赵志华 李晟磊 高冬玲 张云汉 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第14期830-834,共5页
目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4E及肝素酶(HPA)蛋白、mRNA表达的影响,并观察其对EC9706细胞侵袭力的抑制效果。方法:针对eIF4E mRNA翻译起始区设计经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(ASODNS),经... 目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4E及肝素酶(HPA)蛋白、mRNA表达的影响,并观察其对EC9706细胞侵袭力的抑制效果。方法:针对eIF4E mRNA翻译起始区设计经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(ASODNS),经脂质体转染食管癌EC9706细胞,采用原位杂交、Western Blot和Boy-den chamber侵袭实验等方法检测抑制前后EC9706细胞中eIF4E及HPA表达情况及细胞侵袭力改变。结果:eIF4EASODNS转染食管癌EC9706细胞24、48、72h后,elF4E及HPA的mRNA与蛋白表达量均较对照组有所降低(P<0.05),且均以转染72h的抑制效应最为明显,在每个时间段内随剂量增加eIF4E ASODNS抑制效应明显增强(P<0.05);eIF4E ASODNS对HPA蛋白、mRNA表达的抑制效应和对eIF4E蛋白、mRNA表达的抑制效应,呈正相关关系(蛋白r=10.02,mRNA r=10.17,P均<0.01);eIF4E ASODNS体外转染食管癌EC9706细胞后,其穿越Matrigel的细胞数明显少于细胞对照组、空白对照组和无关对照组(P均<0.05)。结论:eIF4E ASODNS可抑制食管癌EC9706细胞中eIF4E、HPA蛋白及mRNA表达,且可抑制食管癌EC9706细胞的浸润转移。该研究结果为临床治疗食管癌等恶性肿瘤浸润转移奠定一定的理论基础。 展开更多
关键词 真核细胞起始因子4E 反义寡核苷酸 人食管癌ec9706细胞株 肝素酶 转染
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辛伐他汀对食管癌EC9706细胞增殖及核因子κB的影响 被引量：1
2
作者 金伟 董涛 +2 位作者 栾春艳 赵存新 张银华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期789-791,795,共4页
目的:探讨辛伐他汀对人食管癌EC9706细胞增殖及核因子κB表达的影响。方法:培养食管癌EC9706细胞株,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测辛伐他汀在不同浓度和不同作用时间下对人食管癌EC9706细胞增殖的影响,透射电镜、激光共聚焦显微镜... 目的:探讨辛伐他汀对人食管癌EC9706细胞增殖及核因子κB表达的影响。方法:培养食管癌EC9706细胞株,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测辛伐他汀在不同浓度和不同作用时间下对人食管癌EC9706细胞增殖的影响,透射电镜、激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪检测辛伐他汀对肿瘤细胞凋亡率和细胞周期的影响,免疫组化技术研究辛伐他汀对人食管癌EC9706细胞NF-κB表达的影响。结果:二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法证实辛伐他汀在0～20μmol/L浓度区间内,随浓度增加和时间的延长,辛伐他汀对食管癌EC9706细胞的抑制率逐渐增加。透射电镜、激光共聚焦显微镜下可见细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。流式细胞仪检测细胞凋亡率,细胞周期阻滞于G_0/G_1期。不同浓度(0,5,10,20μmol/L)辛伐他汀与EC9706细胞作用72h,NF-κB胞核染色阳性率(%)分别为(46.2±5.0,38.3±4.8,30.8±4.0,23.4±2.1)(P<0.05,P<0.01),以及20μmol/L的辛伐他汀与EC9706作用不同时间(0,24,48,72h)后,NF-κB胞核染色阳性率(%)分别为(37.8±2.8,31.6±2.6,25.6±2.2,16.8±2.0)(P<0.05,P<0.01)。随着辛伐他汀作用浓度增加和作用时间延长,食管癌EC9706细胞NF-κB的表达逐渐降低。结论:辛伐他汀对食管癌EC9706细胞的增殖具有显著抑制作用,且与辛伐他汀的浓度和作用时间呈正相关,其作用机制可能与通过抑制食管癌EC9706细胞NF-κB的表达而使细胞发生凋亡有关。 展开更多
关键词 辛伐他汀食管癌ec9706细胞NF-κB细胞凋亡
