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食品中非O157大肠杆菌志贺毒素基因序列分析 被引量:1
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作者 李睿 戴诗皎 +2 位作者 戴锴 杜德龙 朱廷恒 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第21期236-238,共3页
对一株从食品中分离的非O157产志贺毒素1型大肠杆菌(EC6)进行研究。将该菌株所产志贺毒素Stx1用PCR扩增stx1基因全长并克隆测序,其stx1基因与GenBank数据库收录的stx1基因最高同源性为99%,表明EC6发生了一定程度的基因突变。采用邻位相... 对一株从食品中分离的非O157产志贺毒素1型大肠杆菌(EC6)进行研究。将该菌株所产志贺毒素Stx1用PCR扩增stx1基因全长并克隆测序,其stx1基因与GenBank数据库收录的stx1基因最高同源性为99%,表明EC6发生了一定程度的基因突变。采用邻位相连法构建进化树,结果表明EC6为stx1基因亚型。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 食品 stx1基因 序列分析 o157血清型
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大肠杆菌O157志贺毒素1胶乳凝集试剂的研制 被引量:1
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作者 刘建青 周志江 +2 位作者 韩烨 郑峰 薄清如 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期29-33,共5页
根据大肠杆菌933W志贺毒素1(STX1)基因的序列,设计合成寡核苷酸引物,以国内分离的大肠杆菌O157菌株94H的DNA为摸板,经PCR扩增志贺毒素1A亚基基因,扩增的基因克隆到原核表达载体pET-28a,在E.coliBL21中进行表达。用表达的STX1A产物免疫兔... 根据大肠杆菌933W志贺毒素1(STX1)基因的序列,设计合成寡核苷酸引物,以国内分离的大肠杆菌O157菌株94H的DNA为摸板,经PCR扩增志贺毒素1A亚基基因,扩增的基因克隆到原核表达载体pET-28a,在E.coliBL21中进行表达。用表达的STX1A产物免疫兔子,制备STX1A抗血清,从中提取IgG。合成胶乳,用提取的IgG与胶乳交连反应,研制出了敏感和简便的检测大肠杆菌O157STX1产生的胶乳检测试剂。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157 志贺毒素1 A亚基 原核表达 胶乳试剂
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肠出血性大肠杆菌O157∶H7变种Q蛋白对志贺毒素表达的影响 被引量:1
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作者 李嘉文 郑冬冬 +4 位作者 王宏勋 刘志国 余晓丽 周帼萍 李睿 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第15期151-155,共5页
1株肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7变种EC169菌株,携带stx基因但不表达志贺毒素。通过高效热不对称交错聚合酶链式反应(high-efficiency thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction,hiTAIL-PCR)hiTAILPCR扩增得到EC169 stx1... 1株肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7变种EC169菌株,携带stx基因但不表达志贺毒素。通过高效热不对称交错聚合酶链式反应(high-efficiency thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction,hiTAIL-PCR)hiTAILPCR扩增得到EC169 stx1及其上游核苷酸片段并克隆测序,结果表明:EC169 q基因与标准株sakai q基因相比存在6个SNP位点。通过PCR扩增O157∶H7高毒株EC150 q基因全长,并构建表达载体pkk223-q分别转化EC169和低毒株EC157。反转录荧光定量PCR实验结果表明,外源q基因在EC169和EC157重组菌中可高效表达,并引起EC157stx转录水平上调,但EC169重组菌stx转录水平不变。反向乳胶凝集实验结果亦证实EC157重组菌志贺毒素表达量提高,而EC169重组菌志贺毒素表达量不变。Q蛋白变异可能并非EC169志贺毒素不表达的主要原因。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157∶H7 Q蛋白 反转录荧光定量PCR 志贺毒素 hiTAIL-PCR
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南疆不同区域犊牛粪源大肠杆菌非O157致病性STEC的分离及耐药性分析 被引量:2
