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转染NF-κB抑制物基因对食管癌细胞系生物活性的影响
被引量：
4
1
作者
李健
杜芳
+2 位作者
齐义军
冯常炜
王立东
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第19期1094-1097,共4页
目的:将NF-κB抑制物基因pcDNA3/mIκBαS32A/S36A转染食管癌细胞株EC1,观察对NF-κB因子活性及对细胞生长的影响。方法:采用脂质体转染法将pcDNA3/mIκBαS32A/S36A质粒转染入EC1细胞进行瞬时表达,检测其对EC1细胞的影响,用Westernblot...
目的:将NF-κB抑制物基因pcDNA3/mIκBαS32A/S36A转染食管癌细胞株EC1,观察对NF-κB因子活性及对细胞生长的影响。方法:采用脂质体转染法将pcDNA3/mIκBαS32A/S36A质粒转染入EC1细胞进行瞬时表达,检测其对EC1细胞的影响,用Westernblot和RT-PCR方法检测转染前后NF-κBp65、NF-κBp50蛋白和mRNA表达水平的变化。结果:与转染pcDNA3.0质粒和未转染质粒组比较,转染pcDNA3.0/mIκBαS32A/S36A质粒EC1细胞的生长速度受到明显抑制,P<0.05。转染pcDNA3/mIκBαS32A/S36A质粒的EC1细胞,在0、24、48、96小时未见NF-κBp65、NF-κBp50蛋白和mRNA表达,而转染pcDNA3.0质粒EC1细胞可见核内NF-κBp65和NF-κBp50蛋白表达。结论:转染NF-κB抑制物基因IκBα后可抑制EC1细胞的生长,并抑制细胞NF-κBp65、NF-κBp50基因的表达,该结果提示调节NF-κB的表达可能是食管癌基因治疗的靶点。
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关键词
核转录因子NF—kB
食管癌细胞系
质粒转染
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职称材料
纳米载体介导的hTERT反义核酸对食管癌细胞生物活性的影响
被引量：
1
2
作者
王白燕
张振中
+2 位作者
周天洋
张岚
李惠翔
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第23期1353-1358,共6页
目的:研究聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanoparticles,PBCA-NPs,NPs)介导的端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对食管癌细胞EC9...
目的:研究聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanoparticles,PBCA-NPs,NPs)介导的端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对食管癌细胞EC9706生物活性的影响。方法:采用乳化聚合法制备聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒作为转染寡核苷酸(SODN)的载体,利用激光粒度分析仪和原子力显微镜测定制备NPs的粒径及zeta电位;以NPs介导8条不同hTERTASODN(NPs-ASODNⅠ、NPs-ASODNⅡ、NPs-ASODNⅢ、NPs-ASODNⅣ、NPs-ASODNⅤ、NPs-ASODNⅥ、NPs-ASODNⅦ和NPs-ASODNⅧ)转染食管癌细胞EC9706,采用MTT法检测转染后对EC9706细胞增殖的影响;采用RT-PCR检测hTERTmRNA表达情况;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:所制NPs粒径均匀、zeta电位较高,较为理想;以NPs介导hTERTASODN转染24h时,EC9706细胞增殖被明显抑制,该抑制作用随转染时间的延长和浓度的增高依次增强,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05);且不同ASODN转染后对EC9706细胞抑制率不同。单纯NPs组、正义寡核苷酸NPs-SODN组和单纯ASODN组转染后对EC9706细胞增殖无明显抑制作用(P>0.05)。NPs-ASODN转染EC9706细胞72h时,hTERTmRNA表达水平明显降低,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05)。NPs-ASODN转染72h时,NPs-ASODNⅠ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ转染组EC9706细胞出现明显凋亡现象(P<0.05),而NPs-ASODNⅡ、Ⅲ、Ⅳ转染组EC9706细胞未发生明显的凋亡现象(P>0.05)。结论:聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒可以作为一种良好的基因载体,在其介导下hTERTASODN能有效抑制食管癌细胞EC9706的增殖和hTERTmRNA的表达,并能诱导细胞凋亡。提示该纳米粒作为一种新型纳米载体为食管癌的基因治疗提供了一条新的途径。这种抑制作用具有时间和浓度依赖性,并具有序列特异性,表明hTERT基因不同位点在端粒酶活性中所起的作用可能不同。
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关键词
纳米载体
HTERT
反义寡核苷酸
人
食管癌细胞系
EC9706
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职称材料
核酸及蛋白质合成、提取、纯化
3
《生物技术通报》
CAS
CSCD
1992年第11期20-21,共2页
关键词
蛋白质合成
大肠杆菌素
绿色木霉
DNA
人
食管癌细胞系
食管癌
细胞
碱基序列
Eppendorf
启动子
脉冲场凝胶电泳
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职称材料
题名
转染NF-κB抑制物基因对食管癌细胞系生物活性的影响
被引量：
4
1
作者
李健
杜芳
齐义军
冯常炜
王立东
机构
郑州大学第二附属医院消化内科
河南省食管癌重点开放实验室郑州大学医学实验中心癌症研究室
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第19期1094-1097,共4页
基金
国家杰出青年科学基金(编号:30025016)
河南省高校创新人才工程基金(编号:1999125)
