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地高辛配基标记DNA探针检测HLAⅡ类基因技术的建立
被引量：
2
1
作者
余进
张锐发
+2 位作者
李明
万军梅
李伯南
《广州医学院学报》
1995年第2期10-16,共7页
本文报道了采用序列特异性寡核苷酸探针杂交(SSOPH)检测HLAⅡ类基因(DRB、DQB)多态性的方法。实验包括少量全血提取模板DNA、PCR基因扩增基因多态性区域片断、尼龙膜点样、特异性寡核苷酸探针合成及地高辛配基(DIG-11-ddUTP)标记、探针...
本文报道了采用序列特异性寡核苷酸探针杂交(SSOPH)检测HLAⅡ类基因(DRB、DQB)多态性的方法。实验包括少量全血提取模板DNA、PCR基因扩增基因多态性区域片断、尼龙膜点样、特异性寡核苷酸探针合成及地高辛配基(DIG-11-ddUTP)标记、探针杂交;条件洗涤、化学发光显影等一系列步骤。该实验方法具有用血量少、结果精确稳定、操作简便安全、不污染环境等优点。作者对模板DNA的提取、杂交缓冲液制备、标记探针的使用剂量以及条件洗涤等多个环节作了改良,使实验方法和结果进一步优化。
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关键词
HLA-DR
DQ基因序列特异性寡核苷酸
探针
杂交
非同位素dna探针标记
在线阅读
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职称材料
光生物素标记探针检测乙型肝炎病毒DNA
2
作者
陆珍凤
周晓军
周金宝
《医学研究生学报》
CAS
1991年第3期243-244,共2页
近年来,生物素的应用越来越广泛,它不但用于病理技术,而且在临床检验和生物学领域内的用途也日益广泛。目前,进行的斑点杂交法,大多用同位素标记探针,由于同位素对人体有损伤,故生物素的利用日趋兴旺,而光生物素标记探针,既简便、省时,...
近年来,生物素的应用越来越广泛,它不但用于病理技术,而且在临床检验和生物学领域内的用途也日益广泛。目前,进行的斑点杂交法,大多用同位素标记探针,由于同位素对人体有损伤,故生物素的利用日趋兴旺,而光生物素标记探针,既简便、省时,又快速、安全,是检验系统检测液状物质内核酸的最佳选择。有关这方面的文献,国内报道甚少。本文应用光生物素标记探针检测血清中的乙型肝炎病毒(HBV)DNA,获得了满意的结果。现介绍如下:(一)材料1.HBV DNA:带有 HBV:DNA
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关键词
生物素
标记
探针
乙型肝炎病毒
dna
斑点杂交
病理技术
同位素
标记
阴性对照
预杂交
特异性
甲酞胺
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职称材料
用DIG标记的寡核苷酸基因探针杂交技术进行人轮状病毒VP7G血清型鉴定
3
作者
马宏
涂光理
+4 位作者
茹维萍
崔长法
王歆宇
王建阳
夏胜利
《河南医学研究》
CAS
1998年第4期291-295,共5页
目的：建立用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）标记的寡核苷酸基因探针鉴定Ａ群轮状病毒ＶＰ７Ｇ血清型的分子杂交技术，并应用该技术研究河南Ａ群轮状病毒的Ｇ血清型分布。方法：根据轮状病毒编码糖蛋白ＶＰ７的基因核苷酸序...
