灭活仙台病毒体内外诱导顺铂耐药性肺腺癌A549/DDP细胞凋亡

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作者 陈则东 沈晓鹏 +1 位作者 穆洪云 张泉 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第3期57-62,共6页

目的顺铂(DDP)被广泛应用于肺癌的化疗。然而,顺铂抵抗性代表着临床有效治疗的最主要障碍。本实验室前期工作证明灭活仙台病毒(HVJ-E)具有诱导黑色素瘤细胞(B16)凋亡,与对照组相比明显减小荷瘤小鼠的肿瘤体积的作用。该研究主要用于探讨... 目的顺铂(DDP)被广泛应用于肺癌的化疗。然而,顺铂抵抗性代表着临床有效治疗的最主要障碍。本实验室前期工作证明灭活仙台病毒(HVJ-E)具有诱导黑色素瘤细胞(B16)凋亡,与对照组相比明显减小荷瘤小鼠的肿瘤体积的作用。该研究主要用于探讨HVJ-E对于顺铂抵抗性肺腺癌A549/DDP细胞是否具有诱导凋亡的作用。方法体外实验,将HVJ-E与A549/DDP细胞体外共培养,通过流式细胞术检测HVJ-E对A549/DDP细胞凋亡的影响;体内实验,将HVJ-E注射到肿瘤内,通过组织切片TUNEL法以及测量肿瘤体积大小观察HVJ-E的溶瘤效果。结果体外实验流式细胞术检测在12 h、24 h、36 h,A549/DDP晚期凋亡率分别为7.7%、12.6%、18.9%,且12 h与24 h、24 h与36 h的晚期凋亡率差异均有显著性;体内实验TUNEL法检测显示实验组与对照组相比有较多的肿瘤细胞凋亡;同时瘤内注射实验显示实验组肿瘤体积远小于对照组。结论实验结果表明灭活的HVJ-E在体内外均具有诱导A549/DDP细胞凋亡的作用,同时通过瘤内注射能够显著减小肿瘤体积。 展开更多

关键词 顺铂 灭活仙台病毒 顺铂抵抗性a549细胞 凋亡 裸鼠

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沙参麦冬汤含药血清联合顺铂对A549细胞E-cadherin和Snail的影响 被引量：14

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作者 王莹 杨斯洋 +4 位作者 潘一诺 于丹 高原 王淳 刘春英 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第8期62-65,I0019,共5页

目的基于E-cadherin和Snail蛋白表达探讨沙参麦冬汤含药血清联合顺铂治疗肺癌的作用机制。方法根据血清药理学方法将沙参麦冬汤制成中药血清,MTT法检测不同浓度、不同干预时间的中药血清对A549细胞生长的抑制率,筛选其最佳的药物浓度和... 目的基于E-cadherin和Snail蛋白表达探讨沙参麦冬汤含药血清联合顺铂治疗肺癌的作用机制。方法根据血清药理学方法将沙参麦冬汤制成中药血清,MTT法检测不同浓度、不同干预时间的中药血清对A549细胞生长的抑制率,筛选其最佳的药物浓度和干预时间。将细胞随机分4组,即空白血清组、中药血清组、顺铂组及联合药物组(中药血清+顺铂)进行处理,干预A549细胞48 h后,免疫细胞化学法和Western Blot法检测E-cadherin和Snail蛋白表达。结果 MTT结果显示,沙参麦冬汤中药血清能明显抑制A549细胞生长且与浓度和时间呈正相关(P<0.05),其中10%中剂量药物血清干预48 h抑制效果显著且细胞毒性低(P<0.05)。免疫细胞化学法和Western Blot检测结果显示,与单独药物组比较,联合药物组对E-cadherin蛋白表达增多、Snail蛋白表达减少的影响更明显(P<0.05)。结论沙参麦冬汤含药血清联合顺铂能改变人肺癌A549细胞上皮-间充质转化相关因子E-cadherin和Snail蛋白表达,其抗肿瘤机制可能与抑制细胞上皮-间充质转化有关。 展开更多

关键词 a549细胞 肺癌 顺铂 E-CADHERIN SNAIL 沙参麦冬汤

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Survivi n-si RNA抑制肺癌A549细胞的增殖并增强其对顺铂的敏感性 被引量：8

3

作者 张曙光 刘晓凡 +2 位作者 杜江 李文雅 张林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期583-587,共5页

