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非连续密度梯度离心法分离红细胞的影响因素研究 被引量:2
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作者 林梦霞 于帅 +3 位作者 祝超 黄雅 王海宝 于洋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期904-910,共7页
目的:研究非连续密度梯度分离法分离红细胞的影响因素,初步建立Percoll分离液在红细胞分离中的最佳操作条件。方法:检测Percoll与1.5 mol/L NaCl比例为9∶1、10∶1、11∶1、12∶1、13∶1渗透压情况,选取等渗比例作为最佳母液(SIP);以不... 目的:研究非连续密度梯度分离法分离红细胞的影响因素,初步建立Percoll分离液在红细胞分离中的最佳操作条件。方法:检测Percoll与1.5 mol/L NaCl比例为9∶1、10∶1、11∶1、12∶1、13∶1渗透压情况,选取等渗比例作为最佳母液(SIP);以不同密度细胞被充分离心沉降分离,较少存在红细胞滞留、拖带现象作为分离效果评判标准,比较不同红细胞悬液浓度、不同离心力、不同离心加减速度、不同温度和不同离心时间的分离效果。结果:50%以下浓度红细胞悬液分离效果优于50%以上浓度红细胞悬液,4 000×g优于3 000和2 000×g的离心效果,2-8的离心加减速度可以获得满意的离心效果,4℃分层效果比室温稳定,20 min优于15和10 min的分离效果。结论:Percoll与1.5mol/L NaCl为12∶1和11∶1的母液可作为等渗母液,优先4℃离心条件离心,加减速度2-8,其离心效果会随着红细胞悬液浓度的降低、离心时间的延长。 展开更多
关键词 非连续密度梯度离心 梯度分离 红细胞
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非连续密度梯度离心法分离半滑舌鳎外周血白细胞 被引量:2
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作者 郝爽 罗璋 +3 位作者 张振国 刘肖莲 刘国山 冯守明 《河北渔业》 2018年第3期1-4,24,共5页
为研究非连续密度梯度离心法分离半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)外周血白细胞的影响因素,探索Percoll分离半滑舌鳎外周血白细胞的最佳方法,试验设置了密度梯度为1.015/1.065g/mL、1.020/1.070g/mL、1.025/1.075g/mL、1.... 为研究非连续密度梯度离心法分离半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)外周血白细胞的影响因素,探索Percoll分离半滑舌鳎外周血白细胞的最佳方法,试验设置了密度梯度为1.015/1.065g/mL、1.020/1.070g/mL、1.025/1.075g/mL、1.030/1.080g/mL、1.035/1.085g/mL的五种分离液,分别于600×g、800×g和1 000×g离心力下进行半滑舌鳎白细胞分离,以所得白细胞密度、白细胞纯度、活细胞率作为评判指标,并对分离的白细胞进行了显微观察、鉴定,比较不同密度梯度分离液、不同离心力的分离效果。结果显示:以1.020/1.070g/mL密度梯度分离液、800×g离心力条件下分离效果最佳,每毫升外周血可分离到白细胞数量平均为(2.485±0.182)×107个,白细胞纯度平均为(97.926±0.679)%,活细胞率平均为(97.037±0.925)%。 展开更多
关键词 非连续密度梯度离心 外周血白细胞 半滑舌鳎(Cynoglossus SEMILAEVIS Günther)
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全血中性粒细胞分离方法对fMLP诱导极性化的影响 被引量:4
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作者 罗琼 蔡春青 +4 位作者 谢翠华 楚心唯 武清宜 孟晓静 邹飞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1514-1517,共4页
目的比较Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法两种常用的中性粒细胞分离方法 ,为中性粒细胞极性化研究提供有效手段。方法取健康成年人外周血,采用Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法分离中性粒细胞,分别检测分离后的... 目的比较Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法两种常用的中性粒细胞分离方法 ,为中性粒细胞极性化研究提供有效手段。方法取健康成年人外周血,采用Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法分离中性粒细胞,分别检测分离后的中性粒细胞的极性、纯度、存活率,比较二者对极性信号分子F-actin的聚合和胞内Ca2+的影响。结果二者在极性率、纯度、存活率方面并不存在显著性差异,但Dextran沉降法在fMLP诱导细胞极性3min内对F-actin的聚合产生抑制作用,同时可使胞内Ca2+升高的Ca2+峰降低约25%。结论对PMNs极性功能研究时,两种分离方法都可以选择。Percoll非连续密度梯度离心法更有优势,但在需要纯化大量PMNs时,Dextran沉降法也是一种好的选择。 展开更多
关键词 中性粒细胞 极性 Percoll非连续密度梯度离心 Dextran沉降法
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Ficoll和Percoll法分离结直肠癌相关巨噬细胞的比较 被引量:5
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作者 杨芳 伍菲凡 +2 位作者 王晓燕 胡志燕 李祖国 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第9期1394-1398,共5页
目的:比较Percoll非连续密度梯度离心法、Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法分离结直肠癌中的巨噬细胞的效果,并进一步探讨贴壁分离巨噬细胞的最适宜贴壁时间。方法:取结直肠癌患者的肿瘤组织,制成单个细胞的悬液,分别使用100% Ficol... 目的:比较Percoll非连续密度梯度离心法、Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法分离结直肠癌中的巨噬细胞的效果,并进一步探讨贴壁分离巨噬细胞的最适宜贴壁时间。方法:取结直肠癌患者的肿瘤组织,制成单个细胞的悬液,分别使用100% Ficoll、35% Percoll 以及25%与65%双梯度 Percoll 进行巨噬细胞分离,37℃培养2 h后,去除未贴壁的细胞,使用免疫荧光实验来检测巨噬细胞的纯度。之后,将Ficoll分离得到的单个核细胞,分别培养1、2、4和9 h后比较巨噬细胞的纯度。结果:Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法分离的巨噬细胞的纯度为60.18%,Percoll 非连续密度梯度离心法分离的巨噬细胞的纯度分别为54.33%和10.93%,均低于Ficoll法分离所得到的巨噬细胞的纯度(P <0.05)。 Ficoll分离后贴壁1、2、4 h 分离得到的巨噬细胞纯度均达到60%以上,高于贴壁培养9 h得到的巨噬细胞的纯度(34.67%)。结论: Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离巨噬细胞,纯化程度好,是一种简单、高效的巨噬细胞分离方法,适于临床和科研中广泛应用。贴壁培养2~4h是贴壁分离巨噬细胞最适宜的时间。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 肿瘤相关巨噬细胞 Ficoll-Hypaque密度梯度离心 Percoll非连续密度梯度离心 贴壁分离
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