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通幽汤及拆方对食管癌EC9706细胞PI3K/AKT信号通路影响的研究 被引量：14
3
作者 贾永森 吕翠田 +2 位作者 吴范武 杨雨旸 赵舒 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期1306-1308,共3页
目的:揭示通幽汤对食管癌抑制作用的细胞内分子机制,确定从功效分类的有效药物及瘀血内结证的分子本质。方法:体外培养食管鳞癌EC9706细胞,通幽汤及活血行气、滋阴养血拆方分别作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;以MTT法检测细胞... 目的:揭示通幽汤对食管癌抑制作用的细胞内分子机制,确定从功效分类的有效药物及瘀血内结证的分子本质。方法:体外培养食管鳞癌EC9706细胞,通幽汤及活血行气、滋阴养血拆方分别作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;以MTT法检测细胞抑制率,确定最佳药物浓度和作用时间;western blot法观察PI3K/AKT信号通路各蛋白表达变化情况。结果:通幽汤及活血行气拆方可显著抑制EC9706细胞增殖,48h作用最强,通幽汤全方IC50=1523μg.mL-1,活血行气拆方IC50=1001μg.mL-1;可抑制PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达,作用强弱依次为:活血行气拆方>通幽汤全方>滋阴养血拆方。结论:通幽汤抑制食管癌细胞增殖主要为活血行气类药物,根据"以方测证"理论,瘀血内结证与PI3K/AKT信号通路表达增强有关。 展开更多
关键词 通幽汤 拆方 食管癌 ec9706细胞 PI3K/AKT 方证
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启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导的影响 被引量：12
4
作者 吕翠田 司富春 陈玉龙 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第7期1455-1458,I0001,共5页
目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过... 目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过MTT染色观察细胞增殖变化,通过Western blot法检测Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路蛋白表达。结果:启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤的IC50值分别是1462、1232、2875μg/m L,均可促进Caspase-3蛋白表达而诱导细胞凋亡,而Cyt.C蛋白表达较弱;启膈散和沙参麦冬汤对FADD、Fas、TNFR1和DR5蛋白表达有不同程度地影响。结论:三方可通过激活Caspase-3诱导细胞凋亡,其中启膈散主要通过非依赖FADD死亡受体途径,沙参麦冬汤主要通过依赖FADD死亡受体途径,通幽汤可能通过其他凋亡蛋白参与的上游信号途径而激活Caspase-3致细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管癌 ec9706细胞 细胞凋亡信号转导 启膈散 沙参麦冬汤 通幽汤
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肝素酶特异性RNAi对人食管癌EC9706细胞肝素酶基因表达的影响 被引量：5
5
作者 李文才 孙淼淼 +6 位作者 张红 曹学全 娄欣 高冬玲 张岚 宋一民 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期9-11,共3页
目的:探讨RNAi技术对人食管癌EC9706细胞肝素酶(heparanase,Hpa)基因表达的影响。方法:针对Hpa不同基因位点设计合成寡核苷酸,然后转录为小分子干扰RNA(siRNA),分别用浓度为10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L的siRNA经LipofectamineTM200... 目的:探讨RNAi技术对人食管癌EC9706细胞肝素酶(heparanase,Hpa)基因表达的影响。方法:针对Hpa不同基因位点设计合成寡核苷酸,然后转录为小分子干扰RNA(siRNA),分别用浓度为10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L的siRNA经LipofectamineTM2000脂质体介导转染EC9706细胞72h,同时设无关序列组及不转染组。采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中Hpa基因的表达。结果:siRNA可有效抑制人食管癌EC9706细胞Hpa基因的表达,以15μmol/L的siRNA作用效应最强,但不同浓度siRNA两两相比,差异均无统计学意义(P>0.05),不同浓度siRNA对Hpa基因表达的抑制效应均显著强于无关序列组及不转染组(P<0.05)。结论:RNAi技术可有效抑制人食管癌EC9706细胞Hpa基因的表达。 展开更多