目的:构建靶向存活素(survivin)的干扰RNA(siRNA)质粒,观察其对A549细胞增殖、凋亡以及顺铂敏感性的影响。方法:应用pSilencer-U6质粒构建survivin-siRNA干扰质粒,RT-PCR和Western blotting检测survivin mRNA和蛋白的表达,DAPI染色法检... 目的:构建靶向存活素(survivin)的干扰RNA(siRNA)质粒,观察其对A549细胞增殖、凋亡以及顺铂敏感性的影响。方法:应用pSilencer-U6质粒构建survivin-siRNA干扰质粒,RT-PCR和Western blotting检测survivin mRNA和蛋白的表达,DAPI染色法检测细胞的凋亡,MTT法检测细胞的增殖。结果:成功构建了survivin-siRNA干扰质粒。Survivin-siRNA质粒转染可明显下调A549细胞中survivin mRNA和蛋白的表达、抑制A549细胞的增殖、促进细胞的凋亡、增强A549细胞对顺铂的敏感性。结论:Survivin-siRNA沉默survivin在肺癌细胞中的表达能够抑制肿瘤细胞的增殖、促进细胞凋亡,并能增强肿瘤细胞对化疗药物顺铂的敏感性,survivin可作为肺癌治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 存活素 RNA干扰 肺肿瘤 a549细胞 顺铂

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顺铂联合小檗碱通过诱导DNA损伤和ROS依赖性凋亡抑制肺癌细胞A549的生长 被引量：10

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作者 毛娟娟 程伟松 +2 位作者 杨亦德 金茜 汪佳兵 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期844-851,共8页

目的探究顺铂联合小檗碱(berberine,BBR)对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及抗肺癌机制。方法MTT法分别检测不同浓度的BBR、BBR联合不同浓度的顺铂对A549细胞增殖的作用;设置溶剂组、顺铂组、小檗碱组和顺铂+小檗碱组,细胞集落实验检... 目的探究顺铂联合小檗碱(berberine,BBR)对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及抗肺癌机制。方法MTT法分别检测不同浓度的BBR、BBR联合不同浓度的顺铂对A549细胞增殖的作用;设置溶剂组、顺铂组、小檗碱组和顺铂+小檗碱组,细胞集落实验检测细胞集落形成;流式细胞术实验检测细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、cleaved-caspase-3及γH2AX蛋白表达;免疫荧光实验检测DNA损伤;活性氧(reactive oxygen species,ROS)清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)预处理后,流式细胞术实验和Western blot分别检测ROS水平和Bcl-2、cleaved-caspase-3蛋白表达。结果BBR及BBR联合顺铂浓度依赖性抑制A549细胞生长(P<0.05);相对对照组和单药组,联合组抑制细胞集落形成,促进细胞凋亡,抑制Bcl-2和提高cleaved-caspase-3表达,诱导DNA损伤及提高ROS水平(P<0.05)。联用NAC后,凋亡率降低,Bcl-2和cleaved-caspase-3表达分别提高和降低(P<0.05)。结论顺铂联合BBR抑制A549细胞生长并诱导细胞凋亡,其机制可能与调控DNA损伤和ROS介导Bcl-2和cleaved-caspase-3蛋白表达有关。 展开更多

关键词 顺铂 小檗碱 a549细胞 凋亡 DNA损伤 ROS

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补中益气汤含药血清调控GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路增强A549细胞对顺铂敏感性的研究 被引量：8

5

作者 王莹 付权泽 +3 位作者 牟琪瑞 刘春英 王淳 高原 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第16期1958-1962,共5页

目的:探讨补中益气汤含药血清增强A549细胞对顺铂敏感性的机制是否与GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路有关。方法:制备补中益气汤含药血清作用于A549细胞株,随机分为a组(对照血清组)、b组(顺铂组)、c组(补中益气汤组)、d组(补中益... 目的:探讨补中益气汤含药血清增强A549细胞对顺铂敏感性的机制是否与GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路有关。方法:制备补中益气汤含药血清作用于A549细胞株,随机分为a组(对照血清组)、b组(顺铂组)、c组(补中益气汤组)、d组(补中益气汤含药血清联合顺铂组)。流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测GSK-3β、p-GSK-3β^(ser9)、p-GSK-3β^(tyr216)、β-catenin、survivin蛋白表达。结果:补中益气汤含药血清联合顺铂可降低p-GSK-3β^(ser9)、β-catenin、survivin蛋白表达,提高晚期细胞凋亡率。结论:抑制GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路激活可能是补中益气汤含药血清增强A549细胞对顺铂敏感性的作用机制之一。 展开更多

关键词 补中益气汤 a549细胞株 顺铂 GSK-3Β WNT/Β-CATENIN信号通路

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miR-152-3p对非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的作用及分子机制研究 被引量：4

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作者 常彩虹 高玉林 +1 位作者 王敏 林楠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1274-1278,1284,共6页

