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非培养方法解析烟草根部内生细菌的群落结构 被引量:13
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作者 陈泽斌 夏振远 +3 位作者 雷丽萍 刘飞 陈海如 钟永丽 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期201-209,共9页
为了解烟草根部内生细菌多样性,采用改进的CTAB法提取烟草根部总DNA,利用细菌16 S rDNA基因通用引物对烟草根总DNA进行16 S rDNA扩增,构建烟草根部内生细菌16 S rDNA克隆文库;挑取具有不同酶切谱型的克隆进行测序、比对并构建16 S rDNA... 为了解烟草根部内生细菌多样性,采用改进的CTAB法提取烟草根部总DNA,利用细菌16 S rDNA基因通用引物对烟草根总DNA进行16 S rDNA扩增,构建烟草根部内生细菌16 S rDNA克隆文库;挑取具有不同酶切谱型的克隆进行测序、比对并构建16 S rDNA基因系统发育树。构建的烟草根部内生细菌16 S rDNA克隆文库中,155个克隆分属于36个不同的分类单元,Blast结果表明,大部分克隆与已知细菌的16 S rDNA序列相似性较高,分别属于变形菌门(Proteobacteria)的Alpha、Gamma、Beta亚群,放线菌门(Actinobacteria),拟杆菌门(Bacteroidetes),厚壁菌门(Fir-micutes)中的肠杆菌属(Enterobacter)、不动杆菌属(Acinetobacter)、寡养食单胞菌属(Stenotrophomonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)、嗜甲基菌属(Methylobacillus)、食酸菌属(Acidovorax)、芽孢杆菌属(Bacillus)等16个属,其中13.5%的克隆序列与非可培养细菌(Uncultured bacteria)的相似性在93%~99%之间,假单胞菌属细菌是烟草根部内生细菌的优势种群。这些研究结果说明烟草根部存在较为丰富的内生细菌系统发育多样性,并且潜藏着未知的内生细菌资源。 展开更多
关键词 :非培养方法 内生细菌 烟草 微生物多样性
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发酵肉制品菌群的非培养鉴定技术研究进展 被引量:4
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作者 王稳航 徐倩倩 +1 位作者 滕安国 刘安军 《肉类研究》 2014年第9期17-21,共5页
随着分子生物学技术的快速发展,以聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)为基础的非培养鉴定技术在发酵肉制品菌群鉴定中得到越来越广泛的应用。其方法主要有种特异性PCR、聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳等。与传统的分离培养鉴... 随着分子生物学技术的快速发展,以聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)为基础的非培养鉴定技术在发酵肉制品菌群鉴定中得到越来越广泛的应用。其方法主要有种特异性PCR、聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳等。与传统的分离培养鉴定方法相比,非培养方法具有直接、快速、准确、实时等优点,但同时也存在一些缺点,如样品复杂程度、DNA(RNA)提取条件、PCR反应过程的差异等均可影响鉴定结果。非培养鉴定技术与传统微生物鉴定技术相结合,能够对发酵肉制品菌群多态性和动态变化做出准确的鉴定。 展开更多
关键词 发酵肉制品 菌群 非培养方法 种特异性聚合酶链反应 聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳
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非培养技术在干酪微生物群落分析中的应用 被引量:2
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作者 莫蓓红 孙立国 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期293-298,共6页
非培养方法在食品行业中的应用还处于起步阶段。本文综述非培养方法在分析干酪中微生物群落结构以及监测微生物群落结构在干酪生产和成熟过程中演替的应用现状。主要介绍已被广泛用于分析干酪中微生物群落结构的DNA指纹图谱技术,包括PCR... 非培养方法在食品行业中的应用还处于起步阶段。本文综述非培养方法在分析干酪中微生物群落结构以及监测微生物群落结构在干酪生产和成熟过程中演替的应用现状。主要介绍已被广泛用于分析干酪中微生物群落结构的DNA指纹图谱技术,包括PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术、PCR-时间温度梯度凝胶电泳(PCR-TTGE)技术、单链构象多态性PCR(SSCP-PCR)技术以及变性高效液相色谱(DHPLC)技术等。此外,本文还对非培养技术的优点和局限性进行分析,展望非培养方法在干酪行业的应用前景,认为将非培养方法和传统培养方法结合使用才是研究微生物生态的最好途径。 展开更多
关键词 非培养方法 干酪 DNA指纹图谱技术 微生物群落
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基于非培养手段的多环芳烃降解微生物解析 被引量:4
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作者 陈亚婷 姜博 +3 位作者 邢奕 张娜娜 连路宁 路培 《中国环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 2018年第9期3562-3575,共14页
