六君子汤对食管癌细胞株EC9706致血管生成的影响 被引量：9

1

作者 周凌 尹素改 +2 位作者 吴耀松 王慧慧 陈玉龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1165-1169,共5页

目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的... 目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的观察。ELISA法检测EC9706细胞和人脐静脉内皮细胞培养基上清中VEGF和IL-6含有量。结果六君子汤醇提物可明显抑制EC9706细胞增殖,具一定剂量依赖性,其IC50值为505.28μg/m L。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞条件培养基所致鸡胚绒毛尿囊膜血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞和内皮细胞IL-6及内皮细胞VEGF分泌。结论六君子汤醇提物可能通过干预EC9706细胞信号通路从而抑制血管生成的效应。 展开更多

关键词 六君子汤 食管癌细胞株ec9706 人脐静脉内皮细胞 鸡胚绒毛尿囊膜 血管生成 VEGF IL-6

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健脾和胃法对食管癌细胞株EC9706移植瘤生长的抑制作用 被引量：20

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作者 吴耀松 金华彬 +5 位作者 陈玉龙 尹素改 任闪闪 王朋辉 尚艺婉 李晨旭 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第8期1836-1839,共4页

目的:通过观察健脾和胃法及其代表方六君子汤对裸鼠移植瘤的生长和组织中STAT3通路相关因子和蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法:用EC9706细胞皮下注射裸鼠制备移植瘤模型,实验分为:正常空白组(C组)、模型组(M组)、六君... 目的:通过观察健脾和胃法及其代表方六君子汤对裸鼠移植瘤的生长和组织中STAT3通路相关因子和蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法:用EC9706细胞皮下注射裸鼠制备移植瘤模型,实验分为:正常空白组(C组)、模型组(M组)、六君子汤组(L组)、抑制剂组(S组)、六君子汤加抑制剂组(L+S组),C、M组为空白对照组,灌服生理盐水和腹腔注射生理盐水;L组灌服六君子汤和腹腔注射生理盐水;S组灌服生理盐水和腹腔注射Stattic工作液;L+S组灌服六君子汤水煎液和腹腔注射Stattic工作液。4周后摘除眼球取血和移植瘤,ELISA检测血清中IL-6、VEGF含量;免疫组化检测移植瘤组织中CD34和VEGF表达;Western blot检测移植瘤组织细胞中JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结果:与模型组比较,六君子汤组肿瘤体积较小(P<0.05);各组移植瘤重量及组织中CD34表达均下降(P<0.05);血清中抑制剂组IL-6含量明显降低(P<0.05),其它各组没有明显差异;仅六君子汤组和抑制剂组中JAK2和STAT3表达下降(P<0.05),抑制剂组中p-STAT3明显降低(P<0.05),其它各组无明显差异。与抑制剂组比较,六君子汤组中CD34表达略高于抑制剂组(P<0.05),其它各组无明显差异;STAT3蛋白表达中六君子汤组表达降低(P<0.05),而联合抑制剂组则明显升高(P<0.05);p-STAT3表达中,六君子汤组和及其联合制剂组均明显升高(P<0.05)。与六君子汤组比较,除STAT3表达在联合抑制剂组表达有所增高(P<0.05)外,其它各组无明显差异。结论:健脾和胃法及其代表六君子汤可以抑制食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的生长,可能与下调移植瘤中CD34、JAK2、STAT3的表达有关。 展开更多

关键词 健脾和胃法 六君子汤 食管癌 ec9706细胞株 移植瘤

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通幽汤及拆方对食管癌EC9706细胞PI3K/AKT信号通路影响的研究 被引量：14

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作者 贾永森 吕翠田 +2 位作者 吴范武 杨雨旸 赵舒 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期1306-1308,共3页

