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苦杏仁苷在KRAS突变非小细胞肺癌细胞生长和肿瘤免疫中的作用及机制
1
作者 刘奎 《皖南医学院学报》 2025年第2期107-111,共5页
目的:探讨苦杏仁苷对Kirsten鼠肉瘤基因(KRAS)突变非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生长和肿瘤免疫的影响,并探讨可能的潜在机制。方法:用不同浓度(10、50、100、150、200μg/mL)的苦杏仁苷处理KRAS突变的人NSCLC细胞系A54924 h。同时,用程序性... 目的:探讨苦杏仁苷对Kirsten鼠肉瘤基因(KRAS)突变非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生长和肿瘤免疫的影响,并探讨可能的潜在机制。方法:用不同浓度(10、50、100、150、200μg/mL)的苦杏仁苷处理KRAS突变的人NSCLC细胞系A54924 h。同时,用程序性死亡配体1(PD-L1)的选择性激活剂干扰素γ(IFNγ)和Yes相关蛋白(YAP)抑制剂维替洛芬(VP)联合150μg/mL苦杏仁苷处理A549细胞24 h进行挽救实验或协同实验。采用MTT法检测细胞活力;EdU incorporation assay法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;伤口愈合实验和Transwell实验检测细胞迁移与侵袭;蛋白免疫印迹检测PD-L1、YAP、磷酸化YAP(p-YAP)、转录共激活因子(TAZ)蛋白的表达;实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测CTGF和CYR61 mRNA的表达。结果:苦杏仁苷能够以剂量依赖性的方式降低A549细胞的活力(P<0.05)。50、100、150μg/mL的苦杏仁苷能够抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡(P<0.05)。苦杏仁苷能够抑制A549细胞中PD-L1的表达,且这一作用能够在一定程度上被IFNγ消除(P<0.05)。苦杏仁苷能够抑制YAP和TAZ蛋白表达,促进YAP磷酸化,抑制Hippo-YAP信号通路下游靶标CTGF和CYR61 mRNA的表达,且苦杏仁苷与VP联合使用能够协同下调A549细胞中PD-L1的表达(P<0.05)。结论:苦杏仁苷能够抑制KRAS突变型NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡,这可能是通过调节Hippo-YAP/PD-L1轴以调节肿瘤免疫抑制来实现。 展开更多
关键词 苦杏仁苷 KRAS突变非小细胞肺癌细胞 程序性死亡配体1 Yes相关蛋白/转录共激活因子
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阿美替尼联合贝伐珠单抗对非小细胞肺癌细胞的作用研究
2
作者 朱怡璇 汪洋 +1 位作者 屠文莲 曹玮 《成都医学院学报》 2025年第2期186-191,共6页
目的探究阿美替尼联合贝伐珠单抗对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的作用。方法体外培养NSCLC细胞株A549、H1975,分别加入不同浓度阿美替尼(0、1、5、15、50、150、500 mg/L)和贝伐珠单抗(0、1、10、30、100、300、1000 mg/L);采用CCK8法、流... 目的探究阿美替尼联合贝伐珠单抗对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的作用。方法体外培养NSCLC细胞株A549、H1975,分别加入不同浓度阿美替尼(0、1、5、15、50、150、500 mg/L)和贝伐珠单抗(0、1、10、30、100、300、1000 mg/L);采用CCK8法、流式细胞术、划痕实验、Transwell实验测定A549、H1975细胞在阿美替尼、贝伐珠单抗及二者联合用药作用下细胞的增殖率、凋亡率、迁移能力和侵袭能力。结果CCK-8实验结果显示,阿美替尼组、贝伐珠单抗组A549、H1975细胞增殖率低于对照组,且联合用药组A549细胞增殖率低于单药组(P<0.05);人工划痕实验结果显示,阿美替尼组、贝伐珠单抗组及二者联合用药组A549、H1975细胞的迁移率低于对照组(P<0.05),且联合用药组A549、H1975细胞的迁移率低于单药组(P<0.05);Transwell实验表明,阿美替尼组、贝伐珠单抗组及二者联合用药组A549、H1975细胞的侵袭率均低于对照组,仅在A549细胞侵袭实验中,联合用药组细胞的侵袭率低于单药组(P<0.05);流式细胞术实验结果显示,阿美替尼、贝伐珠单抗及二者联合组A549、H1975细胞凋亡率高于对照组(P<0.05)。结论与单一用药相比,阿美替尼联合贝伐珠单抗在抑制肿瘤细胞迁移、侵袭方面更具优势。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌细胞 血管内皮生长因子 增殖 迁移 侵袭 凋亡
