常见食源性病原菌的快速检测技术研究进展 被引量：6

1

作者 俞佳 岑叶平 +1 位作者 江玲丽 高有领 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期123-133,共11页

食源性病原菌广泛存在于自然环境中,可通过肉类、海产品、奶制品等多种媒介传播,引起食源性疾病的发生。目前检测食源性病原菌的方法主要以平板培养辅以生化鉴定和血清型鉴定为主,检测的周期较长,效率较低,因此建立快速、精准的食源性... 食源性病原菌广泛存在于自然环境中,可通过肉类、海产品、奶制品等多种媒介传播,引起食源性疾病的发生。目前检测食源性病原菌的方法主要以平板培养辅以生化鉴定和血清型鉴定为主,检测的周期较长,效率较低,因此建立快速、精准的食源性病原菌检测方法对常见病原菌的现场检测及疾病的快速诊断尤为重要。本文对近年来常见食源性病原菌的快速检测方法进行了概述,主要包括免疫学检测手段、分子生物学检测方法和生物传感器检测技术,比较其优缺点,着重介绍了可以实现现场检测与实时检测的新兴技术:核酸-微流控检测技术,以期为常见食源性病原菌的预防与检测提供相关理论参考。 展开更多

关键词 食源性病原菌 食品安全 快速检测 核酸-微流控检测技术

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基于PCR技术的植物病原菌分子定量检测技术研究进展 被引量：14

2

作者 曹学仁 周益林 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期7-11,32,共6页

植物病原菌的菌源量是病害发生和流行的重要因子之一,对其精准的定量测定或检测可大大提高植物病害预测的准确性,本文对实时荧光定量PCR(qPCR)与数字PCR在植物病原菌定量检测、以及基于RNA水平的real-time PCR和基于核酸染料(EMA/PMA)与... 植物病原菌的菌源量是病害发生和流行的重要因子之一,对其精准的定量测定或检测可大大提高植物病害预测的准确性,本文对实时荧光定量PCR(qPCR)与数字PCR在植物病原菌定量检测、以及基于RNA水平的real-time PCR和基于核酸染料(EMA/PMA)与qPCR相结合的技术在植物病原菌活体定量检测中的应用进行了综述,并展望其在植物病害流行和预测中的应用前景。 展开更多

关键词 植物病原菌 定量检测 实时定量PCR 数字PCR 活体检测

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食源性病原菌检测方法研究进展 被引量：15

3

作者 孙晓飞 赵凯 +3 位作者 王金斌 谭芙蓉 祁保民 唐雪明 《现代农业科技》 2010年第14期334-336,共3页

食品中的病原微生物是影响食品安全的主要因素之一,传统检测食源性病原菌的方法繁琐复杂、周期较长,随着分子生物学技术和微电子技术等的发展,快速、简便、特异的检测方法成为研究目标。介绍并分析了几种检测食源性病原菌的方法及其特点... 食品中的病原微生物是影响食品安全的主要因素之一,传统检测食源性病原菌的方法繁琐复杂、周期较长,随着分子生物学技术和微电子技术等的发展,快速、简便、特异的检测方法成为研究目标。介绍并分析了几种检测食源性病原菌的方法及其特点,并就其发展历程和应用进行阐述。 展开更多

关键词 食源性病原菌 食品安全 检测方法

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报告噬菌体在食源性病原菌检测中的应用研究进展 被引量：1

4

作者 杨媛 陈庆森 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期630-633,共4页

由食源性病原菌造成的食物污染及中毒问题引起了人们的普遍关注。现存的检测方法存在着种种不足,不利于病原菌的成功快速检测,报告噬菌体作为一种快速准确的检测工具吸引了研究人员越来越多的关注。本文主要就应用于报告噬菌体检测技术... 由食源性病原菌造成的食物污染及中毒问题引起了人们的普遍关注。现存的检测方法存在着种种不足,不利于病原菌的成功快速检测,报告噬菌体作为一种快速准确的检测工具吸引了研究人员越来越多的关注。本文主要就应用于报告噬菌体检测技术中的报告系统及这一技术的应用现状与新进展进行综述。 展开更多

关键词 食源性病原菌 快速检测 报告噬菌体

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噬菌体在检测食源性病原菌中的应用研究进展 被引量：15

5

作者 魏麟 朱方莉 +5 位作者 周洋 Khairy Morsy MOHAMED 袁超 董星星 王小红 李锦铨 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第17期314-322,共9页

