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可变剪接体WNT4-β对山羊卵泡颗粒细胞增殖和激素分泌的影响 被引量:2
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作者 王鹏 韩海银 +3 位作者 李文韬 刘子嶷 储明星 刘玉芳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3480-3489,共10页
旨在研究WNT4的一个可变剪接体(WNT4-β)对山羊卵泡颗粒细胞增殖的影响。本研究选取4~6月龄健康母羊20只,采集双侧卵巢,体外分离卵泡颗粒细胞进行培养。通过免疫荧光染色技术确定WNT4-β的表达位置;在山羊颗粒细胞中过表达或干扰WNT4-β... 旨在研究WNT4的一个可变剪接体(WNT4-β)对山羊卵泡颗粒细胞增殖的影响。本研究选取4~6月龄健康母羊20只,采集双侧卵巢,体外分离卵泡颗粒细胞进行培养。通过免疫荧光染色技术确定WNT4-β的表达位置;在山羊颗粒细胞中过表达或干扰WNT4-β后,利用RT-qPCR、Westernblot检测WNT4-β和WNT信号通路中关键标记因子ROA1、RHOA及颗粒细胞增殖标记基因cyclin-D2、CDK4的表达变化;CCK-8技术检测颗粒细胞增殖情况;并通过ELISA分析颗粒细胞中生殖激素水平的变化。免疫荧光染色结果显示,WNT4-β只在山羊卵泡颗粒细胞中表达,在卵母细胞不表达;过表达WNT4-β后,WNT4-β和颗粒细胞增殖因子cyclin-D2、CDK4的mRNA相对表达量极显著增加(P<0.01),蛋白表达水平显著增加(P<0.05);WNT信号通路标记因子ROA1、RHOA mRNA表达水平显著增加(P<0.05),β-catenin蛋白表达水平显著增加(P<0.05);干扰WNT4-β后,WNT4-β、cyclin-D2、CDK4、ROA1和RHOA的mRNA表达显著降低(P<0.05),WNT4-β、cyclin-D2、CDK4及β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05)。CCK-8结果显示,过表达WNT4-β促进颗粒细胞增殖(P<0.05);ELISA结果显示,过表达WNT4-β后,颗粒细胞中雌二醇(estradiol,E_(2))水平显著增加(P<0.05),孕酮(progesterone,P_(4))水平升高但不显著(P>0.05);干扰WNT4-β后则结果相反,颗粒细胞增殖受到抑制(P<0.05),E_(2)和P_(4)的水平显著降低(P<0.05)。综上所述,WNT4可变剪接体WNT4-β通过调控WNT信号通路促进山羊卵泡颗粒细胞增殖及类固醇激素分泌,本研究为解析WNT4调控山羊颗粒细胞增殖的潜在分子机制提供理论基础。 展开更多
关键词 山羊 卵泡发育 颗粒细胞增殖 可变剪接体 WNT4-β
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生长分化因子9与卵泡发育研究进展 被引量:6
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作者 徐照学 陆涛峰 +2 位作者 施巧婷 楚秋霞 王同勋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期115-119,共5页
生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF-9)属于TGF-β超家族,其在卵泡的发育过程中发挥着重要的作用。作者将对GDF-9基因的结构和功能,GDF-9的表达与调控及其对卵泡发育和颗粒细胞增殖的影响等方面进行详细的阐述,进而分析... 生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF-9)属于TGF-β超家族,其在卵泡的发育过程中发挥着重要的作用。作者将对GDF-9基因的结构和功能,GDF-9的表达与调控及其对卵泡发育和颗粒细胞增殖的影响等方面进行详细的阐述,进而分析GDF-9基因与哺乳动物繁殖性能的关系。 展开更多
关键词 生长分化因子9 卵泡发育 颗粒细胞增殖 繁殖
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