目的:探究miR-152-3p对非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的作用及其分子机制。方法:采用顺铂处理体外培养的A549细胞,检测细胞内miR-152-3p、SOS1表达水平的变化;采用荧光素酶活性检测法分析miR-152-3p与SOS1的调控关系。A549细胞转染miR... 目的:探究miR-152-3p对非小细胞肺癌A549细胞顺铂敏感性的作用及其分子机制。方法:采用顺铂处理体外培养的A549细胞,检测细胞内miR-152-3p、SOS1表达水平的变化;采用荧光素酶活性检测法分析miR-152-3p与SOS1的调控关系。A549细胞转染miR-152-3p慢病毒过表达载体、SOS1慢病毒过表达载体或慢病毒空载体,采用顺铂处理转染的细胞,比较miR-152-3p过表达或SOS1过表达对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及迁移的影响。结果:与正常培养的A549细胞相比,顺铂处理的A549细胞内miR-152-3p表达水平显著降低,而SOS1表达水平显著升高(P<0.05);生物信息学分析显示SOS1是miR-152-3p的一个潜在靶基因,而荧光素酶活性检测法分析显示miR-152-3p具有负调控SOS1的作用。与转染空载体的A549细胞相比,miR-152-3p过表达显著抑制A549细胞增殖及迁移、阻滞细胞周期、促进细胞凋亡(P<0.05)。miR-152-3p过表达的A549细胞内SOS1表达水平显著低于转染空载体的细胞(P<0.05);与单独转染miR-152-3p过表达载体的细胞相比,同时转染miR-152-3p过表达载体和SOS1慢病毒过表达载体的A549细胞增殖、迁移增强,且细胞凋亡受到显著抑制(P<0.05)。结论:miR-152-3p通过抑制SOS1表达增强A549细胞对顺铂的敏感性,继而抑制A549细胞增殖、迁移,阻滞细胞周期以及促进A549细胞凋亡。 展开更多

关键词 miR-152-3p 非小细胞肺癌 a549细胞 顺铂 SOS1

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奈达铂体外诱导肺腺癌A549细胞凋亡及其作用机制 被引量：3

7

作者 王莉 刘汉锋 +1 位作者 蔡正文 罗婕 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期332-335,共4页

目的探讨奈达铂(NDP)体外对人肺腺癌A549细胞的影响及其作用机制。方法采用四氮甲唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的NDP对A549细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FCM)测定给药前后细胞凋亡率及周期分布变化;半定量PCR分析... 目的探讨奈达铂(NDP)体外对人肺腺癌A549细胞的影响及其作用机制。方法采用四氮甲唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的NDP对A549细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FCM)测定给药前后细胞凋亡率及周期分布变化;半定量PCR分析凋亡基因Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达情况。结果 NDP能显著抑制A549细胞的生长;FCM结果显示,10μg/mL NDP作用A549细胞48h后,与对照组相比,细胞凋亡明显增加[(25.14±3.97)%vs.(8.01±1.46)%];S期细胞的比例增加[(52.73±1.66)%vs.(38.38±3.91)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,Bax、Caspase-3、Caspase-9表达增加(P<0.05)。结论 NDP可抑制A549细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡、细胞S期阻滞及上调Bax、Caspase-3和Caspase-9的表达有关。 展开更多

关键词 奈达铂 a549细胞 细胞凋亡 细胞周期 凋亡基因 Bax Caspase-3 CASPASE-9

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槐耳清膏对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的影响及顺铂耐药逆转作用 被引量：4

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作者 鲁明骞 卢宏达 +6 位作者 卢忠心 孔庆志 雷章 许新华小 许新华 徐冰清 郭蓉 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第9期2185-2187,共3页

目的:探讨槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞和A549/DDP细胞增殖的抑制影响及其顺铂耐药细胞A549/DDP的逆转作用。方法:以体外培养的人肺腺癌A549及A549/DDP细胞为实验模型,采用MTT法测定不同浓度槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖抑制... 目的:探讨槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞和A549/DDP细胞增殖的抑制影响及其顺铂耐药细胞A549/DDP的逆转作用。方法:以体外培养的人肺腺癌A549及A549/DDP细胞为实验模型,采用MTT法测定不同浓度槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖抑制率,并运用流式细胞术检测顺铂联合槐耳清膏对A549/DDP细胞的变化,以及增敏作用效应。结果:槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖有明显抑制作用,随着药物浓度的增加,其抑制率逐渐增加,具有明显的量-效关系(P<0.05)。顺铂40μmol/L作用于A549及A549/DDP细胞48 h后,其凋亡率分别为(27.61±3.45)%和(17.93±1.73)%,两组间有统计学差异(P<0.01)。槐耳清膏1 mg/m L作用于人肺腺癌A549和A549/DDP细胞40 h后,再以相同浓度顺铂诱导,A549细胞凋亡率为(32.35±2.68)%,A549/DDP细胞凋亡率为(30.01±3.65)%,两组间无统计学意义,但与单独DDP作用相比,差异具有显著意义(P<0.01)。结论:槐耳清膏能显著抑制人肺腺癌A549及A549/DDP细胞的增殖,诱导细胞凋亡,还可以增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多

