高粱微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的优化 被引量：7

1

作者 许丽 李玥莹 +3 位作者 邹剑秋 林凤 许昕 陶思源 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第2期328-329,共2页

以高粱抗、感丝黑穗病3号生理小种部分品种(S95062B、7050B、2381R、LR625;622A、622B、矮4)为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行抗病基因的引物筛选。通过比较各因子对电泳体系的影响,建立了一个高粱微卫星非... 以高粱抗、感丝黑穗病3号生理小种部分品种(S95062B、7050B、2381R、LR625;622A、622B、矮4)为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行抗病基因的引物筛选。通过比较各因子对电泳体系的影响,建立了一个高粱微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系:电泳时间为92～105min;银染温度为27.8～29.0℃;显色温度为32℃左右。 展开更多

关键词 高粱 微卫星 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染

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非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测新疆特种乳中掺加的牛乳 被引量：3

2

作者 孙国栋 李爱丽 +1 位作者 赵仲凯 杨洁 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第6期50-56,共7页

新疆特种乳资源丰富,具有重要的商业价值。近年来乳制品掺假问题时有发生,准确鉴别特种乳中乳源动物成分,防止牛乳掺假具有重要的意义。本研究采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)对驼乳、马乳、驴乳、山羊乳与牛乳等特种乳的乳... 新疆特种乳资源丰富,具有重要的商业价值。近年来乳制品掺假问题时有发生,准确鉴别特种乳中乳源动物成分,防止牛乳掺假具有重要的意义。本研究采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)对驼乳、马乳、驴乳、山羊乳与牛乳等特种乳的乳清蛋白及酪蛋白进行乳间差异性分析,建立基于牛乳特征蛋白质多态性的检测方法,并研究不同热处理工艺对检测方法稳定性、灵敏度的影响。结果表明,牛β-乳球蛋白可作为特种乳中掺加牛乳的检测靶标,热处理会使样品中蛋白质发生变性,导致掺加牛乳检出限的升高。基于牛β-乳球蛋白的条带强度与牛乳掺加百分比建立回归方程,相关系数为0.9779~0.9998,定量范围在5%~100%之间。本研究为新疆特种乳中掺加牛乳的检测,提供了一种准确、灵敏和经济的方法。 展开更多

关键词 特种乳 牛乳 掺假 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

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大白菜非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的优化 被引量：17

3

作者 梁宝萍 原玉香 +6 位作者 朴凤植 张晓伟 蒋武生 梁爽 姚秋菊 张强 赵艳艳 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第5期129-132,136,共5页

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的检测效果受到凝胶聚合速度、片段迁移率等多种因素影响。以大白菜为供试材料,研究比较了凝胶聚合速度及PCR产物在不同浓度凝胶上的检测效果。不同浓度的凝胶是由2种〔40%(19∶1)和30%(29∶1)〕贮存液分... 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的检测效果受到凝胶聚合速度、片段迁移率等多种因素影响。以大白菜为供试材料,研究比较了凝胶聚合速度及PCR产物在不同浓度凝胶上的检测效果。不同浓度的凝胶是由2种〔40%(19∶1)和30%(29∶1)〕贮存液分别配制的4种浓度(5%,7%,9%,11%)。结果表明,在4～30℃,凝胶聚合速度随温度的升高而加快;APS保持不变,不同温度下TEMED∶APS合适配比也不同:4℃(冬季)时,TEMED/APS的合适配比是1∶10,25℃(春秋)、30℃(夏季),选择1∶20的配比为宜;2种不同贮存液配制的相同浓度凝胶检测效果不同,30%(29∶1)优于40%(19∶1),由前者配制7%的凝胶上DNA片段分离效果好,带型清晰,分辨率高。 展开更多

关键词 非变性聚丙烯酰胺 聚合速度 贮存液 TEMED与APS配比

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几种鲑鳟鱼血清蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的研究 被引量：12

4

作者 杨贵强 徐绍刚 +2 位作者 王建 高云奇 王占全 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期1068-1072,共5页