食源性病原菌是导致食源性疾病的主要原因之一,现代食品工业的迅猛发展对食品中病原菌的快速检测提出了更高的要求。噬菌体作为地球上种类最丰富的微生物之一,能够侵染细菌。研究表明,噬菌体不仅具备结构简单、特异性强、价格低廉等特性... 食源性病原菌是导致食源性疾病的主要原因之一,现代食品工业的迅猛发展对食品中病原菌的快速检测提出了更高的要求。噬菌体作为地球上种类最丰富的微生物之一,能够侵染细菌。研究表明,噬菌体不仅具备结构简单、特异性强、价格低廉等特性,而且具有能够区分活细菌和死细菌的能力,以及容易与其他传统检测方法相结合等优势,噬菌体及其产物为食源性病原菌的检测提供了新的思路。近年来,噬菌体与免疫学、分子生物学和纳米科学等学科结合形成的新型快速检测方法已成为国际研究热点。本文就噬菌体检测食源性病原菌的原理及应用进行分类综述和分析。 展开更多

关键词 噬菌体 食源性病原菌 检测方法 基因工程

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MALDI-TOF MS技术在病原菌检测与鉴定中的应用研究 被引量：9

6

作者 王海花 张晓峰 苗丽 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第2期62-65,I0001,共5页

病原微生物引起的动物疾病不仅严重影响到动物的经济价值也威胁着人类健康,随着近年来抗菌药物的滥用导致多种细菌耐药以及部分新型细菌的出现使形势更加严峻。传统的微生物鉴定方法主要有表型的检测,包括革兰染色、微生物分离培养和生... 病原微生物引起的动物疾病不仅严重影响到动物的经济价值也威胁着人类健康,随着近年来抗菌药物的滥用导致多种细菌耐药以及部分新型细菌的出现使形势更加严峻。传统的微生物鉴定方法主要有表型的检测,包括革兰染色、微生物分离培养和生化试验等,因时间较长、鉴定范围窄,影响了病原微生物鉴定的速度和准确性,在一定程度上影响了疾病的控制。 展开更多

关键词 病原菌检测 微生物鉴定 动物疾病 病原微生物 革兰染色 单增李斯特菌 抗菌药物 DESORPTION 金黄色葡萄球菌 食源性致病菌

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3种食源性致病菌TaqMan多重荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：13

7

作者 王华健 张宁 +7 位作者 杨威 赵志强 李茜 陆安 田勇 何欣 赵兴华 李杰峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1201-1209,共9页

旨在建立一种可同时快速检测大肠杆菌O157∶H7、沙门菌和产单核细胞李氏杆菌3种食源性致病菌的TaqMan多重荧光定量PCR(qPCR)方法。针对大肠杆菌O157∶H7 rfbE基因、沙门菌invA基因和产单核细胞李氏杆菌hlyA基因的保守序列分别设计特异... 旨在建立一种可同时快速检测大肠杆菌O157∶H7、沙门菌和产单核细胞李氏杆菌3种食源性致病菌的TaqMan多重荧光定量PCR(qPCR)方法。针对大肠杆菌O157∶H7 rfbE基因、沙门菌invA基因和产单核细胞李氏杆菌hlyA基因的保守序列分别设计特异性引物和TaqMan探针,建立多重qPCR反应体系,进行特异性、灵敏性和重复性试验,应用建立的方法检测生鲜食品中致病菌并与国家标准方法对比。结果显示:建立的多重qPCR方法特异性好,只扩增3种靶细菌;灵敏性最低检测值均为10^(4) copies·μL^(-1);重复性良好,批内变异系数为0.09%~2.97%,批间变异系数为0.23%~7.82%;对120份生鲜肉样品进行检测对比,两种方法均检出2份大肠杆菌O157∶H7,21份产单核细胞李氏杆菌,多重qPCR方法检出14份沙门菌,比国标法多检出1份,建立的方法可检出所有受污染样品。综上表明,建立的多重qPCR检测方法能快速、准确检测食品中大肠杆菌O157∶H7、沙门菌和产单核细胞李氏杆菌3种食源性致病菌,为食品安全提供技术保障。 展开更多

关键词 食源性致病菌 多重荧光定量PCR 检测方法 大肠杆菌O157∶H7 沙门菌 产单核细胞李氏杆菌

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双抗夹心ELISA法定量检测食品中大肠杆菌O157:H7初探 被引量：9