关键词 肝素酶 食管肿瘤 癌细胞 RNAI ec9706细胞系
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组织蛋白酶B特异性siRNA对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B基因表达的影响 被引量：7
6
作者 娄欣 张红 +6 位作者 曹学全 孙淼淼 高冬玲 张岚 宋一民 李冰 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期14-17,共4页
目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B(CB)基因表达的影响。方法:设计并用体外转录方法合成针对CB基因的siRNA,转染EC9706细胞(设10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L3个转染浓度),分别培养24h、48h、72h(实验组),... 目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B(CB)基因表达的影响。方法:设计并用体外转录方法合成针对CB基因的siRNA,转染EC9706细胞(设10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L3个转染浓度),分别培养24h、48h、72h(实验组),采用免疫细胞化学及原位杂交方法检测转染细胞中CB蛋白和mRNA表达的变化,并设正常对照、空白对照、无关对照。结果:不同浓度siRNA转染24h、48h、72hEC9706细胞CB蛋白表达量均较正常、空白及无关对照降低(P<0.05),以转染72h的抑制效应最为明显,但3者相比差异无统计学意义(P>0.05)。3个时间段内随浓度增加siRNA抑制效应增强,3者相比差异有统计学意义(P<0.05),正常对照、空白对照、无关对照均未表现出对CB蛋白表达的抑制效应。转染siRNA后部分细胞形态发生改变。结论:特异性siRNA能有效抑制EC9706细胞中CB蛋白和mRNA表达。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 组织蛋白酶B ec9706细胞 小分子干扰RNA
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顺铂增强食管癌相关基因2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用 被引量：5
7
作者 宋海岩 邓晓慧 孙春莉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期290-293,共4页
目的:探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer-related gene 2,ECRG2)蛋白联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗对人食管癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法分别检测单用ECRG2蛋白和ECRG2蛋白联合顺铂对EC9706细胞增殖的影响;采用Hoe... 目的:探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer-related gene 2,ECRG2)蛋白联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗对人食管癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法分别检测单用ECRG2蛋白和ECRG2蛋白联合顺铂对EC9706细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色法检测二者对EC9706细胞凋亡的影响;Westernblotting检测二者对EC9706细胞中p53蛋白表达的影响。结果:MTT结果显示,ECRG2蛋白可抑制EC9706细胞增殖,ECRG2蛋白和DDP联用后抑制细胞增殖作用增强,且在一定浓度范围内呈时间、剂量依赖关系。Hoechst33258染色显示,ECRG2蛋白和DDP联合作用24 h后EC9706细胞凋亡数目多于单用ECRG2蛋白。Western blot-ting结果提示ECRG2蛋白和DDP联合用药较单用ECRG2蛋白明显上调p53蛋白的表达。结论:DDP可增强ECRG2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,其增强诱导EC9706细胞凋亡的机制可能与上调p53蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 食管癌相关基因2 顺铂 细胞增殖 细胞凋亡 ec9706细胞