采用非变性聚丙烯凝胶电泳的方法分析了硬头鳟、金鳟、虹鳟、北极红点鲑和溪红点鲑血清蛋白的组成成分及其含量。结果显示,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者之间的遗传距离最小,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的遗传距离最大;硬头鳟、金鳟和... 采用非变性聚丙烯凝胶电泳的方法分析了硬头鳟、金鳟、虹鳟、北极红点鲑和溪红点鲑血清蛋白的组成成分及其含量。结果显示,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者之间的遗传距离最小,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的遗传距离最大;硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与北极红点鲑处于同一亚组,而溪红点鲑独处于另一亚组。研究结果表明硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的亲缘关系远于与北极红点鲑的关系;同时还表明,以聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鲑鳟鱼血清蛋白的方法简单易行、重复性好。本研究结果对鲑鳟鱼的种属鉴定、良种选育、品种改良和遗传结构分析提供了试验依据;虹鳟的繁养殖需进一步规范化和标准化,减少蛋白遗传基因的流失,从根本上预防大规模疾病的暴发。 展开更多

关键词 硬头鳟 金鳟 虹鳟 北极红点鲑 溪红点鲑 血清蛋白 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

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大白菜非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术影响因素研究 被引量：1

5

作者 张红 徐莹莉 +3 位作者 黄志银 李梅 范伟强 王超楠 《安徽农业科学》 CAS 2019年第21期105-107,共3页

电泳技术是分子标记辅助育种技术的关键步骤,建立一套高效的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术体系可提高分子标记辅助育种技术的工作效率。以根肿病抗感大白菜作为试材,以凝胶聚合速度及凝胶条带的清晰度作为衡量标准,分别对电泳中的凝胶... 电泳技术是分子标记辅助育种技术的关键步骤,建立一套高效的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术体系可提高分子标记辅助育种技术的工作效率。以根肿病抗感大白菜作为试材,以凝胶聚合速度及凝胶条带的清晰度作为衡量标准,分别对电泳中的凝胶浓度、温度、促凝剂配比3个重要因素进行研究。结果发现凝胶浓度、温度、促凝剂配比均与凝胶聚合时间呈现负相关,但4种常用凝胶浓度制胶时间差异不明显,可主要根据目的产物的大小选择浓度。在凝胶质量方面,温度、促凝剂配比与凝胶的脆性呈负相关。综合分析,操作中环境温度为25~35℃,促凝剂配比为1∶10的条件,聚合速度适中,条带清晰,检测效果最佳。 展开更多

关键词 非变性聚丙烯凝胶电泳 凝胶浓度 温度 促凝剂配比 大白菜

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一种高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法的建立——以水稻为例 被引量：8

6

作者 王运斌 江良荣 +2 位作者 黄荣裕 黄育民 郑景生 《福建稻麦科技》 2015年第3期4-8,共5页

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染技术已广泛用于DNA片段检测。介绍一种本实验室改进的高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法,该法将固定和染色两步骤合并,整个银染过程只需16 min即可完成。同时,该法无需使用无水乙醇和冰乙酸,减... 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染技术已广泛用于DNA片段检测。介绍一种本实验室改进的高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法,该法将固定和染色两步骤合并,整个银染过程只需16 min即可完成。同时,该法无需使用无水乙醇和冰乙酸,减少了硝酸银、氢氧化钠及甲醛的使用量。 展开更多

关键词 非变性聚丙烯酰胺凝胶 电泳 银染

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癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析非变性蛋白质分子量的适用性鉴定

7

作者 臧家涛 徐竞 +2 位作者 李东红 刘建仓 刘良明 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2012年第4期55-58,61,共5页

目的:鉴定癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDecS-PAGE)是否适于分析非变性蛋白质的分子量。方法:以不同SDecS-PAGE凝胶、电泳缓冲液分析5种非变性标准分子量蛋白质,观察蛋白质亚基解离情况,测定分子量对数值(log Mr)与迁移率x之间的相... 目的:鉴定癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDecS-PAGE)是否适于分析非变性蛋白质的分子量。方法:以不同SDecS-PAGE凝胶、电泳缓冲液分析5种非变性标准分子量蛋白质,观察蛋白质亚基解离情况,测定分子量对数值(log Mr)与迁移率x之间的相关性。结果:5种标准分子量蛋白质的四级结构完整,log Mr与x线性相关性较低;但其中的α-牛乳白蛋白、鸡蛋清白蛋白、牛血清白蛋白的log Mr与x线性相关性较好,相关系数平方值(R2)>0.94。结论:SDecS-PAGE可用于测定有限种类的非变性蛋白质的分子量。 展开更多

