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非整合型质粒重编程脐带血CD34^+细胞形成诱导性多潜能干细胞的研究
被引量：
1
1
作者
张权娥
刘淑平
+5 位作者
刘延风
张鸿雁
袁卫平
陈桂彬
李彦欣
许静
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期728-734,共7页
本研究探索和优化非整合质粒的方法,将人脐带血来源的CD34+(CB CD34+)细胞进行重编程,建立无病毒的iPS技术体系。利用细胞核转染仪将质粒pEB-C5和pEB-Tg转入短暂培养后的CB CD34+细胞中,使其进行重编程形成iPSC,14 d后观察到2×106C...
本研究探索和优化非整合质粒的方法,将人脐带血来源的CD34+(CB CD34+)细胞进行重编程,建立无病毒的iPS技术体系。利用细胞核转染仪将质粒pEB-C5和pEB-Tg转入短暂培养后的CB CD34+细胞中,使其进行重编程形成iPSC,14 d后观察到2×106CB CD34+细胞中约有200个类似ES细胞特征的克隆出现,并对产生的iPSC进行体内外多能性鉴定及细胞核型检测。结果表明,重编程后的CB CD34+细胞的多能性基因表达与ESC类似,细胞核型正常,外源基因无插入,且具有体内分化成三胚层的全能性。结论:利用非整合型质粒的方法重编程CB CD34+细胞形成iPSC,该方法无外源基因插入、重复性好、操作简单、且效率较高,为建立相对安全的iPSC提供了一个行之有效的途径,为深入探索iPSC应用于临床药物的筛选、组织工程和再生医学研究等提供了很好的研究材料。
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关键词
多潜能
干细胞
脐带血CD34+
细胞
非
整合型
质粒
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职称材料
质粒重编程诱导多潜能干细胞及定向分化神经干细胞
2
作者
林成楷
戎利民
刘斌
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2016年第6期647-654,共8页
目的探讨游离质粒载体重编程诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)为非整合型诱导多潜能干细胞,并在体外定向分化为神经干细胞(neural stem cells,NSCs),为神经干细胞移植治疗神经损伤提供稳定、安全的细胞来源。...
目的探讨游离质粒载体重编程诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)为非整合型诱导多潜能干细胞,并在体外定向分化为神经干细胞(neural stem cells,NSCs),为神经干细胞移植治疗神经损伤提供稳定、安全的细胞来源。方法使用电转仪将质粒p EP4-EO2S-ET2K转入小鼠MEFs,经诱导培养重编程为诱导多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs),i PSCs在不同诱导培养基中经2次悬浮及贴壁培养分化为NSCs,在体内及体外实验鉴定i PSCs多向分化潜能特性及NSCs特性。结果体内外实验显示i PSCs具有与胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)相似的多向分化潜能,且不整合外源性基因。i PSCs进一步分化的NSCs其相关标志基因表达与野生型NSCs相近,且较i PSCs显著增加,免疫荧光显示NSCs高表达NSC标志物NESTIN及PAX6,在体外存活能分化为神经元、少突胶质细胞及星形胶质细胞。结论游离质粒能重编程诱导非整合型i PSCs,并定向分化为神经干细胞及神经元,是神经损伤修复的理想种子细胞。
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关键词
游离质粒载体
非整合型诱导多潜能干细胞
神经
干细胞
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职称材料
题名
非整合型质粒重编程脐带血CD34^+细胞形成诱导性多潜能干细胞的研究
被引量：
1
1
作者
张权娥
刘淑平
刘延风
张鸿雁
袁卫平
陈桂彬
李彦欣
许静
机构
中国医学科学院
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期728-734,共7页
基金
国家医药重大专项(编号2011ZX09102-010-04)
科技部973项目(编号2012CB966601
+5 种基金
2010CB945204
2009CB521803)
国家自然科学基金(编号81130074
81070390)
天津市科委自然基金项目(编号10JCZDJC19500
11JCZDJC27900)
文摘
本研究探索和优化非整合质粒的方法,将人脐带血来源的CD34+(CB CD34+)细胞进行重编程,建立无病毒的iPS技术体系。利用细胞核转染仪将质粒pEB-C5和pEB-Tg转入短暂培养后的CB CD34+细胞中,使其进行重编程形成iPSC,14 d后观察到2×106CB CD34+细胞中约有200个类似ES细胞特征的克隆出现,并对产生的iPSC进行体内外多能性鉴定及细胞核型检测。结果表明,重编程后的CB CD34+细胞的多能性基因表达与ESC类似,细胞核型正常,外源基因无插入,且具有体内分化成三胚层的全能性。结论:利用非整合型质粒的方法重编程CB CD34+细胞形成iPSC,该方法无外源基因插入、重复性好、操作简单、且效率较高,为建立相对安全的iPSC提供了一个行之有效的途径,为深入探索iPSC应用于临床药物的筛选、组织工程和再生医学研究等提供了很好的研究材料。
关键词
多潜能
干细胞
脐带血CD34+
细胞
非
整合型
质粒
Keywords
pluripotent stem cell
cord blood CD34＋ cell
non-integrating plasmid
分类号
R331.1 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
质粒重编程诱导多潜能干细胞及定向分化神经干细胞
2
作者
林成楷
戎利民
刘斌
机构
中山大学附属第三医院脊柱外科
出处
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2016年第6期647-654,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(31170947
31470949
+5 种基金
81472122)
广东省自然科学基金资助项目(S2012020011099
S2013010016413)
广东省科技计划(2012B060300008)
教育部博士点新教师基金资助项目(20100171120088)
广州市科技计划(2013J4100062)
文摘
目的探讨游离质粒载体重编程诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)为非整合型诱导多潜能干细胞,并在体外定向分化为神经干细胞(neural stem cells,NSCs),为神经干细胞移植治疗神经损伤提供稳定、安全的细胞来源。方法使用电转仪将质粒p EP4-EO2S-ET2K转入小鼠MEFs,经诱导培养重编程为诱导多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs),i PSCs在不同诱导培养基中经2次悬浮及贴壁培养分化为NSCs,在体内及体外实验鉴定i PSCs多向分化潜能特性及NSCs特性。结果体内外实验显示i PSCs具有与胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)相似的多向分化潜能,且不整合外源性基因。i PSCs进一步分化的NSCs其相关标志基因表达与野生型NSCs相近,且较i PSCs显著增加,免疫荧光显示NSCs高表达NSC标志物NESTIN及PAX6,在体外存活能分化为神经元、少突胶质细胞及星形胶质细胞。结论游离质粒能重编程诱导非整合型i PSCs,并定向分化为神经干细胞及神经元,是神经损伤修复的理想种子细胞。
关键词
游离质粒载体
非整合型诱导多潜能干细胞
神经
干细胞
Keywords
Episomal plasmid vectors
Non-integrating induced pluripotent stem cells
Neural stem cells
分类号
Q813 [生物学—生物工程]
R318 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
非整合型质粒重编程脐带血CD34^+细胞形成诱导性多潜能干细胞的研究
张权娥
刘淑平
刘延风
张鸿雁
袁卫平
陈桂彬
李彦欣
许静
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
质粒重编程诱导多潜能干细胞及定向分化神经干细胞
林成楷
戎利民
刘斌
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2016
0
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职称材料
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