关键词 槐耳清膏 人肺腺癌a549/DDP细胞 细胞增殖 顺铂耐药

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当归挥发油联合卡铂对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响 被引量：3

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作者 张艳霞 张正顺 +2 位作者 陈绍仪 孔学礼 周佳玮 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2017年第7期755-761,共7页

目的:探讨当归挥发油与卡铂联用对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT比色法检测两药单用及联用对A549细胞的体外杀伤活性;用流式细胞术检测A549细胞凋亡;AO/BE双荧光染色法观察A549细胞凋亡。结果:当归挥发油单独应用及与卡... 目的:探讨当归挥发油与卡铂联用对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT比色法检测两药单用及联用对A549细胞的体外杀伤活性;用流式细胞术检测A549细胞凋亡;AO/BE双荧光染色法观察A549细胞凋亡。结果:当归挥发油单独应用及与卡铂合用对A549细胞的增殖均具有浓度依赖性抑制作用,两药联用IC_(50)较单用IC_(50)下降,说明当归挥发油对卡铂抑制A549细胞增殖的作用具协同效应。流式细胞术检测结果表明,当归挥发油单用及与卡铂合用均可诱导A549细胞凋亡、坏死,两药合用后细胞凋亡、坏死率显著升高。AO/BE双荧光染色法结果显示,联合用药组细胞凋亡、坏死率上升。结论:当归挥发油与卡铂具有协同诱导A549细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 当归挥发油 卡铂 人肺腺癌a549细胞 细胞凋亡

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shRNA下调BAG-1表达降低肺癌A549细胞对顺铂的耐药性 被引量：1

10

作者 刘洋 刘志良 +1 位作者 哈敏文 王亚帝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期706-710,共5页

目的:通过载体介导的shRNA下调BAG-1基因(Bcl-2 associated athanogene-1)表达,探讨其对肺癌A549细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响。方法:构建靶向BAG-1的shRNA干扰载体pGCsi-BAG-1,稳定转染A549细胞。实验组使用稳定转染pGCsi-BAG-... 目的:通过载体介导的shRNA下调BAG-1基因(Bcl-2 associated athanogene-1)表达,探讨其对肺癌A549细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响。方法:构建靶向BAG-1的shRNA干扰载体pGCsi-BAG-1,稳定转染A549细胞。实验组使用稳定转染pGCsi-BAG-1的细胞株(BAG-1-shRNA),阴性对照组使用无关序列质粒转染的细胞株(SC-shRNA),对照组使用未转染的亲本A549细胞株(Control)。Western blotting检测pGCsi-BAG-1转染对A549细胞BAG-1、Bcl-2表达的影响。MTT法、流式细胞术分别检测pGCsi-BAG-1转染对DDP处理后A549细胞的增殖和凋亡的影响。结果:成功构建稳定干扰BAG-1表达的A549细胞株,BAG-1-shRNA组细胞中BAG-1和Bcl-2蛋白表达显著低于SC-shRNA组和对照组(均P<0.05)。随DDP(2.5~40μg/ml)浓度增加,各组细胞增殖抑制率也随之升高,DDP浓度为2.5μg/ml时,BAG-1-shRNA组A549细胞的增殖抑制率即显著高于SC-shRNA组和对照组[(22.26±4.89)%vs(10.07±3.82)%,(8.12±4.09)%,均P<0.05]。与SC-shRNA组和对照组相比,DDP(2.5μg/ml)处理24 h后,BAG-1-shRNA组凋亡率显著升高[(37.8 4±3.62)%vs(16.80±2.81)%、(17.10±3.11)%,P<0.05]。结论:下调BAG-1表达可抑制DDP作用下的A549细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 BAG-1基因 肺癌 a549细胞 顺铂 耐药

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柴胡皂苷D联合奥沙利铂对A549细胞荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其机制 被引量：9