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作者 吾买尔江·牙合甫 买占海 +7 位作者 韩俊成 阿卜杜米吉提·艾海提 阿丽米热·买买提 杨莉 戴小华 刘英玉 夏利宁 吾买尔·尼亚孜 《中国草食动物科学》 CAS 2020年第6期46-50,共5页
对南疆某区A、B、C、D不同规模化肉牛场0~90日龄腹泻犊牛粪源大肠杆菌菌株进行分离、非O157 STEC毒力基因(stx1、stx2)检测和兽医临床常用药物耐药性分析。结果显示,大肠杆菌菌株分离率74.5%(205/275),非O157 STEC毒力基因stx1、stx2检... 对南疆某区A、B、C、D不同规模化肉牛场0~90日龄腹泻犊牛粪源大肠杆菌菌株进行分离、非O157 STEC毒力基因(stx1、stx2)检测和兽医临床常用药物耐药性分析。结果显示,大肠杆菌菌株分离率74.5%(205/275),非O157 STEC毒力基因stx1、stx2检出率21.9%(45/205),其中stx2检出率11.2%(23/205)、stx1+stx2检出率9.7%(20/205),均较高。未扩增出rfbE、fliC条带,视为非O157产志贺毒素大肠杆菌。分离菌株对兽医临床抗菌药物总耐药率表现为敏感,不同养殖场耐药性分析表明,A场38株犊牛源大肠杆菌菌株对阿莫西林中敏,B场60株菌株对庆大霉素表现为中耐。说明该区犊牛已被STEC感染,传播途径可能是水源、饲草料、母乳、环境,有必要进一步分析该牛场食物链。 展开更多
关键词 犊牛 非o157产志贺毒素大肠杆菌 鉴定 毒力基因 耐药性
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大肠杆菌O157的志贺毒素基因克隆和测序
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作者 李睿 孙言凤 +1 位作者 王芳 熊燕 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第9期65-67,共3页
将一株大肠杆菌O157PCR扩增stx2基因全长并克隆测序。该菌株stx2基因与GenBank数据库收录的stx2基因最高同源性为98%,在3个核苷酸位点存在基因突变。采用邻位相连法构建进化树,序列分析结果表明O157为stx2C基因亚型。了解大肠杆菌O157... 将一株大肠杆菌O157PCR扩增stx2基因全长并克隆测序。该菌株stx2基因与GenBank数据库收录的stx2基因最高同源性为98%,在3个核苷酸位点存在基因突变。采用邻位相连法构建进化树,序列分析结果表明O157为stx2C基因亚型。了解大肠杆菌O157的基因突变情况,并为开发大肠杆菌分子检测方法提供了参考。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157 志贺毒素基因 基因克隆 测序
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O26等产志贺毒素的6种血清型大肠杆菌的暴发流行情况及检测研究现状 被引量:5
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作者 夏诗琪 赖卫华 +1 位作者 刘道峰 崔希 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第17期301-305,共5页
近年来,产志贺毒素而非O157的大肠杆菌,尤其是被美国农业部称为"the Big Six"的6种大肠杆菌在诸多国家及地区暴发流行,严重威胁人类的健康,越来越受到世界各国的关注。"the Big Six"包括大肠杆菌O26、O45、O103、O... 近年来,产志贺毒素而非O157的大肠杆菌,尤其是被美国农业部称为"the Big Six"的6种大肠杆菌在诸多国家及地区暴发流行,严重威胁人类的健康,越来越受到世界各国的关注。"the Big Six"包括大肠杆菌O26、O45、O103、O111、O121、O145等6种血清型。目前,在国内,关于"the Big Six"的报道及研究相对较少。文中介绍"the Big Six"的暴发流行情况,并对各种检测方法进行综述。 展开更多
关键词 志贺毒素o157大肠杆菌 暴发 检测
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江苏某奶牛场健康奶牛体内产志贺毒素大肠杆菌的分离鉴定及其对小鼠致病性的研究 被引量:12
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作者 薛涛 顾丛丛 +4 位作者 高崧 焦新安 周琼 张文俊 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期830-837,共8页