关键词 癸基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 非变性蛋白质 分子量测定 SDecS-PAGE

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非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法临床应用探讨 被引量：6

8

作者 胡卫华 李铁臣 孙惠兰 《实用医学杂志》 CAS 2005年第4期425-427,共3页

目的:建立一种省时简便和灵敏可靠的检测筛查基因点突变的方法,即PCR-SSCP(PCR-Singlestrandconformationpolymorphism)银染分析技术。方法:应用改进的PCR-SSCP银染分析技术,检测妊娠期胆内胆汁淤积症患者外周血基因组DNA中MDR3基因外显... 目的:建立一种省时简便和灵敏可靠的检测筛查基因点突变的方法,即PCR-SSCP(PCR-Singlestrandconformationpolymorphism)银染分析技术。方法:应用改进的PCR-SSCP银染分析技术,检测妊娠期胆内胆汁淤积症患者外周血基因组DNA中MDR3基因外显子14的点突变情况。结果:非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳在有冷水循环装置控制下,结果稳定可靠,受环境温度影响小;但银染时,需根据室温调整染色时间及显影液的配制,当室温高于25℃时,碳酸钠需预冷,有利于控制背景色,得到更为满意的结果。结论:利用非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法筛查目的基因的点突情况,具有省时简便和灵敏可靠的特点,且重复性好,避免了盲目测序及资金浪费。 展开更多

关键词 非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳 银染法 临床应用 聚合酶链反应 点突变

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香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用及正交优化 被引量：2

9

作者 张丹 颜梦秋 +3 位作者 张美彦 谭琦 宋春艳 尚晓冬 《江苏农业科学》 北大核心 2021年第5期57-61,共5页

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种高效鉴定微卫星分子标记的方法,广泛应用于种质鉴定、遗传连锁图谱构建及分子标记辅助育种等研究中。该方法由于操作繁琐,目前在食用菌领域的应用尚不广泛。以香菇为研究对象,建立变性聚丙烯酰胺凝胶电泳... 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种高效鉴定微卫星分子标记的方法,广泛应用于种质鉴定、遗传连锁图谱构建及分子标记辅助育种等研究中。该方法由于操作繁琐,目前在食用菌领域的应用尚不广泛。以香菇为研究对象,建立变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测流程,并利用正交试验对检测流程中涉及的加样缓冲液与PCR反应液的体积比、95℃变性时间、置于冰上冷却时间、银染时间、银染后胶板去离子水洗时间等5个操作节点进行优化。结果表明,加样缓冲液与PCR反应液体积比为1∶2,95℃变性2~5min,置于冰上冷却15~20min,银染7min,银染后胶板用去离子水洗5~10s是正交试验的较优处理组合。试验建立了香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测操作规程,该操作规程具有成本低、效率高、易批量化操作等优点,对其他食用菌微卫星标记的应用具有重要的参考价值。 展开更多

关键词 香菇 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 微卫星标记 正交试验设计 银染试验

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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定动物肌肉蛋白热变性的研究 被引量：2

10

作者 方绍庆 鲁闽 +4 位作者 许红岩 耿金培 王洪来 刘桂荣 梁成珠 《肉类研究》 2006年第5期41-44,共4页

分别对鸡、牛、猪、羊、鱼等五种新鲜动物肌肉组织进行不同温度的热处理,对处理前后的样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示五种动物肌肉组织经不同温度处理,所得电泳图谱具有显著差异,反映蛋白质变性与温度存在密切相关性。因此,... 分别对鸡、牛、猪、羊、鱼等五种新鲜动物肌肉组织进行不同温度的热处理,对处理前后的样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示五种动物肌肉组织经不同温度处理,所得电泳图谱具有显著差异,反映蛋白质变性与温度存在密切相关性。因此,可采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定动物组织蛋白的热变性程度,从而应用于肉制品加工过程中热熟程度的判定。该方法特异性和敏感性较强,操作简单,结果判定直观可靠。 展开更多

