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北京和非北京基因型结核分枝杆菌生长曲线及mazEF系统的研究
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作者 谢婉莹 赵继利 +2 位作者 杨赛丽 刘微 袁俐 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期502-508,共7页
目的研究北京与非北京基因型结核分枝杆菌的生长曲线、mazEF3,6,9系统表达有无差异。方法测绘上述菌株及其mazEF3,6,9基因缺失和过表达菌株在标准、低氧和营养饥饿培养条件下的生长曲线。使用qRT-PCR技术检测各菌株的mazEF3, 6, 9、mazF... 目的研究北京与非北京基因型结核分枝杆菌的生长曲线、mazEF3,6,9系统表达有无差异。方法测绘上述菌株及其mazEF3,6,9基因缺失和过表达菌株在标准、低氧和营养饥饿培养条件下的生长曲线。使用qRT-PCR技术检测各菌株的mazEF3, 6, 9、mazF3, 6,9和mazE3, 6,9基因mRNA表达水平;利用Western Blot技术检测MazF9蛋白表达水平。结果在标准和低氧条件下培养的第4、6、8、10 d,营养饥饿条件下培养的第2、4、6、8 d,北京基因型菌株的OD值(细菌数量)均高于非北京基因型菌株,差异有统计学意义(P<0.05);在上述3种培养条件下,北京和非北京基因型mazEF3,6,9缺失突变株和过表达株菌数均低于其亲本株。在mRNA、蛋白水平上,与非北京基因型菌株相比,北京基因型菌株mazEF3高表达9.55倍、mazF3高表达4.86倍、mazF6高表达2.64倍、mazF9高表达5.27倍和mazE9低表达0.16倍;mazF9蛋白高表达1.62倍,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论北京与非北京基因型结核分枝杆菌的生长曲线、mazEF3,6,9系统表达存在差异,mazEF系统与北京基因型菌株流行相关。 展开更多
关键词 北京基因结核分枝杆菌 非北京基因型结核分枝杆菌 毒素-抗毒素mazEF系统 生长曲线
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不同VNTR位点组合用于北京基因型结核分枝杆菌基因分型的研究 被引量:17
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作者 李墨 焦伟伟 +3 位作者 孙桂芝 Igor Mokrousov 郭雅洁 申阿东 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期505-509,共5页
目的评价不同串联重复序列(VNTR)位点组合在北京地区北京基因型结核分枝杆菌基因分型中的应用。方法采用多位点数目可变串联重复序列分析(MLVA)技术对72株北京地区北京基因型菌株的24个VNTR位点进行分析,基因多态性分析采用BioNumerics... 目的评价不同串联重复序列(VNTR)位点组合在北京地区北京基因型结核分枝杆菌基因分型中的应用。方法采用多位点数目可变串联重复序列分析(MLVA)技术对72株北京地区北京基因型菌株的24个VNTR位点进行分析,基因多态性分析采用BioNumerics软件。结果24个位点的多态性差异较大,位点QUB-11b(HGI 0.651)、Mtub 21(HGI0.556)和QUB-26(HGI 0.518)的多态性较高,有两个位点(MIRU 2和MIRU 24)则不具有多态性;不同VNTR位点组合(12位点,15位点,24位点)在北京基因型菌株中的分辨指数依次升高,分别为0.788,0.990,0.992,后两个组合的差异仅是由位点Mtub 29引起的。结论不同的VNTR位点在北京地区北京基因型菌株中的分辨力存在差异;推荐的基础VNTR 15位点与Mtub 29组合可作为北京地区结核分枝杆菌分子流行病学研究的一线方法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 北京基因 串联重复序列 基因
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结核分枝杆菌北京基因型菌株与耐药表型的关系 被引量:19
3
作者 王胜芬 赵雁林 +4 位作者 黄海荣 李强 周杨 欧喜超 付育红 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期427-431,共5页
目的研究我国结核分枝杆菌北京基因型菌株的分布以及与耐药表型的关系。方法2008年4~12月从我国6个区域收集痰涂片阳性的结核病患者的临床分离株,每一患者的一份分离株经生化方法鉴定为结核分枝杆菌复合群。收集患者的性别、年龄、病... 目的研究我国结核分枝杆菌北京基因型菌株的分布以及与耐药表型的关系。方法2008年4~12月从我国6个区域收集痰涂片阳性的结核病患者的临床分离株,每一患者的一份分离株经生化方法鉴定为结核分枝杆菌复合群。收集患者的性别、年龄、病史、菌株耐药谱和菌株来源资料。药物敏感性实验采用比例法。运用间隔区寡核苷酸分型方法或基因dnaA~dnaN之间插入序列IS6110鉴定北京基因型菌株。结果在410份结核分枝杆菌分离株中,67.1%(275/410)的分离株属于北京基因型菌株,东北部区域感染北京基因型菌株患者的比例高于中西部区域(χ2=20.50,P=0.000)。患者的年龄、性别和治疗史与感染北京基因型菌株无关。在耐多药菌株和耐利福平菌株中,北京基因型菌株的比例显著高于非北京基因型(P=0.002,P=0.005)。结论患者的年龄、性别和治疗史与感染北京基因型菌株无关,东北部区域北京基因型菌株分布比例显著高于中西部区域。北京基因型菌株与利福平耐药和耐多药有关。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 北京基因 耐药表