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去甲斑蝥素诱导人食管癌Ec9706细胞凋亡及其可能的机制 被引量：6
8
作者 刘亮 李慧 左连富 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期419-422,共4页
目的:研究去甲斑蝥素对人食管鳞癌Ec9706细胞的致凋亡作用及其可能的作用机制,为去甲斑蝥素应用于临床抗癌治疗提供实验依据。方法:不同质量浓度去甲斑蝥素(0、5、10、20、40μg/ml)分别作用Ec9706细胞不同时间(12、24和48 h)后,MTT方... 目的:研究去甲斑蝥素对人食管鳞癌Ec9706细胞的致凋亡作用及其可能的作用机制,为去甲斑蝥素应用于临床抗癌治疗提供实验依据。方法:不同质量浓度去甲斑蝥素(0、5、10、20、40μg/ml)分别作用Ec9706细胞不同时间(12、24和48 h)后,MTT方法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡及Caspase-3和Survivin蛋白表达的变化。结果:去甲斑蝥素作用后Ec9706细胞呈现不同程度的增殖抑制,而且细胞增殖抑制程度随作用剂量及时间增加不断增强,40μg/ml去甲斑蝥素作用48 h时,Ec9706细胞增殖抑制率达(80.00±2.15)%。去甲斑蝥素显著诱导Ec9706细胞凋亡,其20μg/ml作用48 h时,Ec9706细胞的凋亡率达(38.57±1.76)%。去甲斑蝥素作用后,Ec9706细胞中Caspase-3蛋白水平显著增高,而Survivin蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:去甲斑蝥素明显诱导食管癌Ec9706细胞凋亡,其作用机制可能与下调细胞Survivin蛋白及上调Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 ec9706细胞 去甲斑蝥素 细胞凋亡
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不同基因位点的人端粒酶RNA反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞增殖及端粒酶活性的影响 被引量：3
9
作者 张蕾 耿丽 +2 位作者 张云汉 温洪涛 张岚 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第3期406-409,共4页
目的:探讨封闭人端粒酶RNA不同基因位点的硫代修饰性反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌细胞增殖及端粒酶活性的影响。方法:采用阳离子脂质体介导的方法,将不同浓度(0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和30μmol/L)的5条ASODN(ASODN1、... 目的:探讨封闭人端粒酶RNA不同基因位点的硫代修饰性反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌细胞增殖及端粒酶活性的影响。方法:采用阳离子脂质体介导的方法,将不同浓度(0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和30μmol/L)的5条ASODN(ASODN1、ASODN2、ASODN3、ASODN4和ASODN5)和无关序列寡核苷酸(N -ODN)分别导入食管癌EC9706细胞中,应用MTT法及端粒酶活性的定性及定量检测法,测定ASODN对食管癌EC9706细胞增殖及端粒酶活性的抑制作用。结果:5条ASODN和1条N ODN按照N ODN、ASODN4、ASODN5、ASODN2、ASODN1和ASODN3的顺序,对细胞增殖及端粒酶活性的抑制作用逐渐增高(P<0.05)。结论:封闭hTR功能区的反义寡核苷酸可有效抑制食管癌细胞增殖及端粒酶活性。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 ec9706细胞 反义寡核苷酸 端粒酶
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组织蛋白酶B特异性siRNA对人食管癌EC9706细胞体外侵袭力的抑制作用 被引量：3
10
作者 张红 娄欣 +6 位作者 曹学全 孙淼淼 高冬玲 张岚 宋一民 李冰 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期17-19,共3页
