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重组靛蓝色素合成酶快速定量检测L-谷氨酰胺
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作者 袁天慧 李晗 +7 位作者 张怡婷 赵钰 成琦 韩雨洁 徐得磊 朱天择 罗兵 朱益波 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第4期163-172,共10页
【目标】快速、经济且准确地检测复杂样品中L-谷氨酰胺(L-glutamine,Gln)的浓度。【方法】利用重组大肠杆菌(Escherichia coli)表达的靛蓝色素合成酶(blue pigment synthetaseA,BpsA),开发快速精确定量Gln的方法。通过对脱辅基BpsA(apo-... 【目标】快速、经济且准确地检测复杂样品中L-谷氨酰胺(L-glutamine,Gln)的浓度。【方法】利用重组大肠杆菌(Escherichia coli)表达的靛蓝色素合成酶(blue pigment synthetaseA,BpsA),开发快速精确定量Gln的方法。通过对脱辅基BpsA(apo-BpsA)进行体外活化及测定条件优化获得BpsA全酶(holo-BpsA)。【结果】所获holo-BpsA可在适宜条件下于30 min内完成对Gln的定量测定,该方法检测限为10.46μmol/L,定量限为31.68μmol/L,板间标准偏差为1.41μmol/L,板内标准偏差为0.85μmol/L;针对5种常用培养基的平均加标回收率为94.7%~106.6%,其标准偏差基本在5%以下。holo-BpsA在-20℃下保存2个月后,酶活力未见显著变化。【结论】作者开发的基于BpsA快速检测Gln的方法操作简便、专一性强、耗时短,具有较高灵敏度和准确度。 展开更多
关键词 L-谷氨酰胺 靛蓝色素合成酶 快速定量检测
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