目的:揭示通幽汤对食管癌抑制作用的细胞内分子机制,确定从功效分类的有效药物及瘀血内结证的分子本质。方法:体外培养食管鳞癌EC9706细胞,通幽汤及活血行气、滋阴养血拆方分别作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;以MTT法检测细胞... 目的:揭示通幽汤对食管癌抑制作用的细胞内分子机制,确定从功效分类的有效药物及瘀血内结证的分子本质。方法:体外培养食管鳞癌EC9706细胞,通幽汤及活血行气、滋阴养血拆方分别作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;以MTT法检测细胞抑制率,确定最佳药物浓度和作用时间;western blot法观察PI3K/AKT信号通路各蛋白表达变化情况。结果:通幽汤及活血行气拆方可显著抑制EC9706细胞增殖,48h作用最强,通幽汤全方IC50=1523μg.mL-1,活血行气拆方IC50=1001μg.mL-1;可抑制PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达,作用强弱依次为:活血行气拆方>通幽汤全方>滋阴养血拆方。结论:通幽汤抑制食管癌细胞增殖主要为活血行气类药物,根据"以方测证"理论,瘀血内结证与PI3K/AKT信号通路表达增强有关。 展开更多

关键词 通幽汤 拆方 食管癌 ec9706细胞 PI3K/AKT 方证

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藤梨根提取物与奥沙利铂在诱导人食管癌细胞Ec9706细胞凋亡中的协同作用 被引量：9

4

作者 党辉 关徐涛 +3 位作者 宋锐 王冰 王涛 高萍 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第2期286-289,共4页

目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微... 目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微镜在镜下观察食管癌细胞株的形态变化;并且对细胞的凋亡率和细胞周期使用流式技术进行检测,且对食管癌细胞Ec9706株应用免疫细胞化学技术检测中细胞株内Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平。结果:藤梨根提取物单用、奥沙利铂单用、以及联合应用均可对食管癌细胞Ec9706的增殖起到抑制作用。通过显微镜下观察食管癌细胞株发现Ec9706细胞的形态发生了改变,并且凋亡比率也显著增加;且藤梨根提取物与L-OHP连用后能起到协同增效的作用。而应用藤梨根提取物后食管癌细胞Ec9706中Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平均受到了抑制。连用L-OHP后两种蛋白的阳性率表达均进一步降低。结论:藤梨根正丁醇提取物能显著抑制人食管癌细胞Ec9706细胞的增殖并且与L-OHP联用可有协同增效的作用,抑制作用明显增强,可能机制与Bcl-2和Survivin蛋白的下调有关。 展开更多

关键词 藤梨根提取物 奥沙利铂 食管癌细胞ec9706细胞 BCL-2

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启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导的影响 被引量：12

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作者 吕翠田 司富春 陈玉龙 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第7期1455-1458,I0001,共5页

目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过... 目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过MTT染色观察细胞增殖变化,通过Western blot法检测Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路蛋白表达。结果:启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤的IC50值分别是1462、1232、2875μg/m L,均可促进Caspase-3蛋白表达而诱导细胞凋亡,而Cyt.C蛋白表达较弱;启膈散和沙参麦冬汤对FADD、Fas、TNFR1和DR5蛋白表达有不同程度地影响。结论:三方可通过激活Caspase-3诱导细胞凋亡,其中启膈散主要通过非依赖FADD死亡受体途径,沙参麦冬汤主要通过依赖FADD死亡受体途径,通幽汤可能通过其他凋亡蛋白参与的上游信号途径而激活Caspase-3致细胞凋亡。 展开更多

关键词 食管癌 ec9706细胞 细胞凋亡信号转导 启膈散 沙参麦冬汤 通幽汤

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eIF4E反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4EHPA表达的影响 被引量：1

6

作者 陈奎生 楚丽 +3 位作者 赵志华 李晟磊 高冬玲 张云汉 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第14期830-834,共5页