8

作者 宋宏新 马冬 +1 位作者 薛海燕 李红心 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期528-530,共3页

以鸡抗O157:H7特异性脂多糖(LPS)抗体(IgY)为捕获抗体,酶标抗体(HRP-IgY)为检测抗体建立双抗夹心ELISA法检测食品中大肠杆菌O157:H7的方法,确定了抗原浓度对数与OD450值的高度线性相关性,根据检测OD450值可从拟合回归曲线确定样品中的... 以鸡抗O157:H7特异性脂多糖(LPS)抗体(IgY)为捕获抗体,酶标抗体(HRP-IgY)为检测抗体建立双抗夹心ELISA法检测食品中大肠杆菌O157:H7的方法,确定了抗原浓度对数与OD450值的高度线性相关性,根据检测OD450值可从拟合回归曲线确定样品中的含菌量,含菌量≥104CFU/ml的食品样品可直接用双抗夹心法进行检测,含菌量≤104CFU/ml的食品样品可增菌14h后检测。 展开更多

关键词 大肠杆菌O157:H7 食源性病原菌定量检测 双抗夹心ELISA

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应用SYBR GreenI的Real-time PCR方法定量检测空肠弯曲杆菌 被引量：10

9

作者 阳成波 蒋原 +1 位作者 黄克和 祝长青 《动物医学进展》 CSCD 2003年第1期74-78,共5页

空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态(Viablebutnonculturable,VNC),所以传统的生化鉴定结果不一定可靠,并且是一项费时而繁琐的工作... 空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态(Viablebutnonculturable,VNC),所以传统的生化鉴定结果不一定可靠,并且是一项费时而繁琐的工作。核酸检测方法的出现为空肠弯曲杆菌的检测带来了方便。本文基于LightCycler为平台,利用SYBRGreenI染料能特异与双链DNA结合而发荧光的特性,建立一种Real-timePCR方法来定量检测空肠弯曲杆菌。用该方法检测时,发现所有空肠弯曲杆菌(11株)都呈阳性,所有其它弯曲菌(3株)和其它菌株(5株)都是阴性。整个检测过程60min内可以完成,检测限度为5CFU,标准曲线的相关系数为1。结果表明基于SYBRGreenI的定量PCR方法既为空肠弯曲杆菌提供了一种特异、敏感、快速和简洁的定量检测方法,又为研究空肠弯曲杆菌致病机理提供了一种重要方法。 展开更多

关键词 空肠弯曲杆菌 定量检测 SYBRGreenI染料 Real-timePCR方法 致病机理 食源性病原菌

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5种食源性致病菌多重PCR检测方法的建立 被引量：8

10

作者 程晓艳 刘庆慧 黄倢 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2012年第2期97-103,共7页

本研究建立一种同时特异性地检测5种常见食源性致病菌的多重PCR方法。根据目前食品中常见病原菌副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、单核细胞增生性李斯特菌Listeria monocytogenes、肠炎沙门氏... 本研究建立一种同时特异性地检测5种常见食源性致病菌的多重PCR方法。根据目前食品中常见病原菌副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、单核细胞增生性李斯特菌Listeria monocytogenes、肠炎沙门氏菌Salmonella enteritidis、福氏志贺氏菌Shigella flexneri的相关毒力基因,选择具有特异性的副溶血弧菌不耐热溶血毒素基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因、单核细胞增生性李斯特菌编码溶血素O基因、沙门氏菌侵袭蛋白A基因及志贺氏菌侵袭性质粒抗原H基因,设计5对特异性引物进行多重PCR检测,对反应条件进行优化并评价了其特异性和灵敏度。通过对48份实际样品检测,验证了此多重PCR体系具有很好的可靠性和实用性。 展开更多

关键词 多重PCR 食源性病原菌 检测

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Taqman荧光探针技术在食源性致病菌检测中的应用 被引量：7

11

作者 伊鋆 蔡雪凤 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期374-377,共4页

Taqman荧光探针技术作为定量PCR的代表性方法,综合了PCR技术及荧光标记技术,由引物和探针双重控制靶基因的选择,具有很好的特异性和灵敏度。近年来该技术逐步应用于食品中致病微生物的检测。本文概述了Taqman荧光探针技术的原理、优缺... Taqman荧光探针技术作为定量PCR的代表性方法,综合了PCR技术及荧光标记技术,由引物和探针双重控制靶基因的选择,具有很好的特异性和灵敏度。近年来该技术逐步应用于食品中致病微生物的检测。本文概述了Taqman荧光探针技术的原理、优缺点及其在食源性致病菌检测中的应用与研究进展,并对其应用前景进行了探讨。 展开更多

