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菊苣质体同源片段的克隆及非抗生素标记的质体定点整合表达载体构建
被引量:
3
1
作者
王玉华
郝建国
贾敬芬
《草业学报》
CSCD
北大核心
2009年第6期72-81,共10页
依据烟草、玉米、拟南芥和大豆质体基因组rps7基因和16S rDNA基因的保守序列设计引物,以菊苣质体基因组DNA为模板,PCR扩增到1段4.8 kb的片段。序列分析表明,该片段全长4 751 bp(GenBank登录号为GQ199478),包括449 bp的rps7基因5′端序列...
依据烟草、玉米、拟南芥和大豆质体基因组rps7基因和16S rDNA基因的保守序列设计引物,以菊苣质体基因组DNA为模板,PCR扩增到1段4.8 kb的片段。序列分析表明,该片段全长4 751 bp(GenBank登录号为GQ199478),包括449 bp的rps7基因5′端序列、793 bp的rps12基因、72 bp的trnV基因、1 315 bp的16S rDNA基因5′端以及大部分的基因间隔区,该序列与烟草对应区段的相似性为92%,与莴苣对应区段的相似性为97%。以此片段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建了非抗生素标记的菊苣质体定点整合表达载体pJBADH-GFP,酶切分析及PCR检测证明构建的载体符合预期设计。该载体的构建为建立高效、稳定的菊苣质体转化和无抗生素筛选体系奠定基础,为进一步通过质体基因工程手段将更多感兴趣的基因导入菊苣进行遗传改良,或以菊苣质体作生物反应器生产动物口服疫苗等搭建技术平台。
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关键词
菊苣
质体同源片段
非抗生素标记
定点整合
表达载体
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职称材料
题名
菊苣质体同源片段的克隆及非抗生素标记的质体定点整合表达载体构建
被引量:
3
1
作者
王玉华
郝建国
贾敬芬
机构
陕西省生物技术重点实验室西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室西北大学生命科学学院
出处
《草业学报》
CSCD
北大核心
2009年第6期72-81,共10页
基金
国家自然科学基金(30900914
30671082)
+1 种基金
陕西省教育厅专项(09JK777)
西北大学西部资源生物与生物技术教育部重点实验室开放基金资助
文摘
依据烟草、玉米、拟南芥和大豆质体基因组rps7基因和16S rDNA基因的保守序列设计引物,以菊苣质体基因组DNA为模板,PCR扩增到1段4.8 kb的片段。序列分析表明,该片段全长4 751 bp(GenBank登录号为GQ199478),包括449 bp的rps7基因5′端序列、793 bp的rps12基因、72 bp的trnV基因、1 315 bp的16S rDNA基因5′端以及大部分的基因间隔区,该序列与烟草对应区段的相似性为92%,与莴苣对应区段的相似性为97%。以此片段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建了非抗生素标记的菊苣质体定点整合表达载体pJBADH-GFP,酶切分析及PCR检测证明构建的载体符合预期设计。该载体的构建为建立高效、稳定的菊苣质体转化和无抗生素筛选体系奠定基础,为进一步通过质体基因工程手段将更多感兴趣的基因导入菊苣进行遗传改良,或以菊苣质体作生物反应器生产动物口服疫苗等搭建技术平台。
关键词
菊苣
质体同源片段
非抗生素标记
定点整合
表达载体
Keywords
chicory
plastid homologous fragments
antibiotic free
site-specific integration
expression vector
分类号
S54 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
菊苣质体同源片段的克隆及非抗生素标记的质体定点整合表达载体构建
王玉华
郝建国
贾敬芬
《草业学报》
CSCD
北大核心
2009
3
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