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结核分枝杆菌西安分离株北京家族基因型检测及其耐药相关性研究 被引量:12
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作者 刘志广 张选民 +7 位作者 张媛媛 曾令城 吕冰 王西临 赵秀芹 杜新玲 韩跃玲 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期435-438,共4页
目的了解西安市结核分枝杆菌临床分离株的耐药情况及其与北京家族基因型(Beijing Family)的相关性,为有效防治结核病提供依据。方法对临床分离结核分枝杆菌采用绝对浓度法进行药物敏感性检测。间隔寡核苷酸分型(Spoli-gotyping)方法进... 目的了解西安市结核分枝杆菌临床分离株的耐药情况及其与北京家族基因型(Beijing Family)的相关性,为有效防治结核病提供依据。方法对临床分离结核分枝杆菌采用绝对浓度法进行药物敏感性检测。间隔寡核苷酸分型(Spoli-gotyping)方法进行北京家族基因型鉴定。结果统计学分析采用χ2检验。结果104株结核分枝杆菌对4种一线抗结核药物,异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB),全部敏感的菌株为71株(68.3%);耐药菌株33株(31.7%),其中,单耐药菌株12株(11.5%),耐多药菌株21株(20.2%)。结核分枝杆菌对4种一线药物INH、RFP、SM和EMB的耐药率分别为24.04%(25/104)、18.69%(19/104)、16.34%(17/104)和2.88%(3/104)。104株结核分枝杆菌中北京家族基因型(BeijingFamily)占全部菌株的83.7%,非北京家族基因型占16.3%。87株北京家族基因型菌株中耐药菌株28株(32.18%),敏感菌株59株(67.82%),而17株非北京家族基因型菌株中耐药菌株5株(29.41%),敏感菌株为12株(70.59%)。经统计学分析其差异无统计学意义(χ2=0.05,P>0.05)。结论西安市分枝杆菌的耐药情况较为严重。结核分枝杆菌北京家族基因型与耐药性之间无明显相关性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐药性 基因 北京家族基因
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结核分枝杆菌北京基因型菌株与重庆地区结核患儿耐药表型的相关分析 被引量:8
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作者 彭哲 朱朝敏 +1 位作者 幸琳琳 刘芮汐 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期2545-2548,共4页
目的研究结核分枝杆菌北京基因型菌株与结核患儿耐药表型及其相关因素。方法采用定向缺失多重酶链聚合反应技术(deletion-targeted multiplex PCR,DTM-PCR)对从143例患儿分离得到的结核分枝杆菌进行北京基因型菌株鉴定,并使用绝对浓度... 目的研究结核分枝杆菌北京基因型菌株与结核患儿耐药表型及其相关因素。方法采用定向缺失多重酶链聚合反应技术(deletion-targeted multiplex PCR,DTM-PCR)对从143例患儿分离得到的结核分枝杆菌进行北京基因型菌株鉴定,并使用绝对浓度法进行药敏实验。收集患者的性别、年龄、居住地、卡介苗接种史和结核性脑膜炎病史等相关因素资料。采用χ2检验和Fisher确切概率法分析北京基因型与相关因素以及耐药表型之间的关系。结果在143株结核分枝杆菌中,91株为北京基因型,占63.6%,北京基因型菌株与年龄、性别、居住地、卡介苗接种和结核性脑膜炎无关(P>0.05)。北京基因型菌株在耐链霉素菌株(16.5%,15/91)和耐异烟肼菌株(15.4%,14/91)中的比例显著高于非北京基因型(3.8%,2/52;3.8%,2/52)(P<0.05)。结论北京基因型菌株是重庆地区儿童结核患者中流行的优势菌群,患儿的年龄、性别、居住地、是否接种卡介苗和是否为结核性脑膜炎与北京基因型菌株无关,感染北京基因型菌株的结核患儿更易出现链霉素和异烟肼耐药。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐药性 基因 北京家族基因
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北京基因型结核分枝杆菌的研究 被引量:7
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作者 孙蕾 杨立军 +2 位作者 郑锦辉 杨文涛 王莉 《中国防痨杂志》 CAS 2008年第3期223-226,共4页
关键词 北京基因结核分枝杆菌 毒性 毒力 结核分枝杆菌 分枝杆菌 结核杆菌
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利用多重PCR方法快速鉴定结核分枝杆菌北京基因型菌株 被引量:13
