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miR-221/222及其靶基因在妊娠期肝内胆汁淤积症发病机制中作用的研究
被引量：
8
1
作者
王林若
刘建
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期662-667,共6页
目的:研究微小核糖核酸(MicroRNA,miRNA)221/222 及其靶基因在正常孕妇和妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepaticcholestasis of pregnancy,ICP)孕妇胎盘中表达的差异,并通过细胞实验过表达方法研究 miR-221/222 对靶基因表达影响,探讨其在 ...
目的:研究微小核糖核酸(MicroRNA,miRNA)221/222 及其靶基因在正常孕妇和妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepaticcholestasis of pregnancy,ICP)孕妇胎盘中表达的差异,并通过细胞实验过表达方法研究 miR-221/222 对靶基因表达影响,探讨其在 ICP 发病机制中的作用。方法:搜集 2015 年 9 月到 2016 年 3 月在重庆医科大学附属第二医院妇产科行剖宫产分娩的正常孕妇和 ICP 孕妇的胎盘组织各 20 例,直接提取 miRNA,采用实时荧光定量逆转录 PCR(qRT-PCR)检测 miR-221/222 在 2 组胎盘组织中的表达情况;预测 miR-221/222 的靶基因是顶端钠依赖性胆酸转运体(apical sodium-dependent bile acid transporter,ASBT,又称 SLC10A2);Western blot 检测 ASBT 在 ICP 和正常胎盘组织中的表达情况;用 Lipofectaine2000 脂质体包裹合成的miR-221/222 mimic 转染正常滋养细胞 HTR-8;qRT-PCR 检测 miR-221/222 表达水平;蛋白质印迹法检测转染后 ASBT 蛋白表达。结果:①经过内参 U6 的校正,miR-221 在 ICP 胎盘表达量为 1.066±0.044,正常胎盘表达量为 0.053±0.009;miR-222 在ICP胎盘表达量为 13.724±4.355,正常胎盘表达量为 0.833±0.189。可见 miR-221/222 在 ICP 胎盘中的表达明显上调(P<0.05)。②SLC10A2 在 ICP 组中的表达量为 0.328±0.102,在正常组中的表达量为 0.604±0.119,其在 ICP 组的表达较正常组的表达下调(P=0.000)。③经过内参 ACTIN 校正,ASBT 在转染 miR-221 组细胞内表达量为 0.338±0.064,对照组表达量为 0.583±0.040;ASBT 在转染 miR-222 组细胞内表达量为 0.371±0.024,对照组表达量为 0.624±0.031,可见 ASBT 在转染组中较对照组表达下调。结论:miR-221/222 在 ICP 胎盘组织中表达升高,而其预测靶基因 ASBT 的表达则下降;细胞实验中 miR-221/222 转染组靶基因 ASBT 表达下降。两者之间可能存在负调控关系。可能由此影响了孕妇胆汁酸在肠道的重吸收及在肝脏的转运而导致妊娠期肝内胆汁淤积。
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关键词
妊娠期肝内
胆
汁淤积症
miR-221/222
顶端
钠
依赖性
胆
汁酸
转运体
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职称材料
口服肝靶向制剂介导受体ASBT和ASGPR在肝泡型包虫病大鼠模型体内的表达分析
被引量：
1
2
作者
高瑞雪
胡春晖
+4 位作者
张发斌
高攀
甘雪辉
张耀刚
姜博璠
《临床肝胆病杂志》
CAS
北大核心
2021年第4期846-851,共6页
目的通过测定顶端钠依赖性胆盐转运体(ASBT)和去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的表达研究,探讨其在肝泡型包虫病(HAE)药物治疗方面口服肝靶向制剂设计的可行性。方法18只雄性SD大鼠,10只大鼠造模,造模成功的8只大鼠为HAE组,正常组大鼠8只作...
目的通过测定顶端钠依赖性胆盐转运体(ASBT)和去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的表达研究,探讨其在肝泡型包虫病(HAE)药物治疗方面口服肝靶向制剂设计的可行性。方法18只雄性SD大鼠,10只大鼠造模,造模成功的8只大鼠为HAE组,正常组大鼠8只作为对照。采用免疫荧光、Western Blot、实时荧光定量PCR对ASBT在HAE模型大鼠及正常大鼠的回肠组织的表达分布、蛋白及基因表达水平进行检测分析;采用同样的检测方法分析ASGPR在HAE大鼠模型的非患病肝组织、肝组织病灶边缘带及正常大鼠肝组织的表达水平。符合正态分布的计量资料2组间比较采用t检验,3组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果免疫荧光、Western Blot、实时荧光定量PCR结果均显示ASBT在HAE组回肠组织的表达较正常组表达上调(t值分别为5.309、4.110、28.060,P值均<0.05)。免疫荧光、Western Blot、实时荧光定量PCR结果均显示,ASGPR在正常对照组大鼠肝组织、HAE组大鼠非患病肝组织和HAE组大鼠肝织病灶边缘带中表达差异有统计学意义(F值分别为110.666、128.201、143.879,P值均<0.001),其中HAE组较正常组表达水平高,且越靠近病灶组织表达越高。结论ASBT和ASGPR可作为HAE潜在的口服肝靶向制剂的介导受体,为设计用于治疗HAE的口服肝靶向制剂提供理论基础。
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关键词
棘球蚴病
肝
分子靶向治疗
顶端钠依赖性胆盐转运体
去唾液酸糖蛋白受体
大鼠
Sprague-Dawley
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职称材料
题名
miR-221/222及其靶基因在妊娠期肝内胆汁淤积症发病机制中作用的研究
被引量：
8
1
作者
王林若
刘建
机构
重庆医科大学附属第二医院妇产科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期662-667,共6页
