期刊文献+
共找到104篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库的构建 被引量:8
1
作者 潘卫 戚中田 +2 位作者 贺祥 陈秋莉 潘欣 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期857-860,共4页
目的 :为了探讨噬菌体展示技术在筛选和鉴定病毒抗原表位研究中的应用前景。 方法 :利用随机引物 PCR法以HCV核心基因为模板合成随机 DNA片段 ,再经特定引物二次扩增后获得高丰度的 HCV核心蛋白随机 DNA片段 ,将该片段插入噬菌粒载体 p ... 目的 :为了探讨噬菌体展示技术在筛选和鉴定病毒抗原表位研究中的应用前景。 方法 :利用随机引物 PCR法以HCV核心基因为模板合成随机 DNA片段 ,再经特定引物二次扩增后获得高丰度的 HCV核心蛋白随机 DNA片段 ,将该片段插入噬菌粒载体 p CANTAB5 X的 Xba 位点 ,转化大肠杆菌 TG1,辅助噬菌体拯救 ,建立噬菌体随机肽展示文库。结果 :所构建的随机文库含 1.2 3× 10 5个不同克隆 ,库容噬菌体滴度为 2× 10 1 2 TU/ m l(转导单位 / ml) ,PCR法检测插入阳性为 2 8.1% ,核酸杂交证实 40 %的克隆为 HCV核心基因阳性克隆。 结论 :所建的随机文库有足够大的库容和较好的多样性 ,可以满足HCV C抗原表位的筛选。 展开更多
关键词 噬菌体随机展示 核心蛋白 丙型肝炎 HCV
在线阅读 下载PDF
从HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库中筛选抗原表位 被引量:6
2
作者 潘卫 戚中田 +4 位作者 吴晓兰 贺祥 潘欣 陈秋莉 杜平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期20-23,共4页
目的探讨病毒抗原序列研究的新方法。方法应用噬菌体展示技术,筛选HCV核心蛋白的抗原序列。用抗-HCV核心抗体单独阳性的血清,对巳构建的HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库进行4轮筛选,检测筛选阳性的克隆数、插入阳性率和杂... 目的探讨病毒抗原序列研究的新方法。方法应用噬菌体展示技术,筛选HCV核心蛋白的抗原序列。用抗-HCV核心抗体单独阳性的血清,对巳构建的HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库进行4轮筛选,检测筛选阳性的克隆数、插入阳性率和杂交阳性率来评价筛选的效果。测定和分析7个杂交阳性克隆的DNA序列。结果所测定的7个序列中,6个为HCV核心蛋白序列,其中5个被正确地展示于噬菌体表面,1个可能被正确展示,这些序列均含有重要的HCV核心抗原表位。另1个为大肠杆菌nrfa基因。结论噬菌体展示技术完全可应用于病毒蛋白抗原序列的筛选,并具有简便、快速、准确的优点。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 核心蛋白 噬菌体 随机 抗原
在线阅读 下载PDF
运用噬菌体展示随机肽库筛选与内毒素结合的高亲和性多肽 被引量:4
3
作者 杨海捷 段光杰 +3 位作者 刘友生 陈锐 余德文 杨宇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期2262-2266,共5页
目的从噬菌体展示随机肽库中筛选与内毒素结合的多肽序列,并进行鉴定。方法以内毒素脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)为靶分子对噬菌体展示随机十二肽库进行4轮亲和筛选,获得与LPS结合的噬菌体克隆,应用结合实验和克隆斑抑制实验进一步... 目的从噬菌体展示随机肽库中筛选与内毒素结合的多肽序列,并进行鉴定。方法以内毒素脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)为靶分子对噬菌体展示随机十二肽库进行4轮亲和筛选,获得与LPS结合的噬菌体克隆,应用结合实验和克隆斑抑制实验进一步确证。挑选结合力强的克隆进行DNA测序,推导出呈现的多肽序列,应用生物信息学软件进行多肽序列分析和同源性分析。结果经4轮亲和筛选从噬菌体展示随机十二肽库中筛选获得了86个克隆,挑选12个结合力强的克隆进行DNA序列测序及生物信息学分析,结合本项目组的噬菌体展示随机七肽库筛选结果推导出呈现的多肽序列为HWQWPHWSPPP(命名为P11肽)。检索相关数据库发现此肽序列未被申请专利,体内约908种蛋白与其结构相匹配,其中包含有与LPS相互作用的位点。结论通过对噬菌体展示随机肽库的淘选,获得与LPS结合的高亲和性多肽,为进一步以这些多肽为先导物进行定向进化研究提供了实验依据和结构基础。 展开更多
