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靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞毒性作用的体内外验证
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作者 张仪婷 席文锦 +6 位作者 王鹏举 赵晓娟 郑瑞 梁思辛 蒙若彤 阎博 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期289-295,共7页
目的 对靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞进行毒理学评估,为其后期HER2-CAR-T细胞治疗的临床上评估提供安全性依据。方法 利用重组慢病毒载体制备HER2-CAR-T细胞,采用软琼脂集落形成实验,观察HER2-CAR-T细胞集落... 目的 对靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞进行毒理学评估,为其后期HER2-CAR-T细胞治疗的临床上评估提供安全性依据。方法 利用重组慢病毒载体制备HER2-CAR-T细胞,采用软琼脂集落形成实验,观察HER2-CAR-T细胞集落形成情况并对集落形成率进行统计分析;将HER2-CAR-T细胞悬液与兔红细胞悬液共孵,通过直接观察法以及酶标仪检测法评估红细胞溶解情况;对雄性新西兰兔耳缘静脉注射HER2-CAR-T细胞制剂,通过组织切片染色观察HER2-CAR-T细胞对动物血管的刺激作用;以pMD 2.G载体上的水泡性口炎病毒囊膜糖蛋白(VSV-G)基因为目标序列,利用荧光定量PCR进行慢病毒载体安全性的验证;取接受HER2-CAR-T细胞输注的小鼠心、肝、肺、肾,HE染色观察其病变情况。结果 成功制备了HER2-CAR-T细胞,这些细胞在体外不具备软琼脂集落形成能力,HER2-CAR-T细胞制剂对新西兰兔红细胞不产生溶血现象。新西兰兔耳缘静脉输注HER2-CAR-T细胞后未发现明显血管刺激反应,也未检测到VSV-G的特异性扩增,治疗组小鼠心、肝、肺、肾组织未见明显病变。结论 所制备的HER2-CAR-T细胞具有可靠安全性。 展开更多
关键词 安全性 毒理学 向人表皮生长因子2嵌合抗原受体t(her2-car-t)细胞 集落形成实验 溶血 血管刺激性 器官毒性
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嵌合抗原受体T细胞治疗多形性胶质母细胞瘤的最新进展 被引量:1
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作者 白玥 钟晓松 李文斌 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第16期794-799,共6页
多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)是恶性程度最高的脑胶质瘤,传统手术结合放、化疗疗效有限。嵌合抗原受体是由单一分子组成的抗原重组受体,重新定向T细胞的特异性和功能,由CD28或4-1BB构成的第二代CAR-T能识别抗原,完... 多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)是恶性程度最高的脑胶质瘤,传统手术结合放、化疗疗效有限。嵌合抗原受体是由单一分子组成的抗原重组受体,重新定向T细胞的特异性和功能,由CD28或4-1BB构成的第二代CAR-T能识别抗原,完全活化T细胞并增强T细胞功能和持久性,是新兴GBM疗法的关注焦点。本文从CAR-T研究现状出发,主要介绍其发展历程和GBM相关的有效靶点,综述其理论基础,着重以白介素13受体α2、表皮生长因子受体变异Ⅶ、人表皮生长因子受体2和酪氨酸蛋白激酶受体A2这四种胶质瘤相关抗原为例,探讨靶点的结构、功能特性、前期研究和临床研究前景。选择性表达在GBM的白介素13受体α2在临床Ⅰ期治疗复发性GBM是安全有效的;表皮生长因子受体变异Ⅷ只存在于癌细胞和胶质母细胞瘤干细胞,与预后不良密切相关,正在进行Ⅰ、Ⅱ期临床试验;表皮生长因子受体2和酪氨酸蛋白激酶受体A也取得重大进展。这些特异性CAR-T可能成为治疗相应靶向阳性的GBM的重要免疫疗法。本文集中总结了目前CAR-T治疗GBM的应用价值及挑战。 展开更多
关键词 多形性胶质母细胞 嵌合抗原受体t细胞 白介素13受体α2 表皮生长因子受体变异Ⅷ 人表皮生长因子受体2 酪氨酸蛋白激酶受体A2
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HER2靶向TRAC和B2M双基因敲除通用型CAR-T细胞的制备及对非小细胞肺癌细胞的杀伤作用 被引量:3
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作者 宋源 李秧 +7 位作者 阎博 左百乐 赵丽君 赵晓娟 王鹏举 王依依 杨安钢 王向鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期432-438,共7页
目的利用同种异体健康人T细胞,制备靶向人表皮生长因子受体2(HER2)的通用型嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞,检测其对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤能力。方法构建靶向HER2的人源化单链抗体P1h2 CAR慢病毒表达载体,包装慢病毒感染健康人T细胞获得CA... 目的利用同种异体健康人T细胞,制备靶向人表皮生长因子受体2(HER2)的通用型嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞,检测其对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤能力。方法构建靶向HER2的人源化单链抗体P1h2 CAR慢病毒表达载体,包装慢病毒感染健康人T细胞获得CAR-T细胞;利用成簇的规律间隔的短回文重复序列/Cas9核酸酶(CRISPR/Cas9)技术敲除CAR-T的T细胞受体(TCR)和人类白细胞抗原Ⅰ(HLA-Ⅰ),制备靶向HER2的通用型CAR-T细胞,CCK-8试验检测其对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤能力。结果制备通用型CAR-T细胞,CAR阳性率为(67.1±1.46)%,TCR和HLA-Ⅰ类分子的敲除率为(86.31±1.78)%。体外杀伤试验显示通用型CAR-T细胞能够有效杀伤HER2阳性肿瘤细胞,其杀伤能力与CAR-T细胞无明显区别。结论成功制备能够靶向杀伤HER2阳性肿瘤细胞的通用型CAR-T细胞,为实现应用通用型同种异体CAR-T细胞治疗HER2阳性肿瘤患者奠定了基础。 展开更多
关键词 同种异体 表皮生长因子受体2 嵌合抗原受体t(CAR-t)细胞 通用型CAR-t细胞
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HER2阳性胃癌免疫治疗的研究进展 被引量:7
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作者 潘云枫(综述) 刘宝瑞(审阅) 魏嘉(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期90-96,共7页
人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性胃癌是胃癌的重要亚型,靶向HER2的免疫治疗能显著改善晚期胃癌患者的预后,并已成为晚期胃癌的一线标准治疗。免疫治疗是肿瘤治疗领域的研究热点,通过直接或间... 人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性胃癌是胃癌的重要亚型,靶向HER2的免疫治疗能显著改善晚期胃癌患者的预后,并已成为晚期胃癌的一线标准治疗。免疫治疗是肿瘤治疗领域的研究热点,通过直接或间接地调动机体的固有和适应性免疫发挥抗肿瘤效应。免疫治疗在晚期胃癌中的应用主要集中在二线、三线及以后,其在HER2阳性胃癌患者中的小样本试验性应用获得了初步的疗效,提示HER2阳性胃癌免疫治疗的使用具有进一步研究的价值。本文将从现有的主要免疫治疗手段——免疫检查点抑制剂、嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T细胞)和治疗性疫苗三个方面,整合临床前实验与相关临床试验的数据,阐述HER2阳性胃癌免疫治疗的研究进展,探讨HER2阳性胃癌免疫治疗的潜在机制,同时对免疫治疗的疗效与安全性进行综合评价,展望HER2阳性胃癌免疫治疗的广阔前景及研究的新方向。 展开更多
关键词 人表皮生长因子受体2(her2) 胃癌 免疫治疗 免疫检查点抑制剂 嵌合抗原受体t细胞(CAR-t细胞) 治疗性疫苗
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