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云南大围山自然保护区木霉菌多样性与RAPD分析 被引量:5
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作者 唐嘉义 王家和 +1 位作者 杨福惠 刘亚芬 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期9-11,19,共4页
描述了从云南省大围山自然保护区土壤样品中分离鉴定的 6个木霉集合种 (speciesaggregates) :康氏木霉(Trichoderma .koningiiOud) ,哈茨木霉 (T .harzianumRifai) ,绿色木霉 (T .viridePersexS .F .Gray) ,长枝木霉(T .longibrachiatum... 描述了从云南省大围山自然保护区土壤样品中分离鉴定的 6个木霉集合种 (speciesaggregates) :康氏木霉(Trichoderma .koningiiOud) ,哈茨木霉 (T .harzianumRifai) ,绿色木霉 (T .viridePersexS .F .Gray) ,长枝木霉(T .longibrachiatumRifai) ,桔绿木霉 (T .citrinovirideBissett) ,钩状木霉 (T .hamatum (Bon)Bain)。对 6种木霉分别进行拮抗活性测定和随机扩增多态性DNA(RAPD) ;其结果 ,6种木霉对 4种植物病原菌均有不同程度的拮抗性 ;6种木霉DNA扩增谱带差异明显 ,遗传相似性聚类分析结果按一定遗传距离可分 6群 ;与形态分类结果一致 ,可作为木霉分类鉴定的依据。 展开更多
关键词 木霉菌 多样 随机增多DNA(RAPD)分析
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实时定量PCR法快速检测水产品中的副溶血性弧菌 被引量:8
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作者 陈琳 周青青 +1 位作者 顾青 郦萍 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期823-828,共6页
副溶血性弧菌是一种广泛存在于水产品中的食源性致病菌,可污染食物,引起严重的食物中毒。利用实时定量PCR方法建立一种快速检测水产品中副溶血性弧菌的方法,根据随机扩增多态性分析(RAPD)鉴定特异性片段,设计特异性引物。采用建立的实... 副溶血性弧菌是一种广泛存在于水产品中的食源性致病菌,可污染食物,引起严重的食物中毒。利用实时定量PCR方法建立一种快速检测水产品中副溶血性弧菌的方法,根据随机扩增多态性分析(RAPD)鉴定特异性片段,设计特异性引物。采用建立的实时定量PCR方法检测市售水产品20份,检出阳性食品6份,最小检测灵敏度为50 fg DNA,与传统微生物检测结果相比无显著差异。该检测方法特异性强,灵敏度高。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 随机扩增多态性分析 实时荧光定量PCR
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我国部分地区猪养殖场耐药基因mcr-1阳性大肠杆菌的PFGE和RAPD分型对比研究 被引量:4
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作者 仝慧娴 姚晓慧 +7 位作者 王舒丰 魏建超 刘珂 邵东华 邱亚峰 马志永 李蓓蓓 刘聚祥 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第4期88-94,共7页
耐药基因mcr-1严重威胁多黏菌素对多重耐药革兰氏阴性杆菌感染的治疗,该基因起源于动物养殖场,而且具有非常高的流行率。本研究从我国山东、青海、四川、北京、贵州、海南、江西、山西、新疆维吾尔自治区9个省市自治区的33个猪养殖场分... 耐药基因mcr-1严重威胁多黏菌素对多重耐药革兰氏阴性杆菌感染的治疗,该基因起源于动物养殖场,而且具有非常高的流行率。本研究从我国山东、青海、四川、北京、贵州、海南、江西、山西、新疆维吾尔自治区9个省市自治区的33个猪养殖场分离鉴定得到63株mcr-1阳性大肠杆菌,采用脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)和随机扩增多态性分析(RAPD)方法来解析上述菌株的亲缘关系,并对两种分子分型方法进行比较。结果显示,我国不同地域猪养殖场中的mcr-1宿主菌主要为大肠杆菌,并且其分子分型呈现多样性特征。63株菌共获得56种PFGE谱型,仅有7组菌株表现出克隆关系;RAPD分型则呈现55种谱型,有7组菌株表现出克隆关系。研究表明两种分型方法均可用于mcr-1阳性大肠杆菌的同源性分析,但PFGE的分辨力、稳定性、重复性都优于RAPD,在对菌株进行亲缘关系分析时推荐使用PFGE。对于缺乏高端设施的实验室,分离株进行分子分型时也可以考虑RAPD。 展开更多
关键词 mcr-1阳大肠杆菌 同源分析 脉冲场凝胶电泳分型 随机扩增多态性分析
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低能碳离子注入野牛草种子的变异分析 被引量:7
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作者 肖尊安 武菊英 孙振元 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期518-523,共6页
以野牛草 (Buchlo dactyloides)为材料 ,研究了不同注量的C+ 离子注入种子对种子萌发、幼苗生长和发育 ,以及随机扩增多态性DNA(RAPD)谱带变化的影响 .结果表明 :随C+ 注量Φ增加 ,种子萌发率降低 ,实生苗生长减弱 ;Φ =1× 10 14 ... 以野牛草 (Buchlo dactyloides)为材料 ,研究了不同注量的C+ 离子注入种子对种子萌发、幼苗生长和发育 ,以及随机扩增多态性DNA(RAPD)谱带变化的影响 .结果表明 :随C+ 注量Φ增加 ,种子萌发率降低 ,实生苗生长减弱 ;Φ =1× 10 14 cm- 2 处理的幼苗生长超过对照 ,但Φ =1×10 15和 1× 10 16 cm- 2 处理使幼苗生长高度显著降低 (P <0 .0 5 ) ;不同Φ处理对幼苗叶片数和分蘖数无显著影响 (P >0 .0 5 ) ;引物E1和E12扩增的RAPD谱带中出现DNA条带随C+ 的Φ增加逐渐消失的现象 ,首次揭示了RAPD条带变化与Φ的相关性 .研究认为 ,利用Φ =1× 10 14 cm- 2 的C+ 离子注入种子 。 展开更多
关键词 野牛草 低能C^+离子注入 诱变 随机增多DNA分析
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随机引物PCR及其应用的研究进展 被引量:3
5
作者 李雪华 刘应鹏 +2 位作者 江倩 王艳玲 刘兴友 《上海畜牧兽医通讯》 2006年第3期4-5,共2页
关键词 PCR 随机引物 随机增多DNA分析 EVOLUTION ANALYSIS DNA多 应用 检测技术 基因组DNA 选择
