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口蹄疫病毒非结构蛋白2C主要表位区的原核表达及其单克隆抗体的制备 被引量:6
1
作者 田美娜 李永亮 +4 位作者 付元芳 卢曾军 袁明 吴磊 刘在新 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期69-73,共5页
本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2C蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Do... 本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2C蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Dot-ELISA以及IFA对mAbs的特异性等进行鉴定。共获得4株抗重组蛋白2C的mAbs,其亚类鉴定结果3株为IgG1,1株为IgG2b,叠加ELISA初步判定4株单抗所识别表位相同或相近。Dot-ELISA显示这些mAbs与重组2C蛋白和(2C'3AB)蛋白以及口蹄疫病毒O/China99感染的BHK-21细胞中的2C抗原均可特异性结合,IFA结果显示所得单抗能与FMDV感染细胞中的2C蛋白特异性结合。本研究获得的针对2C蛋白的特异性mAb,为进一步研究2C蛋白的结构和功能以及诊断方法奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 非结构蛋白2c 大肠杆菌表达 单克隆抗体
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猪嵴病毒非结构蛋白2C的生物信息学分析 被引量:1
2
作者 陈秋勇 胡崇伟 +4 位作者 陈如敬 陈晓珞 林群群 陈鹏强 修金生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期50-54,共5页
本研究运用RT-PCR方法从猪嵴病毒感染阳性样品中扩增出其非结构蛋白2C全基因,并将其克隆到T载体后进行序列测定。研究结果表明,猪嵴病毒非结构蛋白2C全长为1005bp,编码335个氨基酸。所编的非结构蛋白2C大小为36.9297ku,理论等电点为7.18... 本研究运用RT-PCR方法从猪嵴病毒感染阳性样品中扩增出其非结构蛋白2C全基因,并将其克隆到T载体后进行序列测定。研究结果表明,猪嵴病毒非结构蛋白2C全长为1005bp,编码335个氨基酸。所编的非结构蛋白2C大小为36.9297ku,理论等电点为7.18;不稳定系数为39.41,属于稳定蛋白质类;脂肪族氨基酸指数为87.10,平均亲水性为-0.242。与其核苷酸同源性最高的是CH/HZ/2011株(GenBank登录号:JX827598),同源性为91.6%;同源性最低的是XX株(GenBank登录号:KC204684),同源性为88.8%。遗传进化分析结果显示,猪嵴病毒非结构蛋白2C在遗传进化树呈3个明显的结构分支,猪源嵴病毒匈牙利株和泰国株处于第Ⅲ遗传进化分支,猪嵴病毒中国分离株分处于第Ⅰ和第Ⅱ遗传进化分支,呈一定的区域流行性。 展开更多
关键词 猪嵴病毒 非结构蛋白2c 生物信息学分析
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柯萨奇B4病毒非结构蛋白P_2C重组质粒的构建 被引量:1
3
作者 高久春 黄红兰 李凡 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期583-585,共3页
目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2CcDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒。结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出987bp大小的片段,克隆入PUC... 目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2CcDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒。结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出987bp大小的片段,克隆入PUCm-T载体,用BamHⅠ、HindⅢ双酶切鉴定,与非结构蛋白P2C的PCR扩增产物片段大小一致。结论:成功地构建了柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。 展开更多
关键词 柯萨奇B4病毒(cVB4) 1型糖尿病 结构蛋白P2c 重组质粒
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口蹄疫病毒2c基因的克隆及表达 被引量:3
4
作者 江鹏斐 刘在新 +2 位作者 赵启祖 常惠芸 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期231-234,共4页
从O型口蹄疫病毒China98株病毒材料中克隆到了非结构蛋白 2C的基因 ,并成功地将该基因在大肠杆菌中进行了表达 ,为建立以基因工程产品为抗原、能区分人工免疫和自然感染动物的检疫方法提供了技术和材料条件。
关键词 口蹄疫病毒 非结构蛋白2c 检疫 基因克隆 基因表达 口蹄疫
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