目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4E及肝素酶(HPA)蛋白、mRNA表达的影响,并观察其对EC9706细胞侵袭力的抑制效果。方法:针对eIF4E mRNA翻译起始区设计经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(ASODNS),经... 目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4E及肝素酶(HPA)蛋白、mRNA表达的影响,并观察其对EC9706细胞侵袭力的抑制效果。方法:针对eIF4E mRNA翻译起始区设计经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(ASODNS),经脂质体转染食管癌EC9706细胞,采用原位杂交、Western Blot和Boy-den chamber侵袭实验等方法检测抑制前后EC9706细胞中eIF4E及HPA表达情况及细胞侵袭力改变。结果:eIF4EASODNS转染食管癌EC9706细胞24、48、72h后,elF4E及HPA的mRNA与蛋白表达量均较对照组有所降低(P<0.05),且均以转染72h的抑制效应最为明显,在每个时间段内随剂量增加eIF4E ASODNS抑制效应明显增强(P<0.05);eIF4E ASODNS对HPA蛋白、mRNA表达的抑制效应和对eIF4E蛋白、mRNA表达的抑制效应,呈正相关关系(蛋白r=10.02,mRNA r=10.17,P均<0.01);eIF4E ASODNS体外转染食管癌EC9706细胞后,其穿越Matrigel的细胞数明显少于细胞对照组、空白对照组和无关对照组(P均<0.05)。结论:eIF4E ASODNS可抑制食管癌EC9706细胞中eIF4E、HPA蛋白及mRNA表达,且可抑制食管癌EC9706细胞的浸润转移。该研究结果为临床治疗食管癌等恶性肿瘤浸润转移奠定一定的理论基础。 展开更多

关键词 真核细胞起始因子4E 反义寡核苷酸 人食管癌ec9706细胞株 肝素酶 转染

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Bcl-XL 反义寡核苷酸对食管癌 EC9706细胞和裸鼠移植瘤组织的诱凋亡作用 被引量：3

7

作者 张岚 高冬玲 +1 位作者 温洪涛 张蕾 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第2期146-149,共4页

目的:探讨Bcl-XL反义寡核苷酸(Bcl-XL ASODN)对食管癌EC9706细胞和人食管癌裸鼠移植瘤组织的诱凋亡作用。方法:将合成的Bcl-XL ASODN通过阳离子脂质体介导转染EC9706细胞后,以吖啶橙荧光染色、流式细胞术和TUNEL技术检测ASODN组、细胞... 目的:探讨Bcl-XL反义寡核苷酸(Bcl-XL ASODN)对食管癌EC9706细胞和人食管癌裸鼠移植瘤组织的诱凋亡作用。方法:将合成的Bcl-XL ASODN通过阳离子脂质体介导转染EC9706细胞后,以吖啶橙荧光染色、流式细胞术和TUNEL技术检测ASODN组、细胞对照组、空白对照组和N-ODN组的凋亡率;用TUNEL技术检测ASODN组、N-ODN组和细胞对照组裸鼠移植瘤组织的细胞凋亡率。结果:吖啶橙荧光染色、流式细胞术和TUNEL检测结果显示,ASODN组、N-ODN组、空白对照组和细胞对照组的凋亡率比较,差异均有统计学意义(F=26.853、38.537、28.541,P均<0.001);且ASODN组的凋亡率均高于细胞对照组、空白对照组和N-ODN组(P均<0.05);TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡率结果显示,细胞对照组、N-ODN组及ASODN组的凋亡率比较,差异有统计学意义(F=56.375,P<0.001);且ASODN组高于细胞对照组及N-ODN组(P均<0.05)。结论:Bcl-XL ASODN对食管癌EC9706细胞及食管癌裸鼠移植瘤组织均有诱凋亡作用。 展开更多

关键词 食管癌 凋亡 Bcl—XL 反义寡核苷酸 ec9706细胞 裸鼠

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顺铂增强食管癌相关基因2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用 被引量：5

8

作者 宋海岩 邓晓慧 孙春莉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期290-293,共4页

目的:探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer-related gene 2,ECRG2)蛋白联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗对人食管癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法分别检测单用ECRG2蛋白和ECRG2蛋白联合顺铂对EC9706细胞增殖的影响;采用Hoe... 目的:探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer-related gene 2,ECRG2)蛋白联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗对人食管癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法分别检测单用ECRG2蛋白和ECRG2蛋白联合顺铂对EC9706细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色法检测二者对EC9706细胞凋亡的影响;Westernblotting检测二者对EC9706细胞中p53蛋白表达的影响。结果:MTT结果显示,ECRG2蛋白可抑制EC9706细胞增殖,ECRG2蛋白和DDP联用后抑制细胞增殖作用增强,且在一定浓度范围内呈时间、剂量依赖关系。Hoechst33258染色显示,ECRG2蛋白和DDP联合作用24 h后EC9706细胞凋亡数目多于单用ECRG2蛋白。Western blot-ting结果提示ECRG2蛋白和DDP联合用药较单用ECRG2蛋白明显上调p53蛋白的表达。结论:DDP可增强ECRG2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,其增强诱导EC9706细胞凋亡的机制可能与上调p53蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 食管癌相关基因2 顺铂 细胞增殖 细胞凋亡 ec9706细胞

