目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对尿酸(UA)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症反应和氧化应激的影响。方法体外培养HUVEC,取第4~5代细胞随机分为四组,对照组给予EGM-2完全培养液培养;UA组加入含终浓度为8 mg/d L UA的EGM-2完全...目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对尿酸(UA)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症反应和氧化应激的影响。方法体外培养HUVEC,取第4~5代细胞随机分为四组,对照组给予EGM-2完全培养液培养;UA组加入含终浓度为8 mg/d L UA的EGM-2完全培养液培养;UA+EGCG组加入含终浓度为50μmol/L EGCG的EGM-2完全培养液培养12 h,再加入含终浓度为8 mg/d L UA的EGM-2完全培养液培养;EGCG组加入含终浓度为50μmol/L EGCG的EGM-2完全培养液培养。收集各组培养24 h的细胞,采用RT-PCR法检测NF-κB、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、环氧化酶2(COX-2)、TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)mRNA相对表达量,采用DCFH-DA法检测活性氧(ROS)水平(以平均光密度值表示)。结果与对照组比较,UA组NF-κB、MCP-1、ICAM-1、TNF-α、i NOS mRNA相对表达量均升高(P均<0.01);与UA组比较,UA+EGCG组、EGCG组NF-κB、MCP-1、ICAM-1、COX-2、TNF-α、i NOS mRNA相对表达量均下降(P均<0.01)。对照组、UA组、UA+EGCG组、EGCG组平均光密度值分别为101.26±12.34、345.98±27.01、112.65±9.62、103.37±5.88,UA组高于对照组,UA+EGCG组、EGCG组均低于UA组,组间比较P均<0.01。结论 EGCG可减轻UA诱导HUVEC发生的炎症和氧化应激反应,抑制NF-κB信号通路、减少炎症因子释放可能是其作用机制。展开更多
目的体外震波治疗能促进缺血组织的血管新生和加速侧支循环建立,但其具体作用机制尚不明确。探讨0.09 m J/mm2的体外震波对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖及血管内皮生长因子(vascular endotheli...目的体外震波治疗能促进缺血组织的血管新生和加速侧支循环建立,但其具体作用机制尚不明确。探讨0.09 m J/mm2的体外震波对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)变化的影响。方法实验分为实验组和对照组,对照组试管置于震波仪器中但不进行震波处理,实验组以0、0.03、0.09、0.18、0.24 m J/mm2震波能量冲击,每孔加CCK8溶液,用酶标仪测定在波长450 nm处的A值。对体外培养的HUVECs细胞株施予0.09 m J/mm2能量的震波处理,CCK8比色法检测细胞增殖情况,Real-time PCR法和流式细胞术分别检测低能量超声波处理后细胞因子VEGF、IL-8 mRNA表达和蛋白质的变化。结果 1CCK8比色法检测结果显示实验组中只有0.09 m J/mm2能量A450值与对照组比,差异有统计学意义(0.70±0.04 vs0.54±0.09,P<0.05),而其他能量与对照组比,差异无统计学意义(P>0.05);2RT-PCR结果显示0.09 m J/mm2能量时HUVECs VEGF、IL-8 mRNA的表达(7.93±0.90、7.34±1.67)均较对照组(1.07±0.40、1.00±0.09)明显升高(P<0.01)。3流式细胞术检测结果显示与对照组相比,0.09 m J/mm2能量时HUVECs VEGF、IL-8蛋白表达(39.89±4.79、31.33±5.61)均较对照组(20.98±3.30、22.60±3.76)明显升高(P<0.05)。结论体外低能量震波可促进HUVECs增殖和增加VEGF、IL-8的表达,VEGF、IL-8的表达增加可在体外震波促进血管新生机制中起重要作用。展开更多
文摘目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对尿酸(UA)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症反应和氧化应激的影响。方法体外培养HUVEC,取第4~5代细胞随机分为四组,对照组给予EGM-2完全培养液培养;UA组加入含终浓度为8 mg/d L UA的EGM-2完全培养液培养;UA+EGCG组加入含终浓度为50μmol/L EGCG的EGM-2完全培养液培养12 h,再加入含终浓度为8 mg/d L UA的EGM-2完全培养液培养;EGCG组加入含终浓度为50μmol/L EGCG的EGM-2完全培养液培养。收集各组培养24 h的细胞,采用RT-PCR法检测NF-κB、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、环氧化酶2(COX-2)、TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)mRNA相对表达量,采用DCFH-DA法检测活性氧(ROS)水平(以平均光密度值表示)。结果与对照组比较,UA组NF-κB、MCP-1、ICAM-1、TNF-α、i NOS mRNA相对表达量均升高(P均<0.01);与UA组比较,UA+EGCG组、EGCG组NF-κB、MCP-1、ICAM-1、COX-2、TNF-α、i NOS mRNA相对表达量均下降(P均<0.01)。对照组、UA组、UA+EGCG组、EGCG组平均光密度值分别为101.26±12.34、345.98±27.01、112.65±9.62、103.37±5.88,UA组高于对照组,UA+EGCG组、EGCG组均低于UA组,组间比较P均<0.01。结论 EGCG可减轻UA诱导HUVEC发生的炎症和氧化应激反应,抑制NF-κB信号通路、减少炎症因子释放可能是其作用机制。
文摘目的体外震波治疗能促进缺血组织的血管新生和加速侧支循环建立,但其具体作用机制尚不明确。探讨0.09 m J/mm2的体外震波对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)变化的影响。方法实验分为实验组和对照组,对照组试管置于震波仪器中但不进行震波处理,实验组以0、0.03、0.09、0.18、0.24 m J/mm2震波能量冲击,每孔加CCK8溶液,用酶标仪测定在波长450 nm处的A值。对体外培养的HUVECs细胞株施予0.09 m J/mm2能量的震波处理,CCK8比色法检测细胞增殖情况,Real-time PCR法和流式细胞术分别检测低能量超声波处理后细胞因子VEGF、IL-8 mRNA表达和蛋白质的变化。结果 1CCK8比色法检测结果显示实验组中只有0.09 m J/mm2能量A450值与对照组比,差异有统计学意义(0.70±0.04 vs0.54±0.09,P<0.05),而其他能量与对照组比,差异无统计学意义(P>0.05);2RT-PCR结果显示0.09 m J/mm2能量时HUVECs VEGF、IL-8 mRNA的表达(7.93±0.90、7.34±1.67)均较对照组(1.07±0.40、1.00±0.09)明显升高(P<0.01)。3流式细胞术检测结果显示与对照组相比,0.09 m J/mm2能量时HUVECs VEGF、IL-8蛋白表达(39.89±4.79、31.33±5.61)均较对照组(20.98±3.30、22.60±3.76)明显升高(P<0.05)。结论体外低能量震波可促进HUVECs增殖和增加VEGF、IL-8的表达,VEGF、IL-8的表达增加可在体外震波促进血管新生机制中起重要作用。
