检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

基于pyrF的乳酸乳球菌食品级表达载体的构建被引量：1: 1; 作者王帅邓木兰 +6 位作者梁志成周泓宇何少媚张智穆云萍李芳红赵子建《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第9期124-130,共7页; 基于pyrF筛选标记和来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)的基因组DNA为表达元件,构建L.lactis食品级表达载体,用于食品和药用多肽的表达和生产。首先,利用NZ3900 pyrF基因列构建同源重组突变盒,构建NZ3900 ΔpyrF突变株;然后... 展开更多; 关键词 pyrF 乳酸乳球菌食品级表达载体筛选标记绿色荧光蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

乳酸菌中幽门螺杆菌ureB基因的食品级表达与优化被引量：1: 2; 作者陈帅印张荣光 +1 位作者范清堂段广才《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第3期396-398,共3页; 目的:以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)为宿主菌构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylo-ri)尿素酶B(UreB)的食品级表达系统。方法:从重组质粒pMD19-T-ureB上酶切得到ureB基因片段,与含有筛选标记lacF基因的L.lactis表达... 展开更多; 关键词幽门螺杆菌 ureB基因乳酸乳球菌食品级表达载体条件优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

乳酸菌基因表达载体及其应用研究进展被引量：21: 3; 作者崔月倩王菁蕊王艳萍《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第9期224-229,共6页; 近年来随着乳酸菌的功能特性和应用研究的深入,利用分子手段研究乳酸菌的功能基因已经成为最新研究热点。研究者构建众多不同特性的基因表达载体,本文从载体使用的安全性角度对已经报道的载体进行总结,并介绍各类基因表达载体在发酵产... 展开更多; 关键词乳酸菌非食品级基因表达载体食品级基因表达载体应用; 在线阅读下载PDF 职称材料

南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因在乳酸乳球菌MG1363中的整合及表达被引量：4: 4; 作者尹建洪罗立新王成《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期105-109,共5页; 根据南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)的基因序列将CALB基因进行TA克隆、酶切鉴定及测序后,亚克隆至大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭表达载体pMG36e-NisI中,构建重组表达载体pMG36e-NisI-CALB。设计特异性引物P3和P4,对重组质粒pMG36e-NisI-CALB进行... 展开更多; 关键词乳酸乳球菌食品级表达载体 CALB 基因敲除整合活性测定; 在线阅读下载PDF 职称材料