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IL-21增强CIK细胞对食管癌EC9706细胞的杀伤作用及其可能的机制 被引量：3

9

作者 肖鹏 冯睿婷 +1 位作者 梅家转 赵继智 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1266-1270,共5页

目的:探讨细胞因子IL-21对CIK细胞体外杀伤食管癌EC9706细胞活性的影响,并初步分析其可能的分子机制。方法:体外无菌分离人外周血单个核细胞,分别进行常规培养和加IL-21培养CIK细胞。流式细胞术检测2种培养CIK细胞的免疫表型,LDH释放法... 目的:探讨细胞因子IL-21对CIK细胞体外杀伤食管癌EC9706细胞活性的影响,并初步分析其可能的分子机制。方法:体外无菌分离人外周血单个核细胞,分别进行常规培养和加IL-21培养CIK细胞。流式细胞术检测2种培养CIK细胞的免疫表型,LDH释放法检测2种培养CIK细胞杀伤食管癌EC9706的活性,ELISA法检测2种CIK细胞培养上清液IFN-γ浓度。结果:常规培养和加IL-21培养的2种CIK细胞增殖数量无明显差异。加IL-21培养的CIK细胞CD3^+CD56^+细胞比例、CD3^+细胞内颗粒酶B和穿孔素表达率均显著高于常规培养CIK细胞[(26.95±3.53)%vs(16.18±1.04)%,(33.29±2.30)%vs(23.58±2.28)%和(59.70±1.91)%vs(45.96±2.67)%,均P<0.05)。效靶比20∶1和30∶1时,加IL-21培养的CIK细胞杀伤EC9706细胞的活性均显著高于常规培养的CIK细胞[20∶1时:(43.66±1.99)%vs(34.59±1.75)%;30∶1时:(57.52±2.15)%vs(42.23±1.87)%,均P<0.05]。加IL-21培养CIK细胞的上清液FN-γ的浓度明显高于常规培养CIK细胞的上清液[(142.7±13.4)vs(42.6±3.3)ng/L,P<0.05]。结论:IL-21增加CD3+CD56+细胞比例和颗粒酶B及穿孔素的表达,提高CIK细胞分泌IFN-γ,从而增强CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性。 展开更多

关键词 食管癌 细胞因子诱导的杀伤细胞 白介素-21 穿孔素 颗粒酶B ec9706细胞

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辛伐他汀对食管癌EC9706细胞增殖及核因子κB的影响 被引量：1

10

作者 金伟 董涛 +2 位作者 栾春艳 赵存新 张银华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期789-791,795,共4页

目的:探讨辛伐他汀对人食管癌EC9706细胞增殖及核因子κB表达的影响。方法:培养食管癌EC9706细胞株,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测辛伐他汀在不同浓度和不同作用时间下对人食管癌EC9706细胞增殖的影响,透射电镜、激光共聚焦显微镜... 目的:探讨辛伐他汀对人食管癌EC9706细胞增殖及核因子κB表达的影响。方法:培养食管癌EC9706细胞株,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测辛伐他汀在不同浓度和不同作用时间下对人食管癌EC9706细胞增殖的影响,透射电镜、激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪检测辛伐他汀对肿瘤细胞凋亡率和细胞周期的影响,免疫组化技术研究辛伐他汀对人食管癌EC9706细胞NF-κB表达的影响。结果:二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法证实辛伐他汀在0～20μmol/L浓度区间内,随浓度增加和时间的延长,辛伐他汀对食管癌EC9706细胞的抑制率逐渐增加。透射电镜、激光共聚焦显微镜下可见细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。流式细胞仪检测细胞凋亡率,细胞周期阻滞于G_0/G_1期。不同浓度(0,5,10,20μmol/L)辛伐他汀与EC9706细胞作用72h,NF-κB胞核染色阳性率(%)分别为(46.2±5.0,38.3±4.8,30.8±4.0,23.4±2.1)(P<0.05,P<0.01),以及20μmol/L的辛伐他汀与EC9706作用不同时间(0,24,48,72h)后,NF-κB胞核染色阳性率(%)分别为(37.8±2.8,31.6±2.6,25.6±2.2,16.8±2.0)(P<0.05,P<0.01)。随着辛伐他汀作用浓度增加和作用时间延长,食管癌EC9706细胞NF-κB的表达逐渐降低。结论:辛伐他汀对食管癌EC9706细胞的增殖具有显著抑制作用,且与辛伐他汀的浓度和作用时间呈正相关,其作用机制可能与通过抑制食管癌EC9706细胞NF-κB的表达而使细胞发生凋亡有关。 展开更多

