部分商品化非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒的比对 被引量：3

1

作者 崔基贤 南文龙 +3 位作者 高原 兰德松 于本良 顾贵波 《中国动物检疫》 CAS 2021年第8期79-84,共6页

为获得商品化非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光PCR检测试剂盒的敏感性、特异性、一致性和最低检测限等试验数据,以世界动物卫生组织(OIE)推荐引物探针为金标准,以62份已灭活的ASFV阳性田间样品、32份阴性田间样品和P72基因核酸标准物质为检测对象... 为获得商品化非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光PCR检测试剂盒的敏感性、特异性、一致性和最低检测限等试验数据,以世界动物卫生组织(OIE)推荐引物探针为金标准,以62份已灭活的ASFV阳性田间样品、32份阴性田间样品和P72基因核酸标准物质为检测对象,对农业农村部公布许可的其中17个厂家生产的商品化ASFV荧光PCR检测试剂盒开展了试验特性方面的比对研究。结果显示,17个厂家生产试剂盒的敏感性最低为77.4%,最高为96.8%,特异性最低为87.5%,最高为96.8%,均未达到100%,且有一定差别;12个厂家的试剂盒与OIE推荐引物探针检测结果一致性较好(Kappa值≥0.75),其余5个厂家的试剂盒与其一致性一般(0.4<Kappa值<0.75);17个厂家的试剂盒均可检测到的最低稀释度为5.9×10^(3)×2^(-3)拷贝/μL,但不同厂家试剂盒的最低检测限有所差别,其中5个试剂盒可检测到的最低稀释度为5.9×10^(3)×2^(-3)拷贝/μL,2个试剂盒为5.9×10^(3)×2^(-4)拷贝/μL,6个试剂盒为5.9×10^(3)×2^(-5)拷贝/μL,3个试剂盒为5.9×10^(3)×2^(-6)拷贝/μL,1个试剂盒至少为5.9×10^(3)×2^(-7),且大部分国产试剂盒的最低检测限比进口试剂盒低。本研究为ASFV荧光PCR检测试剂盒的筛选和比对提供了参考数据。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 荧光pcr 敏感性 特异性 一致性 最低检测限

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三种非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒和两种核酸提取方法的比对 被引量：2

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作者 曹东阳 朱奕霏 +4 位作者 马晓媛 白翠 杨金鑫 胡泽宇 吴丹 《中国动物检疫》 CAS 2022年第12期112-117,共6页

为评价不同荧光PCR检测试剂盒对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的检测效果,以及不同核酸提取方法对ASFV的提取差异,选取ASFV B646L基因标准物质作为模板参照,通过荧光PCR检测对标准曲线、最低检出限(LOD)、特异性、检测... 为评价不同荧光PCR检测试剂盒对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的检测效果,以及不同核酸提取方法对ASFV的提取差异,选取ASFV B646L基因标准物质作为模板参照,通过荧光PCR检测对标准曲线、最低检出限(LOD)、特异性、检测时间等进行比较,分析3个厂家商品化ASFV荧光PCR检测试剂盒(A、B、C)的综合性能;选取磁珠法和柱式法两种核酸提取方式,对标准物质核酸提取后进行ASFV荧光PCR扩增,以Ct值大小评价试剂的提取效果。结果显示:3种ASFV荧光PCR试剂盒决定系数(R~2)分别为0.985、0.996、0.985,且特异性较好;3种ASFV荧光PCR试剂盒LOD介于10~10copies/μL,A试剂盒反应循环数最多且反应时间最长(105 min),LOD为10copies/μL。全自动核酸提取工作站与手工核酸提取Ct值无统计学差异(P> 0.1),批内变异系数(CV)在1.5%以内。结果表明:3种荧光PCR检测试剂盒的综合性能较为理想,A试剂盒更适用于临床含毒量低的样品检测;两种核酸提取方法均可有效提取ASFV B646L基因质粒标准物质。本试验为科学、合理选择ASFV检测和提取试剂提供了数据参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 标准物质 荧光pcr 核酸提取试剂

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6种非洲猪瘟荧光PCR试剂盒对比试验

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作者 彭苗苗 杜丽飞 +5 位作者 王慧 杨俊 邱美珍 刘伯承 周望平 危婷 《湖南畜牧兽医》 2021年第6期16-20,共5页

