采用限制性酶切片段长度多态性和PCR指印技术对牛结核分枝杆菌分型研究 被引量：7

1

作者 蔡宏 李淑霞 +3 位作者 呼西旦 李君莲 许苗 朱玉贤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期175-179,共5页

5株牛结核分枝杆菌DNA经PvuⅡ消化后 ,用来自IS10 81中的 2 48bp荧光探针杂交后进行限制性酶切片段长度多态性 (RFLP)分型 ,5株牛分离株中有 4株具有相同杂交带型 ,剩余的 1株在 3.6kb处多了 1条带。将 2 48bp探针对北京牛结核分枝杆菌... 5株牛结核分枝杆菌DNA经PvuⅡ消化后 ,用来自IS10 81中的 2 48bp荧光探针杂交后进行限制性酶切片段长度多态性 (RFLP)分型 ,5株牛分离株中有 4株具有相同杂交带型 ,剩余的 1株在 3.6kb处多了 1条带。将 2 48bp探针对北京牛结核分枝杆菌分离株的RFLP分型法结果与直接反向PCR分型法对上述分离株分型结果比较发现 :5株牛结核分枝杆菌分离株中有 2株具有相同的PCR指印带型 ,剩余 3株牛结核分枝杆菌分离株则PCR指印带型各不相同 ,上述结果显示出 ,直接反向PCR分型法较标准的RFLP分型法分型能力强。直接PCR法对新疆牛结核分枝杆菌分离株的分型结果显示出 ,PCR指印带型中带数较少 ,且与北京牛结核分枝杆菌分离株的PCR指印带型截然不同。 展开更多

关键词 牛结核分枝杆菌 插入序列 限制性酶切片段长度多态性 直接反向PCR 分型

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云南马关县矮马线粒体DNA的限制性片段长度多态性分析 被引量：4

2

作者 解德文 刘爱华 林世英 《云南畜牧兽医》 1995年第S1期37-38,共2页

云南马关县矮马线粒体ＤＮＡ的限制性片段长度多态性分析云南省畜牧兽医科学研究所解德文中科院昆明动物研究所刘爱华，林世英高等动物线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）是共价闭合环状的核外遗传物质，而核外遗传又是母体遗传，不发生重组，... 云南马关县矮马线粒体ＤＮＡ的限制性片段长度多态性分析云南省畜牧兽医科学研究所解德文中科院昆明动物研究所刘爱华，林世英高等动物线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）是共价闭合环状的核外遗传物质，而核外遗传又是母体遗传，不发生重组，ｍｔＤＮＡ对于研究亲缘关系较近的群... 展开更多

关键词 线粒体DNA 多态性分析 限制性片 马关县 矮马 段长度 遗传差异 遗传分化 云南省 限制性酶切

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激性腺素受体基因酶切片段长度多态性

3

作者 秦春圃 《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第5期52-53,共2页

关键词 猪 促性腺激素受体 促卵泡素受体 FSHR基因片断 酶切片段长度多态性

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中国汉族人群N-乙酰基转移酶1基因多态性的检测分析

4

作者 徐张巍 梅俏 +2 位作者 许建明 胡乃中 胡咏梅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第2期153-156,共4页

目的　探讨N 乙酰基转移酶1(NAT1)基因型检测方法及其基因多态性的分布。方法　在140名汉族健康人的外周血中,应用聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性分析(RFLP)及多重PCR技术,进行NAT1等位基因分型研究。结果　应用PCR- RFLP+多重... 目的　探讨N 乙酰基转移酶1(NAT1)基因型检测方法及其基因多态性的分布。方法　在140名汉族健康人的外周血中,应用聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性分析(RFLP)及多重PCR技术,进行NAT1等位基因分型研究。结果　应用PCR- RFLP+多重PCR方法避免了多种限制性内切酶之间相互干扰,可准确区分NAT1基因型。在140名检测标本中,NAT1* 3,NAT1* 4,NAT1* 10和NAT1* 11的发生频率分别是8 .2%、49. 6%、40%和2 2%。NAT1* 4发生率明显低于欧美人群,但高于东南亚人群;而NAT1* 10的发生率高于欧美人群,NAT1* 3和NAT1* 11的发生率较低,与大多数亚洲人群基本一致。结论　PCR RFLP+多重PCR方法检测NAT1基因型特异性高;NAT1基因型分布与其他国家检测情况有所差异。 展开更多