11

作者 吴克勤 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期355-358,共4页

考察柴胡皂苷D联合奥沙利铂对荷人肺腺癌A549细胞裸鼠的抑瘤作用及其机制。建立A549细胞荷瘤小鼠模型,灌胃给予柴胡皂苷D,以体内抑瘤率考察柴胡皂苷D的最佳剂量,再考察柴胡皂苷D与奥沙利铂联合用药对肿瘤的生长状态的影响,TUNEL法检测... 考察柴胡皂苷D联合奥沙利铂对荷人肺腺癌A549细胞裸鼠的抑瘤作用及其机制。建立A549细胞荷瘤小鼠模型,灌胃给予柴胡皂苷D,以体内抑瘤率考察柴胡皂苷D的最佳剂量,再考察柴胡皂苷D与奥沙利铂联合用药对肿瘤的生长状态的影响,TUNEL法检测凋亡细胞,ELISA法检测血清中前列腺素E2(PGE2)浓度变化,Western blot检测瘤体中COX-2蛋白的表达。结果显示:柴胡皂苷D在1.0 mg/kg时抑制作用最佳(抑瘤率40.96%);柴胡皂苷D与奥沙利铂联合用药诱导荷瘤裸鼠瘤体凋亡的作用强于二者单独用药;荷瘤模型组PGE2浓度和COX-2的表达明显增高;单独和联合用药PGE2浓度、COX-2表达量均显著降低(P<0.05),且联合用药组的PGE2浓度和COX-2表达均显著低于单用组(P<0.01)。研究结果表明,柴胡皂苷D联合奥沙利铂用药能产生协同作用,其抑瘤作用可能是通过下调COX-2蛋白的表达来实现的。 展开更多

关键词 柴胡皂苷D 奥沙利铂 联合用药 a549细胞 抑制作用

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重组金属蛋白酶组织抑制因子-3与顺铂联合应用对肺癌细胞A549生长抑制与凋亡的影响

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作者 李刚 任宏 +5 位作者 王健生 张云锋 张靖 杜宁 孙欣 秦思达 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期422-426,共5页

目的探讨重组金属蛋白酶组织抑制因子-3(rhTIMP-3)和顺铂(cis-platinum,DDP)联合应用对肺癌细胞株A549生长和凋亡的影响。方法分别或联合应用不同浓度的rhTIMP-3、DDP作用于A549细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制作用,... 目的探讨重组金属蛋白酶组织抑制因子-3(rhTIMP-3)和顺铂(cis-platinum,DDP)联合应用对肺癌细胞株A549生长和凋亡的影响。方法分别或联合应用不同浓度的rhTIMP-3、DDP作用于A549细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制作用,流式细胞术测定细胞周期分布和凋亡率。结果 rhTIMP-3与DDP均可抑制A549细胞的增殖,rhTIMP-3作用结果呈时间、浓度依赖性,DDP的作用结果呈浓度依赖性,二者都可以诱导A549细胞凋亡。rhTIMP-3使细胞阻滞在S和G2/M期,DDP可造成细胞S期的阻滞,当两者联合应用时对A549细胞的生长抑制作用明显加强,对诱导凋亡有明显协同作用。结论 rhTIMP-3、DDP均可抑制A549细胞的增殖,并可诱导其凋亡;二者联合应用不仅能增加细胞生长的抑制作用,而且有协同诱导细胞凋亡作用。 展开更多

关键词 肺癌细胞a549 细胞周期 凋亡 重组金属蛋白酶组织抑制因子-3(rhTIMP-3) 顺铂

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顺铂诱导A549细胞凋亡的研究 被引量：13

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作者 刘文哲 李金瀚 +1 位作者 胡义德 钱桂生 《中国肺癌杂志》 CAS 2002年第4期254-256,共3页

目的　探讨顺铂诱导肺癌细胞凋亡的规律、机制以及在肿瘤化疗中的作用。方法　应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、原位DNA断裂点的末端标记法和流式细胞仪分析技术 ,检测顺铂诱导A5 49细胞的凋亡作用。结果　 3mg/L顺铂诱导的细胞凋亡在... 目的　探讨顺铂诱导肺癌细胞凋亡的规律、机制以及在肿瘤化疗中的作用。方法　应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、原位DNA断裂点的末端标记法和流式细胞仪分析技术 ,检测顺铂诱导A5 49细胞的凋亡作用。结果　 3mg/L顺铂诱导的细胞凋亡在 12～ 72h持续存在并逐渐增强 ,呈时间依赖性 ;顺铂浓度分别为 1、3、5、7mg/L时均诱导了细胞凋亡 ,呈浓度依赖性。在顺铂作用下 ,细胞被阻滞于G1期。结论　诱导细胞凋亡可能是顺铂抗肿瘤作用的重要机制。 展开更多

关键词 a549细胞 细胞凋亡 顺铂 肺癌 化学疗法 细胞形态学 作用机理

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黄芪建中汤含药血清联合顺铂对A549细胞的抑制作用及Smad3、Smad7表达的影响 被引量：7

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作者 潘一诺 杨斯洋 +2 位作者 于丹 刘文俊 刘春英 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第7期1673-1676,I0029,I0030,共6页

