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淋球菌隐蔽性质粒cppB基因探针制备及初步应用的研究
1
作者
冯国和
乔光彦
+2 位作者
陈庆学
侯晓刚
鲁润铭
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
1995年第1期96-98,共3页
应用碱变性法从淋球菌D参考菌株获得4.2kb隐蔽性质粒DNA,通过PCR方法扩增该质粒633bpcppB基因。采用DNA直接酶标─化学发光自显影技术标记cppB基因探针,通过斑点及Southern印迹杂交加以鉴定并初...
应用碱变性法从淋球菌D参考菌株获得4.2kb隐蔽性质粒DNA,通过PCR方法扩增该质粒633bpcppB基因。采用DNA直接酶标─化学发光自显影技术标记cppB基因探针,通过斑点及Southern印迹杂交加以鉴定并初步应用于临床标本检测。旨在为临床淋病实验室诊断提供一个简便、快速方法。
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关键词
淋球菌
隐蔽性质粒
cppB
基因探针
制备
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职称材料
植物乳杆菌内源性质粒序列分析及其表达载体的构建
被引量:
3
2
作者
方来杉
赖强
+1 位作者
钟泽民
黄毓茂
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期118-124,共7页
目的:构建乳酸杆菌的表达载体,对菌株携带的质粒进行序列测定和功能分析,并利用自身带有的质粒系统构建乳酸杆菌的表达系统,对乳酸菌口服疫苗的制备起到积极的促进作用。方法:从植物乳杆菌LP3中提取质粒并进行序列测定和功能分析。通过...
目的:构建乳酸杆菌的表达载体,对菌株携带的质粒进行序列测定和功能分析,并利用自身带有的质粒系统构建乳酸杆菌的表达系统,对乳酸菌口服疫苗的制备起到积极的促进作用。方法:从植物乳杆菌LP3中提取质粒并进行序列测定和功能分析。通过质粒pLP3复制子,与pCPSP载体的氯霉素基因CmR、pUC19的复制子构建大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒。在穿梭质粒的基础上加上嗜酸乳杆菌的S层蛋白启动子PslpA和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,eGFP)基因,进一步构建乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP。结果:从植物乳杆菌LP3中得到一个天然隐蔽性质粒pLP3,该质粒大小为2017 bp,GC含量为37.48%。基于质粒pLP3,构建了大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒D-pLP3,并成功转化至不同类型乳酸菌,转化效率介于0.3×102~1.0×103 CFU/μg(DNA质量计)之间。乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP转化至植物乳杆菌,成功获得了荧光蛋白的表达。结论:成功构建了乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA,为乳酸菌基因操作提供了新的工具。
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关键词
隐蔽性质粒
滚环复制
穿梭质
粒
植物乳杆菌
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职称材料
题名
淋球菌隐蔽性质粒cppB基因探针制备及初步应用的研究
1
作者
冯国和
乔光彦
陈庆学
侯晓刚
鲁润铭
机构
第二临床学院传染病教研室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
1995年第1期96-98,共3页
文摘
应用碱变性法从淋球菌D参考菌株获得4.2kb隐蔽性质粒DNA,通过PCR方法扩增该质粒633bpcppB基因。采用DNA直接酶标─化学发光自显影技术标记cppB基因探针,通过斑点及Southern印迹杂交加以鉴定并初步应用于临床标本检测。旨在为临床淋病实验室诊断提供一个简便、快速方法。
关键词
淋球菌
隐蔽性质粒
cppB
基因探针
制备
Keywords
neisseria gonorrhoeae
cryptic plasmid
cppB gene probe
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R759.204 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
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职称材料
题名
植物乳杆菌内源性质粒序列分析及其表达载体的构建
被引量:
3
2
作者
方来杉
赖强
钟泽民
黄毓茂
机构
华南农业大学兽医学院
广州沃德生物技术有限公司
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期118-124,共7页
基金
“十三五”国家重点研发计划重点专项(2017YFD0501902)
文摘
目的:构建乳酸杆菌的表达载体,对菌株携带的质粒进行序列测定和功能分析,并利用自身带有的质粒系统构建乳酸杆菌的表达系统,对乳酸菌口服疫苗的制备起到积极的促进作用。方法:从植物乳杆菌LP3中提取质粒并进行序列测定和功能分析。通过质粒pLP3复制子,与pCPSP载体的氯霉素基因CmR、pUC19的复制子构建大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒。在穿梭质粒的基础上加上嗜酸乳杆菌的S层蛋白启动子PslpA和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,eGFP)基因,进一步构建乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP。结果:从植物乳杆菌LP3中得到一个天然隐蔽性质粒pLP3,该质粒大小为2017 bp,GC含量为37.48%。基于质粒pLP3,构建了大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒D-pLP3,并成功转化至不同类型乳酸菌,转化效率介于0.3×102~1.0×103 CFU/μg(DNA质量计)之间。乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP转化至植物乳杆菌,成功获得了荧光蛋白的表达。结论:成功构建了乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA,为乳酸菌基因操作提供了新的工具。
关键词
隐蔽性质粒
滚环复制
穿梭质
粒
植物乳杆菌
Keywords
cryptic plasmid
rolling circle replication
shuttle vector
Lactobacillus plantarum
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
淋球菌隐蔽性质粒cppB基因探针制备及初步应用的研究
冯国和
乔光彦
陈庆学
侯晓刚
鲁润铭
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
1995
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
植物乳杆菌内源性质粒序列分析及其表达载体的构建
方来杉
赖强
钟泽民
黄毓茂
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2020
3
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