目的:探讨组织蛋白酶B(CB)特异性siRNA对人食管癌EC9706细胞体外侵袭力的抑制作用。方法:将体外转录合成的针对CB的特异性siRNA设10μmol/L、15μmol/L和20μmol/L3个不同剂量转染人食管癌EC9706细胞,用Boydenchamber体外侵袭实验检测... 目的:探讨组织蛋白酶B(CB)特异性siRNA对人食管癌EC9706细胞体外侵袭力的抑制作用。方法:将体外转录合成的针对CB的特异性siRNA设10μmol/L、15μmol/L和20μmol/L3个不同剂量转染人食管癌EC9706细胞,用Boydenchamber体外侵袭实验检测转染前后细胞体外侵袭力的变化。对照组设无关siRNA转染组、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不进行任何操作)。结果:和正常对照组相比,特异性siRNA15μmol/L组和20μmol/L组穿越Matrigel胶的细胞数明显减少(P<0.05),而10μmol/L特异性siRNA组、空白对照组和无关siRNA转染组与正常对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:特异性CBsiRNA能有效抑制人食管癌EC9706细胞的体外侵袭力。 展开更多
关键词 siRNA 组织蛋白酶B ec9706细胞 转染 侵袭力
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全反式维甲酸对食管癌EC9706细胞NDRG1 mRNA和蛋白表达的影响 被引量：3
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作者 贺付成 高冬玲 +5 位作者 陈奎生 李惠翔 张岚 张红新 张三申 张云汉 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第3期398-401,共4页
目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对食管癌细胞分化相关基因NDRG1表达的影响。方法:将10μmol/L ATRA作用于人食管癌EC9706细胞,应用免疫组织化学SP法和RT PCR方法分别检测对照组及ATRA作用1d、2d、3d及5d组NDRG1蛋白和mRNA的表达。结果:ATR... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对食管癌细胞分化相关基因NDRG1表达的影响。方法:将10μmol/L ATRA作用于人食管癌EC9706细胞,应用免疫组织化学SP法和RT PCR方法分别检测对照组及ATRA作用1d、2d、3d及5d组NDRG1蛋白和mRNA的表达。结果:ATRA作用1d、2d、3d及5d组NDRG1mRNA相对含量分别为1.47±0.18、1.69±0.24、1.72±0.19和1.58±0.25,均高于对照组的1.08±0.10(P<0.05或0.01)。ATRA作用1d、2d、3d及5d组NDRG1蛋白表达积分分别为254±37、277±34、265±30和239±24,均高于对照组的164±29(P<0.01)。结论:ATRA可上调EC9706细胞分化相关基因NDRG1的表达,从而促进其分化。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 NDRG1 全反式维甲酸 ec9706细胞
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肝素酶反义寡核苷酸转染的人食管癌EC9706细胞中肝素酶mRNA的表达 被引量：3
12
作者 陈奎生 张岚 +4 位作者 唐琳 张云汉 高冬玲 阎亮 张蕾 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第2期181-183,共3页
目的:探讨肝素酶反义寡核苷营酸对肝毒酶mRNA表达的影响。方法:食管癌EC9706细胞分6组培养,5组分别用设计合成的4条封闭肝素酶不同基因位点的反义寡核苷酸(ASODN1、ASODN2、ASODN3、ASODN4)及1条无关寡核苷酸(N-ODN)转染,另1组不转染。... 目的:探讨肝素酶反义寡核苷营酸对肝毒酶mRNA表达的影响。方法:食管癌EC9706细胞分6组培养,5组分别用设计合成的4条封闭肝素酶不同基因位点的反义寡核苷酸(ASODN1、ASODN2、ASODN3、ASODN4)及1条无关寡核苷酸(N-ODN)转染,另1组不转染。采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中肝素酶mR-NA表达情况。结果:4条肝素酶反义寡核苷酸转染的EC9706细胞中肝素酶mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),但均显著低于无关寡核苷酸组(P<0.05)。结论:肝素酶反义寡核苷酸序列可抑制食管癌EC9706细胞中肝素酶mRNA表达。 展开更多
关键词 肝素酶 食管肿瘤 癌 ec9706细胞系 反义寡核苷酸
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IL-21增强CIK细胞对食管癌EC9706细胞的杀伤作用及其可能的机制 被引量：3
13
作者 肖鹏 冯睿婷 +1 位作者 梅家转 赵继智 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1266-1270,共5页
