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前列腺癌组织中雄激素受体剪接变异体7的表达及临床意义
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作者 王艳龙 张洪麟 +3 位作者 杜浩 任宇 于广海 刘志宇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期678-680,689,共4页
目的探讨雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)在前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法收集2017年3月至2019年3月大连医科大学附属大连市中心医院泌尿外科48例患者的组织标本。其中良性前列腺增生18例(良性增生组)、局限性前列腺癌18例(局限癌... 目的探讨雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)在前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法收集2017年3月至2019年3月大连医科大学附属大连市中心医院泌尿外科48例患者的组织标本。其中良性前列腺增生18例(良性增生组)、局限性前列腺癌18例(局限癌组)、前列腺癌骨转移12例(骨转移癌组)。免疫组化染色检测各组AR-V7阳性表达;qRT-PCR检测各组AR-V7 mRNA的表达。结果免疫组化结果显示3组比较AR-V7阳性表达存在统计学差异(P<0.05)。qRT-PCR检测结果显示,与良性增生组比较,局限癌组AR-V7 mRNA表达增高(P<0.05);与良性增生组和局限癌组比较,骨转移癌组AR-V7 mRNA表达增高(P<0.05)。结论前列腺癌组织中AR-V7表达增高,且与前列腺癌的临床进展相关,提示AR-V7可能参与前列腺癌的临床进展和骨转移的发生。 展开更多
关键词 雄激素受体剪接变异体7 前列腺癌 临床意义
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多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞雄激素受体剪接变异体对内分泌激素水平的影响 被引量:3
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作者 许晶晶 石超逸 +2 位作者 刘晔 吴琰婷 黄荷凤 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1277-1283,共7页
目的·探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)患者卵巢颗粒细胞雄激素受体插入型剪接变异体(androgen receptor splice variant insertion isoform,AR-ins)对性激素及胰岛素水平的影响。方法·纳入2017年6月—2... 目的·探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)患者卵巢颗粒细胞雄激素受体插入型剪接变异体(androgen receptor splice variant insertion isoform,AR-ins)对性激素及胰岛素水平的影响。方法·纳入2017年6月—2018年6月于上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院辅助生殖科行体外受精-胚胎移植的154例PCOS患者(PCOS组)和79例正常排卵患者(对照组)。通过病史摘录收集其社会人口学信息、血清基础性激素及胰岛素数据,其中激素水平由化学发光法检测。收集所有患者的卵巢颗粒细胞及卵泡液。采用巢式PCR鉴定PCOS患者卵巢颗粒细胞中的雄激素受体剪接变异体,进一步将PCOS组患者分为PCOS野生型(wild type,Wt)组(39例)和PCOS AR-ins组(115例)。利用化学发光法检测3组患者卵泡液中的性激素及胰岛素水平,计算游离雄激素指数(free androgen index,FAI)。采用One-way ANOVA、Welch's ANOVA、Kruskal-Wallis H检验和χ^2检验比较3组患者的社会人口学信息、血清及卵泡液的性激素及胰岛素水平的差异。结果·与对照组相比,PCOS AR-ins组患者血清中性激素结合球蛋白(sex hormone-binding globulin,SHBG)水平显著降低(P=0.000),总睾酮(total testosterone,TT)水平(P=0.000)、胰岛素水平(P=0.001)及FAI(P=0.000)均显著增高。分别与对照组和PCOS Wt组相比,PCOS AR-ins组患者卵泡液中SHBG、TT、胰岛素水平及FAI间的差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论·存在AR-ins的PCOS患者血清中具有高雄激素和高胰岛素的特点,而在其卵巢局部此效应更为显著。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 激素受体 剪接异体 激素 胰岛素抵抗