关键词 辛伐他汀食管癌ec9706细胞NF-κB细胞凋亡

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盐酸胺碘酮对人食管癌细胞EC9706增殖的影响

11

作者 朱少平 毛志福 +1 位作者 黄杰 王君钰 《医药导报》 CAS 2009年第2期155-157,共3页

目的研究盐酸胺碘酮体外对人食管癌细胞株EC9706增殖及细胞周期分布的影响，了解盐酸胺碘酮的新药理用途。方法应用MTT法检测经不同浓度盐酸胺碘酮或氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-Fu）作用后，EC9706细胞的增殖特点，并采用流式细胞检... 目的研究盐酸胺碘酮体外对人食管癌细胞株EC9706增殖及细胞周期分布的影响，了解盐酸胺碘酮的新药理用途。方法应用MTT法检测经不同浓度盐酸胺碘酮或氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-Fu）作用后，EC9706细胞的增殖特点，并采用流式细胞检测技术（FCM）测定EC9706细胞周期分布的特点。结果EC9706细胞经盐酸胺碘酮（浓度范围0．5—4．5μg·mL^-1）作用后，细胞生长受到显著抑制，并呈现明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系。盐酸胺碘酮组与空白对照组比较，抑制率及细胞周期分布特点相关参数差异有极显著性（P〈0．01），而与5-Fu干预组相比，二者之间差异无显著性。同时盐酸胺碘酮使细胞周期分布发生明显变化，表现为S期细胞比例下降，G0/G1期和G2／M期细胞比例上升，与5-Fu干预组呈相似的趋势。结论盐酸胺碘酮在体外能抑制食管癌EC9706细胞增殖，并呈现出明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系。 展开更多

关键词 胺碘酮 盐酸 食管癌 ec9706

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人食管癌EC9706细胞中Gadd45α基因的表达

12

作者 王珍珍 刘冬梅 +1 位作者 王刚 李国文 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第5期844-845,共2页

关键词 Gadd45α基因 食管癌 ec9706细胞

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利用pTet-Off系统研究NAIF1对食管癌细胞系EC9706生物学行为的影响

13

作者 罗清 钟佳玲 +4 位作者 赵玫 马怡茗 刘健 王佳 黄常志 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期162-165,共4页

目的:利用pTet-off可诱导表达系统将NAIF1重组质粒导入食管癌EC9706中进行生物学行为影响研究。方法:构建pTRE2-NAIF1质粒,与PTK-Hyg质粒共转染入可诱导表达细胞系TF93(由EC9706构建而得),经筛选并鉴定获得稳定可诱导表达克隆。以此克... 目的:利用pTet-off可诱导表达系统将NAIF1重组质粒导入食管癌EC9706中进行生物学行为影响研究。方法:构建pTRE2-NAIF1质粒,与PTK-Hyg质粒共转染入可诱导表达细胞系TF93(由EC9706构建而得),经筛选并鉴定获得稳定可诱导表达克隆。以此克隆采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞术(FCM)检测细胞周期、Transwell小室法检测细胞迁移和检测细胞黏附能力的改变。结果:经筛选并鉴定获得了稳定的可诱导表达TF93-pTRE2-NAIF1克隆。NAIF1在体外可以抑制EC9706细胞增殖、导致G0/G1期细胞阻滞、抑制其迁移和黏附能力。结论:NAIF1能抑制食管癌细胞系EC9706的恶性生物学行为,为食管癌的基因治疗提供了可能的新靶点。 展开更多