+1 种基金
河南省医药卫生创新人才工程基金(编号:200084)
河南省食管癌重点开放实验室基金资助(编号:20050227)
文摘
目的:将NF-κB抑制物基因pcDNA3/mIκBαS32A/S36A转染食管癌细胞株EC1,观察对NF-κB因子活性及对细胞生长的影响。方法:采用脂质体转染法将pcDNA3/mIκBαS32A/S36A质粒转染入EC1细胞进行瞬时表达,检测其对EC1细胞的影响,用Westernblot和RT-PCR方法检测转染前后NF-κBp65、NF-κBp50蛋白和mRNA表达水平的变化。结果:与转染pcDNA3.0质粒和未转染质粒组比较,转染pcDNA3.0/mIκBαS32A/S36A质粒EC1细胞的生长速度受到明显抑制,P<0.05。转染pcDNA3/mIκBαS32A/S36A质粒的EC1细胞,在0、24、48、96小时未见NF-κBp65、NF-κBp50蛋白和mRNA表达,而转染pcDNA3.0质粒EC1细胞可见核内NF-κBp65和NF-κBp50蛋白表达。结论:转染NF-κB抑制物基因IκBα后可抑制EC1细胞的生长,并抑制细胞NF-κBp65、NF-κBp50基因的表达,该结果提示调节NF-κB的表达可能是食管癌基因治疗的靶点。
关键词
核转录因子NF—kB
食管癌细胞系
质粒转染
Keywords
Nuclear transcription factor kappa B Plasmids transfection Esophageal cancerous cell lines
分类号
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
纳米载体介导的hTERT反义核酸对食管癌细胞生物活性的影响
被引量：
1
2
作者
王白燕
张振中
周天洋
张岚
李惠翔
机构
河南中医学院基础医学院
郑州大学药学院
郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理重点实验室
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第23期1353-1358,共6页
基金
国家自然科学基金(编号:30371695)
国家自然科学基金专项基金资助(编号:90406024)~~
文摘
目的:研究聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanoparticles,PBCA-NPs,NPs)介导的端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对食管癌细胞EC9706生物活性的影响。方法:采用乳化聚合法制备聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒作为转染寡核苷酸(SODN)的载体,利用激光粒度分析仪和原子力显微镜测定制备NPs的粒径及zeta电位;以NPs介导8条不同hTERTASODN(NPs-ASODNⅠ、NPs-ASODNⅡ、NPs-ASODNⅢ、NPs-ASODNⅣ、NPs-ASODNⅤ、NPs-ASODNⅥ、NPs-ASODNⅦ和NPs-ASODNⅧ)转染食管癌细胞EC9706,采用MTT法检测转染后对EC9706细胞增殖的影响;采用RT-PCR检测hTERTmRNA表达情况;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:所制NPs粒径均匀、zeta电位较高,较为理想;以NPs介导hTERTASODN转染24h时,EC9706细胞增殖被明显抑制,该抑制作用随转染时间的延长和浓度的增高依次增强,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05);且不同ASODN转染后对EC9706细胞抑制率不同。单纯NPs组、正义寡核苷酸NPs-SODN组和单纯ASODN组转染后对EC9706细胞增殖无明显抑制作用(P>0.05)。NPs-ASODN转染EC9706细胞72h时,hTERTmRNA表达水平明显降低,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05)。NPs-ASODN转染72h时,NPs-ASODNⅠ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ转染组EC9706细胞出现明显凋亡现象(P<0.05),而NPs-ASODNⅡ、Ⅲ、Ⅳ转染组EC9706细胞未发生明显的凋亡现象(P>0.05)。结论:聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒可以作为一种良好的基因载体,在其介导下hTERTASODN能有效抑制食管癌细胞EC9706的增殖和hTERTmRNA的表达,并能诱导细胞凋亡。提示该纳米粒作为一种新型纳米载体为食管癌的基因治疗提供了一条新的途径。这种抑制作用具有时间和浓度依赖性,并具有序列特异性,表明hTERT基因不同位点在端粒酶活性中所起的作用可能不同。
关键词
纳米载体
HTERT
反义寡核苷酸
人
食管癌细胞系
EC9706
Keywords
Nanoparticle
hTERT
Antisense oligodeoxynucleotide
分类号
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
R943.4 [医药卫生—药剂学]
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职称材料
题名
核酸及蛋白质合成、提取、纯化
3
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
1992年第11期20-21,共2页
关键词
蛋白质合成
大肠杆菌素
绿色木霉
DNA
人
食管癌细胞系
食管癌
细胞
碱基序列
Eppendorf
启动子
脉冲场凝胶电泳
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转染NF-κB抑制物基因对食管癌细胞系生物活性的影响
李健
杜芳
齐义军
冯常炜
王立东
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
纳米载体介导的hTERT反义核酸对食管癌细胞生物活性的影响
王白燕
张振中
周天洋
张岚
李惠翔
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
核酸及蛋白质合成、提取、纯化
《生物技术通报》
CAS
CSCD
1992
0
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职称材料
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