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紫草素联合顺铂对人非小细胞肺癌细胞凋亡的作用研究
3
作者 朱丽 陈长梅 +2 位作者 王宇宇 黄瑶 吴玉佳 《北方药学》 2024年第9期4-7,共4页
目的:探究紫草素联合顺铂对人非小细胞肺癌细胞凋亡的作用研究,为临床合理用药提供科学依据。方法:将NCI-H2347细胞设空白对照组、紫草素(1μg/mL)组、顺铂组(50μg/mL)和联合实验组(紫草素1μg/mL+顺铂5μg/mL),MTT筛选出紫草素的使用... 目的:探究紫草素联合顺铂对人非小细胞肺癌细胞凋亡的作用研究,为临床合理用药提供科学依据。方法:将NCI-H2347细胞设空白对照组、紫草素(1μg/mL)组、顺铂组(50μg/mL)和联合实验组(紫草素1μg/mL+顺铂5μg/mL),MTT筛选出紫草素的使用浓度及联合用药后对NCI-H2347细胞的抑制作用;Western blot检测特异性蛋白TTF-1(甲状腺转录因子-1)及Bax与Bcl-2;凋亡试剂盒进一步检测Bax与Bcl-2。结果:MTT结果显示紫草素的有效浓度为1μg/mL;Western blot法检测NCL-H2347细胞中紫草素联合顺铂组TTF-1较单独使用紫草素或顺铂组明显降低;紫草素联合顺铂能明显增加Bax与Bcl-2的比值。结论:紫草素联合顺铂后对TTF-1的抑制可能与凋亡途径有关。 展开更多
关键词 紫草素 顺铂 人非小细胞肺癌细胞
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菝葜体外抗非小细胞肺癌细胞活性物质研究 被引量：5
4
作者 邱千 戴琪 +3 位作者 陈树和 干国平 刘焱文 卿国良 《中国现代中药》 CAS 2014年第1期12-13,20,共3页
目的:筛选菝葜抗非小细胞肺癌细胞活性物质。方法:采用溶剂法、明胶沉淀法和大孔吸附树脂纯化技术,将菝葜提取分离为乙醇粗提物、总鞣质、总黄酮3个物质部位,利用细胞计数仪测定3种物质部位抗A549、NCI-H522、NCI-H23细胞存活率。结果:... 目的:筛选菝葜抗非小细胞肺癌细胞活性物质。方法:采用溶剂法、明胶沉淀法和大孔吸附树脂纯化技术,将菝葜提取分离为乙醇粗提物、总鞣质、总黄酮3个物质部位,利用细胞计数仪测定3种物质部位抗A549、NCI-H522、NCI-H23细胞存活率。结果:从菝葜提取分离的3种物质部位均有不同程度抗非小细胞肺癌细胞活性,其中鞣质部位致非小细胞肺癌细胞存活率最低,并在浓度范围内呈现出良好的计量依耐性。结论:鞣质为菝葜主要抗非小细胞肺癌细胞活性物质。 展开更多
关键词 菝葜 非小细胞肺癌细胞 鞣质 乙醇提取物 总黄酮
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黄芪甲苷对非小细胞肺癌细胞A549、SPC-A1增殖凋亡的调控作用及其机制 被引量：18
5
作者 吴安妮 袁力 +1 位作者 邢婧 王楠 《山东医药》 CAS 2021年第3期18-22,共5页
目的探讨黄芪甲苷对非小细胞肺癌细胞A549、SPC-A1增殖凋亡的调控作用及潜在的作用机制。方法分别用0、10、20、40、60、80、100μmoL/L的黄芪甲苷处理非小细胞肺癌细胞A549和SPC-A124 h后,用四甲基偶氮唑蓝染色法测算A549和SPC-A1细胞... 目的探讨黄芪甲苷对非小细胞肺癌细胞A549、SPC-A1增殖凋亡的调控作用及潜在的作用机制。方法分别用0、10、20、40、60、80、100μmoL/L的黄芪甲苷处理非小细胞肺癌细胞A549和SPC-A124 h后,用四甲基偶氮唑蓝染色法测算A549和SPC-A1细胞存活率,计算出黄芪甲苷的半数抑制浓度(IC_(50))。将IC_(50)的黄芪甲苷加入非小细胞肺癌细胞A549和SPC-A124 h,同时设立空白对照,采用原位末端转移酶标记法测算A549和SPC-A1细胞的凋亡率。实时荧光定量PCR检测Ki67、PCNA、Caspase-3、Caspase-9基因,免疫印迹法检测Cleaved Caspase3、Cleaved Caspase9、total-Akt、p-Akt蛋白。