关键词 内毒素 噬菌体展示随机 多肽 生物信息学
在线阅读 下载PDF
庚型肝炎病毒全基因组cDNA噬菌体随机展示肽库的构建与鉴定 被引量:2
4
作者 吴晓兰 潘卫 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期842-845,共4页
目的 :构建能用于抗原表位筛选的庚型肝炎病毒 (HGV)全基因组 c DNA噬菌体随机展示肽库。 方法 :将 DNase 部分消化的 HGV全基因组 c DNA随机片段 ,克隆到噬菌粒载体 p CANTAB5 X中 ,使 HGV抗原以融合蛋白的形式随机展示于噬菌体表面 ,... 目的 :构建能用于抗原表位筛选的庚型肝炎病毒 (HGV)全基因组 c DNA噬菌体随机展示肽库。 方法 :将 DNase 部分消化的 HGV全基因组 c DNA随机片段 ,克隆到噬菌粒载体 p CANTAB5 X中 ,使 HGV抗原以融合蛋白的形式随机展示于噬菌体表面 ,并用原位杂交、限制性酶切及 DNA测序等方法鉴定所建文库的随机性和完整性。 结果 :所建肽库的容量为5 .34× 10 4个菌落形成单位 ,滴度为 1.41× 10 1 4 TU/ ml。原位杂交结果证明在 HGV基因组的不同区域均有阳性菌落 ,酶切鉴定和 DNA测序结果显示插入片段的长度和片段来源区域具有随机性。结论 :所建肽库具有良好的完整性、随机性及实用性 ,为进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 噬菌体随机展示 庚型肝炎 HGV CDNA
在线阅读 下载PDF
噬菌体展示随机肽库及其在抗原表位研究上的应用 被引量:5
5
作者 王欣之 傅志强 《中国兽医寄生虫病》 CAS 2005年第1期42-45,共4页
本文主要介绍了噬菌体展示系统的原理,并就噬菌体表面展示系统的不同表达载体类别,分别做了描述, 同时讨论该展示系统在抗原表位研究上的应用。
关键词 抗原表位 噬菌体展示 随机 噬菌体表面展示 研究 表达载体 类别 应用
在线阅读 下载PDF
从噬菌体展示随机肽库中筛选豌豆凝集素的结合肽
6
作者 周翔 詹金彪 +1 位作者 毛献荣 王克夷 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第5期412-416,共5页
目的:从噬菌体展示随机肽库中筛选能与豌豆凝集素(PSA)特异结合的短肽。方法:①用豌豆凝集素(PSA)作为靶蛋白,对噬菌体展示的随机六肽库进行亲和筛选;②α-甲基-D-甘露糖苷对筛选出的噬菌体和PSA结合的影响实验(点印迹法);③选择性地合... 目的:从噬菌体展示随机肽库中筛选能与豌豆凝集素(PSA)特异结合的短肽。方法:①用豌豆凝集素(PSA)作为靶蛋白,对噬菌体展示的随机六肽库进行亲和筛选;②α-甲基-D-甘露糖苷对筛选出的噬菌体和PSA结合的影响实验(点印迹法);③选择性地合成了3条6肽ARMWSF、RYDYSY、LRLRQL,用不同浓度的6肽对PSA、ConA与HRP的结合进行竞争抑制实验。结果:经过三轮筛选后,这些噬菌体展示肽有明显的富集,从第三轮挑选的22个克隆的插入氨基酸序列可分为三大类;点印迹结果表明,这些噬菌体展示肽能与PSA特异结合,而α-甲基-D-甘露糖苷不同程度地抑制这种结合;LRLRQL不溶于水,ARMWSF和RYDYSY对PSA和HRP的结合有抑制,而对ConA和HRP的结合没有明显抑制。结论:人工合成的2条6肽和PSA的结合部位与α-甲基-D-甘露糖苷和PSA结合的部位并非相同。 展开更多
关键词 噬菌体 类/分离提纯 模拟 外源凝集素类/遗传学 植物 噬菌体展示随机 豌豆凝集素 亲和筛选 结合
在线阅读 下载PDF
噬菌体展示随机十五肽库的构建 被引量:1
7
作者 王筱蒙 邱郑 +1 位作者 张芳 王旻 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期242-246,共5页