大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达被引量：4: 5; 作者马红丹张丽媛 +4 位作者赵邯郸徐丹丹曲静关淑艳王丕武《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期135-139,共5页; 为使大豆锰超氧化物歧化酶(Mn superoxide dismutase,Mn SOD)在乳酸乳球菌中高效表达,将克隆的Mn SOD基因开放阅读框序列分别重组到质粒p NZ8149和经改造的质粒p NZS上,表达载体p NZ-SOD和分泌表达载体p NZS-SOD,将两者分别以电穿孔法... 展开更多; 关键词锰超氧化物歧化酶(Mn SOD) 食品级分泌表达载体乳酸乳球菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于pyrF的乳酸乳球菌食品级表达载体的构建被引量：1: 1; 作者王帅邓木兰梁志成周泓宇何少媚张智穆云萍李芳红赵子建; 机构广东工业大学生物医药研究院华南理工大学医学院深圳大学生命与海洋科学学院; 出处《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第9期124-130,共7页; 基金国家重点研发计划项目(2018YFA0800603) 国家自然科学基金青年项目(82100064) +1 种基金广东省重点领域研发计划项目(2019B020201015)。; 文摘基于pyrF筛选标记和来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)的基因组DNA为表达元件,构建L.lactis食品级表达载体,用于食品和药用多肽的表达和生产。首先,利用NZ3900 pyrF基因列构建同源重组突变盒,构建NZ3900 ΔpyrF突变株;然后,分别以来源于L.lactis的repA和repC基因为复制元件、pyrF基因为筛选标记、P_(32)和P_(8)为启动子、以及Tusp_(45)和TpepN为终止子,构建食品级表达质粒pLD;最后以绿色荧光蛋白ZsGreen为报告基因,验证ZsGreen在NZ3900 ΔpyrF突变株的表达及pLD-ZsG的遗传稳定性。实验结果表明,原养型ZsGreen阳性转化子可在普通Elliker培养基中正常生长,在荧光显微镜下观察到明显的绿色荧光信号;此外,PCR和Western blotting也证实ZsGreen能在NZ3900中表达且能稳定传代至30代,说明pLD食品级表达载体构建成功且使得外源蛋白在L.lactis中稳定表达。综上所述,基于pyrF营养缺陷型标记构建的L.lactis食品级表达载体的方法切实可行,可为推动L.lactis在食品和药用多肽生产中的应用提供研究基础。; 关键词 pyrF 乳酸乳球菌食品级表达载体筛选标记绿色荧光蛋白; Keywords pyrF Lactococcus lactis food-grade expression vector selective marker green fluorescent protein; 分类号 TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乳酸菌中幽门螺杆菌ureB基因的食品级表达与优化被引量：1: 2; 作者陈帅印张荣光范清堂段广才; 机构郑州大学公共卫生学院流行病学教研室河南省分子医学重点实验室郑州大学基础医学院寄生虫学教研室; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第3期396-398,共3页; 基金中国博士后科学基金资助项目20070410252; 文摘目的:以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)为宿主菌构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylo-ri)尿素酶B(UreB)的食品级表达系统。方法:从重组质粒pMD19-T-ureB上酶切得到ureB基因片段,与含有筛选标记lacF基因的L.lactis表达载体pNZ8149经双酶切后定向连接,应用PCR、酶切和测序的方法鉴定重组子。重组菌用乳联菌肽诱导表达,用正交表实验进行表达条件的优化,通过SDS-PAGE和Western blot对重组蛋白进行鉴定。结果:重组菌NZ3900/pNZ8149-ureB经鉴定与预期相符。优化结果显示在菌体培养到D600nm为0.40左右时加入终浓度为25μg/L的乳联菌肽诱导5h产量最高,通过Western blot能检测到UreB的表达。结论:构建了ureB基因食品级表达系统,并得到了表达的最优条件。; 关键词幽门螺杆菌 ureB基因乳酸乳球菌食品级表达载体条件优化; Keywords Helicobacter pylori urease subunit B gene Lactococcus lactis food-grade expression vector condition optimization; 分类号 R183 [医药卫生—流行病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乳酸菌基因表达载体及其应用研究进展被引量：21: 3; 作者崔月倩王菁蕊王艳萍; 机构天津科技大学食品工程与生物技术学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第9期224-229,共6页; 基金国家自然科学基金面上项目(31171629) 国家自然科学基金青年科学基金项目(31101218) 中国博士后科学基金面上项目(2014M551029); 文摘近年来随着乳酸菌的功能特性和应用研究的深入,利用分子手段研究乳酸菌的功能基因已经成为最新研究热点。研究者构建众多不同特性的基因表达载体,本文从载体使用的安全性角度对已经报道的载体进行总结,并介绍各类基因表达载体在发酵产胞外多糖、酶制剂、疫苗制备等方面的应用。; 关键词乳酸菌非食品级基因表达载体食品级基因表达载体应用; Keywords lactic acid bacteria non-food-grade genetic expression vector food-grade genetic expression vector application; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因在乳酸乳球菌MG1363中的整合及表达被引量：4: 4; 作者尹建洪罗立新王成; 机构华南理工大学生物科学与工程学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期105-109,共5页; 文摘根据南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)的基因序列将CALB基因进行TA克隆、酶切鉴定及测序后,亚克隆至大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭表达载体pMG36e-NisI中,构建重组表达载体pMG36e-NisI-CALB。设计特异性引物P3和P4,对重组质粒pMG36e-NisI-CALB进行红霉素抗性基因的敲除,以构建食品级表达载体pMG36N-CALB,后再将两种重组质粒分别电转化入乳酸乳球菌MG1363,以Nisin为选择压力,考察CALB在MG1363中的表达情况。结果显示,成功构建了表达载体pMG36e-NisI-CALB及pMG36N-CALB,两株重组菌在含有20 IU Nisin/mL的培养基中均生长情况良好,遗传性能稳定,且经水解圈鉴定,CALB能够进行活性表达。进一步研究发现,CALB基因整合到乳酸乳球菌MG1363染色体中。; 关键词乳酸乳球菌食品级表达载体 CALB 基因敲除整合活性测定; Keywords Lactococcus lactis Food-grade expression vector CALB Gene knock-out Integrate Activity assay; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达被引量：4: 5; 作者马红丹张丽媛赵邯郸徐丹丹曲静关淑艳王丕武; 机构吉林农业大学生命科学院吉林农业大学农学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期135-139,共5页; 基金农业科技成果转化资金项目(2013GB2B100125) 吉林省科技支撑计划项目(20120215) 吉林农业大学启动基金项目(201242); 文摘为使大豆锰超氧化物歧化酶(Mn superoxide dismutase,Mn SOD)在乳酸乳球菌中高效表达,将克隆的Mn SOD基因开放阅读框序列分别重组到质粒p NZ8149和经改造的质粒p NZS上,表达载体p NZ-SOD和分泌表达载体p NZS-SOD,将两者分别以电穿孔法转化乳酸乳球菌L.lactis NZ3900,经Elliker琼脂板筛选、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、酶切鉴定正确后,获得的两重组菌株加入Nisin进行诱导表达,对L.lactis NZ3900/p NZ-SOD和L.lactis NZ3900/p NZS-SOD的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和酶活性对比分析。结果显示:L.lactis NZ3900/p NZS-SOD菌株表达SOD总活性约是L.lactis NZ3900/p NZ-SOD菌株的1.6倍,是L.lactis NZ3900/p NZ8149的13.5倍,且可将表达的约2/3的SOD分泌到胞外,表明经改造的乳酸菌分泌表达系统L.lactis NZ3900/p NZS能够分泌表达SOD,并增强SOD的表达。; 关键词锰超氧化物歧化酶(Mn SOD) 食品级分泌表达载体乳酸乳球菌; Keywords manganese superoxide dismutase(Mn SOD) food-grade vector Lactococcus lactis; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于pyrF的乳酸乳球菌食品级表达载体的构建	王帅邓木兰梁志成周泓宇何少媚张智穆云萍李芳红赵子建	《食品工业科技》 CAS 北大核心	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	乳酸菌中幽门螺杆菌ureB基因的食品级表达与优化	陈帅印张荣光范清堂段广才	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	乳酸菌基因表达载体及其应用研究进展	崔月倩王菁蕊王艳萍	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2015	21	在线阅读下载PDF 职称材料
4	南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因在乳酸乳球菌MG1363中的整合及表达	尹建洪罗立新王成	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2012	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达	马红丹张丽媛赵邯郸徐丹丹曲静关淑艳王丕武	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2015	4	在线阅读下载PDF 职称材料