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TRPV1修饰BMSCs治疗脑缺血再灌注损伤大鼠的研究 被引量:1
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作者 张海霞 刘峰 《医学影像学杂志》 2021年第5期873-877,共5页
目的探讨SPIO标记3.0T磁共振成像辅助示踪技术在TRPV1基因修饰BMSCs治疗脑缺血再灌注损伤大鼠的相关影响。方法提取并培养鼠源骨髓间充质干细胞(BMSCs),利用流式细胞仪进行鉴定。通过Cas-9技术构建TRPV1的过表达载体,利用慢病毒转染BMS... 目的探讨SPIO标记3.0T磁共振成像辅助示踪技术在TRPV1基因修饰BMSCs治疗脑缺血再灌注损伤大鼠的相关影响。方法提取并培养鼠源骨髓间充质干细胞(BMSCs),利用流式细胞仪进行鉴定。通过Cas-9技术构建TRPV1的过表达载体,利用慢病毒转染BMSCs,根据病毒转染情况将BMSCs分成3组,即空白对照组、阴性对照组和过表达载体组。利用RT-PCR和Western blot法检测TRPV1过表达载体转染后对BMSCs的促神经分化作用。利用超顺磁性氧化铁(SPIO)试剂盒标记BMSCs染色,构建缺血再灌注损伤SD大鼠模型。利用3.0T磁共振成像SPIO标记BMSCs的归巢检测。结果1)BMSCs的表面蛋白CD44和CD29的表达为60.2%和58.3%;CD34和CD45表达为3.4%和2.6%;2)慢病毒可以将TRPV4过表达载体质粒转染至BMSCs细胞内,且效率较高,为90%以上;3)体外细胞实验结果显示,过表达载体组TRPV4,Peripherin和NSE的mRNA相对表达量和蛋白表达量要明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);4)BMSCs细胞可以与超顺磁性氧化铁(SPIO)相结合,从而可以作为示踪分子,检测后续BMSCs细胞尾静脉注射后BMSCs的示踪行为;5)相较于BMSCs组,将TRPV1基因过表达载体转染BMSCs后,可以更好的保护脑组织。结论TRPV1过表达载体可以促进BMSCs向神经细胞分化,且对缺血再灌注损伤SD大鼠具有一定程度的保护作用。 展开更多
关键词 磁共振成像 非选择性阳离子通道瞬时感受器电位v1亚型 骨髓间充质干细胞 分化 缺血再灌注损伤
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