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雄激素受体可变剪接异变体7与前列腺癌关系的研究进展 被引量:2
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作者 于冰冰 李扬 邵晨 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1092-1098,共7页
雄激素受体(AR)信号通路在前列腺癌(PCa)发生发展过程中起重要作用。AR信号转导途径的改变和重新激活是促进去势抵抗性前列腺癌(CRPC)发展和耐药性产生的核心因素。AR可变剪接异变体7(AR-V7)的表达是AR信号通路异常激活的重要原因之一,A... 雄激素受体(AR)信号通路在前列腺癌(PCa)发生发展过程中起重要作用。AR信号转导途径的改变和重新激活是促进去势抵抗性前列腺癌(CRPC)发展和耐药性产生的核心因素。AR可变剪接异变体7(AR-V7)的表达是AR信号通路异常激活的重要原因之一,AR-V7具有与AR不同的结构及功能,在PCa发展、耐药和临床治疗中起着重要的推动作用,同时也具有作为CRPC生物标志物和治疗靶标的巨大潜力。现总结分析AR与AR-V7的结构和功能上的差异,以及在AR靶向药物作用下CRPC患者的疗效,为CRPC的治疗提供理论依据。阐述AR-V7在PCa治疗和耐药方面的主要研究进展及其在判断CRPC疗效和预后方面的作用,同时进一步分析AR-V7特异性检测在临床应用中的不足之处,以期取得技术上的进步和发展。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 去势抵抗性前列腺癌 激素受体 激素受体剪接7 多烯紫杉醇
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人生长激素释放激素受体剪接变异体1型对人肝癌细胞HepG2增殖的影响 被引量:3
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作者 林玉茵 陈文生 +3 位作者 郭晓兰 谭茵 贺小松 戴建威 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期474-478,共5页
目的:探讨人生长激素释放激素受体剪接变异体1型(GHRHR SV1)对肝癌细胞系HepG2增殖的影响,阐明GHRHR SV1对人肿瘤细胞的促增殖作用。方法:将GHRHR SV1真核表达载体导入HepG2细胞建立HepG2-SV1细胞系。设计对照组(野生型HepG2)、空载质粒... 目的:探讨人生长激素释放激素受体剪接变异体1型(GHRHR SV1)对肝癌细胞系HepG2增殖的影响,阐明GHRHR SV1对人肿瘤细胞的促增殖作用。方法:将GHRHR SV1真核表达载体导入HepG2细胞建立HepG2-SV1细胞系。设计对照组(野生型HepG2)、空载质粒组(HepG2-pCDNA 3.0细胞系)和干扰组(HepG2-SV1细胞系)。采用PCR和Western blotting法鉴定HepG2-SV1细胞系,CCK-8法检测各组细胞的增殖率,克隆形成实验检测各组细胞的单克隆形成率,细胞划痕实验检测细胞的迁移率。结果:PCR与Western blotting法检测,构建的HepG2-SV1细胞系能稳定表达GHRHR SV1;CCK-8法检测,干扰组HepG2-SV1细胞系的增殖率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05);克隆形成实验,干扰组HepG2-SV1细胞系的单克隆形成率约为空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系的3.5倍(P<0.05);细胞划痕实验,所构建的干扰组HepG2-SV1细胞系的迁移率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05)。结论:GHRHR SV1能促进HepG2细胞的增殖。 展开更多
关键词 人生长激素释放激素受体剪接异体1型 HEPG2细胞 细胞增殖 克隆形成率 迁移率
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AR-V7在前列腺癌细胞耐药中的作用 被引量:3
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作者 马渊 李纪夫 王玉杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1874-1881,共8页