文摘
目的:研究微小核糖核酸(MicroRNA,miRNA)221/222 及其靶基因在正常孕妇和妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepaticcholestasis of pregnancy,ICP)孕妇胎盘中表达的差异,并通过细胞实验过表达方法研究 miR-221/222 对靶基因表达影响,探讨其在 ICP 发病机制中的作用。方法:搜集 2015 年 9 月到 2016 年 3 月在重庆医科大学附属第二医院妇产科行剖宫产分娩的正常孕妇和 ICP 孕妇的胎盘组织各 20 例,直接提取 miRNA,采用实时荧光定量逆转录 PCR(qRT-PCR)检测 miR-221/222 在 2 组胎盘组织中的表达情况;预测 miR-221/222 的靶基因是顶端钠依赖性胆酸转运体(apical sodium-dependent bile acid transporter,ASBT,又称 SLC10A2);Western blot 检测 ASBT 在 ICP 和正常胎盘组织中的表达情况;用 Lipofectaine2000 脂质体包裹合成的miR-221/222 mimic 转染正常滋养细胞 HTR-8;qRT-PCR 检测 miR-221/222 表达水平;蛋白质印迹法检测转染后 ASBT 蛋白表达。结果:①经过内参 U6 的校正,miR-221 在 ICP 胎盘表达量为 1.066±0.044,正常胎盘表达量为 0.053±0.009;miR-222 在ICP胎盘表达量为 13.724±4.355,正常胎盘表达量为 0.833±0.189。可见 miR-221/222 在 ICP 胎盘中的表达明显上调(P<0.05)。②SLC10A2 在 ICP 组中的表达量为 0.328±0.102,在正常组中的表达量为 0.604±0.119,其在 ICP 组的表达较正常组的表达下调(P=0.000)。③经过内参 ACTIN 校正,ASBT 在转染 miR-221 组细胞内表达量为 0.338±0.064,对照组表达量为 0.583±0.040;ASBT 在转染 miR-222 组细胞内表达量为 0.371±0.024,对照组表达量为 0.624±0.031,可见 ASBT 在转染组中较对照组表达下调。结论:miR-221/222 在 ICP 胎盘组织中表达升高,而其预测靶基因 ASBT 的表达则下降;细胞实验中 miR-221/222 转染组靶基因 ASBT 表达下降。两者之间可能存在负调控关系。可能由此影响了孕妇胆汁酸在肠道的重吸收及在肝脏的转运而导致妊娠期肝内胆汁淤积。
关键词
妊娠期肝内
胆
汁淤积症
miR-221/222
顶端
钠
依赖性
胆
汁酸
转运体
Keywords
intrahepatic cholestasis of pregnancy
miR-221/222
apical sodium-dependent bile acid transporter
分类号
R714.25 [医药卫生—妇产科学]
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职称材料
题名
口服肝靶向制剂介导受体ASBT和ASGPR在肝泡型包虫病大鼠模型体内的表达分析
被引量：
1
2
作者
高瑞雪
胡春晖
张发斌
高攀
甘雪辉
张耀刚
姜博璠
机构
青海大学医学院
青海省包虫病研究重点实验室
出处
《临床肝胆病杂志》
CAS
北大核心
2021年第4期846-851,共6页
基金
国家自然科学基金项目(81960641)
青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室自主课题项目(2019-ZZ-01)。
文摘
目的通过测定顶端钠依赖性胆盐转运体(ASBT)和去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的表达研究,探讨其在肝泡型包虫病(HAE)药物治疗方面口服肝靶向制剂设计的可行性。方法18只雄性SD大鼠,10只大鼠造模,造模成功的8只大鼠为HAE组,正常组大鼠8只作为对照。采用免疫荧光、Western Blot、实时荧光定量PCR对ASBT在HAE模型大鼠及正常大鼠的回肠组织的表达分布、蛋白及基因表达水平进行检测分析;采用同样的检测方法分析ASGPR在HAE大鼠模型的非患病肝组织、肝组织病灶边缘带及正常大鼠肝组织的表达水平。符合正态分布的计量资料2组间比较采用t检验,3组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果免疫荧光、Western Blot、实时荧光定量PCR结果均显示ASBT在HAE组回肠组织的表达较正常组表达上调(t值分别为5.309、4.110、28.060,P值均<0.05)。免疫荧光、Western Blot、实时荧光定量PCR结果均显示,ASGPR在正常对照组大鼠肝组织、HAE组大鼠非患病肝组织和HAE组大鼠肝织病灶边缘带中表达差异有统计学意义(F值分别为110.666、128.201、143.879,P值均<0.001),其中HAE组较正常组表达水平高,且越靠近病灶组织表达越高。结论ASBT和ASGPR可作为HAE潜在的口服肝靶向制剂的介导受体,为设计用于治疗HAE的口服肝靶向制剂提供理论基础。
关键词
棘球蚴病
肝
分子靶向治疗
顶端钠依赖性胆盐转运体
去唾液酸糖蛋白受体
大鼠
Sprague-Dawley
Keywords
Echinococcosis,Hepatic
Molecular Targeted Therapy
Apical Sodium-Dependent Bile Salt Transporter
Asialoglycoprotein Receptor
Rats,Sprague-Dawley
分类号
R532.32 [医药卫生—内科学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-221/222及其靶基因在妊娠期肝内胆汁淤积症发病机制中作用的研究
王林若
刘建
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
8
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下载PDF
职称材料
2
口服肝靶向制剂介导受体ASBT和ASGPR在肝泡型包虫病大鼠模型体内的表达分析
高瑞雪
胡春晖
张发斌
高攀
甘雪辉
张耀刚
姜博璠
《临床肝胆病杂志》
CAS
北大核心
2021
1
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