目的:探讨细胞因子IL-21对CIK细胞体外杀伤食管癌EC9706细胞活性的影响,并初步分析其可能的分子机制。方法:体外无菌分离人外周血单个核细胞,分别进行常规培养和加IL-21培养CIK细胞。流式细胞术检测2种培养CIK细胞的免疫表型,LDH释放法... 目的:探讨细胞因子IL-21对CIK细胞体外杀伤食管癌EC9706细胞活性的影响,并初步分析其可能的分子机制。方法:体外无菌分离人外周血单个核细胞,分别进行常规培养和加IL-21培养CIK细胞。流式细胞术检测2种培养CIK细胞的免疫表型,LDH释放法检测2种培养CIK细胞杀伤食管癌EC9706的活性,ELISA法检测2种CIK细胞培养上清液IFN-γ浓度。结果:常规培养和加IL-21培养的2种CIK细胞增殖数量无明显差异。加IL-21培养的CIK细胞CD3^+CD56^+细胞比例、CD3^+细胞内颗粒酶B和穿孔素表达率均显著高于常规培养CIK细胞[(26.95±3.53)%vs(16.18±1.04)%,(33.29±2.30)%vs(23.58±2.28)%和(59.70±1.91)%vs(45.96±2.67)%,均P<0.05)。效靶比20∶1和30∶1时,加IL-21培养的CIK细胞杀伤EC9706细胞的活性均显著高于常规培养的CIK细胞[20∶1时:(43.66±1.99)%vs(34.59±1.75)%;30∶1时:(57.52±2.15)%vs(42.23±1.87)%,均P<0.05]。加IL-21培养CIK细胞的上清液FN-γ的浓度明显高于常规培养CIK细胞的上清液[(142.7±13.4)vs(42.6±3.3)ng/L,P<0.05]。结论:IL-21增加CD3+CD56+细胞比例和颗粒酶B及穿孔素的表达,提高CIK细胞分泌IFN-γ,从而增强CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性。 展开更多
关键词 食管癌 细胞因子诱导的杀伤细胞 白介素-21 穿孔素 颗粒酶B ec9706细胞
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人端粒酶RNA反义寡核苷酸诱导食管癌EC9706细胞凋亡观察 被引量：1
14
作者 张蕾 耿丽 +2 位作者 高冬玲 温洪涛 张云汉 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第3期410-412,共3页
目的:观察人端粒酶RNA功能区的硫代修饰性反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用。方法:应用20μmol/LASODN1次/d、连续7d转染EC9706细胞,分别于转染前及转染后第1d、3d、5d、7d采用端粒酶活性的定性及定量检测技术测定A... 目的:观察人端粒酶RNA功能区的硫代修饰性反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用。方法:应用20μmol/LASODN1次/d、连续7d转染EC9706细胞,分别于转染前及转染后第1d、3d、5d、7d采用端粒酶活性的定性及定量检测技术测定ASODN对EC9706细胞增殖及端粒酶活性的抑制作用,采用细胞DNA凋亡条带检测、TUNEL检测及吖啶橙荧光染色法观察细胞的凋亡情况。结果:与转染前比较,ASODN转染后各时点EC9706细胞端粒酶活性降低,凋亡细胞增多(P<0.05或0.01)。转染后第3d开始出现DNA凋亡条带,第7d出现从靠近加样孔处向远端延伸的相差180～200bp的十几条DNA凋亡条带。结论:ASODN可通过抑制EC9706细胞端粒酶活性诱导肿瘤细胞凋亡,从而抑制食管癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 ec9706细胞 反义寡核苷酸 端粒酶 凋亡 体外
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人食管癌EC9706细胞中Gadd45α基因的表达
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作者 王珍珍 刘冬梅 +1 位作者 王刚 李国文 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第5期844-845,共2页
关键词 Gadd45α基因 食管癌 ec9706细胞
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不同组织成分对人食管癌EC9706细胞分泌MMP-2和MMP-9的影响
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作者 温洪涛 张蕾 +1 位作者 李继昌 张云汉 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第3期423-425,共3页
