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口蹄疫病毒非结构蛋白2C主要表位区的原核表达及其单克隆抗体的制备
被引量:
6
1
作者
田美娜
李永亮
+4 位作者
付元芳
卢曾军
袁明
吴磊
刘在新
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期69-73,共5页
本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2C蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Do...
本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2C蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Dot-ELISA以及IFA对mAbs的特异性等进行鉴定。共获得4株抗重组蛋白2C的mAbs,其亚类鉴定结果3株为IgG1,1株为IgG2b,叠加ELISA初步判定4株单抗所识别表位相同或相近。Dot-ELISA显示这些mAbs与重组2C蛋白和(2C'3AB)蛋白以及口蹄疫病毒O/China99感染的BHK-21细胞中的2C抗原均可特异性结合,IFA结果显示所得单抗能与FMDV感染细胞中的2C蛋白特异性结合。本研究获得的针对2C蛋白的特异性mAb,为进一步研究2C蛋白的结构和功能以及诊断方法奠定了基础。
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关键词
口蹄疫病毒
非结构蛋白2c
大肠杆菌表达
单克隆抗体
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职称材料
猪嵴病毒非结构蛋白2C的生物信息学分析
被引量:
1
2
作者
陈秋勇
胡崇伟
+4 位作者
陈如敬
陈晓珞
林群群
陈鹏强
修金生
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第11期50-54,共5页
本研究运用RT-PCR方法从猪嵴病毒感染阳性样品中扩增出其非结构蛋白2C全基因,并将其克隆到T载体后进行序列测定。研究结果表明,猪嵴病毒非结构蛋白2C全长为1005bp,编码335个氨基酸。所编的非结构蛋白2C大小为36.9297ku,理论等电点为7.18...
本研究运用RT-PCR方法从猪嵴病毒感染阳性样品中扩增出其非结构蛋白2C全基因,并将其克隆到T载体后进行序列测定。研究结果表明,猪嵴病毒非结构蛋白2C全长为1005bp,编码335个氨基酸。所编的非结构蛋白2C大小为36.9297ku,理论等电点为7.18;不稳定系数为39.41,属于稳定蛋白质类;脂肪族氨基酸指数为87.10,平均亲水性为-0.242。与其核苷酸同源性最高的是CH/HZ/2011株(GenBank登录号:JX827598),同源性为91.6%;同源性最低的是XX株(GenBank登录号:KC204684),同源性为88.8%。遗传进化分析结果显示,猪嵴病毒非结构蛋白2C在遗传进化树呈3个明显的结构分支,猪源嵴病毒匈牙利株和泰国株处于第Ⅲ遗传进化分支,猪嵴病毒中国分离株分处于第Ⅰ和第Ⅱ遗传进化分支,呈一定的区域流行性。
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关键词
猪嵴病毒
非结构蛋白2c
生物信息学分析
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职称材料
柯萨奇B4病毒非结构蛋白P_2C重组质粒的构建
被引量:
1
3
作者
高久春
黄红兰
李凡
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第8期583-585,共3页
目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2CcDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒。结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出987bp大小的片段,克隆入PUC...
目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2CcDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒。结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出987bp大小的片段,克隆入PUCm-T载体,用BamHⅠ、HindⅢ双酶切鉴定,与非结构蛋白P2C的PCR扩增产物片段大小一致。结论:成功地构建了柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。
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关键词
柯萨奇B4病毒(
c
VB4)
1型糖尿病
非
结构
蛋白
P2
c
重组质粒
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职称材料
口蹄疫病毒2c基因的克隆及表达
被引量:
3
4
作者
江鹏斐
刘在新
+2 位作者
赵启祖
常惠芸
谢庆阁
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期231-234,共4页
从O型口蹄疫病毒China98株病毒材料中克隆到了非结构蛋白 2C的基因 ,并成功地将该基因在大肠杆菌中进行了表达 ,为建立以基因工程产品为抗原、能区分人工免疫和自然感染动物的检疫方法提供了技术和材料条件。
关键词
口蹄疫病毒
非结构蛋白2c
检疫
基因克隆
基因表达
口蹄疫
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职称材料
题名
口蹄疫病毒非结构蛋白2C主要表位区的原核表达及其单克隆抗体的制备
被引量:
6
1
作者
田美娜
李永亮
付元芳
卢曾军
袁明
吴磊
刘在新
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点实验室/口蹄疫国家参考实验室
河北畜牧良种工作站
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期69-73,共5页