对5个厂家的6种非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测的敏感性和一致性进行综合比较,选取已知阳性的核酸样品作为待测样品进行梯度稀释,每组设置三个平行对照,使用A1、A2、B、C、D、E6种试剂盒,按照各厂家试剂盒说明书对所有样品进行非洲猪瘟荧光... 对5个厂家的6种非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测的敏感性和一致性进行综合比较,选取已知阳性的核酸样品作为待测样品进行梯度稀释,每组设置三个平行对照,使用A1、A2、B、C、D、E6种试剂盒,按照各厂家试剂盒说明书对所有样品进行非洲猪瘟荧光PCR检测及结果判定,并从检出ct值的样品数量、检出核酸最低拷贝浓度、检出ct值的平均值和检出ct值的离散度四个维度来综合评估对6种试剂盒的敏感性和一致性。结果显示:检测灵敏度方面,由高至低的排名为试剂盒D>试剂盒C>试剂盒A2>试剂盒E>试剂盒B>试剂盒A1;检测一致性方面,试剂盒D>试剂盒C>试剂盒A2>试剂盒E>试剂盒B=试剂盒A1。综合6种试剂盒的敏感性和一致性来看,试剂盒D的灵敏度和一致性最好,试剂盒C稍低于试剂盒D,但差距很小,几乎在同一水平,试剂盒A2灵敏度和一致性次之,其余三种试剂盒E>试剂盒B>试剂盒A1。 展开更多

关键词 非洲猪瘟荧光pcr检测试剂盒 敏感性测试 一致性

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基于非洲猪瘟病毒标准物质的荧光PCR检测试剂盒初步评价 被引量：4

4

作者 马龙 尹才 +3 位作者 李莉 李杰 王晓亮 李知新 《中国动物检疫》 CAS 2021年第4期108-111,共4页

为探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)标准物质作为试剂盒评价体系的可行性,比较了市场上5种主流品牌ASFV荧光PCR检测试剂盒的检测性能。使用ASFV P72基因核酸标准物质作为模板,根据5种试剂盒说明书分别进行相应的荧光定... 为探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)标准物质作为试剂盒评价体系的可行性,比较了市场上5种主流品牌ASFV荧光PCR检测试剂盒的检测性能。使用ASFV P72基因核酸标准物质作为模板,根据5种试剂盒说明书分别进行相应的荧光定量PCR检测,结合扩增曲线、Ct值,分析不同试剂盒的敏感性、可重复性以及所需反应时间。结果显示:5种试剂盒的阴性、阳性对照均成立,最低检测限均为5.9×10^(-1)拷贝/μL;4个厂家的试剂盒线性关系R2>0.98,其中最优的R^(2)=0.994,离散度最小;各试剂盒的实际反应耗时与理论反应耗时均有一定差异(0.20~0.96 h)。结果表明,各生产厂家使用P72基因作为靶基因研制的ASFV荧光PCR检测试剂盒都可以使用ASFV标准物质作为评价体系,来评判试剂盒的检测性能。本试验为各实验室不同样品检测的ASFV荧光PCR检测试剂盒选择提供了一种可用的评价方法。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 标准物质 荧光pcr检测试剂盒 比对

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不同厂家非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒比对 被引量：2

5

作者 许秀琼 刘劼 +5 位作者 吴立炀 叶健 查云峰 王福广 孙柏林 卢受昇 《中国动物检疫》 CAS 2022年第7期97-102,共6页

为评价不同厂家非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒的效果,选择当前市场上6个厂家的商品化试剂盒,检测不同类型样品,结合统计学方法对试剂盒的特异性、敏感性和重复性等性能指标进行比对分析。结果显示:6个厂家的试剂盒ROC曲线下区域面积(A... 为评价不同厂家非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒的效果,选择当前市场上6个厂家的商品化试剂盒,检测不同类型样品,结合统计学方法对试剂盒的特异性、敏感性和重复性等性能指标进行比对分析。结果显示:6个厂家的试剂盒ROC曲线下区域面积(AUC)为0.826~0.951,Youden指数为0.76~0.90,说明试剂盒的排他性和包含性等特异性指标总体表现较好;最低检出限(LOD)等敏感性数据显示,6个厂家试剂盒的LOD为10^(-1)~10^(2) copies/μL,说明各试剂盒的敏感性均较理想;用高、低浓度样品对试剂盒分别进行批内、批间重复性试验,发现高浓度样品的批内、批间变异系数(CV)为0.10%~1.28%,说明重复性较好,仅有2个厂家的试剂盒在检测低浓度样品时表现较好,批内CV为2.25%~6.12%,批间CV为2.93%和4.93%,说明不同试剂盒检测低浓度样品时稳定性较差。本研究为商品化荧光PCR检测试剂盒的评价提供了参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 荧光pcr 试剂盒 比对 评价