目的:观察不同组织成分对人食管癌EC9706细胞分泌MMP-2、MMP-9的影响,探讨食管癌细胞转移的组织倾向性。方法:以不同质量浓度(6.25g/L、12.50g/L、25.00g/L和50.00g/L)正常人淋巴结、肺和肝脏组织匀浆分别与EC9706细胞共孵育24h,分别采... 目的:观察不同组织成分对人食管癌EC9706细胞分泌MMP-2、MMP-9的影响,探讨食管癌细胞转移的组织倾向性。方法:以不同质量浓度(6.25g/L、12.50g/L、25.00g/L和50.00g/L)正常人淋巴结、肺和肝脏组织匀浆分别与EC9706细胞共孵育24h,分别采用免疫组织化学及酶谱分析法检测EC9706细胞MMP-2、MMP-9蛋白的表达及培养上清中酶原型MMP-2(proMMP-2)、活性MMP-2、酶原型MMP9(proMMP-9)和活性MMP9的分泌。结果:正常人淋巴结组织匀浆与EC9706细胞共孵育液中活性MMP-2、proMMP-2和proMMP-9均高水平表达,并可检测到活性MMP-9的分泌。肺、肝脏组织匀浆孵育液中活性MMP-2、proMMP-2和proMMP-9的表达水平与淋巴结组织孵育组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。且3种组织均以剂量依赖方式诱导proMMP2、活性MMP2、proMMP9的产生(r=0.569～0.864)。结论:人正常淋巴结组织对人食管癌细胞分泌MMP2、MMP9的诱导作用强于肺和肝脏组织,淋巴结组织可能具有食管癌细胞淋巴结高转移性的特殊微环境。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞癌 ec9706细胞 MMP-2 MMP-9 淋巴结 肺组织 肝组织
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不同证候噎膈患者血清调控食管癌EC9706细胞PI3K/Akt/NF-κB信号通路差异分析 被引量：7
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作者 贾永森 林清 +5 位作者 秦丽娟 张艳丽 刘春秋 江春花 闫昕 曹慧娟 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第34期4261-4265,共5页
目的通过研究噎膈血瘀证、脾气虚证患者及健康人血清对食管癌EC9706细胞增殖、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核因子kappa B(NF-κB)信号通路相关分子mRNA及蛋白表达的调控,探讨噎膈血瘀证、脾气虚证的分子机制。方法本研究于2... 目的通过研究噎膈血瘀证、脾气虚证患者及健康人血清对食管癌EC9706细胞增殖、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核因子kappa B(NF-κB)信号通路相关分子mRNA及蛋白表达的调控,探讨噎膈血瘀证、脾气虚证的分子机制。方法本研究于2014年6—12月选择来源于唐山市人民医院、迁安燕山医院肿瘤内科的病理确诊的食管鳞癌患者。按照《中华人民共和国中医药行业标准——中医病症诊断疗效标准》确定噎膈血瘀证或脾气虚证标准,选取血瘀证、脾气虚证患者各10人,另选取健康志愿者10人(来自两院体检人员)。将EC9706细胞于37℃,5%饱和湿度的二氧化碳(CO2)培养箱孵育24 h,饥饿24 h,分别加入倍比梯度的噎膈血瘀证、脾气虚证患者和健康人血清,噻唑蓝(MTT)染色法检测细胞增殖变化;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测PI3K、Akt、NF-k B表达;免疫印迹(Western blot)法检测PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关分子蛋白表达。结果血瘀证患者血清刺激细胞的50%增殖率为71.1μl/ml,脾气虚证为118.0μl/ml;血瘀证患者血清上调细胞PI3K、Akt和NF-κB mRNA表达水平,与各对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),脾气虚证患者血清无上调mRNAs作用;血瘀证患者血清促进细胞表皮生长因子受体(EGFR)、PI3K、Akt、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)和NF-κB等蛋白表达水平增高,与各对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),脾气虚证患者血清无促进此五蛋白表达作用。结论噎膈血瘀证患者血清能够促进细胞增殖,该证候的分子机制可能与PI3K/Akt/NF-κB信号通路过度激活有关;脾气虚证患者血清无刺激细胞增殖作用,其证候分子机制有待探讨。 展开更多
关键词 食管肿瘤 血瘀证 脾气虚证 血清 ec9706细胞
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食管癌EC9706细胞中miR-149 rs140584242多态性对DNA聚合酶β表达的影响 被引量：1
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作者 张晓红 张文文 +1 位作者 臧文巧 赵国强 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2020年第3期327-330,共4页
