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蓝细菌光敏色素Alr1966GAF2及其突变体的表达与光化学性质研究
1
作者
马琼
向建伟
+3 位作者
牟若兰
邓腊青
王运
周明
《植物科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期551-557,共7页
采用PCR技术从鱼腥藻(Anabaena sp.PCC7120)中扩增蓝细菌光敏色素基因片段alr1966gaf2,将alr1966gaf2插入到pET-30a(+)载体中,构建表达质粒pET-alr1966gaf2。最后将Alr1966GAF2与HO1、PcyA在E.coli BL21(DE3)中共表达获得色素蛋白Alr196...
采用PCR技术从鱼腥藻(Anabaena sp.PCC7120)中扩增蓝细菌光敏色素基因片段alr1966gaf2,将alr1966gaf2插入到pET-30a(+)载体中,构建表达质粒pET-alr1966gaf2。最后将Alr1966GAF2与HO1、PcyA在E.coli BL21(DE3)中共表达获得色素蛋白Alr1966GAF2,并对该蛋白的光化学性质进行分析。结果显示,色素蛋白Alr1966GAF2结合色素为藻蓝胆素(phycoerythrobilin,PCB)或藻紫胆素(phycoviolobilin,PVB),在3种不同吸收态15Z-P428 nm、中间态和15E-P514 nm之间具有顺序可逆光效应。通过定点突变技术将DXCF基序中的保守性Cys突变为Ala,获得了突变体Alr1966GAF2(C72A)。将Alr1966GAF2(C72A)与HO1、PcyA共表达,获得色素蛋白Alr1966GAF2(C72A)。研究结果表明Alr1966GAF2(C72A)结合色素为PCB,Alr1966GAF2(C72A)-PCB具有较强的荧光活性,其荧光量子的产率高达0.11。Alr1966GAF2(C72A)不仅能够共价结合PCB,还可以结合胆绿素(Biliverdin,BV),均具有较强的红色荧光活性。
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关键词
蓝细菌光敏色素
顺序可逆光效应
红色荧光蛋白
胆绿素
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职称材料
题名
蓝细菌光敏色素Alr1966GAF2及其突变体的表达与光化学性质研究
1
作者
马琼
向建伟
牟若兰
邓腊青
王运
周明
机构
湖北民族大学生物资源保护与利用湖北省重点实验室
湖北民族大学生物科学与技术学院
华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
出处
《植物科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期551-557,共7页
基金
恩施州科技计划项目(D20190025)
国家自然科学基金(21472055)
+1 种基金
湖北民族大学高水平科研成果校内培育项目(PY20020)
湖北民族大学大学生科研训练项目(X201910517274,X201910517231)。
文摘
采用PCR技术从鱼腥藻(Anabaena sp.PCC7120)中扩增蓝细菌光敏色素基因片段alr1966gaf2,将alr1966gaf2插入到pET-30a(+)载体中,构建表达质粒pET-alr1966gaf2。最后将Alr1966GAF2与HO1、PcyA在E.coli BL21(DE3)中共表达获得色素蛋白Alr1966GAF2,并对该蛋白的光化学性质进行分析。结果显示,色素蛋白Alr1966GAF2结合色素为藻蓝胆素(phycoerythrobilin,PCB)或藻紫胆素(phycoviolobilin,PVB),在3种不同吸收态15Z-P428 nm、中间态和15E-P514 nm之间具有顺序可逆光效应。通过定点突变技术将DXCF基序中的保守性Cys突变为Ala,获得了突变体Alr1966GAF2(C72A)。将Alr1966GAF2(C72A)与HO1、PcyA共表达,获得色素蛋白Alr1966GAF2(C72A)。研究结果表明Alr1966GAF2(C72A)结合色素为PCB,Alr1966GAF2(C72A)-PCB具有较强的荧光活性,其荧光量子的产率高达0.11。Alr1966GAF2(C72A)不仅能够共价结合PCB,还可以结合胆绿素(Biliverdin,BV),均具有较强的红色荧光活性。
关键词
蓝细菌光敏色素
顺序可逆光效应
红色荧光蛋白
胆绿素
Keywords
Cyanobacteriochrome
Sequential reversibility
Red fluorescent protein
Biliverdin
分类号
Q946 [生物学—植物学]
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题名
作者
出处
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1
蓝细菌光敏色素Alr1966GAF2及其突变体的表达与光化学性质研究
马琼
向建伟
牟若兰
邓腊青
王运
周明
《植物科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
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