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lncRNA HIT对骨肉瘤组织和细胞U2OS顺铂抵抗的影响及其机制
被引量:
3
1
作者
康宇翔
任志鹏
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期1296-1302,共7页
目的:探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HIT与骨肉瘤细胞顺铂(cisplatin,DDP)抵抗的关系及其上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关机制。方法:选择天津医院骨科2017年6月至2018年6月42例骨肉瘤组...
目的:探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HIT与骨肉瘤细胞顺铂(cisplatin,DDP)抵抗的关系及其上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关机制。方法:选择天津医院骨科2017年6月至2018年6月42例骨肉瘤组织及相应癌旁组织(距癌变边缘>5 cm)标本,采用qRT-qPCR检测骨肉瘤组织及相应癌旁组织中HIT及EMT标志物Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)m RNA的表达水平。构建DDP抵抗的人骨肉瘤U2OS细胞株及人肾上腺293T细胞株作为抵抗组及对照组,采用慢病毒转染两组表达靶向HIT的siRNA载体于抵抗组细胞中作为干扰A组及B组,同时转染HIT过表达载体及空白载体构建HIT过表达的U2OS细胞株及空白U2OS细胞株分别作为过表达组及空白组。MTT实验检测各组细胞DDP半抑制浓度(IC_(50)),qRT-PCR实验检测各组细胞中HIT、Snail及E-cadherin mRNA的表达水平,Western blotting检测各组细胞Snail及Ecadherin的表达水平,RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA-IP)实验检测U2OS及293T细胞中HIT与Snail蛋白分子的结合情况。结果:骨肉瘤组织中HIT及Snail mRNA表达显著高于癌旁组织、E-cadherin mRNA表达显著低于癌旁组织,且骨肉瘤组织中HIT与E-cadherin mRNA表达呈显著负相关(均P<0.01);抵抗组细胞DDP IC_(50)显著高于对照组、干扰A组及B组细胞,过表达组DDP IC_(50)显著高于空白组(均P<0.01);抵抗组细胞HIT表达显著高于对照组,干扰A组及B组细胞HIT表达显著低于抵抗组及对照组,过表达组HIT表达显著高于空白组(均P<0.05或P<0.01);抵抗组细胞Snail、E-cadherin mRNA表达水平显著高于或低于对照组、干扰A组及干扰B组,过表达组E-cadherin mRNA显著低于空白组;抵抗组细胞Snail蛋白表达水平显著高于对照组、干扰A组及B组细胞,E-cadherin蛋白表达水平则显著低于对照组、干扰A组及B组细胞,过表达组Snail蛋白表达水平显著高于空白组(P<0.05或P<0.01);在U2OS及293T细胞中,免疫磁珠介导Anti-snail抗体下拉HIT的表达水平显著高于对照IgG抗体下拉HIT的表达水平(P<0.01)。结论:HIT通过正调控Snail蛋白水平,抑制E-cadherin的转录活性,从而促进骨肉瘤细胞EMT及DDP抵抗的发生。
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关键词
骨肉瘤
U2OS细胞
293T细胞
长链非编码RNAHIT
顺铂抵抗
上皮间充质转化
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职称材料
灭活仙台病毒体内外诱导顺铂耐药性肺腺癌A549/DDP细胞凋亡
2
作者
陈则东
沈晓鹏
+1 位作者
穆洪云
张泉
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2018年第3期57-62,共6页
目的顺铂(DDP)被广泛应用于肺癌的化疗。然而,顺铂抵抗性代表着临床有效治疗的最主要障碍。本实验室前期工作证明灭活仙台病毒(HVJ-E)具有诱导黑色素瘤细胞(B16)凋亡,与对照组相比明显减小荷瘤小鼠的肿瘤体积的作用。该研究主要用于探讨...
目的顺铂(DDP)被广泛应用于肺癌的化疗。然而,顺铂抵抗性代表着临床有效治疗的最主要障碍。本实验室前期工作证明灭活仙台病毒(HVJ-E)具有诱导黑色素瘤细胞(B16)凋亡,与对照组相比明显减小荷瘤小鼠的肿瘤体积的作用。该研究主要用于探讨HVJ-E对于顺铂抵抗性肺腺癌A549/DDP细胞是否具有诱导凋亡的作用。方法体外实验,将HVJ-E与A549/DDP细胞体外共培养,通过流式细胞术检测HVJ-E对A549/DDP细胞凋亡的影响;体内实验,将HVJ-E注射到肿瘤内,通过组织切片TUNEL法以及测量肿瘤体积大小观察HVJ-E的溶瘤效果。结果体外实验流式细胞术检测在12 h、24 h、36 h,A549/DDP晚期凋亡率分别为7.7%、12.6%、18.9%,且12 h与24 h、24 h与36 h的晚期凋亡率差异均有显著性;体内实验TUNEL法检测显示实验组与对照组相比有较多的肿瘤细胞凋亡;同时瘤内注射实验显示实验组肿瘤体积远小于对照组。结论实验结果表明灭活的HVJ-E在体内外均具有诱导A549/DDP细胞凋亡的作用,同时通过瘤内注射能够显著减小肿瘤体积。
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关键词
顺铂
灭活仙台病毒
顺铂抵抗
性A549细胞
凋亡
裸鼠
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职称材料
题名
lncRNA HIT对骨肉瘤组织和细胞U2OS顺铂抵抗的影响及其机制
被引量:
3
1
作者
康宇翔
任志鹏
机构
天津市天津医院骨科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期1296-1302,共7页
