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青蟹双顺反子病毒-1原位杂交检测方法的建立与应用 被引量:1
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作者 崔亚婷 倪军 +4 位作者 马红玲 许海东 冯娟 申亚阳 郭志勋 《广东农业科学》 CAS 2015年第11期130-134,F0003,共6页
根据青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1)基因的保守序列设计1对引物,从感染MCDV-1的青蟹鳃组织中提取RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到1 314 bp的c DNA片段。纯化后的PCR产物用地高辛(DIG)标记制备核酸探针,此探针与青... 根据青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1)基因的保守序列设计1对引物,从感染MCDV-1的青蟹鳃组织中提取RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到1 314 bp的c DNA片段。纯化后的PCR产物用地高辛(DIG)标记制备核酸探针,此探针与青蟹呼肠孤病毒(MCRV)、鲍肌肉萎缩症病毒(Ab SV)、类疱疹病毒(Ab HV)、白斑综合症病毒(WSSV)、虎纹蛙病毒(TFV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)等水生动物常见病毒均无交叉反应,可以特异性的检测出MCDV-1,检出MCDV-1的灵敏度为8.58×107 copies/μL。采用原位杂交检测方法检测拟穴青蟹组织中MCDV-1的组织分布,结果表明,拟穴青蟹中MCDV-1 RNA的阳性信号主要分布于肝胰腺、神经节、肠道和食管。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 青蟹双顺反子病毒-1 地高辛核酸探针 原位杂交
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广东沿海地区拟穴青蟹呼肠孤病毒和双顺反子病毒-1的分子流行病学调查 被引量:4
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作者 申亚阳 杨铿 +3 位作者 马红玲 冯娟 苏友禄 郭志勋 《生态科学》 CSCD 2017年第1期17-24,共8页
运用双重巢式PCR方法于2014年10月和11月份对广东省阳江市、台山市、中山市、惠州市(大亚湾地区、惠东地区)、汕尾市(东涌地区、红海湾地区)等主要拟穴青蟹(Scylla paramamosain)养殖地区的青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)和青... 运用双重巢式PCR方法于2014年10月和11月份对广东省阳江市、台山市、中山市、惠州市(大亚湾地区、惠东地区)、汕尾市(东涌地区、红海湾地区)等主要拟穴青蟹(Scylla paramamosain)养殖地区的青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)和青蟹双顺反子病毒-1(mud crab discistrovirus-1,MCDV-1)流行情况进行检测调查和序列分析。结果表明在调查的地区中,60%—100%的拟穴青蟹至少携带一种病毒。10月份阳江地区、台山地区、中山地区、汕尾东涌和汕尾红海湾地区拟穴青蟹MCRV携带率分别为71.42%、68.97%、70%、72.41%和64%,MCDV-1携带率分别为61.29%、24.14%、63.33%、13.79%和12%;各地区两种病毒双重感染率均在50%以下。11月份阳江地区、台山地区、中山地区、惠州大亚湾地区和惠州惠东地区拟穴青蟹MCRV携带率分别为50%、95.65%、100%、93.1%和82.76%,MCDV-1携带率分别为10%、100%、93.1%、37.93%和27.59%,台山和中山地区地区两种病毒双重感染率均在90%以上,惠州、汕尾地区以单独感染为主。五个地区获得的27株MCRV序列中,各个地区内获得的核酸序列同源性均在99.2%—100%之间,MCRV序列遗传进化基本无地域差异;获得35株MCDV-1序列中,各个地区内获得的核酸序列同源性均在91.4%—100%之间,MCDV-1序列遗传进化出现一定的地域差异。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 青蟹呼肠孤病毒 青蟹双顺反子病毒 分子流行病学 调查
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广东省阳江地区野生拟穴青蟹2种病毒感染情况调查 被引量:5
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作者 张迪 苏友禄 +3 位作者 冯娟 马红玲 付腾 郭志勋 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期137-141,共5页
青蟹双顺反子病毒-1(mudcrabdicistrovirus-1,MCDV-1)和青蟹呼肠孤病毒(mudcrabreovirus,MCRV)是对养殖拟穴青蟹有较强致病性的2种病原,可导致高死亡率。文章采用双重巢式PCR检测法对2012年阳江地区5月-10月捕捞的野生拟穴青蟹(... 青蟹双顺反子病毒-1(mudcrabdicistrovirus-1,MCDV-1)和青蟹呼肠孤病毒(mudcrabreovirus,MCRV)是对养殖拟穴青蟹有较强致病性的2种病原,可导致高死亡率。文章采用双重巢式PCR检测法对2012年阳江地区5月-10月捕捞的野生拟穴青蟹(Scyllaparamamosain)病毒感染情况进行调查。结果显示,阳江地区2012年5月~10月的野生青蟹群体一直保持较高的病毒携带率(44.83%-100%),其中MCDV-1检出率最高的月份为6月、8月和9月,MCRV检出率最高的月份为5月-6月和8月~9月;以单独感染类型为主的月份为5月、7月和10月(〉44.83%),以双阳性感染类型为主的月份为6月、8月和9月(〉82.76%)。由此可见,2种病毒的流行月份为5月~6月和8月~9月;在流行月份期间2种病毒常常协同感染野生拟穴青蟹。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 青蟹双顺反子病毒-1 青蟹呼肠孤病毒 调查
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