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题名酶差速脱壁法联合差速贴壁法分离人颊黏膜上皮干细胞
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作者
张鸿
黄挺
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机构
南华大学附属第一医院眼科
中山大学中山眼科中心
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出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2014年第6期518-522,共5页
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基金
广东省眼科学国家重点实验室基金(编号:2012B031-800112)~~
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文摘
目的培养人颊黏膜上皮细胞和分离上皮干细胞,在角膜缘干细胞微环境下诱导颊黏膜上皮干细胞转分化,为前者获取足够的种子细胞。方法应用Epilife培养基培养颊黏膜上皮细胞,使用CFSE标记,观察CFSE标记率及标记细胞与未标记细胞的生物学特性。采用免疫荧光检测第2代细胞P63、CK12、CK13的表达。应用酶差速脱壁法联合差速贴壁法分离培养颊黏膜上皮干细胞,观察体外培养生物学特性。采用免疫荧光检测第2氉代纯化细胞P63、CK12、CK13的表达。结果颊黏膜上皮细胞在Epilife培养基中生长良好。CFSE标记率可达100%,标记细胞与未标记细胞生物学特性相似。经联合分离法获得的第2代细胞免疫荧光P63、K13阳性,K12阴性,而未经联合分离法获得的第2代细胞免疫荧光CK13阳性,P63、CK12阴性。结论人颊黏膜上皮细胞在Epilife培养基中生长良好。CFSE是理想的颊黏膜上皮细胞荧光标记物。酶差速脱壁法联合差速贴壁法纯化了颊黏膜上皮干细胞,为转分化为角膜上皮干细胞获取了足够的种子细胞。
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关键词
颊黏膜上皮干细胞
CFSE
差速脱壁法
差速贴壁法
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Keywords
buccal mucosal epithelial stem cell
CFSE
differential detachment method
rapid adhering method
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分类号
R772.2
[医药卫生—眼科]
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