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题名人体蠕形螨的DNA提取与随机引物PCR检测
被引量：11
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作者
赵亚娥
成慧
寻萌
吴李萍
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机构
西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系
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出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期929-933,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(30872199)
陕西省自然科学基金资助项目(2006C247)
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文摘
【目的】探索人体毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨DNA的提取方法。【方法】采用液氮反复冻融研磨法破碎螨体细胞,选用改良小昆虫DNA提取法、碱裂解法和试剂盒提取法,分别提取冻存时间在5个月内和8～10个月的毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨基因组DNA,并用随机引物PCR方法进行检测。【结果】蛋白核酸测定仪检测结果显示,试剂盒法提取的DNA纯度较高、量较多,明显优于改良小昆虫法和碱裂解法。随机引物扩增结果显示清晰的DNA指纹图谱,两种人体蠕形螨DNA指纹具有明显差异。蠕形螨冻存时间影响DNA提取的量,但对DNA提取的纯度和RAPD指纹图谱影响较小。不同DNA提取方法提取的同一种蠕形螨DNA指纹图谱基本相似,试剂盒法和改良小昆虫法提取的DNA样本条带多而清晰,碱裂解法提取的样本条带少而模糊。【结论】液氮反复冻融研磨法破碎蠕形螨细胞是有效的,蠕形螨冻存时间不宜超过6个月,试剂盒提取法是提取蠕形螨DNA的好方法。RAPD技术可以用于这两种人体蠕形螨DNA分子水平上的检测和分类。
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关键词
毛囊蠕形螨
皮脂蠕形螨
DNA提取
随机引物pcr检测
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Keywords
Demodex folliculorum
Demodex brevis
DNA extraction
random primer pcr detection
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分类号
Q966
[生物学—昆虫学]
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