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淋球菌隐蔽性质粒cppB基因探针制备及初步应用的研究
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作者 冯国和 乔光彦 +2 位作者 陈庆学 侯晓刚 鲁润铭 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1995年第1期96-98,共3页
应用碱变性法从淋球菌D参考菌株获得4.2kb隐蔽性质粒DNA,通过PCR方法扩增该质粒633bpcppB基因。采用DNA直接酶标─化学发光自显影技术标记cppB基因探针,通过斑点及Southern印迹杂交加以鉴定并初... 应用碱变性法从淋球菌D参考菌株获得4.2kb隐蔽性质粒DNA,通过PCR方法扩增该质粒633bpcppB基因。采用DNA直接酶标─化学发光自显影技术标记cppB基因探针,通过斑点及Southern印迹杂交加以鉴定并初步应用于临床标本检测。旨在为临床淋病实验室诊断提供一个简便、快速方法。 展开更多
关键词 淋球菌 隐蔽性质粒 cppB 基因探针 制备
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植物乳杆菌内源性质粒序列分析及其表达载体的构建 被引量:3
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作者 方来杉 赖强 +1 位作者 钟泽民 黄毓茂 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第4期118-124,共7页
目的:构建乳酸杆菌的表达载体,对菌株携带的质粒进行序列测定和功能分析,并利用自身带有的质粒系统构建乳酸杆菌的表达系统,对乳酸菌口服疫苗的制备起到积极的促进作用。方法:从植物乳杆菌LP3中提取质粒并进行序列测定和功能分析。通过... 目的:构建乳酸杆菌的表达载体,对菌株携带的质粒进行序列测定和功能分析,并利用自身带有的质粒系统构建乳酸杆菌的表达系统,对乳酸菌口服疫苗的制备起到积极的促进作用。方法:从植物乳杆菌LP3中提取质粒并进行序列测定和功能分析。通过质粒pLP3复制子,与pCPSP载体的氯霉素基因CmR、pUC19的复制子构建大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒。在穿梭质粒的基础上加上嗜酸乳杆菌的S层蛋白启动子PslpA和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,eGFP)基因,进一步构建乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP。结果:从植物乳杆菌LP3中得到一个天然隐蔽性质粒pLP3,该质粒大小为2017 bp,GC含量为37.48%。基于质粒pLP3,构建了大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒D-pLP3,并成功转化至不同类型乳酸菌,转化效率介于0.3×102~1.0×103 CFU/μg(DNA质量计)之间。乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP转化至植物乳杆菌,成功获得了荧光蛋白的表达。结论:成功构建了乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA,为乳酸菌基因操作提供了新的工具。 展开更多
关键词 隐蔽性质粒 滚环复制 穿梭质 植物乳杆菌
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