目的:探讨雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)在前列腺癌细胞耐药中的作用及分子机制。方法:运用Lipofectamine2000转染法将AR-V7 siRNA(siAR-V7)转染至4株前列腺癌细胞中,命名为PC3-siAR-V7、DU145-siAR-V7、LNCaP-siAR-V7和ArCaP-siAR-V7细... 目的:探讨雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)在前列腺癌细胞耐药中的作用及分子机制。方法:运用Lipofectamine2000转染法将AR-V7 siRNA(siAR-V7)转染至4株前列腺癌细胞中,命名为PC3-siAR-V7、DU145-siAR-V7、LNCaP-siAR-V7和ArCaP-siAR-V7细胞,以转染无关序列(NC siRNA)为阴性对照。运用real-timePCR和Westernblot实验分别检测转染前后细胞中AR-V7的mRNA和蛋白表达水平;运用MTT法和Transwell法分别检测细胞活力和细胞迁移率;运用萤光素酶报告基因实验和Western blot实验分别检测AR的启动子活性及下游靶基因前列腺特异性抗原(PSA)和FK506结合蛋白5(FKBP5)的蛋白表达。构建耐比卡鲁胺的前列腺癌细胞系LNCaP-DR,运用免疫荧光观察LNCaP、LNCaP-siAR-V7和LNCaP-DR细胞中AR和AR-V7的亚细胞定位;运用蛋白质免疫共沉淀实验检测AR-V7与热休克蛋白90(HSP90)的相互作用。结果:4株前列腺癌细胞中的AR-V7 mRNA水平显著高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1(P<0.05);PC3-siAR-V7、DU145-siAR-V7、LNCaP-siAR-V7和ArCaPsiAR-V7细胞中AR-V7蛋白水平、细胞活性及细胞迁移率显著低于NCsiRNA转染的细胞(P<0.05)。随着比卡鲁胺剂量的增加,所有细胞活力逐渐降低,而下调AR-V7表达显著增强前列腺癌细胞对比卡鲁胺的敏感性(P<0.05)。Westernblot结果显示下调AR-V7表达显著抑制AR启动子活性,其下游PSA和FKBP5蛋白水平明显降低(P<0.05)。免疫荧光结果发现AR和AR-V7主要存在于前列腺癌细胞核内,AR少量存在于细胞质中;下调AR-V7表达则抑制AR的核转运;AR存在于耐药细胞核中,AR-V7在耐药细胞中高表达。免疫共沉淀结果显示内源性AR-V7与HSP90相互作用。结论:AR-V7在前列腺癌细胞中高表达,下调AR-V7的表达显著抑制前列腺癌细胞活力和迁移;前列腺癌细胞耐药与AR-V7高表达相关,其机制可能通过AR-V7与HSP90相互作用介导AR-V7的核转运,激活AR信号通路调控下游靶基因的转录活性最终导致细胞耐药。 展开更多
关键词 雄激素受体剪接变异体7 前列腺癌 耐药性 免疫共沉淀
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GHRHR-SV1抗体的制备及其蛋白在黑色素瘤细胞中的表达 被引量:2
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作者 郭晓兰 谭茵 +2 位作者 陈文生 林玉茵 戴建威 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1237-1242,共6页
目的:制备生长激素释放激素受体剪接变异体1(GHRHR-SV1)抗体,并检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞中的表达情况,为后续的肿瘤机制研究奠定基础。方法:设计GHRHR-SV1基因序列,将其插入质粒pET-32a(+)中,构建pET-GHRHR-SV1重组载体,经PCR... 目的:制备生长激素释放激素受体剪接变异体1(GHRHR-SV1)抗体,并检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞中的表达情况,为后续的肿瘤机制研究奠定基础。方法:设计GHRHR-SV1基因序列,将其插入质粒pET-32a(+)中,构建pET-GHRHR-SV1重组载体,经PCR及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,分别加入0、0.5、1.0、1.5和2.0mmol·L^(-1)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG);诱导1、2、4和6h,并在37℃、30℃和25℃不同温度下进行诱导;观察目的蛋白表达的最佳IPTG浓度、时间和温度。亲和层析纯化重组蛋白,将纯化后的蛋白免疫家兔,制备兔多克隆抗体,ELISA法检测该抗体效价,Western blotting法检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞系B16-F10中的表达情况。结果:重组载体pET-GHRHR-SV1构建成功。在IPTG浓度为2.0mmol·L^(-1)时目的蛋白的表达量最高;IPTG诱导蛋白表达2h时,蛋白表达量最大;当温度为25℃时,蛋白的表达量最大。诱导表达的蛋白相对分子质量约为24 000,纯化后纯度为80%,GHRHR-SV1抗体效价为1∶1 600 000,B16-F10细胞中有GHRHR-SV1蛋白表达。结论:成功制备pETGHRHR-SV1重组载体。GHRHR-SV1蛋白在IPTG浓度为2.0mmol·L^(-1)、诱导时间为2h和温度为25℃的条件下表达最佳。成功制备了高效价的GHRHR-SV1抗体。黑色素瘤细胞系中有GHRHR-SV1蛋白表达。 展开更多
关键词 生长激素释放激素受体剪接异体1 重组载体 重组蛋白 抗体 黑色素瘤
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