结果不同浓度黄芪甲苷处理后24 h,A549和SPC-A1的细胞活性均明显受到了抑制(P均<0.05),A549和SPC-A1细胞增殖的IC50分别为32.6μmol/L和29.4μmol/L。与空白对照比较,IC50的黄芪甲苷加入后,A549和SPC-A-1细胞凋亡率明显升高(P均<0.05)。与空白对照比较,黄芪甲苷加入后,A549、SPC-A1细胞增殖相关基因Ki67、PCNA下降(P均<0.05),凋亡相关基因Caspase-3和Caspase-9的mRNA和蛋白的表达均升高(P均<0.01),p-Akt表达下降(P<0.01)。结论黄芪甲苷可抑制非小细胞肺癌A549、SPC-A1的增殖,促进其凋亡,呈浓度依赖性;抑制Akt信号通路中p-Akt的表达可能是黄芪甲苷的作用机制之一。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 非小细胞肺癌细胞 A549细胞 SPC-A1细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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人参外泌体通过促进巨噬细胞M1极化抑制肺癌细胞生长
6
作者 范亮亮 任李梅 +5 位作者 杨松 李文婧 赵悦名 赵荣华 赵大庆 王佳雯 《食品工业科技》 北大核心 2025年第4期358-366,共9页
目的:旨在探讨人参外泌体(Ginseng-derived nanoparticles,GDNPs)通过改变巨噬细胞极化状态,抑制人非小细胞肺癌细胞(A549)生长的分子机制,为人参鲜药的深入研究提供一定的理论基础。方法:采用CCK-8法检测人参外泌体对巨噬细胞(RAW264.7... 目的:旨在探讨人参外泌体(Ginseng-derived nanoparticles,GDNPs)通过改变巨噬细胞极化状态,抑制人非小细胞肺癌细胞(A549)生长的分子机制,为人参鲜药的深入研究提供一定的理论基础。方法:采用CCK-8法检测人参外泌体对巨噬细胞(RAW264.7)活力的影响;实时定量PCR检测人参外泌体刺激巨噬细胞M1极化相关指标IL-6、iNOS、TNF-α、MCP-1转录水平;流式细胞术检测M1型巨噬细胞分子标志CD80的表达。收集LPS和人参外泌体处理的RAW264.7细胞衍生的上清液,制成条件培养基(CM),并与A549共培养。CCK8和流式细胞术检测A549细胞活力、细胞周期和细胞凋亡;采用Western blot检测GDNPs-CM对A549细胞中TLR4/MyD88通路相关蛋白表达的影响。结果:人参外泌体能够增强巨噬细胞的细胞活力(P<0.05,P<0.01),并提高巨噬细胞M1极化相关指标IL-6、iNOS、TNF-α、MCP-1转录水平的表达(P<0.05,P<0.01,P<0.0001);人参外泌体增强了M1型巨噬细胞分子标志CD80的表达(P<0.01)。在条件培养基作用下,A549细胞的细胞活力受到抑制,并发生G1期阻滞,A549细胞的凋亡率提高(P<0.05,P<0.01);同时,GDNPs-CM促进了A549细胞中TLR4、MyD88、NF-κB、iNOS、COX-2等炎症相关蛋白表达量(P<0.05,P<0.01)。结论:人参外泌体通过刺激巨噬细胞M1极化,抑制A549细胞增殖,调节A549细胞周期,激活TLR4/MyD88/NF-κB信号通路提高炎症因子的表达水平,从而诱导肺癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 人参外泌体 肿瘤相关巨噬细胞 人非小细胞肺癌细胞 细胞周期 细胞凋亡
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雪菊对肝癌和肺癌细胞体外抗肿瘤作用研究 被引量：11
7
作者 帕尔哈提.买买提依明 令狐晨 +1 位作者 朱青梅 阿依吐伦.斯马义 《安徽农业科学》 CAS 2015年第24期46-48,共3页
[目的]研究雪菊不同提取物对体外培养肿瘤细胞的抑制作用。[方法]体外培养人肝癌细胞(7404)及人非小细胞肺癌细胞(A549),用不同浓度的雪菊总黄酮纯化物、粗提物及总多糖分别对细胞作用后,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪测细胞的凋... [目的]研究雪菊不同提取物对体外培养肿瘤细胞的抑制作用。[方法]体外培养人肝癌细胞(7404)及人非小细胞肺癌细胞(A549),用不同浓度的雪菊总黄酮纯化物、粗提物及总多糖分别对细胞作用后,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪测细胞的凋亡率。[结果]通过MTT的方法得出雪菊不同提取物对7404和A549均有抑制作用,并呈现出浓度和时间的依赖性。流式细胞仪检测总黄酮纯化物能增强7404和A549细胞的凋亡率。[结论]雪菊不同提取物对2种癌细胞的增殖有明显抑制作用,其作用机制可能与增强细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 雪菊 人肝癌细胞 人非小细胞肺癌细胞 生长抑制 细胞凋亡 抗肿瘤