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不同非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒在检测猪肉及猪肉制品中的比较 被引量：1

6

作者 韦莹 陈丽芸 +1 位作者 刘闯 陈立军 《中国动物检疫》 CAS 2021年第7期99-104,共6页

为了解不同非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒在检测猪肉及猪肉制品中的特征,采用国内外6种商品化非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒,分别对同一样本开展稳定性试验,对相同非洲猪瘟强阳性、中阳性及弱阳性样本开展敏感性试验。结果显示:6... 为了解不同非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒在检测猪肉及猪肉制品中的特征,采用国内外6种商品化非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒,分别对同一样本开展稳定性试验,对相同非洲猪瘟强阳性、中阳性及弱阳性样本开展敏感性试验。结果显示:6种试剂盒扩增稳定性良好;对强阳性样本,所有商品化试剂盒均能检出;对中阳性及弱阳性样本,特别是弱阳性样本,不同试剂盒的检出情况不尽相同。因此在实际应用中,应根据具体需求选择合适检测试剂盒。本试验为一线工作者选择使用不同商品化非洲猪瘟检测试剂盒提供了一定参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 荧光pcr 商品化试剂盒 猪肉及猪肉制品 比较分析

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青岛立见“非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒”获得农业农村部兽药产品批准文号

7

《中国饲料》 北大核心 2019年第14期1-1,共1页

根据《兽药管理条例》和《兽药产品批准文号管理办法》,对国内突发重大动物疫病防控急需的兽药产品,农业农村部可以核发临时兽药产品批准文号。经农业农村部特定程序审查,由青岛立见诊断技术发展中心生产的“非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试... 根据《兽药管理条例》和《兽药产品批准文号管理办法》,对国内突发重大动物疫病防控急需的兽药产品,农业农村部可以核发临时兽药产品批准文号。经农业农村部特定程序审查,由青岛立见诊断技术发展中心生产的“非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒”获得农业农村部兽药产品批准文号:兽药临字154028864。 展开更多

关键词 《兽药产品批准文号管理办法》 非洲猪瘟病毒 检测试剂盒 荧光pcr 农村 农业 青岛 《兽药管理条例》

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非洲猪瘟病毒荧光PCR检测假阳性的原因与预防措施 被引量：19

8

作者 陈昌海 开妍 +3 位作者 邱冬 徐小艳 王相子 董永毅 《中国动物检疫》 CAS 2020年第2期49-53,共5页

非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)荧光PCR检测是防控非洲猪瘟(African swine fever,ASF)的关键环节。江苏省动物疫病预防控制中心对两家具备ASF检测资质的实验室,进行了阳性样品复核,发现检测结果存在假阳性。为避免实验... 非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)荧光PCR检测是防控非洲猪瘟(African swine fever,ASF)的关键环节。江苏省动物疫病预防控制中心对两家具备ASF检测资质的实验室,进行了阳性样品复核,发现检测结果存在假阳性。为避免实验室检测中出现检测失误,本文分析了导致ASFV检测假阳性结果的原因:实验室检测功能区域设置以及人员、物品流向不合理;检测人员操作不规范、不熟练,未在独立的生物安全柜中进行样品提取与试剂配制;实验室通风不良、清洁消毒不彻底,样品或提取模板间产生交叉污染,PCR试剂、产物、阳性质粒发生污染。为此,从实验室结构、环境、操作等方面提出控制建议:严格实验室功能分区与管理,规范各种试验操作与流程,加强实验室通风和消毒,控制试验中产生PCR污染的相关因素;同时省级实验室要加强对基层实验室的培训、指导和监督,使其在ASF防控中发挥应有的关键作用。本文为从事ASF等重大动物疫病PCR检测的实验室,在提高检测结果准确性和可靠性方面提供了参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 荧光pcr检测 假阳性 原因分析 预防措施