目的:观察黄芪建中汤含药血清联合顺铂对肺癌A549细胞中Smad3、Smad7蛋白表达的影响。方法:应用MTT法分别计算5%高、中、低剂量和10%高、中、低剂量黄芪建中汤含药血清作用于人肺腺癌A549细胞株24、48、72 h的半数抑制浓度(IC50)、黄芪... 目的:观察黄芪建中汤含药血清联合顺铂对肺癌A549细胞中Smad3、Smad7蛋白表达的影响。方法:应用MTT法分别计算5%高、中、低剂量和10%高、中、低剂量黄芪建中汤含药血清作用于人肺腺癌A549细胞株24、48、72 h的半数抑制浓度(IC50)、黄芪建中汤最佳含药血清(10%中剂量,48h)联合最佳顺铂(5μmol/mL,48 h)作用于人肺腺癌A549细胞株的增殖抑制率。免疫组织化学显色技术检测肺癌A549细胞内Smad3、Smad7蛋白的表达情况;Western Blot技术检测Smad3、Smad7蛋白表达。结果:①黄芪建中汤含药血清作用于A549细胞株48h的(IC50)为10%中剂量。黄芪建中汤含药血清联合顺铂作用于A549细胞的增殖抑制率高于两单药组和空白组(P<0.05)。②免疫组化方法检测Smad3、Smad7在A549细胞中的表达,与其它组相比在中西药联合组(HuangQi+Cisplatin)中Smad3蛋白表达棕黄色颗粒最少,Smad7蛋白表达棕黄色颗粒最多。差异具有统计学意义(P<0.05)。③Western Blot技术检测Smad3与Smad7的表达。与其它组相比,中西药联合组Smad3表达下调,Smad7表达上调(P<0.05)。结论:黄芪建中汤含药血清联合顺铂对肺癌A549细胞具有抑制增殖作用,其作用机制可能与上调smad7蛋白表达,下调Smad3蛋白表达有关。 展开更多

关键词 肺癌a549细胞 SMAD3 SMAD7 黄芪建中汤含药血清 顺铂

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5-氮杂-2′-脱氧胞苷联合SAHA对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其机制 被引量：3

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作者 李辉 段凤英 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第12期2006-2009,共4页

目的:探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对耐顺铂(DDP)的人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其可能的机制。方法:以A549、A549/DDP细胞为研究对... 目的:探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对耐顺铂(DDP)的人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其可能的机制。方法:以A549、A549/DDP细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选出5-Aza-CdR和SAHA对A549/DDP细胞的无毒浓度(即对细胞抑制率<10%的药物浓度),并检测出顺铂与无毒浓度5-Aza-CdR和(或)SAHA联合对耐药细胞株的半数抑制浓度(IC50)和耐药指数;采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测48h后各组细胞耐药相关基因MDRl、LRP mRNA的表达;采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。结果:5-Aza-CdR和SAHA对A549/DDP细胞的无毒浓度分别为5μmol/L和1μmol/L,两者均可使A549/DDP细胞对顺铂的IC50值下降,单独或联合应用时逆转倍数分别为1.6、1.8和4.6倍;经5-Aza-CdR和SAHA处理后各组细胞MDRl、LRP mRNA表达均明显减弱,凋亡明显增强,且两者联合具有协同作用(均P<0.05)。结论:5-Aza-CdR和SAHA可以逆转A549/DDP细胞的DDP耐药,且两者联合具有协同作用,其作用机制可能与下调耐药相关基因MDR1、LRPmRNA的表达,减弱肺癌细胞对化疗药物的外排作用有关。 展开更多

关键词 肺肿瘤 顺铂 a549/DDP细胞 表观遗传学 多药耐药基因1 肺耐药蛋白

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麦角甾醇与顺铂联合用药协同抑制人肺癌A549细胞增殖 被引量：3

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作者 吴梅佳 黄挺 +4 位作者 米完完 应园园 王航利 张梦迪 黄绳武 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期433-440,共8页