关键词 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 蛋白热变性

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从非变性聚丙烯酰胺凝胶回收纯化DNA样本 被引量：7

11

作者 朱玉君 樊叶杨 庄杰云 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期193-195,共3页

介绍一种从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收和纯化目标DNA片段的方法,经比较回收纯化前后PCR产物的电泳结果,表明该方法具有简单快捷和效率高的优点。

关键词 非变性聚丙烯酰胺凝胶 回收纯化 目标DNA片段

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从非变性聚丙烯酰胺凝胶中快速高效回收DNA片段 被引量：2

12

作者 周颐 王忆平 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期194-198,共5页

获得特异性的DNA是开展多种分子生物学试验的前提,具有高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳是纯化特异性DNA的首选。借助液氮对凝胶的固化作用,介绍了通过研磨破坏聚丙烯酰胺凝胶结构回收纯化DNA的方法。将通过该方法回收纯化的DNA和采用琼脂... 获得特异性的DNA是开展多种分子生物学试验的前提,具有高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳是纯化特异性DNA的首选。借助液氮对凝胶的固化作用,介绍了通过研磨破坏聚丙烯酰胺凝胶结构回收纯化DNA的方法。将通过该方法回收纯化的DNA和采用琼脂糖凝胶电泳回收纯化的DNA,经由聚丙烯酰胺凝胶电泳的进一步检测,结果显示,该方法与琼脂糖凝胶电泳回收法相比,所获得DNA的纯度高,特异性好,且效率相当。在提高DNA特异性的同时也兼具了经济高效耗时少等优点,可以广泛应用。 展开更多

关键词 非变性聚丙烯酰胺凝胶 琼脂糖凝胶 小片段DNA回收纯化 凝胶阻滞试验

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聚丙烯酰胺压裂液流变行为影响因素研究 被引量：6

13

作者 张林 沈一丁 +2 位作者 杨晓武 隋明炜 洪玉 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1264-1268,共5页

通过考察聚丙烯酰胺(PAM)压裂液质量分数,温度,pH及金属离子研究了聚丙烯酰胺压裂液的黏度。结果表明,增加PAM质量分数,压裂液黏度上升,非牛顿性增强,质量分数1.0%PAM压裂液黏度可达到施工要求;温度升高,压裂液黏度下降,非牛顿性减弱;改... 通过考察聚丙烯酰胺(PAM)压裂液质量分数,温度,pH及金属离子研究了聚丙烯酰胺压裂液的黏度。结果表明,增加PAM质量分数,压裂液黏度上升,非牛顿性增强,质量分数1.0%PAM压裂液黏度可达到施工要求;温度升高,压裂液黏度下降,非牛顿性减弱;改变PAM压裂液的pH环境也可造成黏度下降;金属离子对PAM黏度影响从大到小顺序依次为Mg2+>Ca2+>Na+>K+,符合扩散电层理论。静态悬砂实验表明,聚丙烯酰胺压裂液在质量分数为1.0%及60℃时,悬砂沉降速度达14.88 min/cm,能满足压裂液携砂标准。 展开更多

关键词 压裂液 聚丙烯酰胺 流变性 非牛顿性 扩散电层理论 油田化学品与油品添加剂

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SSR标记小麦抗白粉病基因变性凝胶电泳体系的优化 被引量：3

14

作者 孙现军 郑炜君 +2 位作者 徐军飞 柴守诚 瞿利英 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期49-53,共5页

为寻找适合SSR标记定位小麦抗白粉病基因的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的理想体系。主要研究Arc+Bis占凝胶的质量浓度、Arc/Bis质量比、上样量、电泳电压及染色等因素对变性聚丙烯酰胺凝胶电泳效果的影响。结果表明电泳效果较好的体系为:凝... 为寻找适合SSR标记定位小麦抗白粉病基因的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的理想体系。主要研究Arc+Bis占凝胶的质量浓度、Arc/Bis质量比、上样量、电泳电压及染色等因素对变性聚丙烯酰胺凝胶电泳效果的影响。结果表明电泳效果较好的体系为:凝胶中Arc+Bis 60g/L、m(Arc)∶m(Bis)=29∶1、上样量5μL(含φ=20%的6×loading dye)、1 500V恒压、强碱法染色。此变性凝胶电泳体系下得到的图谱较为清晰。 展开更多