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非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测技术的研究与评价 被引量：23

9

作者 郭少平 刘建 吴绍强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期76-80,共5页

根据非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)K205R基因序列设计合成引物及TaqMan探针,通过优化引物浓度、退火温度和Mg2+浓度,建立基于K205R基因的ASFV实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)检测方法。对在猪肝脏组... 根据非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)K205R基因序列设计合成引物及TaqMan探针,通过优化引物浓度、退火温度和Mg2+浓度,建立基于K205R基因的ASFV实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)检测方法。对在猪肝脏组织DNA中掺入重组质粒制备的模拟样品进行扩增来确定所建方法的实际检测效率,并将OIE推荐的基于p72的qPCR调整后作为评价该方法检测效果的对照。试验结果表明,基于K205R基因的检测方法在检测模拟样品时扩增效率要优于基于p72的方法,而且敏感性和特异性强,适用于非洲猪瘟的快速检测、监测。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 实时荧光定量pcr K205R 检测 研究 评价

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非洲猪瘟病毒检测试剂盒的研制 被引量：4

10

作者 董志珍 赵祥平 +2 位作者 张霞 肖妍 栾慎顺 《中国动物检疫》 CAS 2012年第1期31-33,共3页

针对非洲猪瘟病毒(ASFV)P54基因建立荧光PCR检测方法,通过优化引物、TaqMan探针浓度及反应温度,研发了ASFV检测的荧光PCR检测试剂盒。经灵敏度的重复性试验及3种不同型号荧光PCR仪使用验证,所研发的试剂盒灵敏度为101copy/μL,适用于不... 针对非洲猪瘟病毒(ASFV)P54基因建立荧光PCR检测方法,通过优化引物、TaqMan探针浓度及反应温度,研发了ASFV检测的荧光PCR检测试剂盒。经灵敏度的重复性试验及3种不同型号荧光PCR仪使用验证,所研发的试剂盒灵敏度为101copy/μL,适用于不同型号荧光PCR仪使用,可用于对非洲猪瘟病毒的快速检测。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 荧光定量pcr 试剂盒

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荧光定量PCR在非洲猪瘟检测中的常见问题与解决方案 被引量：5

11

作者 孙华伟 张敬峰 《猪业科学》 2019年第12期128-129,共2页

非洲猪瘟的横空出世,极大促进了荧光定量PCR技术在规模猪场疫病检测实验室中的普及,但荧光定量PCR检测对其操作人员的要求很高。CT值显示异常和实验过程操作不够规范是很多实验室在非洲猪瘟检测中经常遇到的问题,为了得到准确的结果,严... 非洲猪瘟的横空出世,极大促进了荧光定量PCR技术在规模猪场疫病检测实验室中的普及,但荧光定量PCR检测对其操作人员的要求很高。CT值显示异常和实验过程操作不够规范是很多实验室在非洲猪瘟检测中经常遇到的问题,为了得到准确的结果,严格控制实验过程中的污染和掌握实验过程中的操作细节尤为重要。 展开更多

关键词 荧光定量pcr技术 非洲猪瘟检测 问题 方案

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非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：1

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作者 余斌 徐丽华 +3 位作者 李军星 苏菲 叶十一 袁秀芳 《浙江农业科学》 2023年第4期964-967,共4页

为建立一种快捷高效的非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测方法,本研究根据GenBank中登录的ASFV B646L基因保守区序列设计引物和探针,通过优化PCR反应体系和反应条件,建立了非洲猪瘟Taqman荧光定量(ASFV-qPCR)检测方法,验证其特异性、灵敏性和重... 为建立一种快捷高效的非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测方法,本研究根据GenBank中登录的ASFV B646L基因保守区序列设计引物和探针,通过优化PCR反应体系和反应条件,建立了非洲猪瘟Taqman荧光定量(ASFV-qPCR)检测方法,验证其特异性、灵敏性和重复性。结果显示:本研究所建立的检测方法特异性强,与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均无交叉反应;灵敏度高,能检出10拷贝阳性质粒DNA;重复性好,组内和组间重复试验变异系数均小于1.5%。本研究为非洲猪瘟快速诊断提供了有力技术支撑,为进一步开发ASFV多重荧光PCR检测技术奠定了坚实的基础。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 荧光定量pcr B646L 检测