为了满足药物筛选的需要,本实验以pCANTAB 5E噬菌粒为载体,构建表达于丝状噬菌体尾丝蛋白P3N末端的随机十五肽库。通过自行设计引物与模板,人工合成编码随机十五肽的寡核苷酸片段及含有酶切位点的引物。通过PCR技术进行模板扩增获得编... 为了满足药物筛选的需要,本实验以pCANTAB 5E噬菌粒为载体,构建表达于丝状噬菌体尾丝蛋白P3N末端的随机十五肽库。通过自行设计引物与模板,人工合成编码随机十五肽的寡核苷酸片段及含有酶切位点的引物。通过PCR技术进行模板扩增获得编码随机十五肽的基因。将扩增后的目的基因经过SfiΙ,NotΙ两个限制性内切酶双酶切后,与经同样双酶切的5'去磷酸化的噬菌粒载体连接,将重组产物电转入大肠埃希菌TG1感受态细胞。集合菌落后进行库容和多样性检验。所建肽库库容可达5×108。随机挑取20个克隆测序,其核苷酸序列及推断出的氨基酸序列均随机。成功构建了库容量与多样性都满足筛选要求的噬菌体展示随机十五肽库。 展开更多
关键词 噬菌体展示 随机十五
在线阅读 下载PDF
噬菌体展示随机肽库技术及其在动物医学中的应用
8
作者 李娜 《甘肃畜牧兽医》 2009年第2期44-46,共3页
关键词 噬菌体展示技术 动物医学 随机 应用 SMITH 基因工程 基因融合 基因片段
在线阅读 下载PDF
猪瘟病毒E2基因噬菌体展示多肽库的构建及表位鉴定 被引量:12
9
作者 徐和敏 王琴 +1 位作者 徐璐 范学政 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期71-76,共6页
本研究通过建立CSFV噬菌体展示多肽库,并对其进行生物淘选,以期获得E2蛋白上新的抗原表位。选择CSFV石门株(SM)和疫苗株(HCLV)为代表株,采用噬菌体展示技术,以T7select415-1b为载体,分别构建了CSFV SM株和HCLV株E2基因噬菌体展示多肽库(... 本研究通过建立CSFV噬菌体展示多肽库,并对其进行生物淘选,以期获得E2蛋白上新的抗原表位。选择CSFV石门株(SM)和疫苗株(HCLV)为代表株,采用噬菌体展示技术,以T7select415-1b为载体,分别构建了CSFV SM株和HCLV株E2基因噬菌体展示多肽库(SM-E2库和HCLV-E2库)。通过生物淘选和噬菌体原位杂交技术,采用7株猪瘟单克隆抗体和1株猪瘟高免血清分别对构建的SM-E2库和HCLV-E2库进行抗原表位筛选。结果共筛选到了5条与E2蛋白高度同源的序列,在E2蛋白上的同源区域分别为TAVSPTTLR、YYEP、TTWKEYSH、GGQ(V)VK和PDGLPHY。结果表明,TAVSPTTLR、YYEP和TTWKEYSH序列与目前已知E2蛋白表位一致,说明它们是E2蛋白上的优势表位;GGQ(V)VK和PDGLPHY序列与预测表位一致,推测是E2蛋白上潜在的抗原表位。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2蛋白 抗原表位 噬菌体展示多肽
在线阅读 下载PDF
利用噬菌体随机肽库对神经胶质瘤母系SWO-38进行全细胞筛选 被引量:6
10
作者 高双荣 钟雪云 +6 位作者 颜艳灵 钟振宇 秦艳芳 孙艳花 王冰 于莉娜 钟瑛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期946-948,共3页
目的和方法 :用噬菌体随机 7肽库对神经胶质瘤母细胞 (SWO - 38)进行全细胞筛选 ,并通过竞争结合实验检验所筛选出的克隆的结合特异性。结果 :经过 3轮“吸附 -洗脱 -扩增” ,噬菌体高度富集 ,并得到两个特异性较强的克隆。结论 :利用... 目的和方法 :用噬菌体随机 7肽库对神经胶质瘤母细胞 (SWO - 38)进行全细胞筛选 ,并通过竞争结合实验检验所筛选出的克隆的结合特异性。结果 :经过 3轮“吸附 -洗脱 -扩增” ,噬菌体高度富集 ,并得到两个特异性较强的克隆。结论 :利用噬菌体肽库可以简便。 展开更多
关键词 噬菌体随机 全细胞筛选 噬菌体 神经胶质瘤 肿瘤导向治疗
在线阅读 下载PDF
噬菌体随机十二肽库淘选三水白虎汤作用于类风湿关节炎滑膜细胞的靶点研究 被引量:8
11
作者 潘超 肖长虹 +3 位作者 高燕 赵晓峰 李凯芹 毕亚男 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期446-448,453,共4页