目的：建立用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）标记的寡核苷酸基因探针鉴定Ａ群轮状病毒ＶＰ７Ｇ血清型的分子杂交技术，并应用该技术研究河南Ａ群轮状病毒的Ｇ血清型分布。方法：根据轮状病毒编码糖蛋白ＶＰ７的基因核苷酸序列，选择该基因高保守区序列中与ＶＰ７Ｇ血清型高度相关的核苷酸片段，人工合成，并用ＤＩＧ标记。在优选的杂交条件下进行杂交：结果：①Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３和Ｇ４四种Ｇ血清型特异性寡核苷酸探针只与同血清型的轮状病毒参考毒株杂交，无交叉杂交现象。灵敏度和特异性达到放射性同位素３２Ｐ标记的水平。②１８８份经ＰＡＧＥ确定的轮状病毒阳性标本中，７９份（４２．０％）、３５份（１８．６％）、１５份（７．９％）分别与Ｇ１、Ｇ２或Ｇ３型探针杂交；未检出Ｇ４型；５６份（２９．８％）未能分型；３份分型特殊。
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关键词
轮状病毒
寡核苷酸
探针
非
同位素
标记
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职称材料
题名
地高辛配基标记DNA探针检测HLAⅡ类基因技术的建立
被引量：
2
1
作者
余进
张锐发
李明
万军梅
李伯南
机构
深圳市血液病研究所
深圳市红十字会医院
出处
《广州医学院学报》
1995年第2期10-16,共7页
文摘
本文报道了采用序列特异性寡核苷酸探针杂交(SSOPH)检测HLAⅡ类基因(DRB、DQB)多态性的方法。实验包括少量全血提取模板DNA、PCR基因扩增基因多态性区域片断、尼龙膜点样、特异性寡核苷酸探针合成及地高辛配基(DIG-11-ddUTP)标记、探针杂交;条件洗涤、化学发光显影等一系列步骤。该实验方法具有用血量少、结果精确稳定、操作简便安全、不污染环境等优点。作者对模板DNA的提取、杂交缓冲液制备、标记探针的使用剂量以及条件洗涤等多个环节作了改良,使实验方法和结果进一步优化。
关键词
HLA-DR
DQ基因序列特异性寡核苷酸
探针
杂交
非同位素dna探针标记
Keywords
HLA -DRB
DQB allelic polymorphism SSOPH
Nonradioactive
dna
labeling
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
光生物素标记探针检测乙型肝炎病毒DNA
2
作者
陆珍凤
周晓军
周金宝
机构
金陵医院超微病理科
南京大学医学院
出处
《医学研究生学报》
CAS
1991年第3期243-244,共2页
文摘
近年来,生物素的应用越来越广泛,它不但用于病理技术,而且在临床检验和生物学领域内的用途也日益广泛。目前,进行的斑点杂交法,大多用同位素标记探针,由于同位素对人体有损伤,故生物素的利用日趋兴旺,而光生物素标记探针,既简便、省时,又快速、安全,是检验系统检测液状物质内核酸的最佳选择。有关这方面的文献,国内报道甚少。本文应用光生物素标记探针检测血清中的乙型肝炎病毒(HBV)DNA,获得了满意的结果。现介绍如下:(一)材料1.HBV DNA:带有 HBV:DNA
关键词
生物素
标记
探针
乙型肝炎病毒
dna
斑点杂交
病理技术
同位素
标记
阴性对照
预杂交
特异性
甲酞胺
分类号
R [医药卫生]
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职称材料
题名
用DIG标记的寡核苷酸基因探针杂交技术进行人轮状病毒VP7G血清型鉴定
3
作者
马宏
涂光理
茹维萍
崔长法
王歆宇
王建阳
夏胜利
机构
河南省卫生防疫站
出处
《河南医学研究》
CAS
1998年第4期291-295,共5页
基金
河南省医学科学院科研基金
文摘
目的：建立用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）标记的寡核苷酸基因探针鉴定Ａ群轮状病毒ＶＰ７Ｇ血清型的分子杂交技术，并应用该技术研究河南Ａ群轮状病毒的Ｇ血清型分布。方法：根据轮状病毒编码糖蛋白ＶＰ７的基因核苷酸序列，选择该基因高保守区序列中与ＶＰ７Ｇ血清型高度相关的核苷酸片段，人工合成，并用ＤＩＧ标记。在优选的杂交条件下进行杂交：结果：①Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３和Ｇ４四种Ｇ血清型特异性寡核苷酸探针只与同血清型的轮状病毒参考毒株杂交，无交叉杂交现象。灵敏度和特异性达到放射性同位素３２Ｐ标记的水平。②１８８份经ＰＡＧＥ确定的轮状病毒阳性标本中，７９份（４２．０％）、３５份（１８．６％）、１５份（７．９％）分别与Ｇ１、Ｇ２或Ｇ３型探针杂交；未检出Ｇ４型；５６份（２９．８％）未能分型；３份分型特殊。
关键词
轮状病毒
寡核苷酸
探针
非
同位素
标记
Keywords
rotavirus
oligonucleotide probe
nonradioactive labeling
分类号
R373.2 [医药卫生—病原生物学]
R392.7 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
地高辛配基标记DNA探针检测HLAⅡ类基因技术的建立
余进
张锐发
李明
万军梅
李伯南
《广州医学院学报》
1995
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
光生物素标记探针检测乙型肝炎病毒DNA
陆珍凤
周晓军
周金宝
《医学研究生学报》
CAS
1991
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
用DIG标记的寡核苷酸基因探针杂交技术进行人轮状病毒VP7G血清型鉴定
马宏
涂光理
茹维萍
崔长法
王歆宇
王建阳
夏胜利
《河南医学研究》
CAS
1998
0
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职称材料
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