目的:探讨食管癌EC9706细胞中miR-149 rs140584242(G→A)多态性对调控DNA聚合酶β(polβ)表达的影响。方法:分别合成野生型miR-149和rs140584242多态性miR-149,以miR-NC为对照。采用表面等离子共振实验、双荧光素酶报告实验和Western b... 目的:探讨食管癌EC9706细胞中miR-149 rs140584242(G→A)多态性对调控DNA聚合酶β(polβ)表达的影响。方法:分别合成野生型miR-149和rs140584242多态性miR-149,以miR-NC为对照。采用表面等离子共振实验、双荧光素酶报告实验和Western bolt法,分析多态性miR-149与polβ3’UTR结合能力的变化及对EC9706细胞中polβ蛋白表达的影响。结果:多态性miR-149与野生型polβ的结合力低于野生型miR-149(P<0.05)。多态性miR-149与野生型polβ3’UTR报告基因载体共转染的荧光素酶活性高于野生型miR-149(P<0.05)。多态性miR-149转染的EC9706细胞中polβ蛋白相对表达量高于野生型miR-149(P<0.05)。结论:在食管癌EC9706细胞中rs140584242多态性可导致miR-149对polβ表达的负调控作用丧失。 展开更多
关键词 食管癌 miR-149 DNA聚合酶Β ec9706细胞
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藤梨根提取物与奥沙利铂在诱导人食管癌细胞Ec9706细胞凋亡中的协同作用 被引量：9
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作者 党辉 关徐涛 +3 位作者 宋锐 王冰 王涛 高萍 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第2期286-289,共4页
目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微... 目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微镜在镜下观察食管癌细胞株的形态变化;并且对细胞的凋亡率和细胞周期使用流式技术进行检测,且对食管癌细胞Ec9706株应用免疫细胞化学技术检测中细胞株内Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平。结果:藤梨根提取物单用、奥沙利铂单用、以及联合应用均可对食管癌细胞Ec9706的增殖起到抑制作用。通过显微镜下观察食管癌细胞株发现Ec9706细胞的形态发生了改变,并且凋亡比率也显著增加;且藤梨根提取物与L-OHP连用后能起到协同增效的作用。而应用藤梨根提取物后食管癌细胞Ec9706中Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平均受到了抑制。连用L-OHP后两种蛋白的阳性率表达均进一步降低。结论:藤梨根正丁醇提取物能显著抑制人食管癌细胞Ec9706细胞的增殖并且与L-OHP联用可有协同增效的作用,抑制作用明显增强,可能机制与Bcl-2和Survivin蛋白的下调有关。 展开更多
关键词 藤梨根提取物 奥沙利铂 食管癌细胞ec9706细胞 BCL-2
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六君子汤对食管癌细胞株EC9706致血管生成的影响 被引量：9
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作者 周凌 尹素改 +2 位作者 吴耀松 王慧慧 陈玉龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1165-1169,共5页
目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的... 目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的观察。ELISA法检测EC9706细胞和人脐静脉内皮细胞培养基上清中VEGF和IL-6含有量。结果六君子汤醇提物可明显抑制EC9706细胞增殖,具一定剂量依赖性,其IC50值为505.28μg/m L。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞条件培养基所致鸡胚绒毛尿囊膜血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞和内皮细胞IL-6及内皮细胞VEGF分泌。结论六君子汤醇提物可能通过干预EC9706细胞信号通路从而抑制血管生成的效应。 展开更多
关键词 六君子汤 食管癌细胞株ec9706 人脐静脉内皮细胞 鸡胚绒毛尿囊膜 血管生成 VEGF IL-6
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