目的:利用噬菌体随机十二肽库淘选出与三水白虎汤(SSBH)作用的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)特异性结合的多肽,寻找SSBH治疗类风湿关节炎的蛋白靶点。方法:以SSBH处理过的RASFs为靶细胞,生理盐水(NS)处理的RASFs为吸附细胞,全细胞... 目的:利用噬菌体随机十二肽库淘选出与三水白虎汤(SSBH)作用的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)特异性结合的多肽,寻找SSBH治疗类风湿关节炎的蛋白靶点。方法:以SSBH处理过的RASFs为靶细胞,生理盐水(NS)处理的RASFs为吸附细胞,全细胞差减筛选法对噬菌体十二肽库进行3轮淘选,挑取单克隆、扩增纯化噬菌体,并初步鉴定噬菌体克隆的亲和力,阳性克隆测序后进行生物学分析。结果:3轮淘选后,随机挑选32个噬菌体克隆进行DNA序列分析,展示SGVYKVAYDWQH十二肽的噬菌体被富集约为56%(18/32)。结论:从噬菌体肽库筛选到SSBH作用RASFs的特异性结合短肽,并分析出相关作用蛋白。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 噬菌体随机十二 三水白虎汤 全细胞差减筛选
在线阅读 下载PDF
一种稳定、易于操作的噬菌体随机肽库载体的构建 被引量:5
12
作者 万瑛 代佳平 +1 位作者 王燕 刘昕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期256-258,共3页
目的:拟将噬菌粒pCOMB3改建为更为稳定、高拷贝且易于操作的噬菌体随机肽库载体。方法:对常用噬菌体抗体库呈现载体pCOMB3序列进行点矩阵作图分析(Dot-Plot分析),切除其中重复区,纠正其多代培养后自删除特性... 目的:拟将噬菌粒pCOMB3改建为更为稳定、高拷贝且易于操作的噬菌体随机肽库载体。方法:对常用噬菌体抗体库呈现载体pCOMB3序列进行点矩阵作图分析(Dot-Plot分析),切除其中重复区,纠正其多代培养后自删除特性。原克隆位点63bp的填充序列增加到1435bp以便于酶切鉴定和电泳回收。结果:构建了命名为pTMB2的噬菌粒载体。结论:pTMB2的噬菌粒载体更为稳定且易于操作。 展开更多
关键词 噬菌体随机 pCOMB3 Dot-Plot分析 载体
在线阅读 下载PDF
噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库的构建 被引量:4
13
作者 杨华 李连青 +6 位作者 王蓓霞 徐容 沈毅珺 贾建安 潘欣 陈秋莉 潘卫 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期396-401,共6页
目的:构建由免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合的噬菌体展示文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选研究打下基础。方法:PCR扩增制备分别编码Protein A 的A、D结构域、Protein G的B2 结构域和Pro tein L的B3结构... 目的:构建由免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合的噬菌体展示文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选研究打下基础。方法:PCR扩增制备分别编码Protein A 的A、D结构域、Protein G的B2 结构域和Pro tein L的B3结构域的序列片段,片段两端引入XbaⅠ酶切位点,3′端引入分别编码0、1、2、3个氨基酸大小随机连接肽的序列,并克隆于pMD 18T载体构建重组质粒。以上述16种重组质粒为模板,PCR扩增分别制备各种单结构域片段及两端部分T载体序列,XbaⅠ酶切,各种酶切片段混合后连接,并克隆于噬菌体展示载体pCANTAB5S,构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库,挑取单克隆进行序列测定,评价文库的随机性。结果:噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库库容量为2×107,滴度为1.3×1011;文库中含77%以上的阳性克隆,其中由2个以上单结构域组成的阳性克隆占24%;序列分析显示组合文库包含上述4种单结构域序列,连接方式符合随机连接的特点,随机连接肽的编码核酸也呈随机分布。结论:成功构建了免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库,该文库库容、多样性和随机性完全可满足进行体外分子进化研究的要求。 展开更多
关键词 免疫球蛋白结合分子 噬菌体展示 组合文 结构域 随机连接
在线阅读 下载PDF
随机多肽噬菌体展示载体pCANTAB5X的构建 被引量:12