关键词 NAIF1 食管癌 ec9706 pTet-Off可诱导表达系统

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丹参酮ⅡA通过调控上皮间质转化抑制食管癌EC9706和KYSE70细胞的凋亡、侵袭和迁移 被引量：11

14

作者 周鹏飞 李娟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1244-1250,共7页

目的:探讨丹参酮ⅡA对食管癌EC9706和KYSE70细胞侵袭和迁移的影响及其调控机制。方法:食管癌细胞系EC9706和KYSE70培养完成后分为4组:对照组(加DMSO)和2、4、6μg/ml丹参酮组。采用CCK-8法检测EC9706和KYSE70细胞增殖活力,流式细胞术检... 目的:探讨丹参酮ⅡA对食管癌EC9706和KYSE70细胞侵袭和迁移的影响及其调控机制。方法:食管癌细胞系EC9706和KYSE70培养完成后分为4组:对照组(加DMSO)和2、4、6μg/ml丹参酮组。采用CCK-8法检测EC9706和KYSE70细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,qRT-PCR和Western blotting实验检测EMT相关蛋白E-cadherin、Snail-2、Vimentin和N-cadherin mRNA和蛋白表达水平。结果:小于6μg/ml的丹参酮ⅡA不影响食管癌EC9706和KYSE70细胞增殖活力;4、6μg/ml丹参酮ⅡA组细胞凋亡率明显高于对照组(均P<0.01);2、4、6μg/ml丹参酮组每个视野下的侵袭细胞数及划痕愈合率明显低于对照组(均P<0.01),且EC9706和KYSE70细胞形态由纺锤状的间充质形态转变为上皮形态。与对照组相比,2、4、6μg/ml丹参酮组E-cadherin表达明显升高,Snail-2、Vimentin和N-cadherin表达明显下降(均P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA通过抑制EMT促进食管癌EC9706和KYSE70细胞凋亡,并减弱其侵袭和迁移能力。 展开更多

关键词 丹参酮ⅡA 食管癌 ec9706细胞 KYSE70细胞 上皮间质转化 凋亡 侵袭 迁移

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食管癌EC9706细胞中miR-149 rs140584242多态性对DNA聚合酶β表达的影响 被引量：1

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作者 张晓红 张文文 +1 位作者 臧文巧 赵国强 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2020年第3期327-330,共4页

目的:探讨食管癌EC9706细胞中miR-149 rs140584242(G→A)多态性对调控DNA聚合酶β(polβ)表达的影响。方法:分别合成野生型miR-149和rs140584242多态性miR-149,以miR-NC为对照。采用表面等离子共振实验、双荧光素酶报告实验和Western b... 目的:探讨食管癌EC9706细胞中miR-149 rs140584242(G→A)多态性对调控DNA聚合酶β(polβ)表达的影响。方法:分别合成野生型miR-149和rs140584242多态性miR-149,以miR-NC为对照。采用表面等离子共振实验、双荧光素酶报告实验和Western bolt法,分析多态性miR-149与polβ3’UTR结合能力的变化及对EC9706细胞中polβ蛋白表达的影响。结果:多态性miR-149与野生型polβ的结合力低于野生型miR-149(P<0.05)。多态性miR-149与野生型polβ3’UTR报告基因载体共转染的荧光素酶活性高于野生型miR-149(P<0.05)。多态性miR-149转染的EC9706细胞中polβ蛋白相对表达量高于野生型miR-149(P<0.05)。结论:在食管癌EC9706细胞中rs140584242多态性可导致miR-149对polβ表达的负调控作用丧失。 展开更多

关键词 食管癌 miR-149 DNA聚合酶Β ec9706细胞

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PTEN基因表达对EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响 被引量：13

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作者 黄丽艳 王娜 +4 位作者 汤黎明 许燕 黄幼田 杨红艳 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期16-20,共5页