通过对江苏省某奶牛场连续6个月的定群、定畜跟踪调查,获得产志贺毒素大肠杆菌(STEC)在该牛场分布的广泛性、持续性和血清型多样化的资料,并对一些重要血清型分离株作致病性的鉴定。基于本实验室已经建立的多重PCR方法对stx1、stx2、eae... 通过对江苏省某奶牛场连续6个月的定群、定畜跟踪调查,获得产志贺毒素大肠杆菌(STEC)在该牛场分布的广泛性、持续性和血清型多样化的资料,并对一些重要血清型分离株作致病性的鉴定。基于本实验室已经建立的多重PCR方法对stx1、stx2、eaeA、ehxA共4个基因进行检测,对检测出的阳性样品,非O157STEC采用多重PCR结合CT-SMAC平板的分离方法,而O157STEC通过免疫磁珠结合O157显色平板的分离方法。结果表明,该奶牛场STEC的初筛率为16.1%(112/696),分离率为11.1%(77/696)。分离株属于35种O血清型和60种O∶H血清型。该场的优势血清型为O4、O26和O93,O157在该场存在,但并非优势血清型。77个分离株中,stx2基因的检出率为68.8%,远远高于其它毒力基因,如stx1(19.5%)、eaeA(11.7%)和ehxA(20.8%)。该场分离到一些O157和O26血清型的菌株,对小鼠具有较强的致病性。奶牛是STEC的天然宿主,可健康带菌。除了O157STEC外,非O157STEC中一些高致病力菌株对人类的健康也存在威胁。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 奶牛 多重PCR o抗原 H抗原 毒力基因
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关于产志贺毒素大肠杆菌O26的解读 被引量:2
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作者 谷悦 《中国食品》 2016年第5期136-137,共2页
近日,据美国食品安全新闻网消息,由美国墨西哥风味连锁餐厅Chipotle食物中毒引发的产志贺毒素大肠杆菌O26疫情在美国蔓延,导致20人住院。美国疾病预防和控制中心(CDC)称,近两年来由产志贺毒素大肠杆菌O26引发的食物中毒事件明显增多,... 近日,据美国食品安全新闻网消息,由美国墨西哥风味连锁餐厅Chipotle食物中毒引发的产志贺毒素大肠杆菌O26疫情在美国蔓延,导致20人住院。美国疾病预防和控制中心(CDC)称,近两年来由产志贺毒素大肠杆菌O26引发的食物中毒事件明显增多,在未来可能引发更多的疫情,尤其是引发溶血性尿毒综合症的病例数量可能会远超过产志贺毒素大肠杆菌O157。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157 志贺毒素 食物中毒事件 解读 食品安全 控制中心 疾病预防 美国
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2009年爱达荷州与犹他州牛仔竞技表演现场有关志贺毒素大肠杆菌O157:H7感染的暴发
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作者 武峪峰 《临床荟萃》 CAS 2011年第14期1227-1227,共1页
2009年夏季,犹他州卫生局调查了一起与多个牛仔竞技表演现场有关的志贺毒素大肠杆菌(STEC)O157:H7(O157)疾病的暴发情况。面试患者,调查涉及到疾病发生前1周的暴露情况。进行了地面牛肉追溯调查,从患者家中以及一个杂货店提取地面... 2009年夏季,犹他州卫生局调查了一起与多个牛仔竞技表演现场有关的志贺毒素大肠杆菌(STEC)O157:H7(O157)疾病的暴发情况。面试患者,调查涉及到疾病发生前1周的暴露情况。进行了地面牛肉追溯调查,从患者家中以及一个杂货店提取地面牛肉样本,进行了STEC O157化验。面试牛仔竞技表演经理们,调查涉及到自动售货机和牛仔竞技表演使用的牲畜。环境的样本采集于牛仔竞技表演的地面。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:H7感染 2009年 志贺毒素 暴发情况 犹他州 牛肉 竞技 脉冲场凝胶电泳法
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蔬菜中大肠杆菌O157的分离与鉴定 被引量:4
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作者 邱庆超 胡传寿 +4 位作者 周良彬 刘小超 毕旺来 李睿 周帼萍 《中国酿造》 CAS 2012年第9期85-88,共4页
对武汉市售蔬菜(50份)进行大肠杆菌O157的检验,经过新生霉素-EC增菌液增菌、免疫磁珠富集、选择性平板培养和血清学鉴定,从一份生菜中筛出1株O157阳性菌株EC9.23。PCR鉴定该菌毒力基因,stx1、stx2、rfbO157基因均为阳性,hly、eae、fliCH... 对武汉市售蔬菜(50份)进行大肠杆菌O157的检验,经过新生霉素-EC增菌液增菌、免疫磁珠富集、选择性平板培养和血清学鉴定,从一份生菜中筛出1株O157阳性菌株EC9.23。PCR鉴定该菌毒力基因,stx1、stx2、rfbO157基因均为阳性,hly、eae、fliCH7基因均为阴性。说明从武汉市售蔬菜中可检出携带志贺毒素基因的O157菌株。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157 志贺毒素 蔬菜 分离鉴定 食品安全
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武汉肉类食品中大肠杆菌O157∶H7分离株stx亚型和毒力特征分析 被引量:4
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作者 郑冬冬 毕旺来 +3 位作者 王宏勋 刘志国 丁洪波 李睿 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期94-98,共5页