14
作者 潘卫 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期723-725,共3页
目的:构建适用于外源性随机多肽的噬菌体展示载体。方法:在引物中加入XbaⅠ识别序列,将用该引物扩增的PCR产物克隆到pGEM-T中,再将该片段插入pCANTAB5E中构建成噬菌体展示载体pCANTAB5X。结果:限制... 目的:构建适用于外源性随机多肽的噬菌体展示载体。方法:在引物中加入XbaⅠ识别序列,将用该引物扩增的PCR产物克隆到pGEM-T中,再将该片段插入pCANTAB5E中构建成噬菌体展示载体pCANTAB5X。结果:限制酶切点XbaⅠ和HGV C片段被引入到新构建的噬菌粒载体pCANTAB5X中。结论:构建的新的噬菌体展示载体pCANTAB5X能有效展示外源性随机多肽。 展开更多
关键词 噬菌体展示 随机多 外源性 pCANTAB5X
在线阅读 下载PDF
肺癌噬菌体展示肽库的构建及肺癌早期检测分子标志的筛选 被引量:3
15
作者 赵晋丰 吴玲玲 +5 位作者 常文军 黄盛东 余永伟 赵立军 陈祎佳 曹广文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1157-1161,共5页
目的:构建肺癌噬菌体展示肽库,筛选出肺癌早期检测的分子标志群。方法:取30例第二军医大学长海医院手术后立即冻存的肺癌组织标本构建肺癌噬菌体展示肽库;用结合protein-A/G的琼脂糖珠分别富集肺癌组及非肿瘤对照组血浆中的抗体进行5轮... 目的:构建肺癌噬菌体展示肽库,筛选出肺癌早期检测的分子标志群。方法:取30例第二军医大学长海医院手术后立即冻存的肺癌组织标本构建肺癌噬菌体展示肽库;用结合protein-A/G的琼脂糖珠分别富集肺癌组及非肿瘤对照组血浆中的抗体进行5轮亲和筛选,富集肺癌特异性的相关肽;随机挑取5轮筛选后的500个噬菌体克隆,用ELISA法进一步筛选肺癌/对照D比值大于2.0的肺癌特异标志物克隆,进行基因序列测定和蛋白功能预测。结果:(1)该噬菌体展示肽库的滴度为3.0×106pfu,库容9.0×106pfu,随机挑选20个噬菌斑经PCR鉴定其重组率为60%。(2)共筛选出19个有意义的噬菌体,测序后,预测其蛋白质功能,9个与癌症相关,8个功能未知,2个与癌症不相关。结论:筛选出的噬菌体克隆所表达的抗原很可能是早期诊断肺癌的标志物。 展开更多
关键词 噬菌体展示 肺肿瘤 分子标志
在线阅读 下载PDF
利用噬菌体随机肽库筛选Rh(D)血型抗原的模拟表位 被引量:4
16
作者 刘淑均 沈继龙 +2 位作者 卞茂红 张循善 闻慧琴 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第7期817-820,共4页
目的从纯化的人抗Rh(D)抗体阳性血清中筛选Rh(D)血型抗原模拟表位。方法用纯化的多克隆抗Rh(D)抗体血清对噬菌体随机十二肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"过程筛选,随机挑取噬菌体克隆;用ELISA法检测其特异性及其与抗体的结合能... 目的从纯化的人抗Rh(D)抗体阳性血清中筛选Rh(D)血型抗原模拟表位。方法用纯化的多克隆抗Rh(D)抗体血清对噬菌体随机十二肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"过程筛选,随机挑取噬菌体克隆;用ELISA法检测其特异性及其与抗体的结合能力。提取阳性克隆DNA并进行测序,推导外源多肽的氨基酸序列。凝集抑制试验检测噬菌体展示的多肽对Rh(D)血型抗原结合的模拟作用。结果经过3轮筛选和相应鉴定后得到6个抗Rh(D)抗体的特异性噬菌体克隆,其中4个克隆展示相同的氨基酸序列为PSQGYVILLDEK,命名为C2,另外2个克隆展示相同的氨基酸序列为TMLNRAHDFSEC,命名为C21。凝集抑制试验结果表明这两个多肽的噬菌体可以抑制Rh(D)抗原阳性红细胞的凝集作用。结论多肽PSQGYVILLDEK和TMLNRAH-DFSEC可以模拟Rh(D)血型抗原表位。 展开更多
关键词 噬菌体随机 模拟表位 Rh(D)血型抗原
在线阅读 下载PDF
噬菌体展示肽库技术应用的研究进展 被引量:7
17
作者 李芳秋 朱扣军 武建国 《医学研究生学报》 CAS 2004年第9期843-846,共4页
