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非促有丝分裂型人酸性成纤维细胞生长因子的受体结合特性及对MAPK信号通路的影响 被引量:18
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作者 汪小凤 郑青 +6 位作者 蔡绍晖 吴晓萍 许华 赵文 苏志坚 李校堃 张敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期179-182,共4页
目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖... 目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖活性;采用受体放射性配基结合法,测定haFGF和nm- haFGF与其受体结合的亲和力及受体总结合位点数RT ;利用Western印迹检测haFGF和nm- haFGF分别作用于NIH3T3细胞后MAPK信号通路中ERK信号分子的表达。结果:与haFGF比较,nm- haFGF对NIH3T3细胞的促增殖活性降低,nm -haFGF与NIH3T3细胞胞膜上aFGF受体结合的亲和力下降,但与受体结合的总位点数不变。Western半定量检测结果显示,nm -haFGF组信号蛋白ERK的表达水平明显低于haFGF组。结论:nm -haFGF与受体结合能力下降,下调MAPK信号通路是导致nm haFGF的促分裂活性降低的主要原因之一。 展开更多
关键词 分裂人酸性纤维细胞生长因子 受体 信号通路
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人类重组型酸性成纤维细胞生长因子促分裂效应及其信号转导途径的推测
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作者 吕文天 刘光伟 +5 位作者 王志成 赵红光 龚平生 姜晓燕 李校堃 龚守良 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B03期35-38,共4页
【目的】通过比较野生型及重组型酸性成纤维细胞生长因子(waFGF,raFGF)对NIH3T3细胞促分裂活性的差别,推测其信号途径的异同,从而评价促分裂性;同时,通过检测肝素(HS)对这两种生长因子生物学活性的影响,评价其在模仿机体内环境中的作用... 【目的】通过比较野生型及重组型酸性成纤维细胞生长因子(waFGF,raFGF)对NIH3T3细胞促分裂活性的差别,推测其信号途径的异同,从而评价促分裂性;同时,通过检测肝素(HS)对这两种生长因子生物学活性的影响,评价其在模仿机体内环境中的作用。【方法】应用MTT法检测细胞的促分裂活性。应用Western blot和RT-PCR分别检测FGF1受体磷酸化和Fos基因表达。【结果】raEGF对细胞增殖的作用明显低于waFGF,在5-80 mg/mL范围内最为明显(P<0.001); HS均可促进两种因子对细胞的增殖作用,但raFGF+HS组明显低于waFGF+HS组(P<0.05)。waFGF通过核转位和MAPK两种途径发挥促分裂活性,而raFGF则只通过MAPK发挥促分裂性。【结论】raFGF的促分裂作用低于waFGF;肝素对这两种因子的促分裂性具有促进作用;waFGF通过核转位和MAPK两种途径发挥促分裂活性,而raFGF则只通过MAPK发挥促分裂性。 展开更多
关键词 酸性纤维细胞生长因子 肝素 分裂 受体磷酸化 Fos基因表达
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非促分裂haFGF对H_2O_2损伤的人RPE细胞的保护作用 被引量:4
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作者 湛敏 黄亚东 +3 位作者 丁长才 张敏静 朱德勇 苏志坚 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期726-730,共5页
目的研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(nm-haFGF)对H2O2损伤的人视网膜色素上皮(RPE)细胞的保护作用。方法利用H2O2建立人RPE细胞氧化损伤模型,采用MTT法检测RPE细胞的存活率,核染色观察RPE细胞的核形态,流式细胞仪检测RPE细... 目的研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(nm-haFGF)对H2O2损伤的人视网膜色素上皮(RPE)细胞的保护作用。方法利用H2O2建立人RPE细胞氧化损伤模型,采用MTT法检测RPE细胞的存活率,核染色观察RPE细胞的核形态,流式细胞仪检测RPE细胞死亡率以及Western blot检测bcl-2的表达。结果nm-haFGF预处理可以提高H2O2损伤的REP细胞的存活率;nm-haFGF质量浓度在0-10mg/L的范围内,RPE细胞存活率从67.4%上升至92%;nm-haFGF刺激后,RPE细胞的bcl-2表达增加。结论nm-haFGF对H2O2氧化损伤RPE的细胞具有保护作用,并在一定范围内呈质量浓度依赖性。其保护机制可能是通过bcl-2的增加而产生抗凋亡作用。 展开更多
关键词 分裂人酸性纤维细胞生长因子 视网膜色素上皮细胞 氧化损伤 保护作用
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nmhaFGF和haFGF对放线菌素D诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡的保护作用 被引量:2
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作者 海广范 詹合琴 +1 位作者 李生莹 许华 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第6期409-412,共4页
目的探讨非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenic human acidic fibroblast growth factor,nmhaFGF)和haFGF对放线菌素D诱导的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞凋亡的保护作用,同时探讨2种浓度... 目的探讨非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenic human acidic fibroblast growth factor,nmhaFGF)和haFGF对放线菌素D诱导的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞凋亡的保护作用,同时探讨2种浓度放线菌素D诱导hRPE细胞凋亡模型的复制条件。方法用0.25mg·L-1和0.50mg·L-1放线菌素D诱导hRPE细胞凋亡,用琼脂糖凝胶电泳检测2种浓度放线菌素D诱导hRPE细胞DNA断裂情况,并用流式细胞仪检测放线菌素D诱导hRPE细胞的凋亡率,确定诱导hRPE细胞凋亡的条件,分别以0.02mg·L-1、0.06mg·L-1、0.18mg·L-1、0.54mg.L-1和1.62mg·L-1的nmhaFGF和haFGF预作用于hRPE细胞24h,并设置正常细胞组和凋亡模型细胞组,观察nmhaFGF和haFGF对hRPE细胞凋亡的作用。结果0.25mg·L-1和0.50mg·L-1放线菌素D诱导hRPE细胞凋亡16h后细胞凋亡率分别为32.68%和53.27%,琼脂糖凝胶电泳结果显示0.25mg·L-1放线菌素D诱导细胞凋亡条带清晰,而0.50mg·L-1放线菌素D诱导hRPE细胞凋亡条带模糊,因此0.25mg·L-1放线菌素D作用hRPE细胞16h是诱导hRPE细胞凋亡的最佳条件。在nmhaFGF各剂量组中,随着nmhaFGF浓度升高,hRPE细胞凋亡率明显降低,其中1.62mg·L-1剂量组细胞凋亡率最低,为(11.49±0.50)%;相同浓度haFGF各剂量组细胞凋亡率也呈现不同程度的降低,但随着haFGF剂量升高,凋亡率下降的趋势不如nmhaFGF剂量组明显,在haFGF剂量组中,1.62mg·L-1剂量组细胞凋亡率最低,为(14.35±1.02)%,nmhaFGF和haFGF对hRPE细胞凋亡率的下降作用经比较差异无统计学意义。结论haFGF和nmhaFGF都可以发挥对hRPE细胞凋亡的保护作用。该保护作用可能是通过发挥其非促分裂活性实现的。 展开更多
关键词 放线菌素 人视网膜色素上皮 非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子
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