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题名35S启动子定量PCR非同源竞争模板的构建
被引量：1
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作者
徐景升
阙友雄
李峰
陈如凯
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机构
农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点实验室福建农林大学甘蔗研究所
福建省立医院病理科室
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出处
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期12-15,共4页
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基金
福建省青年科技人才创新基金(2005J020)
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文摘
利用35S启动子特异引物,以大肠杆菌基因组DNA为异源模板,经低严谨度PCR扩增并回收克隆适宜DNA片段,构建了35S启动子的非同源竞争对照。测序结果表明,该片段与35S启动子相应序列即靶序列除两端引物序列完全相同外,其他部分没有同源性。利用该非同源竞争对照,建立了转基因玉米35S启动子的QC-PCR技术体系,并进行了校正。
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关键词
竞争定量PCR
非同源对照模板
转基因检测
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Keywords
Quantitative conapetiter-pcr
non- homologous competitor template
GMO detection
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名宿根矮化病菌的竞争定量PCR检测方法建立
被引量：4
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作者
王恒波
郭晋隆
陈平华
阙友雄
陈如凯
许莉萍
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机构
福建农林大学农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室
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出处
《热带作物学报》
CSCD
2009年第10期1511-1516,共6页
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基金
现代农业产业技术体系建设专项资金(No.nycytx-24)
农业部引进国际先进农业科学技术计划(948计划)项目(No.2006-G37)
+3 种基金
国家"863"计划项目(No.2007AA100701)
福建省科技计划重点项目(No.2007I0036)
福建省自然科学基金项目(No.2009J05050)
福建科技项目备案(No.F2007AA100701)资助
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文摘
利用宿根矮化病菌的特异检测引物,构建竞争定量PCR检测的非同源模板,建立宿根矮化病菌的竞争定量PCR检测方法。实验中非同源模板(竞争模板)构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严谨度扩增,回收合适的DNA片段并将其构建到T-esay载体上,通过测序和序列比对,除两端引物序列完全相似外,其余部分没有同源性,因此可以作为定量检测的非同源模板。通过计算非同源模板的拷贝数,进行竞争定量PCR检测宿根矮化病,建立宿根矮化病菌的标准竞争曲线和直线回归方程。本研究建立的竞争定量PCR检测方法操作简单、特异性和敏感性高,适合于宿根矮化病菌的检测,并可为其它病菌竞争定量PCR检测方法的建立提供参考。
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关键词
甘蔗
宿根矮化病菌
非同源模板
竞争定量PCR
检测
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Keywords
sugarcane
ratoon stunning disease
heterologous template
quantitative competitive PCR（QC-PCR）
detection
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分类号
S432.42
[农业科学—植物病理学]
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