噬菌体展示肽库技术是一种新的肿瘤筛选技术 ,它将随机多肽文库表达于丝状噬菌体的表面 ,使高通量筛选多肽配体变得容易些。该技术在研究蛋白质之间的相互作用、寻找肿瘤特异性抗原和治疗性靶肽以及在新型诊断试剂和疫苗研制中都有重要... 噬菌体展示肽库技术是一种新的肿瘤筛选技术 ,它将随机多肽文库表达于丝状噬菌体的表面 ,使高通量筛选多肽配体变得容易些。该技术在研究蛋白质之间的相互作用、寻找肿瘤特异性抗原和治疗性靶肽以及在新型诊断试剂和疫苗研制中都有重要用途。 展开更多
关键词 噬菌体展示 蛋白质相互作用 肿瘤靶
在线阅读 下载PDF
利用噬菌体展示肽库筛选和鉴定沙门氏菌O9抗原的模拟表位 被引量:3
18
作者 张扬 焦新安 +4 位作者 刘文博 潘志明 高崧 张如宽 刘秀梵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期60-63,共4页
目的 用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体 (3- 4 7-O)作为分子探针 ,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位 ,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础。方法与结果 经过三轮的亲和筛... 目的 用生物素标记沙门氏菌O9单克隆抗体 (3- 4 7-O)作为分子探针 ,从两个九肽噬菌体展示文库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位 ,从而为模拟多糖的多肽疫苗或编码该模拟表位的DNA疫苗研制奠定基础。方法与结果 经过三轮的亲和筛选 ,得到了两个能与O9单抗反应的强阳性单克隆扩增物gm6 2和 gm6 8,其序列分别为SHHVRGGGG和YQKWYLPKS。竞争ELISA实验表明 ,10 10转导单位噬菌体 gm6 8对肠炎沙门氏菌与 3- 4 7-O结合的抑制率达到 6 5 % ,而噬菌体 gm6 2的抑制率仅为 2 0 % ,且 gm6 8可以诱导产生针对沙门氏菌O9的抗体 ,而gm6 2则不能。 结论 实验结果显示九肽YQKWYLPKS是具有免疫原性的O9抗原模拟表位。 展开更多
关键词 沙门氏菌 O9抗原 模拟表位 噬菌体展示
在线阅读 下载PDF
噬菌体随机肽库筛选MUC1抗原模拟表位 被引量:2
19
作者 杨清浩 王祥卫 +1 位作者 金燕 张立新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第13期1332-1334,共3页
目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得... 目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP。鉴定结果表明:4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论所得序列TAPDLRP、SAPDLRPAAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。 展开更多
关键词 MCU1抗原 模拟表位 噬菌体随机7 抗体
在线阅读 下载PDF
从噬菌体展示肽库中筛选与人精子蛋白17结合的短肽序列 被引量:3
20
作者 李芳秋 吴玲 +1 位作者 王卫萍 金洁 《医学研究生学报》 CAS 2007年第7期675-677,681,共4页
目的:随机从噬菌体12肽库中筛选与人精子蛋白17(Sp17)特异性结合的短肽序列,并进行鉴定。方法:以基因工程制备的人Sp17为钓饵蛋白,采用亲和淘筛法对噬菌体肽库进行三轮亲和淘筛。富集Sp17特异结合噬菌体,用ELISA鉴定其结合活性并进行DN... 目的:随机从噬菌体12肽库中筛选与人精子蛋白17(Sp17)特异性结合的短肽序列,并进行鉴定。方法:以基因工程制备的人Sp17为钓饵蛋白,采用亲和淘筛法对噬菌体肽库进行三轮亲和淘筛。富集Sp17特异结合噬菌体,用ELISA鉴定其结合活性并进行DNA测序分析。结果:随机挑出20个噬菌体克隆进行鉴定,ELISA显示其中5个克隆与Sp17有较强结合活性,其氨基酸序列分别为QLMSNIHRRM II、RKMMNQTKRHLP、NTMKTMR IMMTR、RRRLLLMQRRMKR和SPRPMMRR IRKQ。结论:从噬菌体展示肽库中筛选鉴定出5个与人Sp17结合的12肽序列。 展开更多
关键词 精子蛋白17结合短 噬菌体展示 酶标记免疫吸附分析法
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部