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恒温隔绝式荧光PCR检测非洲猪瘟病毒核酸方法的建立 被引量：1

13

作者 陈雪蓉 徐林 +2 位作者 王远微 汤承 岳华 《中国动物检疫》 CAS 2022年第3期80-84,共5页

恒温隔绝式荧光PCR(iiPCR)是一种简便、快速及可使用于现场检测的荧光PCR方法。本研究采用农业农村部推荐的检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)核酸的荧光定量PCR方法的引物和探针,通过对引物、探针、Taq酶等反应体系的... 恒温隔绝式荧光PCR(iiPCR)是一种简便、快速及可使用于现场检测的荧光PCR方法。本研究采用农业农村部推荐的检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)核酸的荧光定量PCR方法的引物和探针,通过对引物、探针、Taq酶等反应体系的优化,建立了基于恒温隔绝式荧光PCR的ASFV检测方法。所建立的方法可特异性检出ASFV核酸,对猪常感染的其他6种病毒核酸进行检测,结果均为阴性;检测下限为2.55 copies/μL,组内和组间变异系数均<2%。100份临床样本的检测结果均与农业农村部推荐的荧光定量PCR方法检测结果一致。综上,本研究建立的ASFV核酸iiPCR检测方法的特异性、稳定性及敏感度与传统荧光定量PCR方法一致,实现了ASFV检测的规范化和现场化,为ASFV的快速检测提供了可靠手段。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 恒温隔绝式荧光pcr 现场检测

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核酸提取试剂盒对饲料中牛羊源性成分检测的影响

14

作者 李泰 朱英才 +5 位作者 骆璐 彭强 凌洪权 廖星杰 王钦 张承双 《粮食与饲料工业》 CAS 2024年第1期70-71,共2页

实时荧光聚合酶链反应法(荧光PCR法)是目前饲料中牛羊源性成分的定性检测中常用方法之一。为了熟练操作和掌握这个方法,使得实验室工作人员在做饲料中牛羊源性成分定性这类检测时能有一个清晰的认识,通过核酸提取试剂盒的选取及平行实... 实时荧光聚合酶链反应法(荧光PCR法)是目前饲料中牛羊源性成分的定性检测中常用方法之一。为了熟练操作和掌握这个方法,使得实验室工作人员在做饲料中牛羊源性成分定性这类检测时能有一个清晰的认识,通过核酸提取试剂盒的选取及平行实验比对,对此进行了阐释。 展开更多

关键词 荧光pcr法 牛羊源性成分 检测分析 核酸提取试剂盒

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干燥型荧光PCR试剂盒检测食源性致病菌研究 被引量：3

15

作者 赵现锋 牛娜 +8 位作者 王舒 容海燕 马淑棉 张恒 黎绍基 林镜中 曾静 吕敬章 赵芳 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第7期1826-1836,共11页

目的研究干燥型荧光PCR试剂盒检测副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157:H7和单增李斯特菌3种食源性致病菌的灵敏度、特异性和检测人工污染样品情况。方法目标菌和非目标菌接种至血平板, 36℃培养过夜,目标菌比浊至0.5 McF(麦氏单位), 10倍... 目的研究干燥型荧光PCR试剂盒检测副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157:H7和单增李斯特菌3种食源性致病菌的灵敏度、特异性和检测人工污染样品情况。方法目标菌和非目标菌接种至血平板, 36℃培养过夜,目标菌比浊至0.5 McF(麦氏单位), 10倍连续稀释后提取DNA,进行灵敏度研究;非目标菌直接提取DNA后检测,进行特异性研究;用高、中、低3个浓度目标菌液人工污染食品样品,按国标方法培养后用干燥型荧光PCR试剂盒检测。结果副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157:H7和单增李斯特菌的最低检测浓度分别为140、380和7900 CFU/mL。3种目标菌人工污染食品样品的最低检测浓度分别为1.2 CFU/25 g、5.1CFU/25 g、10 CFU/25 g。每种试剂盒仅对目标菌株的检测结果呈阳性,非目标菌株均呈阴性。结论新型干燥型荧光PCR检测试剂盒具有较好的灵敏度和良好的特异性,适用于食品中副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157:H7和单增李斯特菌的检测。 展开更多