目的研究麦角甾醇(ERG)与顺铂联合用药对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法设细胞对照组、ERG 15.75~252μmol·L^(-1)组、顺铂16.75~268μmol·L^(-1)组及ERG 15.75~252μmol·L^(-1)+顺铂33.5μmol·L^(-1)组,分别... 目的研究麦角甾醇(ERG)与顺铂联合用药对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法设细胞对照组、ERG 15.75~252μmol·L^(-1)组、顺铂16.75~268μmol·L^(-1)组及ERG 15.75~252μmol·L^(-1)+顺铂33.5μmol·L^(-1)组,分别作用12,24,48和72 h,MTT法检测细胞存活。另设细胞对照组,ERG 31.5μmol·L^(-1)组、顺铂33.5μmol·L^(-1)组及ERG 31.5μmol·L^(-1)+顺铂33.5μmol·L^(-1)组,作用24 h后,划痕实验检测细胞迁移能力;Hoechst33258染色观察细胞凋亡;流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞周期;Western蛋白质印迹法检测活化胱天蛋白酶3和活化聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶1(PARP-1)的表达。结果 ERG 15.75~252μmol·L^(-1)+顺铂33.5μmol·L^(-1)各浓度组细胞存活抑制率相较于ERG等浓度15.75~252μmol·L^(-1)及顺铂(33.5μmol·L^(-1))组均有不同程度的提高。ERG 31.5μmol·L^(-1)+顺铂33.5μmol·L^(-1)组出现凋亡样的细胞数量及凋亡率明显高于二者单用(P<0.01)。与细胞对照组相比,其余各组显著上调活化胱天蛋白酶3的表达,ERG+顺铂组活化的PARP-1蛋白片段显著增加(P<0.01)。结论 ERG与顺铂两药联用能显著抑制A549细胞增殖和迁移能力,阻滞细胞G2/M期分裂,诱导并激活PARP-1依赖的细胞凋亡。 展开更多

关键词 麦角甾醇 顺铂 细胞凋亡 细胞周期 a549细胞

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益肺解毒方联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的影响 被引量：6

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作者 牟海军 赵丹 +1 位作者 石寒冰 毕红霞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1607-1611,共5页

目的研究益肺解毒方联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的影响。方法 CCK8法、流式细胞术分别检测高剂量益肺解毒方、顺铂、两药联合对A549细胞增殖、凋亡的影响,Transwell、细胞划痕实验检测三者对A549细胞侵袭转移的影响,Western blot、qRT-... 目的研究益肺解毒方联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的影响。方法 CCK8法、流式细胞术分别检测高剂量益肺解毒方、顺铂、两药联合对A549细胞增殖、凋亡的影响,Transwell、细胞划痕实验检测三者对A549细胞侵袭转移的影响,Western blot、qRT-PCR检测三者对A549细胞Bax、Bcl-2、MMP2、E-cad表达的影响。结果高剂量益肺解毒方、顺铂、两药联合对A549细胞增殖均有显著抑制作用(P<0.05),以两药联合最强,联合指数为1.21;三者均可明显诱导A549细胞凋亡(P<0.05),两药联合组更显著(P<0.05)。与空白对照组比较,3组划痕愈合距离缩短,穿过的细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05),两药联合组更显著(P<0.05)。与空白对照组比较,3组Bax、E-cad表达显著升高,Bcl-2、MMP2表达显著降低(P<0.05),两药联合组变化更明显(P<0.05)。结论益肺解毒方联合顺铂对抑制人肺腺癌A549细胞具有联合增效作用,其机制可能与抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡(促进Bax表达,抑制Bcl-2表达)、抑制细胞侵袭转移(下调MMP2表达,上调E-cad表达)有关。 展开更多

关键词 益肺解毒方 顺铂 人肺腺癌a549细胞

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aaptamine与顺铂联合用药对人肺腺癌顺铂耐药A549/DDP细胞的协同抑制作用

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作者 苗双 倪娜 +4 位作者 杨丽娟 武艳 李雪琳 董洪亮 宫凯凯 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期8-15,共8页

目的:探讨aaptamine与顺铂(DDP)联合用药对肺癌DDP耐药A549/DDP细胞的协同抑制作用,并阐明其可能的分子机制。方法:取对数生长期A549/DDP细胞,加入不同浓度aaptamine和(或)DDP培养48 h,采用CCK-8法检测aaptamine和DDP的半数抑制浓度(IC5... 目的:探讨aaptamine与顺铂(DDP)联合用药对肺癌DDP耐药A549/DDP细胞的协同抑制作用,并阐明其可能的分子机制。方法:取对数生长期A549/DDP细胞,加入不同浓度aaptamine和(或)DDP培养48 h,采用CCK-8法检测aaptamine和DDP的半数抑制浓度(IC50),利用Chou-Talalay中效分析法计算aaptamine和DDP的联合指数(CI),确定最佳联合用药浓度。将细胞分为对照组、aaptamine组(5 mg·L^-1)、DDP组(1 mg·L^-1)和联合用药组(5 mg·L^-1aaptamine+1 mg·L^-1DDP),采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,克隆形成实验检测各组细胞克隆数,划痕实验观察各组细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中耐药和凋亡相关蛋白表达水平。结果:aaptamine和DDP对A549/DDP细胞的IC50分别为19.45和12.86 mg·L^-1。所选择的不同浓度aaptamine和DDP对A549/DDP细胞均有协同抑制作用。细胞增殖实验,与对照组、aaptamine组和DDP组比较,联合用药组细胞增殖活性明显降低(P<0.01)。克隆形成实验,与对照组、aaptamine组和DDP组比较,联合用药组克隆数明显减少(P<0.05或P<0.01)。细胞划痕实验,与对照组、aaptamine组和DDP组比较,联合用药组细胞迁移率明显降低(P<0.01)。流式细胞术检测,与对照组、aaptamine组和DDP组比较,联合用药组细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组、aaptamine组和DDP组比较,联合用药组细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),B细胞淋巴瘤2原癌基因(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2比值明显升高(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,联合用药组切除修复交叉互补基因1(ERCC1)蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:aaptamine和DDP联合用药对A549/DDP细胞具有协同抑制作用,其机制可能与抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡和下调耐药蛋白ABCG2和ERCC1表达水平有关。 展开更多