7
作者 赵德福 谢彤 +2 位作者 巨韩芳 穆成 赵慧 《中国防痨杂志》 CAS 2010年第6期315-317,共3页
目的建立结核分枝杆菌北京基因型菌株快速鉴定方法 ,研究该家族在人群中的流行传播的规律和特点。方法采用间隔区寡核苷酸(spoligotyping)分型与多重PCR方法分别对临床分离的112株结核分枝杆菌进行北京基因型菌株鉴定。结果在分析的112... 目的建立结核分枝杆菌北京基因型菌株快速鉴定方法 ,研究该家族在人群中的流行传播的规律和特点。方法采用间隔区寡核苷酸(spoligotyping)分型与多重PCR方法分别对临床分离的112株结核分枝杆菌进行北京基因型菌株鉴定。结果在分析的112株结核分枝杆菌中,107株为北京基因型,多重PCR鉴定结果与Spoligotyping分型符合率为100%。结论与spoligotyping分型相比,多重PCR技术可以快速地区分北京基因型与非北京基因型株,且方法简单,更适于基层试验室中对北京基因型结核分枝杆菌在人群中的流行进行大规模监测。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 寡核苷酸类 北京基因 聚合酶链反应
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结核分枝杆菌北京基因型菌株的流行特征及其与耐药的关系——2007年全国结核病耐药基线调查资料分析 被引量:11
8
作者 王胜芬 周杨 +1 位作者 逄宇 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2015年第8期836-842,共7页
目的探讨结核分枝杆菌北京基因型菌株的流行特征及其与耐药的关系。方法2007年我国开展全国结核病耐药基线调查,调查覆盖除香港、澳门和台湾地区外的全国31省(自治区、直辖市),含70个调查点。本研究对来自基线调查的3861例涂阳结核... 目的探讨结核分枝杆菌北京基因型菌株的流行特征及其与耐药的关系。方法2007年我国开展全国结核病耐药基线调查,调查覆盖除香港、澳门和台湾地区外的全国31省(自治区、直辖市),含70个调查点。本研究对来自基线调查的3861例涂阳结核病患者的分离菌株进行分析,采用比例法进行药物敏感性试验,以间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)方法对结核病患者的分离株进行基因分型。采用EpiInfo3.5.1建立数据库,SAS9.1软件进行统计学分析,以卡方检验分析不同变量之间的关系,以P〈0.05为有统计学意义。结果北京基因型菌株在我国广泛流行,占总分离菌株的63.97%(2470/3861)。感染北京基因型菌株与年龄(〈30岁和≥60岁:OR=0.9604,95%CI=0.7995~1.1536;30~岁和≥60岁:OR=1.0620,95%CI=0.9071~1.2434,x^2=0.3885,Ptrend=0.6977)、性别(OR=1.1526,95%CI=0.9973~1.3321,x^2=3.7024,P=0.0543)无关;北京基因型菌株与抗结核药物INH(OR=0.9020,95%CI=0.766~1.0619,x^2=1.5356,P=0.2153)、RFP(OR=1.0017,95%CI=0.8166~1.2288,x^2=0.0003,P=0.9868)、Sm(OR=0.9406,95%CI=0.8139~1.08711,x^2=0.6869,P=0.4072)、EMB(OR=0.9222,95%Ci=0.7205~1.1804,X^2=0.4140,P=0.5199)、Ofx(OR=0.9624,95%CI=0.6923~1.3378,x^2=0.0520,P=0.8196)和Km(OR=1.1666,95%CI=0.7624~1.7852,x^2=0.5049,P-0.4774)任何耐药均无关联;与单耐INH(OR=0.9955,95%CI=0.7206~1.3753,x^2=0.0007,P=0.9783)、RFP(OR=0.9615,95%CI=0.4880~1.8944,x^2=0.0129,P=0.9096)、EMB(O=0.5533,95%CI=0.2023~1.5136,x^2=1.3675,P=0.2422)、0fx(OR=0.8445,95%CI=0.3965~1.7984,x^2=0.1926,P=0.6608)、Km(OR=1.7779,95%CI=0.4440~7.1203,x^2=0.6791,P=0.4099)也均无关联;与耐多药(MDR)(OR=0.9884,95%CI=0.7594~1.2284,x^2=0.0110,P=0.9166)和广泛耐药(XDR)(OR=1.1502,95%CI=0.5372~2.4626,x^2=0.1300,P=0.7185)均无显著性关联。结论我国是北京基因型菌株的高流行区,感染北京基因型菌株与年龄、性别无关,北京基因型菌株与耐药无关。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 基因 抗药性 细菌 患病率
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北京基因型结核分枝杆菌中心菌株的筛选 被引量:3
9
作者 李卫民 黄继翔 +3 位作者 柴利泉 王博 牛天贵 李传友 《中国防痨杂志》 CAS 2006年第S1期88-88,共1页
背景结核分枝杆菌北京基因型(Beijing Genotype)是结核分枝杆菌中一个遗传关系接近的分支(clade)。在中国北京基因型的流行程度为64.9%。在全球广为流行且与耐药存在一定的联系。一些文献报道。