目的:观察PTEN基因表达水平的变化对食管癌EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响。方法:构建2个靶向PTEN的siRNA载体及1个PTEN表达载体,分别转染EC9706细胞。实验分沉默1组、沉默2组、siRNA载体对照组、PTEN表达组、表达载体对照组和... 目的:观察PTEN基因表达水平的变化对食管癌EC9706细胞增殖、侵袭、凋亡能力的影响。方法:构建2个靶向PTEN的siRNA载体及1个PTEN表达载体,分别转染EC9706细胞。实验分沉默1组、沉默2组、siRNA载体对照组、PTEN表达组、表达载体对照组和未转染组。RT-PCR、Westernblot法检测转染后各组细胞PTEN基因mRNA和蛋白表达水平。采用CCK-8试验、软琼脂克隆形成实验、流式细胞术和Transwell试验分别检测各组细胞增殖、克隆形成能力、细胞凋亡率及侵袭能力。结果:与未转染组比较,沉默1组、沉默2组PTENmRNA和蛋白表达量均降低,PTEN表达组PTENmRNA相对表达量升高(F=25.762,P<0.001);与未转染组比较,PTEN表达组细胞软琼脂克隆形成数和穿透细胞数均降低,细胞凋亡率增加(F=50.752、29.981、32.193,P均<0.001)。结论:上调PTEN的表达水平可以有效抑制EC9706细胞的增殖、克隆形成和侵袭转移能力,同时促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 PTEN ec9706 细胞增殖 细胞侵袭 凋亡 食管癌

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EC9706和Eca109细胞中雷帕霉素靶蛋白信号通路激活状态观察 被引量：11

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作者 侯桂琴 范天黎 +4 位作者 鲁照明 刘兰琦 许培荣 薛乐勋 王建人 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第2期223-225,共3页

目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态。方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和West... 目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态。方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和Westernblot方法分别从mRNA及蛋白水平检测此通路的活性。结果:在2种细胞中mTOR均有表达,且在EC9706细胞中的表达水平高于Eca109(P<0.05);EC9706细胞中mTOR下游靶点的磷酸化水平高于Eca109细胞(P<0.05)。结论:在2种食管鳞癌细胞中,mTOR信号通路均特异性激活;但激活状态与细胞的分化程度有关,细胞分化程度低者通路的激活水平较高。 展开更多

关键词 食管癌 雷帕霉素靶蛋白 p70S6激酶 ec9706细胞 ecA109细胞

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BTI基因转染诱导EC9706细胞凋亡及G_1阻滞 被引量：2

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作者 李玉英 田欣 +1 位作者 张政 王转花 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期362-368,共7页

为了研究荞麦胰蛋白酶抑制剂(buckwheat trypsin inhibitor,BTI)对肿瘤细胞凋亡与细胞周期的影响,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与BTI融合蛋白真核表达质粒.将BTI基因成功克隆至pEGFP-N1中转染食管癌EC9706细胞后,激光共聚焦显微镜镜检... 为了研究荞麦胰蛋白酶抑制剂(buckwheat trypsin inhibitor,BTI)对肿瘤细胞凋亡与细胞周期的影响,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与BTI融合蛋白真核表达质粒.将BTI基因成功克隆至pEGFP-N1中转染食管癌EC9706细胞后,激光共聚焦显微镜镜检显示,BTI-EGFP获得良好表达.表达的融合蛋白大部分分布于细胞核,在细胞质中有少量分布.Western印迹检测可见约27kD和36 kD的特异性条带.流式细胞术分析结果显示,BTI能够诱导EC9706细胞发生凋亡,并使细胞停滞于G0/G1期. 展开更多

关键词 荞麦胰蛋白酶抑制剂 绿色荧光蛋白 食管癌ec9706细胞 细胞周期 凋亡

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纳米载体介导的hTERT反义核酸对食管癌细胞生物活性的影响 被引量：1

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作者 王白燕 张振中 +2 位作者 周天洋 张岚 李惠翔 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期1353-1358,共6页