关键词 aaptamine 顺铂耐药 肺肿瘤 a549/DDP细胞 协同作用

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顺铂通过激活细胞外信号调节激酶(ERK)通路促进A549人肺腺癌细胞PD-L1表达 被引量：5

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作者 朱虹 刘单 邓述恺 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期891-896,共6页

目的探讨顺铂(DDP)对人肺腺癌A549细胞的程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1)表达的影响及其可能的机制。方法体外培养人肺腺癌A549细胞,采用(0、0.5、1、2、4、8)mg/L DDP处理24、36、48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,并计算其半数抑制浓度(IC... 目的探讨顺铂(DDP)对人肺腺癌A549细胞的程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1)表达的影响及其可能的机制。方法体外培养人肺腺癌A549细胞,采用(0、0.5、1、2、4、8)mg/L DDP处理24、36、48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,并计算其半数抑制浓度(IC_(50)),选择最适抑制时间48 h及其IC_(50)用于后续实验。后续将A549细胞分为4组:空白对照组、IC_(50)的DDP组、20μmol/L的丝裂原活化蛋白激酶激酶抑制剂PD98059组、IC_(50)的DDP联合20μmol/L PD98059组。培养48 h,Western blot法检测细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化的ERK(p-ERK)蛋白表达,流式细胞术检测PD-L1表达。结果与对照组相比,DDP处理的A549细胞PD-L1表达均上调,且呈剂量依赖性,选择最适作用时间点为48h,其IC_(50)值为3.586 mg/L。与对照组相比,DDP处理组p-ERK、PD-L1表达增加,PD98059组p-ERK表达降低;DDP联合PD98059组较DDP组的p-ERK、PD-L1的表达降低,较PD98059组的p-ERK、PD-L1表达增加。结论DDP激活ERK信号通路上调A549细胞PD-L1表达。 展开更多

关键词 肺肿瘤 a549细胞 顺铂(DDP) 程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1) 细胞外信号调节激酶(ERK)

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晚期非小细胞肺癌中Survivin表达对顺铂敏感性和预后的预测价值 被引量：2

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作者 李伟 丁静 陈余清 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期1216-1221,共6页

目的:探讨Survivin预测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂敏感性的价值。方法:RT-PCR、Western blot法检测人肺腺癌细胞株A549和耐药株A549/CDDP中Survivin表达,Survivin siRNA转染A549/CDDP细胞,MTT、流式细胞术检测细胞生长与凋亡;免疫组... 目的:探讨Survivin预测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂敏感性的价值。方法:RT-PCR、Western blot法检测人肺腺癌细胞株A549和耐药株A549/CDDP中Survivin表达,Survivin siRNA转染A549/CDDP细胞,MTT、流式细胞术检测细胞生长与凋亡;免疫组织化学和RT-PCR检测晚期NSCLC组织中Survivin mRNA和蛋白表达。结果:A549/CDDP中Survivin mRNA和蛋白表达均高于A549细胞(P<0.01);A549/CDDP细胞中Survivin siRNA+CDDP组的生长抑制率达76.4%,IC_(50)为(34.12+3.55)μg/mL,耐药指数为6.71倍,均低于对照组(P<0.05)。该组的细胞凋亡率高于对照组(P<0.01);93例NSCLC蜡块组织中,Survivin蛋白表达阴性组接受含顺铂方案化疗有效率(44.4%)高于阳性组(19.3%,P<0.01);Survivin表达阴性组总生存、无疾病进展时间较阳性组长,但差异无统计学意义(P>0.05)。Cox多因素分析结果显示Survivin蛋白表达水平不是影响预后的独立因素。20例新鲜组织中Survivin mRNA低表达组反应率(RR)(60%)和蛋白表达阴性组RR(66.7%)高于mRNA高表达组(10%)和蛋白表达阳性组(9%,P<0.05)。结论:NSCLC组织中Survivin表达阳性提示顺铂耐药,检测Survivin表达对晚期NSCLC筛选含顺铂化疗方案具有指导意义。 展开更多

关键词 SURVIVIN 非小细胞肺癌 顺铂 a549 a549/CDDP

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