关键词 N-乙酰基转移酶 基因多态性 中国汉族人群 检测分析 限制性片段长度多态性分析 聚合酶链反应(PCR) 多重PCR技术 NAT1 PCR方法 限制性内切酶 基因型分布 发生率 检测方法 分型研究 等位基因 相互干扰 检测标本 发生频率

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扩增片段长度多态性（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）技术基本涵义

5

作者 新博 《现代渔业信息》 2007年第6期30-30,共1页

本刊讯：扩增片段长度多态性（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）技术，该技术是由Vos等1995年建立的一项分子标记技术，其基本原理是选择性扩增带有人工接头的DNA酶切片段。因不同个体的DNA的酶切片段存在差异，从而产... 本刊讯：扩增片段长度多态性（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）技术，该技术是由Vos等1995年建立的一项分子标记技术，其基本原理是选择性扩增带有人工接头的DNA酶切片段。因不同个体的DNA的酶切片段存在差异，从而产生扩增片段的长度多态性。AFLP技术具有不需要预先知道被研究物种的基因组DNA序列信息， 展开更多

关键词 扩增片段长度多态性 分子标记技术 基因组DNA 涵义 AFLP技术 酶切片段 选择性扩增 人工接头

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DNA多态性分析技术及其在蚕业上的应用 被引量：1

6

作者 周泽扬 鲁成 +1 位作者 夏庆友 向仲怀 《蚕学通讯》 1996年第4期16-20,共5页

现代分子生物学的迅猛发展,使整个生命科学研究发生了深刻的革命.由之而孕育出的以基因组DNA多态性分析为核心的分子标记(molecular marker)技术,使人们对于生物遗传差异的认识,由表型(产物)特征深入到了分子水平,产生了由现象到本质的... 现代分子生物学的迅猛发展,使整个生命科学研究发生了深刻的革命.由之而孕育出的以基因组DNA多态性分析为核心的分子标记(molecular marker)技术,使人们对于生物遗传差异的认识,由表型(产物)特征深入到了分子水平,产生了由现象到本质的飞跃.DNA多态性是指基因组DNA在漫长的生命繁演历程中所发生的自然突变(DNA片断的插入、缺失、重排或碱基置换)状况的差异性.这种差异反映了基因组的本质特征。 展开更多

关键词 DNA多态性 分析技术 基因组DNA 分子标记 多态性分析 限制性片段长度多态性(RFLP) 模板DNA 蚕业 限制性内切酶 遗传标记

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几种杀虫药剂敏感蚊类酯酶多态性的研究

7

作者 陈丽平 乔传令 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期13-19,共7页

通过蚊虫酯酶蛋白的淀粉凝胶电泳分析和基因组DNA的限制性酶切片段长度多态性(RFLPs)比较 ,对尖音库蚊Culex pipiens、三带喙库蚊 Culextritaeniorhynchus 和中华按蚊Anophelessinensis有机磷杀虫药剂敏感种群的酯酶蛋白和结构基因的多... 通过蚊虫酯酶蛋白的淀粉凝胶电泳分析和基因组DNA的限制性酶切片段长度多态性(RFLPs)比较 ,对尖音库蚊Culex pipiens、三带喙库蚊 Culextritaeniorhynchus 和中华按蚊Anophelessinensis有机磷杀虫药剂敏感种群的酯酶蛋白和结构基因的多态性进行分析。发现在蛋白质水平上 ,三带喙库蚊敏感种群 (n =5 4)在酯酶α和 β位点分别存在 2个和 3个等位基因 ,在DNA水平上有 2 9%的个体具有与酯酶 β11基因 1 3kbcDNA片段同源的 1 3kb单拷贝带存在。发现中华按蚊敏感种群 (n =5 0 )中具有低活性的非特异性酯酶存在 ,在蛋白质水平上 ,酯酶α和β位点各有一个等位基因 ;在DNA水平上 ,通过对单个蚊虫基因组DNA的研究未发现有与酯酶β11基因同源的酯酶编码基因的存在。对尖音库蚊北京敏感种群 (n =6 4)的研究发现 ,在酯酶α和 β位点都存在 5个等位基因 ,在DNA水平上 ,使用一个限制性内切酶 (EcoRI) ,15只蚊虫的样本在酯酶β位点发现了 5个等位基因 ,说明在尖音库蚊北京敏感种群的酯酶 β基因周围存在着较大的中性多态性 ,在有机磷杀虫剂的选择下 。 展开更多

