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lncRNA HIT对骨肉瘤组织和细胞U2OS顺铂抵抗的影响及其机制 被引量:3
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作者 康宇翔 任志鹏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1296-1302,共7页
目的:探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HIT与骨肉瘤细胞顺铂(cisplatin,DDP)抵抗的关系及其上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关机制。方法:选择天津医院骨科2017年6月至2018年6月42例骨肉瘤组... 目的:探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HIT与骨肉瘤细胞顺铂(cisplatin,DDP)抵抗的关系及其上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关机制。方法:选择天津医院骨科2017年6月至2018年6月42例骨肉瘤组织及相应癌旁组织(距癌变边缘>5 cm)标本,采用qRT-qPCR检测骨肉瘤组织及相应癌旁组织中HIT及EMT标志物Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)m RNA的表达水平。构建DDP抵抗的人骨肉瘤U2OS细胞株及人肾上腺293T细胞株作为抵抗组及对照组,采用慢病毒转染两组表达靶向HIT的siRNA载体于抵抗组细胞中作为干扰A组及B组,同时转染HIT过表达载体及空白载体构建HIT过表达的U2OS细胞株及空白U2OS细胞株分别作为过表达组及空白组。MTT实验检测各组细胞DDP半抑制浓度(IC_(50)),qRT-PCR实验检测各组细胞中HIT、Snail及E-cadherin mRNA的表达水平,Western blotting检测各组细胞Snail及Ecadherin的表达水平,RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA-IP)实验检测U2OS及293T细胞中HIT与Snail蛋白分子的结合情况。结果:骨肉瘤组织中HIT及Snail mRNA表达显著高于癌旁组织、E-cadherin mRNA表达显著低于癌旁组织,且骨肉瘤组织中HIT与E-cadherin mRNA表达呈显著负相关(均P<0.01);抵抗组细胞DDP IC_(50)显著高于对照组、干扰A组及B组细胞,过表达组DDP IC_(50)显著高于空白组(均P<0.01);抵抗组细胞HIT表达显著高于对照组,干扰A组及B组细胞HIT表达显著低于抵抗组及对照组,过表达组HIT表达显著高于空白组(均P<0.05或P<0.01);抵抗组细胞Snail、E-cadherin mRNA表达水平显著高于或低于对照组、干扰A组及干扰B组,过表达组E-cadherin mRNA显著低于空白组;抵抗组细胞Snail蛋白表达水平显著高于对照组、干扰A组及B组细胞,E-cadherin蛋白表达水平则显著低于对照组、干扰A组及B组细胞,过表达组Snail蛋白表达水平显著高于空白组(P<0.05或P<0.01);在U2OS及293T细胞中,免疫磁珠介导Anti-snail抗体下拉HIT的表达水平显著高于对照IgG抗体下拉HIT的表达水平(P<0.01)。结论:HIT通过正调控Snail蛋白水平,抑制E-cadherin的转录活性,从而促进骨肉瘤细胞EMT及DDP抵抗的发生。 展开更多
关键词 骨肉瘤 U2OS细胞 293T细胞 长链非编码RNAHIT 顺铂抵抗 上皮间充质转化
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灭活仙台病毒体内外诱导顺铂耐药性肺腺癌A549/DDP细胞凋亡
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作者 陈则东 沈晓鹏 +1 位作者 穆洪云 张泉 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第3期57-62,共6页
目的顺铂(DDP)被广泛应用于肺癌的化疗。然而,顺铂抵抗性代表着临床有效治疗的最主要障碍。本实验室前期工作证明灭活仙台病毒(HVJ-E)具有诱导黑色素瘤细胞(B16)凋亡,与对照组相比明显减小荷瘤小鼠的肿瘤体积的作用。该研究主要用于探讨... 目的顺铂(DDP)被广泛应用于肺癌的化疗。然而,顺铂抵抗性代表着临床有效治疗的最主要障碍。本实验室前期工作证明灭活仙台病毒(HVJ-E)具有诱导黑色素瘤细胞(B16)凋亡,与对照组相比明显减小荷瘤小鼠的肿瘤体积的作用。该研究主要用于探讨HVJ-E对于顺铂抵抗性肺腺癌A549/DDP细胞是否具有诱导凋亡的作用。方法体外实验,将HVJ-E与A549/DDP细胞体外共培养,通过流式细胞术检测HVJ-E对A549/DDP细胞凋亡的影响;体内实验,将HVJ-E注射到肿瘤内,通过组织切片TUNEL法以及测量肿瘤体积大小观察HVJ-E的溶瘤效果。结果体外实验流式细胞术检测在12 h、24 h、36 h,A549/DDP晚期凋亡率分别为7.7%、12.6%、18.9%,且12 h与24 h、24 h与36 h的晚期凋亡率差异均有显著性;体内实验TUNEL法检测显示实验组与对照组相比有较多的肿瘤细胞凋亡;同时瘤内注射实验显示实验组肿瘤体积远小于对照组。结论实验结果表明灭活的HVJ-E在体内外均具有诱导A549/DDP细胞凋亡的作用,同时通过瘤内注射能够显著减小肿瘤体积。 展开更多
关键词 顺铂 灭活仙台病毒 顺铂抵抗性A549细胞 凋亡 裸鼠
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