目的:研究聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanoparticles,PBCA-NPs,NPs)介导的端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对食管癌细胞EC9... 目的:研究聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanoparticles,PBCA-NPs,NPs)介导的端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对食管癌细胞EC9706生物活性的影响。方法:采用乳化聚合法制备聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒作为转染寡核苷酸(SODN)的载体,利用激光粒度分析仪和原子力显微镜测定制备NPs的粒径及zeta电位;以NPs介导8条不同hTERTASODN(NPs-ASODNⅠ、NPs-ASODNⅡ、NPs-ASODNⅢ、NPs-ASODNⅣ、NPs-ASODNⅤ、NPs-ASODNⅥ、NPs-ASODNⅦ和NPs-ASODNⅧ)转染食管癌细胞EC9706,采用MTT法检测转染后对EC9706细胞增殖的影响;采用RT-PCR检测hTERTmRNA表达情况;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:所制NPs粒径均匀、zeta电位较高,较为理想;以NPs介导hTERTASODN转染24h时,EC9706细胞增殖被明显抑制,该抑制作用随转染时间的延长和浓度的增高依次增强,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05);且不同ASODN转染后对EC9706细胞抑制率不同。单纯NPs组、正义寡核苷酸NPs-SODN组和单纯ASODN组转染后对EC9706细胞增殖无明显抑制作用(P>0.05)。NPs-ASODN转染EC9706细胞72h时,hTERTmRNA表达水平明显降低,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05)。NPs-ASODN转染72h时,NPs-ASODNⅠ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ转染组EC9706细胞出现明显凋亡现象(P<0.05),而NPs-ASODNⅡ、Ⅲ、Ⅳ转染组EC9706细胞未发生明显的凋亡现象(P>0.05)。结论:聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒可以作为一种良好的基因载体,在其介导下hTERTASODN能有效抑制食管癌细胞EC9706的增殖和hTERTmRNA的表达,并能诱导细胞凋亡。提示该纳米粒作为一种新型纳米载体为食管癌的基因治疗提供了一条新的途径。这种抑制作用具有时间和浓度依赖性,并具有序列特异性,表明hTERT基因不同位点在端粒酶活性中所起的作用可能不同。 展开更多

关键词 纳米载体 HTERT 反义寡核苷酸 人食管癌细胞系ec9706

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5-杂氮-2’-脱氧胞苷和5-氟尿嘧啶对食管癌细胞系中E-Cadherin和TIMP3基因甲基化状态及蛋白表达的影响 被引量：1

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作者 李沛 赵璇 +3 位作者 马俊芬 赵继敏 杨洪艳 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第5期719-723,共5页

目的:观察去甲基化药物5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和5-氟尿嘧啶(5-FU)对食管癌细胞系EC1和EC9706(均存在E-Cadherin甲基化改变和TIMP3基因未发生甲基化改变)中2种基因甲基化状态及蛋白表达的影响。方法:用5-Aza-CdR和5-FU分别作用... 目的:观察去甲基化药物5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和5-氟尿嘧啶(5-FU)对食管癌细胞系EC1和EC9706(均存在E-Cadherin甲基化改变和TIMP3基因未发生甲基化改变)中2种基因甲基化状态及蛋白表达的影响。方法:用5-Aza-CdR和5-FU分别作用于EC1和EC9706细胞,应用甲基化特异性PCR检测2种药物处理前后细胞中E-Cadherin基因和TIMP3基因的甲基化状态,应用免疫细胞化学方法检测TIMP3和E-Cadherin蛋白的表达。结果:5-Aza-CdR或5-FU处理后两种食管癌细胞系中TIMP3基因仍为非甲基化;5-Aza-CdR作用后,两种食管癌细胞系中E-Cadherin基因的甲基化状态发生了逆转,而5-FU作用后,E-Cadherin基因的甲基化状态无改变。EC1和EC9706经5-Aza-CdR处理后TIMP3蛋白表达无改变,而经5-FU处理后表达增强(P<0.05),EC1和EC9706经两种药物处理后E-Cadherin蛋白表达均增强(F=116.835、119.628、191.700和210.532,P<0.001)。结论:5-Aza-CdR能够有效逆转EC1和EC9706细胞中E-Cadherin基因甲基化状态,并使其蛋白恢复表达;对TIMP3基因的甲基化状态和蛋白表达影响不大。 展开更多

关键词 食管癌 甲基化 5-杂氮-2’-脱氧胞苷 5-氟尿嘧啶 E-CADHERIN TIMP3 ec1 ec9706

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