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硒化秦巴硒菇多糖对A549细胞增殖的抑制作用 被引量：2
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作者 孟敏 安红霞 +3 位作者 俞永智 王霞 雷文娟 孙延庆 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2022年第3期17-24,共8页
【目的】初步探讨硒化秦巴硒菇多糖(Se-ABM)对人非小细胞肺癌细胞(A549)DNA损伤及细胞周期阻滞的分子机制。【方法】体外培养人结肠癌细胞(HT29)、人肝癌细胞(HepG2)、人宫颈癌细胞(HeLa)和非小细胞肺癌细胞(A549),用Se-ABM和拓扑替康处... 【目的】初步探讨硒化秦巴硒菇多糖(Se-ABM)对人非小细胞肺癌细胞(A549)DNA损伤及细胞周期阻滞的分子机制。【方法】体外培养人结肠癌细胞(HT29)、人肝癌细胞(HepG2)、人宫颈癌细胞(HeLa)和非小细胞肺癌细胞(A549),用Se-ABM和拓扑替康处理(Topotecan)A549细胞,分别用CCK-8试验,流式细胞分析和免疫印迹试验(Western-blot,WB)检测Se-ABM对A549细胞的抗肿瘤作用。【结果】Se-ABM能够抑制HT29、HepG2、HeLa和A549细胞的增殖,其中对A549细胞的增殖抑制最为明显。细胞流式试验表明,Se-ABM在G2/M期阻滞A549细胞,并呈浓度依赖性。Western-blot试验结果显示,Se-ABM能够使A549细胞中DNA损伤相关因子毛细血管扩张性共济失调突变基因(ataxia telangiectasia mutated gene,ATM)、毛细血管扩张性共济失调相关基因(ataxia-telangiectasia related gene,ATR)、抑癌基因(p53)、磷酸化组蛋白(γ-H2AX)的表达量明显升高,同时诱导细胞周期阻滞在G2/M期。此外,在A549细胞中,Se-ABM能够调控凋亡相关蛋白的表达,促使促凋亡因子(BAX)、乳腺癌1号基因(BRCA1)、抗凋亡因子(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3,Cas 3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase 9,Cas 9)的表达发生明显变化。【结论】Se-ABM在体外能够明显诱导DNA损伤,从而导致细胞凋亡,Se-ABM具有潜在的抑制A549细胞增殖的效果。 展开更多
关键词 硒化秦巴硒菇 拓扑替康 非小细胞肺癌细胞 细胞周期 细胞凋亡 DNA损伤
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康普瑞丁磷酸二钠壳聚糖-海藻酸钠靶向微球的体内外抗肿瘤作用
9
作者 王耀华 刁源媛 《成都医学院学报》 CAS 2012年第B09期296-297,共2页
目的:观察化合物康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对人非小细胞肺癌细胞株的体外抑制作用及对裸小鼠腹腔移植非小细胞肺癌细胞株的体内抗肿瘤作用。方法:分别用MTT法、细胞生长曲线及细胞集落形成试验,研究康普瑞丁磷酸... 目的:观察化合物康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对人非小细胞肺癌细胞株的体外抑制作用及对裸小鼠腹腔移植非小细胞肺癌细胞株的体内抗肿瘤作用。方法:分别用MTT法、细胞生长曲线及细胞集落形成试验,研究康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对非小细胞肺癌细胞增殖的抑制作用,台盼蓝染色观察细胞形态变化;非小细胞肺癌细胞腹腔移植裸小鼠iv给予康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球,qd,10d,颈椎脱臼处死动物,分别称体重、瘤重,计算抑瘤率。