关键词 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 SSR 银染

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胆红素氧化酶凝胶电泳活性染色法

15

作者 曾伟 赵晓瑜 倪志华 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2008年第2期198-201,共4页

胆红素氧化酶能够特异地将胆红素氧化成胆绿素,利用酶与底物的这种特殊关系可以在凝胶上进行底物染色来直接显示酶的活性区带,这种方法称为胆红素氧化酶的活性染色法.这种活性染色可以采用胆红素直接溶入分离胶后电泳(胆红素-PAGE),也... 胆红素氧化酶能够特异地将胆红素氧化成胆绿素,利用酶与底物的这种特殊关系可以在凝胶上进行底物染色来直接显示酶的活性区带,这种方法称为胆红素氧化酶的活性染色法.这种活性染色可以采用胆红素直接溶入分离胶后电泳(胆红素-PAGE),也可以在电泳后置于胆红素溶液中染色(PACE-胆红素).其中PAGE-胆红素方法在20 min后即在凝胶上出现深绿色的胆红素氧化酶条带,随着时间延长,凝胶上的绿色酶条带逐渐扩散,最终形成透明条带;而运用胆红素-PAGE的方法则在12 h后才能在凝胶上看见透明的胆红素氧化酶所在的条带.相比之下,前者更为简便、快速、灵敏. 展开更多

关键词 活性染色 胆红素氧化酶 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

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微卫星DNA非变性PAGE银染法的分析探讨 被引量：6

16

作者 王光利 石培春 +2 位作者 张薇 曹连莆 李英枫 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2006年第6期455-458,共4页

微卫星DNA非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),是一种常用的DNA检测手段,具有很好的分离微小差异DNA片段的能力,而银染法使该方法得到了广大科研工作者的青睐,但是,在染色过程中,常可能出现一些问题,令结果的判断难以达到满意的效果。为此... 微卫星DNA非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),是一种常用的DNA检测手段,具有很好的分离微小差异DNA片段的能力,而银染法使该方法得到了广大科研工作者的青睐,但是,在染色过程中,常可能出现一些问题,令结果的判断难以达到满意的效果。为此,对该方法进行了一系列的分析和探讨。 展开更多

关键词 微卫星DNA PCR 非变性聚丙烯酰胺凝胶 银染

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用蛋白电泳和高效凝胶排阻色谱法分析还原脲变性蛋白溶菌酶稀释复性过程的集聚体 被引量：5

17

作者 梁长利 边六交 《分析科学学报》 CAS CSCD 2006年第6期641-645,共5页

本文利用蛋白电泳和高效凝胶排阻层析法分析了还原脲变性蛋白溶菌酶稀释复性过程中的集聚体。当用复性液稀释复性还原脲变性蛋白溶菌酶时,会迅速产生可观量的沉淀。沉淀和上清液的不连续十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和... 本文利用蛋白电泳和高效凝胶排阻层析法分析了还原脲变性蛋白溶菌酶稀释复性过程中的集聚体。当用复性液稀释复性还原脲变性蛋白溶菌酶时,会迅速产生可观量的沉淀。沉淀和上清液的不连续十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和高效凝胶排阻层析分析结果表明,还原脲变性蛋白溶菌酶在稀释复性过程中除了能够复性成天然态蛋白溶菌酶分子外,还会形成可溶的蛋白溶菌酶分子二聚体和三聚体,二聚体和三聚体主要是靠分子间二硫键的错配连接而成的;可溶的蛋白溶菌酶分子二聚体之间通过非共价键相互作用而形成集聚体沉淀,而可溶的三聚体溶菌酶分子则仍处于复性液上清液中。 展开更多

关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 高效凝胶排阻层析 还原变性溶菌酶 集聚体 稀释复性 二硫键