关键词 蚊虫 酯酶 有机磷杀虫剂 限制性酶切片段长度多态性 基因扩增 迁移

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广西巴马地区长寿老人 ApoE 基因多态性与认知功能的关系 被引量：10

8

作者 胡才友 杨泽 +18 位作者 郑陈光 吕泽平 梁积英 庞国防 陈进超 韦俊兴 韦勇 王辰 屈彦纯 孙亮 杨斯雷 史晓红 唐雷 郑卫东 王沥 金锋 韩布新 吴森 梁永锡 《中国心理卫生杂志》 CSSCI CSCD 北大核心 2005年第6期383-386,共4页

目的:研究广西巴马地区长寿老人载脂蛋白E(ApoE)基因多态性的分布及其与认知功能改变的关系。方法:采用简易精神状态量表(MMSE)对112例90岁以上广西巴马地区长寿老人进行认知功能检查,并用限制性酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法进... 目的:研究广西巴马地区长寿老人载脂蛋白E(ApoE)基因多态性的分布及其与认知功能改变的关系。方法:采用简易精神状态量表(MMSE)对112例90岁以上广西巴马地区长寿老人进行认知功能检查,并用限制性酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法进行ApoE 基因分型。根据MMSE 得分将研究对象分为认知功能正常组和认知功能障碍组.比较两组人群的基因型、基因频率的分布特征。结果:巴马长寿老人中发生认知功能障碍者占14.29%。长寿老人中ApoEε3/3基因型分布的百分比最大,其次是ε2/3,而ε4/4最少。ApoE 各基因型和等位基因频率认知功能正常组和认知功能障碍组相比较,ε4等位基因频率认知障碍组明显高于认知正常组(P<0.01),ε4基因携带者认知功能障碍发生率明显高于其他基因携带者。结论:巴马地区长寿人群中,ApoEε3/ 3为最常见的基因型,而ε4/4最少;ApoE 基因多态性与巴马长寿老人认知功能改变有关联;ApoEε4基因仍然是长寿老人认知功能障碍发病的危险因子,较低的ApoEε4等位基因频率可能是巴马地区长寿老人认知功能保存较好的原因之一。 展开更多

关键词 APOE基因多态性 长寿老人 巴马 限制性酶切片段长度多态性分析 广西 认知功能障碍 等位基因频率 简易精神状态量表 ApoEε4基因 基因携带者 功能改变 90岁以上 基因型分布 正常组 载脂蛋白 基因分型 功能检查 研究对象

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绢丝昆虫线粒体DNA多态性研究 被引量：2

9

作者 陈元霖 桂慕燕 +1 位作者 凌建华 王斌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1997年第S1期43-45,共3页

采用差速离心法和碱变性法制备家蚕、野桑蚕、蓖麻蚕、柞蚕和天蚕蛹线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ），并进行了限制性酶切片段多态性（ＲＦＬＰ）检测。结果表明，绢丝昆虫在种间ｍｔＤＮＡ酶切类型差异明显，而在种内不同品种之间则没有差... 采用差速离心法和碱变性法制备家蚕、野桑蚕、蓖麻蚕、柞蚕和天蚕蛹线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ），并进行了限制性酶切片段多态性（ＲＦＬＰ）检测。结果表明，绢丝昆虫在种间ｍｔＤＮＡ酶切类型差异明显，而在种内不同品种之间则没有差异或差异甚少。在ＨａｅⅢ酶解作用下，家蚕的１５个一化和二化性品种的酶切类型相同，５个多化性品种的酶切类型也相同，但它们彼此间则有差异，前者与野桑蚕属同一个类型。由此提示，在家蚕品种演化过程中，一化和二化品种可能与野桑蚕有更密切的亲缘关系。 展开更多