关键词 TAQMAN探针 食源性致病菌 定量检测

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荧光定量PCR技术在食品快速检测中的应用 被引量：17

12

作者 丁博群 刘珊娜 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第7期366-373,共8页

荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)是一种将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增与实时检测相结合的技术,也是近年来食品快速检测技术的研究热点之一。与传统PCR技术相比... 荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)是一种将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增与实时检测相结合的技术,也是近年来食品快速检测技术的研究热点之一。与传统PCR技术相比,它具有耗时短、操作简单、灵敏度高、特异性强等优势。本文简要概述了荧光定量PCR技术的基本原理、发展历程、分类及特点,综述了荧光定量PCR技术在食源性致病菌、掺杂掺假、转基因食品、过敏原、食源性寄生虫、可食用昆虫等食品检测中的应用,并对荧光定量PCR技术及其在食品快速检测中应用的前景进行了展望。 展开更多

关键词 荧光定量聚合酶链式反应(qPCR) 快速检测 食源性病原菌 掺杂掺假 过敏原

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食品中大肠杆菌O157:H7的两种检测方法研究 被引量：3

13

作者 宋宏新 孙斌 +1 位作者 薛海燕 徐大鹏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期402-404,共3页

研究食品中大肠杆菌O157∶H7的两种检测方法,PCR法引物针对特异性粘附毒素基因(eaeA)扩增检测,双抗夹心ELISA采用鸡抗O157∶H7特异性脂多糖(LPS)抗体(IgY)检测,结果显示两种方法对纯培养物的检测灵敏度都在103～104cfu/mL之间,特异性能... 研究食品中大肠杆菌O157∶H7的两种检测方法,PCR法引物针对特异性粘附毒素基因(eaeA)扩增检测,双抗夹心ELISA采用鸡抗O157∶H7特异性脂多糖(LPS)抗体(IgY)检测,结果显示两种方法对纯培养物的检测灵敏度都在103～104cfu/mL之间,特异性能满足食品检测需求;PCR法的敏感度较ELISA法高,且较省时。经以牛奶为参考的食品模拟样品(37℃增菌14h)验证两种检测方法的最低检出限均为2.5cfu/25mL样品。 展开更多

关键词 大肠杆菌O157∶H7 食源性病原菌检测 双抗夹心ELISA PCR

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衢州市食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的检测 被引量：3

14

作者 陈卫国 汪垂章 +5 位作者 张建民 金莞尔 王文英 杨瑞军 于丽莉 叶承华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期95-95,共1页

关键词 单核细胞增生性李斯特氏菌 衢州市 食品 单增李斯特菌 检测 食源性病原菌 免疫功能低下 污染状况 结果报告 致病性

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食品中单核细胞增生性李斯特氏菌检测及污染现状分析 被引量：8

15

作者 沈红 蒋兴祥 +1 位作者 赵霞贇 何婷婷 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期417-417,共1页

关键词 单核细胞增生性李斯特氏菌 市售食品 污染现状 检测 食源性病原菌 人畜共患病 污染物监测 临床症状

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PMA在副溶血性弧菌检测中的应用

16

作者 陈光哲 曾德新 +2 位作者 周昊 谢青轩 沈嘉敏 《江苏农业科学》 2019年第4期162-167,共6页

在我国,副溶血性弧菌被认为是海产品衍生疾病的主要因素,因此急需一种能快速、灵敏、特异、准确地检测食品中副溶血性弧菌的方法。传统培养法一直是检测的金标准,但是其检测周期较长;分子生物学方法如聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量... 在我国,副溶血性弧菌被认为是海产品衍生疾病的主要因素,因此急需一种能快速、灵敏、特异、准确地检测食品中副溶血性弧菌的方法。传统培养法一直是检测的金标准,但是其检测周期较长;分子生物学方法如聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量PCR(qPCR)、环介导等温扩增技术(LAMP)已被广泛用于食品中副溶血性弧菌的检测,但是这些方法不能区分死菌和活菌的DNA,容易造成假阳性。而叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,简称PMA)等核酸染料的使用可以有效地消除这一弊端。研究者们将PMA处理与PCR(qPCR)结合,应用于食品中多种食源性致病菌活菌的检测,但是关于PMA在副溶血性弧菌检测中应用的报道并不多见。因此,拟对PMA应用于食品中副溶血性弧菌检测的可行性进行分析,以便为进一步开展相关研究提供参考。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 活菌检测 食源性病原菌 叠氮溴化丙锭(PMA)