基金
天津市卫生局科技基金资助项目(No.2013KR17)
天津市天津医院科技基金资助项目(No.TJYY1508)~~
文摘
目的:探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HIT与骨肉瘤细胞顺铂(cisplatin,DDP)抵抗的关系及其上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关机制。方法:选择天津医院骨科2017年6月至2018年6月42例骨肉瘤组织及相应癌旁组织(距癌变边缘>5 cm)标本,采用qRT-qPCR检测骨肉瘤组织及相应癌旁组织中HIT及EMT标志物Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)m RNA的表达水平。构建DDP抵抗的人骨肉瘤U2OS细胞株及人肾上腺293T细胞株作为抵抗组及对照组,采用慢病毒转染两组表达靶向HIT的siRNA载体于抵抗组细胞中作为干扰A组及B组,同时转染HIT过表达载体及空白载体构建HIT过表达的U2OS细胞株及空白U2OS细胞株分别作为过表达组及空白组。MTT实验检测各组细胞DDP半抑制浓度(IC_(50)),qRT-PCR实验检测各组细胞中HIT、Snail及E-cadherin mRNA的表达水平,Western blotting检测各组细胞Snail及Ecadherin的表达水平,RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA-IP)实验检测U2OS及293T细胞中HIT与Snail蛋白分子的结合情况。结果:骨肉瘤组织中HIT及Snail mRNA表达显著高于癌旁组织、E-cadherin mRNA表达显著低于癌旁组织,且骨肉瘤组织中HIT与E-cadherin mRNA表达呈显著负相关(均P<0.01);抵抗组细胞DDP IC_(50)显著高于对照组、干扰A组及B组细胞,过表达组DDP IC_(50)显著高于空白组(均P<0.01);抵抗组细胞HIT表达显著高于对照组,干扰A组及B组细胞HIT表达显著低于抵抗组及对照组,过表达组HIT表达显著高于空白组(均P<0.05或P<0.01);抵抗组细胞Snail、E-cadherin mRNA表达水平显著高于或低于对照组、干扰A组及干扰B组,过表达组E-cadherin mRNA显著低于空白组;抵抗组细胞Snail蛋白表达水平显著高于对照组、干扰A组及B组细胞,E-cadherin蛋白表达水平则显著低于对照组、干扰A组及B组细胞,过表达组Snail蛋白表达水平显著高于空白组(P<0.05或P<0.01);在U2OS及293T细胞中,免疫磁珠介导Anti-snail抗体下拉HIT的表达水平显著高于对照IgG抗体下拉HIT的表达水平(P<0.01)。结论:HIT通过正调控Snail蛋白水平,抑制E-cadherin的转录活性,从而促进骨肉瘤细胞EMT及DDP抵抗的发生。
关键词
骨肉瘤
U2OS细胞
293T细胞
长链非编码RNAHIT
顺铂抵抗
上皮间充质转化
Keywords
osteosarcoma
U20S cell
293T cell
lncRNA HIT
DDP-resistance
epithelial-mesenchymal transition (EMT)
分类号
R730.51 [医药卫生—肿瘤]
R738.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
灭活仙台病毒体内外诱导顺铂耐药性肺腺癌A549/DDP细胞凋亡
2
作者
陈则东
沈晓鹏
穆洪云
张泉
机构
江苏农牧科技职业学院
扬州大学兽医学院
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2018年第3期57-62,共6页
基金
江苏高校品牌专业建设工程资助项目(编号:PPZY2015C230)
文摘
目的顺铂(DDP)被广泛应用于肺癌的化疗。然而,顺铂抵抗性代表着临床有效治疗的最主要障碍。本实验室前期工作证明灭活仙台病毒(HVJ-E)具有诱导黑色素瘤细胞(B16)凋亡,与对照组相比明显减小荷瘤小鼠的肿瘤体积的作用。该研究主要用于探讨HVJ-E对于顺铂抵抗性肺腺癌A549/DDP细胞是否具有诱导凋亡的作用。方法体外实验,将HVJ-E与A549/DDP细胞体外共培养,通过流式细胞术检测HVJ-E对A549/DDP细胞凋亡的影响;体内实验,将HVJ-E注射到肿瘤内,通过组织切片TUNEL法以及测量肿瘤体积大小观察HVJ-E的溶瘤效果。结果体外实验流式细胞术检测在12 h、24 h、36 h,A549/DDP晚期凋亡率分别为7.7%、12.6%、18.9%,且12 h与24 h、24 h与36 h的晚期凋亡率差异均有显著性;体内实验TUNEL法检测显示实验组与对照组相比有较多的肿瘤细胞凋亡;同时瘤内注射实验显示实验组肿瘤体积远小于对照组。结论实验结果表明灭活的HVJ-E在体内外均具有诱导A549/DDP细胞凋亡的作用,同时通过瘤内注射能够显著减小肿瘤体积。
关键词
顺铂
灭活仙台病毒
顺铂抵抗
性A549细胞
凋亡
裸鼠
Keywords
cisplatin
inactivated Sendai virus
cisplatin-resistant A549 cells
apoptosis
nude mice
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
lncRNA HIT对骨肉瘤组织和细胞U2OS顺铂抵抗的影响及其机制
康宇翔
任志鹏
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
灭活仙台病毒体内外诱导顺铂耐药性肺腺癌A549/DDP细胞凋亡
陈则东
沈晓鹏
穆洪云
张泉
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2018
0
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职称材料
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