关键词 绢丝昆虫 MTDNA 酶切片段长度多态性

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维吾尔族和汉族人群RANTES基因多态性特征及其对HIV-1感染的意义 被引量：2

10

作者 刘雪林 王福生 +2 位作者 金磊 徐德忠 洪卫国 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期489-491,共3页

目的　分析RANTES启动子区等位基因在中国维吾尔族和汉族健康人和HIV 1感染者中的分布特点 ,以期阐明RANTES基因突变型和人类免疫缺陷病毒(HIV 1 )感染在不同民族人群的关系。方法　利用PCR RFLP法对维吾尔族和汉族HIV 1感染者和健康人... 目的　分析RANTES启动子区等位基因在中国维吾尔族和汉族健康人和HIV 1感染者中的分布特点 ,以期阐明RANTES基因突变型和人类免疫缺陷病毒(HIV 1 )感染在不同民族人群的关系。方法　利用PCR RFLP法对维吾尔族和汉族HIV 1感染者和健康人群的 86 5份样品的RANTES 4 0 3、 2 8等位基因进行检测。结果　两个位点在维吾尔族和汉族人群均有较高的等位基因频率 ,分布基本一致 ;RANTES等位基因具有 6个基因表型 ,分别为AC/AC、AC/AG、AC/GC、AG/GC、GC/GC和AG/AG ;从单倍型看 ,汉族和维吾尔族均以GC为最高 ,占 6 2 7% ,AC分别为 2 8 7%和 30 4 % ,AG分别为 8 6 %和 6 8%。但是从单个位点看 ,HIV感染者和健康人、吸毒者差异均无统计学意义(P >0 0 5 ) ;从基因表型分析 ,与AC/AC比较 ,AC/AG、AC/GC、AG/GC、GC/GC的OR值显示都有不同程度的关联(OR =0 33～0 81 )。结论　汉族和维吾尔族中RANTES启动子区 4 0 3/ 2 8均有较高的突变频率 ;与AC/AC比较 ,AC/AG、AC/GC、AG/GC。 展开更多

关键词 RANTES 单核苷酸多态(SNP) 人类免疫缺陷病毒 聚合酶链反应/限制性内切酶片段长度多态性分析

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CD40基因多态性与自身免疫性甲状腺病的相关性 被引量：2

11

作者 张怡 朱本章 孙燕 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期294-296,304,共4页

目的了解CD40基因多态性在西北地区汉族人群中的分布及其与自身免疫性甲状腺病(AITD)的相关性。方法随机选取本院内分泌科门诊的165例Graves病(GD)患者、113例桥本甲状腺炎(HT)患者为研究对象,以94例健康体查者为对照。①应用聚合酶链反... 目的了解CD40基因多态性在西北地区汉族人群中的分布及其与自身免疫性甲状腺病(AITD)的相关性。方法随机选取本院内分泌科门诊的165例Graves病(GD)患者、113例桥本甲状腺炎(HT)患者为研究对象,以94例健康体查者为对照。①应用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性技术检测CD40基因5′非翻译区-1位点C/T多态性(5′UTR C(-1)T)、第三外显子58038位点-/T多态性;②应用扩增受阻突变系统-聚合酶链反应检测第九外显子64610位点C/G多态性。结果①5′UTR C(-1)T位点中CC基因型、C等位基因在GD组和对照组间有显著差异(P<0.05);②58038位点在372例样本中均为TT型;③64610位点未发现GG基因型。结论①西北地区汉族人CD40基因5′UTR C(-1)T位点上C等位基因型与GD发病有相关性,CC基因型者患GD的危险性较TT高;②58038位点-/T在西北地区汉族人中无多态性;③64610位点C/G在西北地区汉族人中未发现GG基因型。 展开更多

关键词 自身免疫性甲状腺病 CD40基因 单核苷酸多态性 聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性 扩增受阻突变系统-聚合酶链反应

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维生素D受体基因BsmⅠ多态性与北方汉族成人慢性肾功能不全骨密度的关系