结果:MTT法提示,0.5~64.0μg/mL康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对非小细胞肺癌细胞48h的抑制率为31%~75%,平均ICs。约为1.137μg/mL,生长曲线提示,康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对非小细胞肺癌细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系;台盼蓝染色后细胞出现凋亡形态的变化。康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖一海藻酸钠靶向微球对裸小鼠腹腔移植非小细胞肺癌细胞的治疗作用呈量效关系,随剂量增大,裸小鼠抑瘤率也增加。结论:康普瑞丁磷酸二钠(CA4P)壳聚糖-海藻酸钠靶向微球对人非小细胞肺癌细胞的增殖具有抑制作用,对非小细胞肺癌细胞裸小鼠腹腔移植瘤具治疗作用。 展开更多
关键词 康普瑞丁磷酸二钠 壳聚糖-海藻酸钠靶向微球 非小细胞肺癌细胞 肺癌
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沉默lncRNA DANCR调节尼古丁胁迫下NSCLCs的炎症微环境、增殖活性和迁移 被引量：2
10
作者 兰飞 赵鹏 刘冬 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第11期1485-1491,共7页
目的探讨促癌基因lncRNA DANCR在尼古丁诱导的肿瘤微环境下对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和迁移的作用。方法分别使用不同浓度尼古丁(0,50,250,500 ng/ml)刺激NSCLC细胞系A549,采用ELISA法检测四组细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的水... 目的探讨促癌基因lncRNA DANCR在尼古丁诱导的肿瘤微环境下对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和迁移的作用。方法分别使用不同浓度尼古丁(0,50,250,500 ng/ml)刺激NSCLC细胞系A549,采用ELISA法检测四组细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平变化。选择500 ng/ml尼古丁刺激A549细胞,RT-qPCR法检测两组细胞(0 ng/ml组、500 ng/ml组) IKKβ水平变化,Western blot法检测该两组细胞p-IκBα及胞核p65-NF-κB水平变化。A549细胞中的lncRNA DANCR以siRNA法进行沉默。以尼古丁(0 ng/ml、500 ng/ml)及DANCR沉默(未处理、si-NC转染、si-DANCR转染)联合处理细胞,分为0 ng/ml组、0 ng/ml+si-RNA组、0 ng/ml+si-DANCR组、500 ng/ml组、500 ng/ml+si-NC组和500 ng/ml+si-DANCR组,使用ELISA法复测TNF-α、IL-6、IL-8的水平变化,Western blot法复测胞核p65-NF-κB水平变化,MTT法检测各组A549细胞的增殖活性变化,细胞划痕实验评估各组A549细胞的迁移能力变化。结果尼古丁能够以剂量依赖性方式(50,250,500 ng/ml)诱导A549细胞炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平增加(P <0. 05)。此外,与0 ng/ml尼古丁组相比,A549细胞炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8水平,NF-κB炎性反应信号通路相关分子IKKβ、p-IκBα、p65-NF-κB水平,细胞增殖活性及划痕愈合能力在500ng/ml尼古丁组均显著增加(均P <0. 05),而这种增加在500 ng/ml+si-DANCR组中均被显著抑制(均P <0. 05)。结论沉默lncRNA DANCR调节尼古丁胁迫下NSCLC细胞的炎症微环境、增殖活性和迁移能力。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌细胞 炎症微环境 NF-κB炎症通路 细胞增殖 细胞迁移 长链非编码RNA DANCR
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