关键词 结核分枝杆菌 基因 中心菌株 筛选 北京 代表性 聚类分析 免疫保护作用 流行程度 结核病防治
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结核分枝杆菌北京基因型菌株大片段的多态性研究 被引量:5
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作者 谢彤 孙蕊 +4 位作者 巨韩芳 王春花 穆成 王志锐 赵慧 《中国防痨杂志》 CAS 2018年第3期269-273,共5页
目的揭示结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)北京基因型菌株的进化路径,在进化过程中产生的各个进化分支,以及每个分支的北京基因型菌株在人群中的流行情况。方法收集2014年1月至2016年4月天津地区临床分离的567株MTB... 目的揭示结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)北京基因型菌株的进化路径,在进化过程中产生的各个进化分支,以及每个分支的北京基因型菌株在人群中的流行情况。方法收集2014年1月至2016年4月天津地区临床分离的567株MTB菌株,首先采用多重PCR试验分析菌株基因组中差异片段207(RD207)的缺失情况,以鉴定收集的菌株是否为北京基因型;然后分析所有的北京基因型MTB菌株基因组中差异区域RD105、RD181、RD150和RD142的缺失情况,以及菌株基因组NTF(noise transfer function)区中插入序列6110(IS6110)的存在情况。结果567株临床分离的MTB菌株中,517株(91.2%)为北京基因型菌株。所有北京基因型菌株中,447株(86.5%)为NTF区含有IS6110的北京基因型现代株;70株(13.5%)为NTF区不含IS6110的北京基因型古代株。基于大片段的多态性分析,北京基因型菌株被分为5个亚型,其中RD181(+)的北京基因型菌株为22株(4.3%),且全部为北京基因型古代株。RD181(-)/RD150(+)和RD181(-)/RD150(-)的北京基因型古代株分别为41株(7.9%)和7株(1.4%)。447株现代菌株中,RD181(-)/RD150(+)和RD181(-)/RD150(-)的分别为404株(78.1%)和43株(8.3%)。结论MTB北京基因型中的现代株是天津地区的主要流行株;北京基因型MTB在人群传播流行中已经进化出5个分支,其中RD181(-)/RD150(+)的北京基因型现代株为主要的流行分支。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 基因 基因缺失 扩增片段长度多态性分析 生物进化
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北京基因型结核分枝杆菌感染THP-1细胞系表达谱的研究 被引量:2
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作者 李卫民 黄海荣 +7 位作者 高峰 刘毅 范伟兴 戴广明 姜广路 宋小运 赵立平 付玉红 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第3期346-351,共6页
目的通过分析不同结核分枝杆菌感染巨噬细胞后表达谱的改变,探讨结核病(tuberculosis,TB),尤其是北京基因型结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis M.tb)感染的结核病免疫发病机制。方法具有IS6110 DNARFLP和Spoligotyping基因分型... 目的通过分析不同结核分枝杆菌感染巨噬细胞后表达谱的改变,探讨结核病(tuberculosis,TB),尤其是北京基因型结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis M.tb)感染的结核病免疫发病机制。方法具有IS6110 DNARFLP和Spoligotyping基因分型结果的265株北京基因型结核分枝杆菌(简称M.tb Beijing genotype)鉴定自2000年中国结核病流行病学抽样调查(简称2000年流调),采用平均连锁方法计算北京基因型结核分枝杆菌中心菌。结核分枝杆菌(M.tb H37Rv)、牛分枝杆菌(M.bovis)标准菌株和M.tb Beijing genotype感染THP-1细胞,采用基因芯片分析其表达谱的改变。结果输入MAS系统,行进一步的分析。结果依据计算原则,相似系数最大为0.514,其对应菌株为结核分枝杆菌北京基因型中心菌株。分枝杆菌感染THP-1细胞后相应的芯片结果具有可靠性和可分析性。M.tb H37Rv、M.bovis、M.tb Beijing genotype感染THP-1细胞的共同表达293个基因。共同表达基因的GO和pathway分析,发现一些不为人特别关注,但对结核免疫有一定作用的信号通路,例如B细胞受体信号通路。M.tb H37Rv、M.tb Beijing genotype感染THP-1细胞差异表达基因包括:tnf,tnfrsf9,pim-1,icam-1和cd48。结论 2000年结核病流调以中国人口为整体,采用分层整群随机抽样。因此获得的M.tb Beijing genotype中心菌株具有中国代表性。293个基因可作为筛选用于菌阴结核病诊断的候选靶标。对这些差异表达基因涉及的信号通路,例如:JAK-STAT信号通路和自然杀伤细胞介导的细胞毒性以及TNF的深入分析,将对理解M.tb Beijing genotype免疫毒性特征有益。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 北京基因 基因芯片 表达谱