本文对原位识别土壤未培养微生物的非培养手段进行综述,揭示其在PAHs降解中发挥的作用.首先对土壤中PAHs的降解微生物、降解原理以及功能基因进行全面总结;其次对荧光原位杂交技术(FISH)、稳定同位素探针技术(SIP)、宏基因组学技术(Meta... 本文对原位识别土壤未培养微生物的非培养手段进行综述,揭示其在PAHs降解中发挥的作用.首先对土壤中PAHs的降解微生物、降解原理以及功能基因进行全面总结;其次对荧光原位杂交技术(FISH)、稳定同位素探针技术(SIP)、宏基因组学技术(Metagenomics)、转录组学技术(Transcriptomics)、单细胞技术(Single-cell technology)以及磁性纳米材料技术(MMI)等非培养手段的原理、特点以及应用进行归纳总结.重点讨论这6种非培养手段在原位识别PAHs降解微生物中的应用潜力.其中SIP在研究PAHs降解机制中最为成熟、稳定,应用最广泛.MMI作为一种新型的非培养手段,能够从复杂的生态环境中分离获得活的功能微生物,为深入探究未培养的PAHs降解微生物提供解决途径. 展开更多
关键词 培养微生物 多环芳烃降解 土壤 功能微生物 非培养方法
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新疆泥火山细菌遗传多样性 被引量:15
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作者 马小龙 王芸 +7 位作者 杨红梅 王纯利 毛培宏 金湘 常玮 房世杰 张评浒 娄恺 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期3722-3728,共7页
为了解新疆乌苏泥火山细菌多样性,从泥火山泥浆样品中直接提取总DNA,构建了含150个有效转化子的泥火山细菌16SrDNA基因文库,转化子经菌液PCR及HaeⅢ酶切后获得16个不同带型,克隆测序结果表明,其分属于16个不同的分类单元。一部分序列与... 为了解新疆乌苏泥火山细菌多样性,从泥火山泥浆样品中直接提取总DNA,构建了含150个有效转化子的泥火山细菌16SrDNA基因文库,转化子经菌液PCR及HaeⅢ酶切后获得16个不同带型,克隆测序结果表明,其分属于16个不同的分类单元。一部分序列与已知细菌类群的16SrDNA序列相似性较高,归属变形菌门(Proteobacteria),厚壁菌门(Firmicutes),梭杆菌门(Fusobacteria),放线菌门(Actinobacteria);另外一部分序列与已知细菌类群的16S rDNA序列同源性较低,可能代表新的分类单位。研究结果显示,泥火山环境中微生物种群丰富,值得进一步研究。 展开更多
关键词 泥火山 微生物多样性 非培养方法 系统发育
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西沙野生诺尼种子内生细菌群落多样性的初步研究 被引量:12
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作者 刘洋 李辉 +5 位作者 李金霞 曹艳花 姚粟 白飞荣 谭望桥 程池 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期142-147,共6页
通过构建16S rDNA克隆文库的非培养方法对我国西沙野生诺尼种子内生细菌群落结构多样性进行研究,共涉及Proteobacteria、Firmicutes、Bacteroidetes及Actinobacteria四大类群,包含33个属,42个OTU,优势菌属(丰度)依次为Enterobactersp.(1... 通过构建16S rDNA克隆文库的非培养方法对我国西沙野生诺尼种子内生细菌群落结构多样性进行研究,共涉及Proteobacteria、Firmicutes、Bacteroidetes及Actinobacteria四大类群,包含33个属,42个OTU,优势菌属(丰度)依次为Enterobactersp.(17.55%)、Bacillussp.(16.79%)、Acinetobactersp.(6.11%)、Pseudomonassp.(6.11%)及Piscinibactersp.(6.11%)。这是国内外首次利用非培养方法针对诺尼种子内生细菌群落多样性进行研究的报道。 展开更多
关键词 诺尼 种子 内生细菌 群落多样性 非培养方法
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超级杂交水稻种子内生细菌群落结构及其多样性 被引量:10
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作者 刘洋 赵燃 +7 位作者 黎妮 曹艳花 张超 白飞荣 张欣 袁隆平 王伟平 程池 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期31-36,共6页
通过采用构建16S r DNA克隆文库的非培养方法,对超级杂交水稻品种"深两优5814"及"Y两优900"种子内生细菌群落结构多样性进行研究。实验表明,"深两优5814"种子内生细菌含13个OUT,第一优势菌属为Pantoea,... 通过采用构建16S r DNA克隆文库的非培养方法,对超级杂交水稻品种"深两优5814"及"Y两优900"种子内生细菌群落结构多样性进行研究。实验表明,"深两优5814"种子内生细菌含13个OUT,第一优势菌属为Pantoea,丰度为89.44%,第二优势菌和第三优势菌分别为Flavobacterium及Methylobacterium;"Y两优900"种子内生细菌含13个OUT,第一优势菌属为Pantoea,丰度为76.11%,第二优势菌和第三优势菌分别为Pseudomonas及Xanthomonas。由研究可见,泛菌属细菌为水稻种子中的优势菌群,同时,水稻种子基因型对其内生细菌的丰度及多样性具有一定的影响。 展开更多
关键词 超级杂交水稻 种子内生细菌 非培养方法 群落多样性
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