关键词 干燥型荧光pcr检测试剂盒 检测 食源性致病菌

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荧光PCR检测技术对非洲猪瘟的常规监测 被引量：2

16

作者 马成立 《中国畜禽种业》 2020年第12期53-54,共2页

通过荧光PCR检测技术对非洲猪瘟病毒在正常监测中的应用,详细介绍非洲猪瘟病毒核酸提取试剂盒和检测试剂盒的原理、使用方法、注意事项,对监测非洲猪瘟病毒,防控非洲猪瘟具有积极的指导意义。

关键词 非洲猪瘟 监测 检测 被检样品 试剂盒 注意事项

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非洲猪瘟荧光定量PCR检测常见问题分析及注意事项 被引量：2

17

作者 冯妹玲 《中国动物保健》 2020年第11期66-67,共2页

非洲猪瘟荧光定量PCR检测实验,无论是对仪器设备还是技术人员操作水平均是要求较高的实验,本文主要是介绍在实验室实际操作过程中影响非洲猪瘟荧光定量PCR检测实验结果的因素和实验过程中常见问题的分析及处理方法。

关键词 荧光定量pcr检测 非洲猪瘟 影响因素

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农业农村部发布关于非洲猪瘟病毒检测试剂盒的通知

18

《中国饲料》 北大核心 2019年第2期1-1,共1页

为进一步做好非洲猪瘟防控工作,降低病毒扩散风险,农业农村部已部署加强各环节非洲猪瘟病毒检测工作。近日,就非洲猪瘟病毒检测方法及其试剂盒(试纸条)有关事宜发布通知,情况如下.

关键词 非洲猪瘟病毒 检测试剂盒 农村 农业 病毒检测 试纸条

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如何保证猪场实验室非洲猪瘟荧光PCR检测结果的准确性

19

作者 于新友 李天芝 《养猪》 2022年第2期122-123,共2页

非洲猪瘟在我国已经暴发近3年零5个月了,病毒已经形成一定的污染面。为精准防控非洲猪瘟,国家鼓励猪场实验室开展非洲猪瘟自检工作,非洲猪瘟病毒荧光PCR检测为猪场实验室常规检测项目。荧光PCR检测是一种技术含量很高的工作,要想做好并... 非洲猪瘟在我国已经暴发近3年零5个月了,病毒已经形成一定的污染面。为精准防控非洲猪瘟,国家鼓励猪场实验室开展非洲猪瘟自检工作,非洲猪瘟病毒荧光PCR检测为猪场实验室常规检测项目。荧光PCR检测是一种技术含量很高的工作,要想做好并不容易,为保证检测结果的准确性和可靠性,笔者结合自身工作对检测环节的一些常见问题进行总结,供猪场试验室人员参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 荧光pcr 检测 准确性

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多重荧光PCR鉴别诊断猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒 被引量：9

20

作者 陈静静 罗宝正 +5 位作者 沙才华 廖秀云 王振全 陈伟生 徐海聂 薄清如 《湖北畜牧兽医》 2012年第2期4-6,9,共4页

为了建立一种快速、灵敏、特异的能够同时检测猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒的多重荧光PCR方法,根据GenBank中公布的猪瘟病毒基因序列,设计一套特异性的引物和探针,对猪瘟病料提取RNA,经RT-PCR扩增后将产物回收,克隆至pMD18-T构建pMD18-T-CSF... 为了建立一种快速、灵敏、特异的能够同时检测猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒的多重荧光PCR方法,根据GenBank中公布的猪瘟病毒基因序列,设计一套特异性的引物和探针,对猪瘟病料提取RNA,经RT-PCR扩增后将产物回收,克隆至pMD18-T构建pMD18-T-CSFV阳性质粒;非洲猪瘟的目的片段序列采用化学合成,构建pMD18-T-ASFV阳性质粒。以两种阳性质粒为模板对建立的多重荧光PCR方法做特异性、灵敏度和重复性试验,结果表明该方法可以将猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒同口蹄疫病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪水泡病病毒、猪圆环病毒2型区分开,灵敏度可以达到10拷贝的数量级,而且方法稳定。对2份已知猪瘟阳性血清样品和120份猪内脏、猪鼻腔拭子及血清样品检测后,发现对已知阳性样品的检测结果符合预期目标,未知样品检出猪瘟病毒3份阳性,未检出非洲猪瘟病毒阳性。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 非洲猪瘟病毒 多重荧光pcr 检测

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