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结核分枝杆菌北京基因型亚型的流行及与耐药性的关系研究 被引量:1
12
作者 谢彤 巨韩芳 +6 位作者 王春花 王志锐 穆成 赵慧 王艳楠 孙蕊 王撷秀 《中国防痨杂志》 CAS 2015年第9期928-932,共5页
目的通过分析Mtb北京基因型基因组NTF(noisetransferfunction)区插入序列IS6110,揭示北京基因型在进化过程中所形成的古代株和现代株2个亚型在天津市的流行情况及其与耐药表型的关系。方法收集20122014年天津市临床分离的816株Mtb菌... 目的通过分析Mtb北京基因型基因组NTF(noisetransferfunction)区插入序列IS6110,揭示北京基因型在进化过程中所形成的古代株和现代株2个亚型在天津市的流行情况及其与耐药表型的关系。方法收集20122014年天津市临床分离的816株Mtb菌株。采用PCR试验分析菌株基因组中差异区域(Regionofdifference,RD)RD207和RD105片段是否有缺失,以鉴定是否为北京基因型。通过检测北京基因型菌株基因组NTF区中IS6110插入序列的数目,了解北京基因型菌株中古代株和现代株所占的比例,并进一步分析这两种亚型与菌株耐药表型间的关系。计数资料采用卡方检验进行分析,以P〈0.05为差异有统计学意义。结果在所分析的816株临床分离的Mtb菌株中,764(93.63%)株为北京基因型菌株。764株北京基因型菌株中,110株(14.40%)为古代株,654株(85.60%)为现代株。现代株中仅有1株为北京基因型w株。在古代株和现代株中,耐异烟肼菌株分别占26.36%(29/110)和10.70%(70/654)(X2=20.47,P〈0.01);耐利福平菌株分别占14.55%(16/110)和6.57%(43/654)(X2=8.40,P〈0.01);耐乙胺丁醇菌株分别占8.18%(9/110)和3.21%(21/654),(X2=6.17,P〈0.05)。此外,MDR-TB患者中古代株和现代株分别占13.64%(15/110)和4.74%(31/654)(X2=13.17,P〈0.01)。结论Mtb北京基因型中的现代株是天津市的主要流行株,但古代株与耐药结核病的关系更为密切,提示在天津市,对抗结核药物产生耐药并不是导致北京基因型广泛流行的主要因素。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 基因 抗药性 细菌
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宜昌地区结核分枝杆菌北京基因型菌株的鉴定及VNTR分型 被引量:3
13
作者 李丹 胡晓红 +6 位作者 徐新娟 杜德兵 吴文艳 王德成 庄倩 陈志杰 金柱 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期232-238,共7页
目的研究宜昌地区结核分枝杆菌北京基因型菌株的多态性和流行特征,揭示该地区结核病的分子流行病学特征,为结核病防治提供科学依据。方法选择2018年1月—2019年12月具有完整病例信息的结核分枝杆菌298株,进行人型结核分枝杆菌的鉴定,用... 目的研究宜昌地区结核分枝杆菌北京基因型菌株的多态性和流行特征,揭示该地区结核病的分子流行病学特征,为结核病防治提供科学依据。方法选择2018年1月—2019年12月具有完整病例信息的结核分枝杆菌298株,进行人型结核分枝杆菌的鉴定,用扩增RD105缺失片段的多重PCR(DTM-PCR)鉴定北京基因型菌株;应用优化的9位点数目可变串联重复序列技术(VNTR)分析北京基因型菌株的多态性。结果298株结核分枝杆菌中,260株为人型结核分枝杆菌,DTM-PCR鉴定发现北京基因型菌株140株(53.85%),非北京基因型菌株120株(46.15%)。北京基因型菌株耐药率(32.14%)高于非北京基因型菌株耐药率(10.83%),差异有统计学意义(P<0.05)。VNTR-9位点对北京基因型菌株的分辨率为0.9985,成簇率为12.15%。结论北京基因型菌株在宜昌地区呈较高流行趋势,且北京基因型菌株耐药率更高。VNTR-9位点基因分型方法用于该地区结核分枝杆菌北京基因型菌株的鉴别,能准确反映宜昌地区结核分枝杆菌的分子流行病学特征。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 北京基因 可变串联重复序列技术 分子流行病学
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江西省耐多药结核分枝杆菌链霉素基因突变特征 被引量:3
14
作者 于圣铭 夏良华 +4 位作者 詹佳欢 刘思琦 王伟 晏亮 陈开森 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期91-96,共6页