12

作者 王玉浔 安雅臣 +5 位作者 赵晓晶 刘国荣 高素玲 张江 王艳 史国辉 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期959-963,共5页

目的:探讨维生素D受体(VDR)基因BsmⅠ位点多态性与北方汉族成人慢性肾功能不全骨密度的关系,探讨影响骨密度的遗传易感因素。方法:选取211名河北联合大学附属医院连续收治的汉族成人(年龄≥18岁)慢性肾功能不全患者并根据血肌酐(Scr)水... 目的:探讨维生素D受体(VDR)基因BsmⅠ位点多态性与北方汉族成人慢性肾功能不全骨密度的关系,探讨影响骨密度的遗传易感因素。方法:选取211名河北联合大学附属医院连续收治的汉族成人(年龄≥18岁)慢性肾功能不全患者并根据血肌酐(Scr)水平分为肾功能不全组和肾功能衰竭组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)的方法检测VDR基因BsmⅠ多态性位点,对慢性肾功能不全相关的因素进行问卷调查,同时检测入院24 h内肝肾功能、血钾、钠、氯、钙、磷、甲状腺功能、血甲状旁腺激素水平,及腰椎L2～4、颈椎、Wards三角部位骨密度。用Pearson相关分析进行年龄及体质指数(BMI)与骨密度关系的研究,用协方差分析的方法比较年龄、BMI校正后各部位骨密度与VDR基因型之间的关系。结果:肾功能不全组和肾功能衰竭组VDR基因BsmⅠ多态性分布无统计学意义(χ2=0.088,P=0.591)。年龄、BMI与骨密度的Pearson相关分析发现,年龄与各部位的骨密度呈负相关(P<0.01),BMI与骨密度值呈正相关(P<0.01)。采用协方差分析对年龄与BMI进行校正后,对不同部位的骨密度值与VDR基因型相关性进行分析,发现VDR不同基因型间腰椎的骨密度值差异有统计学意义(P<0.05),aa基因型具有较低骨密度(P<0.05)。结论:VDR基因BsmⅠ位点多态性与慢性肾功能不全患者骨密度存在关联,可能是影响骨密度的遗传易感因素。 展开更多

关键词 慢性肾功能不全 VDR基因多态性 骨密度 聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析

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ApoE基因多态性与运动防治原发性骨质疏松效果的关系 被引量：2

13

作者 彭朋 陆一帆 +3 位作者 金泰庆 赵斐 张健 张勇 《天津体育学院学报》 CAS CSSCI 北大核心 2007年第3期235-238,共4页

目的:探讨不同ApoE基因型人群对适宜健骨运动处方防治原发性骨质疏松的敏感性,为制定基于基因多态性的个性化运动处方提供理论依据。方法:74名原发性骨质疏松患者按ApoE基因型随机分为ε2组、ε3组和ε4组,进行为期3个月的有氧及抗阻运... 目的:探讨不同ApoE基因型人群对适宜健骨运动处方防治原发性骨质疏松的敏感性,为制定基于基因多态性的个性化运动处方提供理论依据。方法:74名原发性骨质疏松患者按ApoE基因型随机分为ε2组、ε3组和ε4组,进行为期3个月的有氧及抗阻运动训练,双能X线骨密度吸收仪(DXA)测定运动前后骨矿含量、腰椎(L2～4)及髋部骨密度(BMD)的变化。结果:ε4组BMC运动前后的变化率高于ε2组(P<0.05);L2～4BMD运动前后无显著变化;ε4组髋部BMD运动前后的变化率显著高于ε2组(P<0.05)。结论:运动疗法防治原发性骨质疏松的效果受ApoE基因多态性的影响,其中ε4型人群通过运动疗法防治骨质疏松的效果较好。 展开更多

关键词 原发性骨质疏松 基因多态性 限制性酶切片段长度多态性 聚合酶链式反应 运动

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秦川牛TRAF6基因多态及其与体尺性状的关联分析 被引量：1