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小麦籽粒淀粉分支酶活性电泳染色方法的比较验证

18

作者 赵法茂 齐霞 肖军 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第3期352-355,共4页

以发育中的小麦籽粒为材料,对两种淀粉分支酶凝胶电泳活性染色方法的缓冲体系、染色过程、染色时间,试剂浓度等进行了比较验证。结果表明,Nagamine等文献中的酶活性染色方法能很好的区分淀粉分支酶的同种型类型和基因位点分布,显示不同... 以发育中的小麦籽粒为材料,对两种淀粉分支酶凝胶电泳活性染色方法的缓冲体系、染色过程、染色时间,试剂浓度等进行了比较验证。结果表明,Nagamine等文献中的酶活性染色方法能很好的区分淀粉分支酶的同种型类型和基因位点分布,显示不同基因位点的遗传多态性特点,与Yamanouchi等文献中的染色方法相比,酶带分辨率高,电泳图谱清晰,实验成本降低,可为淀粉分支酶的分子生物学及遗传特性研究提供一种经济、可靠的方法。 展开更多

关键词 小麦 淀粉分支酶 酶活性染色 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 比较

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单链DNA纯化对变性PAGE凝胶银染片段回收效率的提高 被引量：3

19

作者 史金铭 孙野青 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期74-76,共3页

为了提高变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染后片段回收的效率,本实验在传统的煮沸法的基础上加入单链DNA纯化的步骤对水稻基因组CCGG为点甲基化敏感限制性酶切多态性(MSAP)分析片段进行回收,并对加入该步骤后的再扩增的效率与传统煮沸... 为了提高变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染后片段回收的效率,本实验在传统的煮沸法的基础上加入单链DNA纯化的步骤对水稻基因组CCGG为点甲基化敏感限制性酶切多态性(MSAP)分析片段进行回收,并对加入该步骤后的再扩增的效率与传统煮沸法进行了比较。实验结果显示,加入单链DNA纯化步骤后的回收效率比传统煮沸法提高了约6倍。改进后的方法可以有效地用于扩增片段长度多态性(AFLP)以及MSAP等差异显示PAGE凝胶银染DNA片段的回收。 展开更多

关键词 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 条带回收 银染 MSAP

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六堡茶茶褐素中酚类化合物及蛋白质组分分析 被引量：2

20

作者 王寅竹 滕建文 +2 位作者 黄丽 夏宁 韦保耀 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第22期127-133,共7页

本研究通过甲醇提取茶褐素,将其分为可提取部分(记为FTB)和不可提取部分(记为BTB),采用傅里叶变换红外光谱、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质印迹和超高效液相色谱-高分辨质谱方法开展组分分析。结果表明,茶褐素为多羟基的... 本研究通过甲醇提取茶褐素,将其分为可提取部分(记为FTB)和不可提取部分(记为BTB),采用傅里叶变换红外光谱、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质印迹和超高效液相色谱-高分辨质谱方法开展组分分析。结果表明,茶褐素为多羟基的芳香族物质,含有蛋白质、氨基酸和肽等含氮化合物;在蛋白质分子质量63~75 kDa附近具有条带,总体为弥散型的长条且可能被多酚等物质修饰;非靶向代谢组学共鉴定出297种化合物,以差异倍数(fold change,FC)>2或FC<0.5和P<0.05为标准进行筛选,发现BTB与FTB之间有137种化合物存在显著差异,主要为酚类化合物(37种);通过主成分分析和正交偏最小二乘判别分析获得了FTB与BTB的5种酚类化合物(儿茶素、2,3-二羟基苯甲酸、没食子酸、4-羟基香豆素和咖啡酸),它们不仅可以区分FTB和BTB,还有可能是茶褐素的主要不可提取酚类。本研究解析了六堡茶茶褐素的多酚谱及其特征性多酚,提出了蛋白质-多酚复合物的推论,有助于丰富黑茶茶褐素中蛋白质的相关研究,推动黑茶茶褐素的物质组成及功能活性的进一步研究。 展开更多

关键词 茶褐素 酚类 蛋白质 非靶向代谢组学 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳

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