目的了解江西省耐多药结核分枝杆菌中链霉素耐药的分子特征,探究北京基因型结核与链霉素耐药基因(rpsL、rrs和gidB)突变及链霉素耐药表型之间的关系。方法收集南昌大学第一附属医院高新医院及江西省胸科医院2021年1-12月分离的非重复耐... 目的了解江西省耐多药结核分枝杆菌中链霉素耐药的分子特征,探究北京基因型结核与链霉素耐药基因(rpsL、rrs和gidB)突变及链霉素耐药表型之间的关系。方法收集南昌大学第一附属医院高新医院及江西省胸科医院2021年1-12月分离的非重复耐多药结核菌106例,检测其耐药表型、是否为北京基因型及与链霉素耐药基因rpsL、rrs和gidB突变的关系。χ^(2)检验rpsL、rrs和gidB基因突变与北京基因型及表型关系。结果106例耐多药结核菌中链霉素耐药76例,其中58例rpsL 43A>G突变,8例88A>G突变,5例rrs突变,3例gidB突变。任何rpsL、rrs和gidB基因突变与表型耐药的符合率为89.6%,特异度及敏感度分别为86.7%和90.8%。北京型结核菌分离率为88.7%,其耐药基因突变主要集中于rpsL和rrs,非北京型菌耐药突变则主要集中于gidB;北京型菌更容易发生基因突变(P=0.013),但表型耐药无差异。结论rpsL、rrs和gidB基因突变与表型耐药符合率较好,可采用分子生物学直接检测耐药基因预判菌株耐药性;结核菌型与链霉素耐药特征具有紧密联系。 展开更多
关键词 耐多药结核 链霉素耐药 北京基因 江西省
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Spoligotyping对广西地区208株结核分枝杆菌临床分离株的基因分型 被引量:18
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作者 刘飞鹰 刘志广 +6 位作者 王喜文 赵秀琴 董海燕 刘洁 吕冰 董柏青 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1226-1230,共5页
目的用间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)对广西地区结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型,并分析北京家族菌株与耐药的相关性。方法收集广西地区结核分枝杆菌临床分离株,应用Spoligotyping进行基因分型研究和比例法进行药物敏感性检测... 目的用间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)对广西地区结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型,并分析北京家族菌株与耐药的相关性。方法收集广西地区结核分枝杆菌临床分离株,应用Spoligotyping进行基因分型研究和比例法进行药物敏感性检测。基因聚类分析采用BioNumerics软件。统计分析采用χ2检验。结果共在广西地区收集到208株结核分枝杆菌临床分离株,可分为2个基因群,即北京家族(Beijingfamily)或称北京基因型(Beijinggenotype),和非北京家族(Non-Beijingfamily),分别占55.3%(115/208)和44.7%(93/208),47种基因型,其中36株为独特类型,剩余172株分为11簇。北京家族菌株中,90.4%(104/115)为典型北京家族(TypicalBeijingfamily),非北京家族菌株表现为高度的基因多态性,可分为39个基因型,31株为独特的基因型。有耐药结果的205株菌株中,北京家族菌株,76.25%(76/113)表现为全敏感,而23.75%(37/113)表现为耐药;非北京家族菌株,75%表现为全敏感,而25%表现耐药,经卡方检验(Chi-SquareTests)(表2),两者间的差异无统计学意义(χ2=2.9721,P>0.05)。结论广西结核分枝杆菌存在明显的基因多态性。本研究证实北京基因型与耐药无明显相关性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 间隔区寡核苷酸分 基因 北京基因 耐药
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mazEF系统及生物膜对北京基因型结核分枝杆菌生存能力的影响
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作者 谢婉莹 赵继利 +2 位作者 刘微 杨赛丽 袁俐 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第6期661-668,共8页
目的探索生物膜形成能力、mazEF3,6,9系统的表达与北京基因型结核分枝杆菌生存力的相关性。方法检测北京、非北京基因型菌株与标准毒力株H37Rv在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力。采用PCR技术扩增上述菌株的mazE3,6,9系统,并进... 目的探索生物膜形成能力、mazEF3,6,9系统的表达与北京基因型结核分枝杆菌生存力的相关性。方法检测北京、非北京基因型菌株与标准毒力株H37Rv在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力。采用PCR技术扩增上述菌株的mazE3,6,9系统,并进行基因测序;使用荧光定量PCR检测所有菌株的mazEF3,6,9基因、mazF3,6,9毒素基因和mazEF3,6,9抗毒素基因的mRNA表达水平;利用WesternBlot技术检测MazF9蛋白表达水平。结果北京基因型菌株在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力高于非北京基因型菌株。北京、非北京基因型菌株mazF3基因193bp处发生碱基突变,由C突变为T。在mRNA表达水平上,与H37Rv相比,北京、非北京基因型菌株中mazE3低表达;非北京菌株中mazE6低表达,mazE9高表达(P<0.05)。与非北京基因型菌株相比,北京基因型菌株中mazEF3高表达、mazE9低表达、mazF3、mazF6、mazF9高表达,mazF9蛋白高表达(P<0.05)。结论北京基因型菌株具有较强的生存力和生物膜形成能力。mazEF系统的差异表达、生物膜成膜能力强可能与北京基因型菌株生存能力强相关。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 北京基因结核分枝杆菌 毒素-抗毒素系统 生存力 生物膜