基金
国家重点研究973项目(2005CB523201)
文摘
本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2C蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Dot-ELISA以及IFA对mAbs的特异性等进行鉴定。共获得4株抗重组蛋白2C的mAbs,其亚类鉴定结果3株为IgG1,1株为IgG2b,叠加ELISA初步判定4株单抗所识别表位相同或相近。Dot-ELISA显示这些mAbs与重组2C蛋白和(2C'3AB)蛋白以及口蹄疫病毒O/China99感染的BHK-21细胞中的2C抗原均可特异性结合,IFA结果显示所得单抗能与FMDV感染细胞中的2C蛋白特异性结合。本研究获得的针对2C蛋白的特异性mAb,为进一步研究2C蛋白的结构和功能以及诊断方法奠定了基础。
关键词
口蹄疫病毒
非结构蛋白2c
大肠杆菌表达
单克隆抗体
Keywords
FMDV
non-stru
c
turel protein
2
c
expression of Es
c
heri
c
hia
c
oli
mono
c
lonal antibody
分类号
S852.3 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪嵴病毒非结构蛋白2C的生物信息学分析
被引量:
1
2
作者
陈秋勇
胡崇伟
陈如敬
陈晓珞
林群群
陈鹏强
修金生
机构
福建农林大学动物科学学院
福建省农业科学院畜牧兽医研究所
龙岩市康顺养殖有限公司
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第11期50-54,共5页
基金
福建省农业科学技术项目(2011-02)
文摘
本研究运用RT-PCR方法从猪嵴病毒感染阳性样品中扩增出其非结构蛋白2C全基因,并将其克隆到T载体后进行序列测定。研究结果表明,猪嵴病毒非结构蛋白2C全长为1005bp,编码335个氨基酸。所编的非结构蛋白2C大小为36.9297ku,理论等电点为7.18;不稳定系数为39.41,属于稳定蛋白质类;脂肪族氨基酸指数为87.10,平均亲水性为-0.242。与其核苷酸同源性最高的是CH/HZ/2011株(GenBank登录号:JX827598),同源性为91.6%;同源性最低的是XX株(GenBank登录号:KC204684),同源性为88.8%。遗传进化分析结果显示,猪嵴病毒非结构蛋白2C在遗传进化树呈3个明显的结构分支,猪源嵴病毒匈牙利株和泰国株处于第Ⅲ遗传进化分支,猪嵴病毒中国分离株分处于第Ⅰ和第Ⅱ遗传进化分支,呈一定的区域流行性。
关键词
猪嵴病毒
非结构蛋白2c
生物信息学分析
Keywords
por
c
ine kobuvirus , nonstru
c
tural protein
2
c
bioinformati
c
s analysis
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
柯萨奇B4病毒非结构蛋白P_2C重组质粒的构建
被引量:
1
3
作者
高久春
黄红兰
李凡
机构
吉林大学基础医学院
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第8期583-585,共3页
文摘
目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2CcDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒。结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出987bp大小的片段,克隆入PUCm-T载体,用BamHⅠ、HindⅢ双酶切鉴定,与非结构蛋白P2C的PCR扩增产物片段大小一致。结论:成功地构建了柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。
关键词
柯萨奇B4病毒(
c
VB4)
1型糖尿病
非
结构
蛋白
P2
c
重组质粒
Keywords
c
oxsa
c
kie B4 virus(
c
VB4)
Type 1 diabetes mellitus
Nonstru
c
tural protein P
2
c
Re
c
ombinant plasmid
分类号
R392.2 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
口蹄疫病毒2c基因的克隆及表达
被引量:
3
4
作者
江鹏斐
刘在新
赵启祖
常惠芸
谢庆阁
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期231-234,共4页
文摘
从O型口蹄疫病毒China98株病毒材料中克隆到了非结构蛋白 2C的基因 ,并成功地将该基因在大肠杆菌中进行了表达 ,为建立以基因工程产品为抗原、能区分人工免疫和自然感染动物的检疫方法提供了技术和材料条件。
关键词
口蹄疫病毒
非结构蛋白2c
检疫
基因克隆
基因表达
口蹄疫
Keywords
Foot and mouth disease virus
Nonstru
c
tural protein
2
c
Quarantine
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
口蹄疫病毒非结构蛋白2C主要表位区的原核表达及其单克隆抗体的制备
田美娜
李永亮
付元芳
卢曾军
袁明
吴磊
刘在新
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪嵴病毒非结构蛋白2C的生物信息学分析
陈秋勇
胡崇伟
陈如敬
陈晓珞
林群群
陈鹏强
修金生
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
柯萨奇B4病毒非结构蛋白P_2C重组质粒的构建
高久春
黄红兰
李凡
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
口蹄疫病毒2c基因的克隆及表达
江鹏斐
刘在新
赵启祖
常惠芸
谢庆阁
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
3
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职称材料
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