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猪非典型性瘟病毒与猪流行性腹泻病毒双重PCR方法的建立与应用 被引量:2
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作者 杨晓宇 徐雷 +3 位作者 殷鑫欢 张继宗 徐志文 朱玲 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期1081-1086,共6页
为了快速准确地检测出猪非典型性瘟病毒(APPV)与猪流行性腹泻病毒(PEDV),根据Gen Bank中发布的PEDV S2基因和APPV NS3基因的序列,分别选取PEDV S2基因和APPV NS3基因的保守序列,设计、合成了1对特异性引物。通过对体系进行优化,分别扩增... 为了快速准确地检测出猪非典型性瘟病毒(APPV)与猪流行性腹泻病毒(PEDV),根据Gen Bank中发布的PEDV S2基因和APPV NS3基因的序列,分别选取PEDV S2基因和APPV NS3基因的保守序列,设计、合成了1对特异性引物。通过对体系进行优化,分别扩增出190 bp和500 bp的特异性片段。建立的双重RT-PCR方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪轮状病毒(RV)的检测均为阴性。对PEDV和APPV的最低检出量分别为1μl 2.65×10~5和1μl 3.56×10~4,对四川遂宁、眉山等地采集到的腹泻、肌肉震颤的病料进行检测,PEDV、APPV阳性病料检出率分别为41. 18%和11. 76%,经分别与特异性检测APPV和PEDV的单一RT-PCR法检测结果进行比较分析,符合率均为100%。与单一RT-PCR检测方法具有相同特异性和重复性,可用于临床检测。 展开更多
关键词 非典型性瘟病毒 猪流行性腹泻病毒 双重RT-PCR
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非典型性瘟病毒SYBR Green Ⅱ荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量:1
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作者 杨晓宇 徐雷 +4 位作者 殷鑫欢 张继宗 鲁令华 冯宇 朱玲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1133-1136,共4页
为建立一种快速检测猪非典型性瘟病毒(APPV)的方法,本实验建立了APPV SYBR Green Ⅱ荧光定量RT-PCR检测方法。该方法特异性试验结果显示,除APPV外,猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒等常见猪病病原检测... 为建立一种快速检测猪非典型性瘟病毒(APPV)的方法,本实验建立了APPV SYBR Green Ⅱ荧光定量RT-PCR检测方法。该方法特异性试验结果显示,除APPV外,猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒等常见猪病病原检测均为阴性,表明其特异性良好;该方法最低检测限为2.8×10~3拷贝/μL,敏感性较高;重复性试验的组内、组间变异系数均小于1%。利用该方法对临床56份来自四川各地的临床病料样品进行检测,检出5份阳性样品,且与常规PCR检测方法的阳性符合率为100%。本研究建立的APPV荧光定量RT-PCR检测方法为APPV临床检出以及后期并发症的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 非典型性瘟病毒 荧光定量RT-PCR SYBR Green
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猪非典型性瘟病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:3
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作者 郭佳琪 杨晓宇 +3 位作者 冯宇 杨钒 徐志文 朱玲 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期357-362,共6页
为建立一种快速、准确检测猪非典型性瘟病毒(APPV)的方法,根据GenBank发布的APPV NS2基因序列,设计合成1对扩增后目的基因片段大小为500 bp的特异性引物。建立的RT-PCR方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)和猪瘟病毒(... 为建立一种快速、准确检测猪非典型性瘟病毒(APPV)的方法,根据GenBank发布的APPV NS2基因序列,设计合成1对扩增后目的基因片段大小为500 bp的特异性引物。建立的RT-PCR方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)和猪瘟病毒(CSFV)的检测结果均为阴性,该方法对APPV的最低检出量为1μl 4.95×10~4拷贝,重复性试验中组间、组内试验结果均与预期相符。应用该方法对68份疑似患病的仔猪样品进行检测,阳性病料检出率为7.35%。利用Mega7.0绘制APPV系统进化树,对APPV进行遗传进化分析,结果显示本试验检出的APPV(SC株)与中国报道的APPV的亲缘关系较近。建立的APPV RT-PCR检测方法可用于APPV的临床诊断及流行病学检测。 展开更多
关键词 非典型性瘟病毒 RT-PCR 检测
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猪非典型性瘟病毒(APPV)研究进展 被引量:3
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作者 武省 曾莉 +1 位作者 潘永飞 宋延华 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第3期104-109,共6页
猪非典型性瘟病毒(APPV)是近两年来新发现的猪病毒性病原,引起新生仔猪先天性震颤,可导致仔猪站立困难、吮乳受阻甚至死亡,严重威胁着养猪业的持续健康发展.本文从APPV的发现与流行现状、病原特征、临床表现和病理变化及检测技术等方面... 猪非典型性瘟病毒(APPV)是近两年来新发现的猪病毒性病原,引起新生仔猪先天性震颤,可导致仔猪站立困难、吮乳受阻甚至死亡,严重威胁着养猪业的持续健康发展.本文从APPV的发现与流行现状、病原特征、临床表现和病理变化及检测技术等方面的研究进展进行了综述,以期为APPV的防控工作提供参考. 展开更多
关键词 非典型性瘟病毒 仔猪先天性震颤 流行现状
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猪非典型性瘟病毒研究进展 被引量:1
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作者 姬永琛 赵静雯 吴慧光 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5075-5083,共9页
猪非典型性瘟病毒(Atypical porcine pestivirus,APPV)是一种近年来新发现的瘟病毒属病毒,对全球养猪业造成了重大损失。APPV被认为是引起仔猪先天性A-Ⅱ型震颤的病原,可导致仔猪全身肌肉震颤,影响进食,进而因饥饿而死亡。APPV于2015年... 猪非典型性瘟病毒(Atypical porcine pestivirus,APPV)是一种近年来新发现的瘟病毒属病毒,对全球养猪业造成了重大损失。APPV被认为是引起仔猪先天性A-Ⅱ型震颤的病原,可导致仔猪全身肌肉震颤,影响进食,进而因饥饿而死亡。APPV于2015年在美国首次被发现,主要集中分布在美洲、西欧、东亚地区,现已在中国多个省市被发现。目前已开发出多种诸如PCR和血清学技术检测APPV感染的方法。虽然APPV的研究取得了一定进展,但对其起源、流行病学和传播动态等方面的理解仍非常有限。由于APPV分离培养困难以及缺乏合适的替代试验动物模型,限制了其商业化疫苗的研发,为疫病防控带来难度。作者着重综述了目前国内外关于APPV的进化与分型、基因组结构、病原分离培养、组织嗜性与传播途径、病原检测技术和疫苗研发等方面最新进展,旨在充分了解其蛋白功能和分子机制,以期为研究人员开发有效的诊断工具、制定成功的控制策略提供理论依据。 展开更多
关键词 非典型性瘟病毒 先天性震颤 病原分离 疫苗研发
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