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应用基因芯片分析结核分枝杆菌常见耐药基因型的研究 被引量:29
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作者 吴雪琼 张琼 +9 位作者 张俊仙 梁建琴 鲁红丽 李洪敏 张洪恩 陆阳 荣利 吕翠环 张广宇 邢婉丽 《中国防痨杂志》 CAS 2006年第1期4-10,共7页
目的应用基因芯片快速检测结核分枝杆菌耐药基因型,建立一种新的分子药敏试验方法。方法以传统药敏试验和PCR-直接测序方法为对照,应用基因芯片快速检测157株结核分枝杆菌临床分离株异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB... 目的应用基因芯片快速检测结核分枝杆菌耐药基因型,建立一种新的分子药敏试验方法。方法以传统药敏试验和PCR-直接测序方法为对照,应用基因芯片快速检测157株结核分枝杆菌临床分离株异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB)耐药基因(katGr、poB、rp-sLr、rs和embB)的带荧光素标记的PCR产物。结果PCR-直接测序和基因芯片检测36株结核分枝杆菌药物敏感株的5种耐药基因均为野生型。121株结核分枝杆菌耐药分离株中,56株耐INH分离株,katG基因突变率为62.5%,其中katG缺失率为7.5%,315位密码子突变率为55.4%,279位密码子突变率为1.8%;104株耐RFP株,rpoB基因突变率为94.2%,最常见的突变位点为531位和526位密码子(突变率分别为60.6%、15.4%),双位点突变率为5.8%,还发现511、513、515、516、517、518和533位密码子突变;62株耐SM分离株,rpsL和rrs总突变率为88.7%(两者分别为82.3%、6.5%),rpsL突变位于43位和88位密码子(突变率分别为77.4%、4.8%),rrs突变位于513位和516位碱基(突变分别为4.8%、1.6%);57株为耐EMB株,embB基因突变率为61.4%,均为306位密码子突变,最常见的突变为ATG→GTG或ATA(突变率分别为35.1%、15.8%),还发现306位密码子ATG→ATC、ATT和CTG突变。通过基因芯片检出的突变与基因测序结果一致。结论应用基因芯片可分析大多数结核分枝杆菌耐药基因型,弥补传统药敏试验方法的不足,指导临床治疗。 展开更多
关键词 基因芯片 耐药基因 聚合酶链反应 分枝杆菌 结核
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广东省地区结核分枝杆菌寡核苷酸基因分型及耐药相关性 被引量:5
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作者 蔡杏珊 许蕴怡 +3 位作者 张院良 马品云 苏碧仪 谭耀驹 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期643-647,652,共6页
目的研究结核分枝杆菌(MTB)不同基因型在广东省各地区的流行情况及其耐药相关性。方法随机数字法抽取广州市胸科医院2014-2015年临床分离的来自于广东省不同地区的504株结核分枝杆菌菌株,采用比例法进行药物敏感性实验,选用间隔区寡核... 目的研究结核分枝杆菌(MTB)不同基因型在广东省各地区的流行情况及其耐药相关性。方法随机数字法抽取广州市胸科医院2014-2015年临床分离的来自于广东省不同地区的504株结核分枝杆菌菌株,采用比例法进行药物敏感性实验,选用间隔区寡核苷酸分型方法(Spoligotyping)对结核分枝杆菌进行基因分型。基因型耐药率差异比较采用χ2检验。结果 (1)在504株结核分枝杆菌临床分离株中北京家族和非北京家族分别是386株和118株。非北京家族中,T家族高达48株;其余是H3家族、EAI家族、MANU家族、AMBIGO家族、LAM家族以及新发基因型。北京家族构成比在性别、年龄上无统计学差异(P>0.05),但在汕头、汕尾、揭阳、东莞四个地级市的构成比低于广州市,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)504株结核分枝杆菌中,453株在SPOIDB 4.0数据库中分为49种寡核苷酸类型归类于30个簇,其主要流行簇依次为:SIT1、SIT53、SIT52、SIT19、SIT523。SIT1基因型的异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、吡嗪酰胺(PZA)、阿米卡星(AMK)、左氧氟沙星(LVFX)、耐多药(MDR)、泛耐药(XDR)的耐药率均高于SIT53、SIT52、SIT19,而SIT523在RFP、SM、EMB、MDR的耐药率方面高于SIT1(3)主要流行基因型北京家族的INH、PZA、AMK的耐药率高于非北京家族,差异有统计学意义(P<0.05),其余药物的耐药性无显著性差异(P>0.05)。结论广东省结核分枝杆菌呈基因多态性,北京基因型菌株为本省结核分枝杆菌主要流行株,而且与异烟肼、吡嗪酰胺、阿米卡星耐药相关。非北京基因型在潮汕和东莞等华侨之乡比例有所增加。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 寡核苷酸类 基因 抗药性 细菌