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一株酿酒酵母的特征区域序列扩增标记
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作者 方维明 杨智 +2 位作者 杨振泉 孟庆阳 汪志君 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1-4,共4页
以23株不同来源的酿酒酵母为研究对象,分别提取基因组DNA,试用50条随机引物对其进行随机扩增多态性DNA分析,筛选到两条具有菌株鉴别能力的随机引物。P09可以从2.412,ST—01,SK—26,ZD—01四株酿酒酵母基因组DNA中扩增出长度为433bp的Sc... 以23株不同来源的酿酒酵母为研究对象,分别提取基因组DNA,试用50条随机引物对其进行随机扩增多态性DNA分析,筛选到两条具有菌株鉴别能力的随机引物。P09可以从2.412,ST—01,SK—26,ZD—01四株酿酒酵母基因组DNA中扩增出长度为433bp的Sc—433片断Sc—433;P46可以从2.1882,ST—01,NJ—02三株酿酒酵母基因组DNA中扩增出长度为665bp的Sc—665片断,其中仅有目的菌株ST—01能稳定的扩增出这2个标记。把这2个片断分别克隆到pUCmT质粒载体中,经过酶切鉴定后测序,根据序列设计特异性引物,把RAPD标记转化为特征区域序列扩增标记,为酿酒酵母菌株的分子鉴别提供了新的借鉴。 展开更多
关键词 酿酒酵母 随机增多DNA分析 特征区域序列 分子标记
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O139群霍乱弧菌地方分离株的分子特征研究 被引量:12
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作者 李孝权 王鸣 +9 位作者 易鸿 刘于飞 黄冰 周端华 莫自耀 欧忠辉 柴巧学 刘衡川 蒋力云 刘远 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期608-610,共3页
目的研究本地分离出的O139群霍乱弧菌的分子特征,建立霍乱暴发和散发的快速检测及流行病学溯源的有效手段。方法采用PCR方法对霍乱弧菌进行4种毒力基因的检测,用随机扩增多态性分析(RAPD)及SPSS软件对以上菌株进行多态性分析,对霍乱弧... 目的研究本地分离出的O139群霍乱弧菌的分子特征,建立霍乱暴发和散发的快速检测及流行病学溯源的有效手段。方法采用PCR方法对霍乱弧菌进行4种毒力基因的检测,用随机扩增多态性分析(RAPD)及SPSS软件对以上菌株进行多态性分析,对霍乱弧菌毒力进行快速测定和分子分型。结果5株O139群霍乱弧菌均可检出四种毒力基因。所有霍乱弧菌的RAPD结果经聚类分析可分为3个聚类群,较好地反应了不同群的霍乱弧菌之间的亲缘关系。结论可将PCR和RAPD方法结合分析用于霍乱疫情的快速检测和流行病学溯源。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 毒力基因 PCR 随机扩增多态性分析
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Molecular characterization of Acidithiobacillus ferrooxidans strains isolated from different environments by three PCR-based methods
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作者 吴学玲 刘莉莉 +2 位作者 张真真 邓凡凡 刘新星 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS CSCD 2015年第2期455-465,共11页
PCR-based DNA fingerprinting, REP-PCR(repetitive element PCR), RAPD(randomly amplified polymorphic DNA) and16 S r DNA sequence analyses were used to characterize 23 Acidithiobacillus ferrooxidans strains isolated from... PCR-based DNA fingerprinting, REP-PCR(repetitive element PCR), RAPD(randomly amplified polymorphic DNA) and16 S r DNA sequence analyses were used to characterize 23 Acidithiobacillus ferrooxidans strains isolated from different environments.(GTG)5 and BOXA1 R primer were selected for REP-PCR. Twenty arbitrary primers were used for RAPD to acquire DNA profiles from A. ferrooxidans. Both RAPD and REP-PCR produce complex banding patterns and show good discriminatory ability in differentiating closely related strains of A. ferrooxidans. The strains are clustered into 4 or 5 major groups and reveal genomic diversity using(GTG)5-PCR, BOX-PCR and RAPD analysis. Phylogenetic tree based on 16 S r DNA sequences of 23 strains and related strains shows that they are clustered into two distinct groups. Twelve strains are highly related to a new Acidithiobacillus named Acidithiobacillus ferrivorans. The results indicate that PCR-based methods are effective in revealing genetic diversity among A. ferrooxidans. 展开更多
关键词 Acidithiobacillus ferrooxidans repetitive element PCR(REP-PCR) randomly amplified polymorphic DNA(RAPD) 16S r DNA sequence analysis genetic diversity
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