从22家市场销售的117份肉类食品中分离出4株大肠杆菌O157∶H7菌株,经PCR检测这4株菌的stx、hly、eae毒力基因均为阳性。采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法对这4株菌的stx亚型进行鉴定。3株菌同时携带stx1、stx2基因... 从22家市场销售的117份肉类食品中分离出4株大肠杆菌O157∶H7菌株,经PCR检测这4株菌的stx、hly、eae毒力基因均为阳性。采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法对这4株菌的stx亚型进行鉴定。3株菌同时携带stx1、stx2基因,且均为stx1a、stx2a亚型。菌株EC5.11仅携带stx2基因,但在所有的stx2分型PCR反应中都为阴性。用PCR扩增该菌株stx2基因全长并克隆测序,序列分析结果表明EC5.11志贺毒素基因为stx2c亚型。采用Vero细胞毒性实验检测这4株菌产志贺毒素的状况,结果显示这些菌株都具有一定的Vero细胞毒性。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157∶H7 志贺毒素 stx亚型 Vero细胞毒性
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某定点肉牛屠宰场中非O157致病性STEC的分离鉴定 被引量:4
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作者 张妍 刘英玉 +3 位作者 郑晓琴 张超 苏战强 张晓红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第4期1035-1040,共6页
为了了解新疆伊犁地区肉牛屠宰过程中大肠杆菌的污染情况,检测非O157致病性产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)的感染情况,本试验采集新疆伊犁地区某定点肉牛屠宰场中屠宰肉牛的粪样和屠宰后的胴体表面拭... 为了了解新疆伊犁地区肉牛屠宰过程中大肠杆菌的污染情况,检测非O157致病性产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)的感染情况,本试验采集新疆伊犁地区某定点肉牛屠宰场中屠宰肉牛的粪样和屠宰后的胴体表面拭子,并对样品进行了大肠杆菌的分离鉴定、毒力基因(eae、stx1、stx2)的PCR检测、O157鉴定(rfbE)、ERIC-PCR基因分型和小鼠致病性试验。结果显示,在采集的45份样品中分离鉴定出42株大肠杆菌,分离率为93.3%。其中2株菌株同时编码了毒力基因stx1和stx2,检出率为4.8%,毒力基因eae未被检出。PCR鉴定均为非O157STEC。ERIC-PCR基因分型检测发现,2株菌的基因型非常相似,同源关系密切。对小鼠进行腹腔注射攻毒,攻菌6h后,小鼠开始出现死亡,立即解剖死亡小鼠发现,其肠道出血,肝脏、脾脏、肾脏明显出血肿大,解剖对照小鼠表现正常,表明菌株具有一定的致病性。综上所述,在肉牛屠宰过程中存在大肠杆菌污染,其中粪便中非O157STEC菌株对胴体造成了污染,需要加强控制肉牛的屠宰加工关键环节的环境卫生。 展开更多
关键词 非o157产志贺毒素大肠杆菌 分离鉴定 毒力基因 ERIC-PCR
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1株感染多种致病性大肠杆菌噬菌体的生物学特性研究 被引量:2
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作者 林焱 罗润波 +1 位作者 刘燕坤 朱伟云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期282-289,共8页
旨在测定此前从断奶前仔猪粪样中分离得到的1株大肠杆菌噬菌体C6在致病性大肠杆菌上的生物学特性,并比较该噬菌体在不同致病菌上的感染特性。利用电镜形态观察和基因组测序确定其分类,用点滴法和双层平板法测定其在致病性大肠杆菌上的... 旨在测定此前从断奶前仔猪粪样中分离得到的1株大肠杆菌噬菌体C6在致病性大肠杆菌上的生物学特性,并比较该噬菌体在不同致病菌上的感染特性。利用电镜形态观察和基因组测序确定其分类,用点滴法和双层平板法测定其在致病性大肠杆菌上的宿主谱,通过噬菌斑形态、最佳感染复数(MOI)、成斑率(EOP)、吸附率、一步生长曲线以及抑菌曲线等来评价噬菌体在多株致病菌上的感染特性。结果显示:噬菌体C6可感染1株非致病性大肠杆菌和4株致病性大肠杆菌,包括大肠杆菌O157(E.coli W1)、2株产志贺毒素大肠杆菌(STEC W3、STEC W5)和1株肠致病性大肠杆菌(EPEC 143)。通过比较噬菌体C6在4株致病菌上的各项感染特性指标发现:噬菌斑大小和成斑率E.coli W1>EPEC 143>STEC W3>STEC W5;吸附率E.coli W1>EPEC 143、STEC W3、STEC W5;最佳MOI EPEC 143、STEC W3、STEC W5>E.coli W1;液体LB中生长能力和抑菌能力E.coli W1>STEC W3>EPEC 143、STEC W5。噬菌体C6为T4样噬菌体,可感染多株致病性大肠杆菌,在不同致病菌上的感染特性存在差异,但均能显著抑制致病菌的生长。 展开更多
关键词 大肠杆菌噬菌体 大肠杆菌o157 志贺毒素大肠杆菌 肠致病性大肠杆菌 感染特性 抑菌效力
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