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重庆地区耐多药结核分枝杆菌基因分型特征分析 被引量:5
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作者 李同心 黄正谷 +10 位作者 王易伟 沈明 王静 周刚 杨小红 严晓峰 廖传玉 罗明 钟敏 黄忠民 石涛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1298-1303,共6页
目的对重庆地区耐多药结核患者结核分枝杆菌进行基因分型,明确该地区基因类型的特征和流行情况。方法连续收集重庆市公共卫生医疗救治中心和重庆市第十二人民医院结核内科2013年7月至2015年3月753例临床诊断为耐多药结核患者的痰液或其... 目的对重庆地区耐多药结核患者结核分枝杆菌进行基因分型,明确该地区基因类型的特征和流行情况。方法连续收集重庆市公共卫生医疗救治中心和重庆市第十二人民医院结核内科2013年7月至2015年3月753例临床诊断为耐多药结核患者的痰液或其他体液,采用液体培养法分离培养分枝杆菌,采用PCR方法对分枝杆菌分离株进行菌种鉴定,并使用多位点数目可变串联重复序列分析(multiple locus variable number of tandem repeat analysis,MLVA)方法进行基因分型。采用Bionumerics Version 3.0和phyloviz软件进行各基因位点的多态性和成簇分析。结果共分离培养出538例耐多药分枝杆菌菌株,经PCR鉴定确认结核分枝杆菌有503例(95.8%),非结核分枝杆菌有35例(4.2%)。北京家族型470例(93.4%,470/503),非北京家族型33例(6.6%,33/503)。503例分枝杆菌菌株共分为348个基因型,其中267例患者分离株为单一基因型,其余236例菌株可归入81个簇,成簇率为30.8%。北京家族型有76个簇,成簇率为30.8%,成簇比例为35.9%,非北京家族型有5个簇,成簇率为30.3%,成簇比例为33.3%。不同特征的耐多药结核人群对结核分枝杆菌北京基因型菌株易感因素分析:感染北京基因型菌株与性别无显著性关联(χ~2=2.68,P>0.05);与年龄呈显著性关联(χ~2=784.00,P<0.05)。结论重庆地区耐多药结核分枝杆菌的基因型存在明显的多态性,北京基因型占绝对优势;不同特征耐多药结核人群感染北京基因型菌株与性别无关,与年龄相关。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐多药 基因 重庆市
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安徽省391株结核分枝杆菌临床分离株MLVA基因分型研究 被引量:6
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作者 王庆 董海燕 +3 位作者 包训迪 赵秀芹 徐东芳 万康林 《中国防痨杂志》 CAS 2013年第1期17-21,共5页
目的初步探讨安徽省结核分枝杆菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)的分型及分布特征。方法选取安徽省结核分枝杆菌391株临床分离菌株,常规培养、收集菌体,提取基因组DNA,采用聚合酶反应(PCR)对15个VNTR位点进行检测分析,基因分型... 目的初步探讨安徽省结核分枝杆菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)的分型及分布特征。方法选取安徽省结核分枝杆菌391株临床分离菌株,常规培养、收集菌体,提取基因组DNA,采用聚合酶反应(PCR)对15个VNTR位点进行检测分析,基因分型聚类分析采用BioNumerics 5.0软件。结果经基因聚类分析,可分4个基因群(Ⅰ群、Ⅱ群、Ⅲ群和Ⅳ群),分别为Ⅰ群占3.32%(13/391),Ⅱ群占3.07%(12/391),Ⅲ群所占89.00%(348/391),Ⅳ群占4.60%(18/391);共含183个基因型,其中149株为独特类型,余242株分为34簇,其中最大的一簇包含64株(基因型为424343357333544);研究显示明显的基因多态性,Mtub21和MIRU26位点显示较高多态性(h),分别为0.591和0.527;ETR-B、ETR-C、ETR-D和MIRU23显示较低多态性,h分别为0.125、0.08、0.124和0.137;基因群分布与药敏间的差异无统计学意义(χ2值分别为0.22、0.00、0.01、0.07,P值均>0.05)。结论初步证实安徽省结核分枝杆菌菌株存在明显的基因多态性,以Ⅲ型菌株为主,应加强对此型菌株流行的监控。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 基因 小卫星重复
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