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磁性侧流层析技术在食品污染物快速检测中的研究进展 被引量：5

17

作者 翟文磊 韩晨瑞 +3 位作者 韦迪哲 肖志勇 孔聪 王蒙 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1827-1836,共10页

磁性侧流层析技术(MLFA)是一种将磁性纳米材料与侧流层析检测平台相结合的快速分析技术。在保留了传统侧流层析技术操作简单、快速实时、低成本优势的基础上,引入功能化磁性纳米材料,实现了复杂基质中目标物的选择性分离和富集,从而提... 磁性侧流层析技术(MLFA)是一种将磁性纳米材料与侧流层析检测平台相结合的快速分析技术。在保留了传统侧流层析技术操作简单、快速实时、低成本优势的基础上,引入功能化磁性纳米材料,实现了复杂基质中目标物的选择性分离和富集,从而提高检测灵敏度和准确性。该文重点关注了近五年来MLFA技术在食品分析领域的研究进展,总结了磁性纳米材料的主要种类及MLFA的主要检测原理,并对食源性病原菌和真菌毒素、兽药等小分子有害物质的检测进行了介绍。最后,总结了MLFA技术的研究现状并对未来的发展方向进行了展望。 展开更多

关键词 磁性侧流层析技术 食品安全 快速检测技术 磁性纳米材料 免疫层析法 食源性病原菌 真菌毒素 兽药残留

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多重PCR技术在食品安全检测中的应用 被引量：6

18

作者 宋岱松 《山东畜牧兽医》 2009年第5期57-58,共2页

食品安全是一个越来越引起人们重视的问题，不仅影响到人们的生活、工作和健康，更是关系到国计民生的大事。在各种食物中毒中，细菌性食物中毒是食物中毒的主要因素。食源性疾病原的检测技术是食源性疾病的预防与控制的关键技术环节。... 食品安全是一个越来越引起人们重视的问题，不仅影响到人们的生活、工作和健康，更是关系到国计民生的大事。在各种食物中毒中，细菌性食物中毒是食物中毒的主要因素。食源性疾病原的检测技术是食源性疾病的预防与控制的关键技术环节。目前我们国家虽然制定相关的食物中毒病原菌检验方法，由于检测方法均采用经典、耗时较长的方法，且存在国内试剂供应不配套等问题， 展开更多

关键词 多重PCR技术 食品安全检测 食源性疾病 食物中毒 应用 检测技术 检验方法 病原菌

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肠出血性大肠杆菌O157:H7检测方法综述 被引量：3

19

作者 孟祥升 辛崇兴 +1 位作者 邵晞 刘宏祥 《中国畜牧业》 2012年第1期76-78,共3页

肠出血性大肠杆菌O157:H7是一种人畜共患的食源性病原菌,近年来在世界各地的流行范围不断扩大,受到世界各国卫生组织的高度重视。2011年欧洲暴发的"毒黄瓜"事件及美国流行的"毒草莓"事件再次对肠出血性大肠杆菌的... 肠出血性大肠杆菌O157:H7是一种人畜共患的食源性病原菌,近年来在世界各地的流行范围不断扩大,受到世界各国卫生组织的高度重视。2011年欧洲暴发的"毒黄瓜"事件及美国流行的"毒草莓"事件再次对肠出血性大肠杆菌的检测提出了更高的要求。 展开更多

关键词 肠出血性大肠杆菌O157:H7 检测 综述 人畜共患 流行范围 卫生组织 病原菌 食源性

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《中国蔬菜》2013·4学术论文导读

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《中国蔬菜》 北大核心 2013年第2期25-26,共2页

实时荧光定量PCR检测蔬菜病原细菌技术陈璐等（中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京100081）-《中国蔬菜））2013（4）．植物病原菌的实时荧光定量PCR检测方法为病原菌的研究和病害的防治提供了新的思路。

关键词 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 学术论文 荧光定量PCR检测 PCR检测方法 植物病原菌 导读 病原细菌 实时

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