14

作者 张芷毓 欧德琼 +6 位作者 邬明丽 樊英智 高源 李世鹏 赖振雨 雷初朝 党瑞华 《中国牛业科学》 2018年第4期4-8,共5页

牛TRAF6基因位于15号染色体上,含有七个外显子,共编码902个氨基酸,是生长发育相关的候选基因。本研究旨在分析陕西地区秦川牛TRAF6基因多态及其与体尺性状之间的关系。本研究针对秦川牛TRAF6基因外显子及部分非编码序列设计引物,利用DN... 牛TRAF6基因位于15号染色体上,含有七个外显子,共编码902个氨基酸,是生长发育相关的候选基因。本研究旨在分析陕西地区秦川牛TRAF6基因多态及其与体尺性状之间的关系。本研究针对秦川牛TRAF6基因外显子及部分非编码序列设计引物,利用DNA池做为模板扩增测序,在第六内含子17 628bp处发现1个SNP。通过运用PCRRELP方法对该位点多态进行分析,结果发现存在2种基因型,分为TT和TC。TT的基因型频率为0.9574,TC的基因型频率0.0426;等位基因T的频率为0.9787,等位基因C的频率为0.0213,TT的基因型频率显著高于基因型TC,为优势基因型,TT基因型个体各体尺性状数据普遍高于TC基因型个体。本研究首次对陕西地区秦川牛的TRAF6基因进行了多态性分析,在第六内含子处发现了基因突变位点,且该突变位点与秦川牛体尺和体重等重要生长性状有关,可以作为分子标记辅助选择的参考。 展开更多

关键词 秦川牛 TRAF6基因 SNP 限制性酶切片段长度多态性 体尺性状

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肺癌分子预后分析 被引量：2

15

作者 崔永 王天佑 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第6期570-573,共4页

关键词 肺癌分期 预后分析 分子分期 限制性酶切片段长度多态性分析 逆转录聚合酶链反应 免疫组化染色技术 酶联免疫吸附实验 等位基因特异性 蛋白质水平 基因扩增

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RT-PCR检测健康猪扁桃体和流产死胎猪瘟病毒的应用及RFLP分析 被引量：14

16

作者 罗廷荣 孙敬锋 +6 位作者 莫扬 刘芳 黄伟坚 陆芹章 温荣辉 秦爱珍 余克伦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期192-195,共4页

本研究用反转录＿聚合酶链反应(RT＿PCR)技术对广西部分猪场的健康猪扁桃体材料以及流产胎儿和死胎中的猪瘟病毒(HCV)进行检测。70份健康猪扁桃体材料中阳性11份,阳性率达15 7%;52份流产胎儿及死胎材料中检出阳性9份,阳性率达17 3%。表... 本研究用反转录＿聚合酶链反应(RT＿PCR)技术对广西部分猪场的健康猪扁桃体材料以及流产胎儿和死胎中的猪瘟病毒(HCV)进行检测。70份健康猪扁桃体材料中阳性11份,阳性率达15 7%;52份流产胎儿及死胎材料中检出阳性9份,阳性率达17 3%。表明广西猪场中有比较严重的健康带毒情况。用限制性片段长度多态性分析法(RFLP)对25份阳性材料、HCLV和石门毒的引物A1/A2的PCR产物进行分析,发现HCLV、石门强毒和广西流行野毒的RT＿PCR扩增产物中均有RsaⅠ的一个识别序列,但HCLV上的识别序列所在位置不同。本研究表明,用引物A1/A2作RT＿PCR检测,并结合RFLP分析技术可把兔化弱毒和流行野毒区分开来,这将对预防猪瘟起到十分重要的作用。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 反转录-聚合酶链式反应 限制性片段长度多态性分析法

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PCR-RFLP技术及其在隐孢子虫基因分析上的应用 被引量：2

17

作者 周荣琼 李国清 +1 位作者 黄汉成 肖淑敏 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1114-1116,共3页

关键词 PCR-RFLP技术 基因分析 隐孢子虫 限制性片段长度多态性 DNA多态性 人类遗传疾病 DNA遗传标记 聚合酶链式反应 生命科学 CHAIN

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长臀AFLP分析体系的建立 被引量：1

18

作者 程飞 叶卫 +1 位作者 叶富良 刘波 《南方水产》 CAS 2007年第4期46-51,共6页

以珠江长臀(Cranoglanis bouderius)为试验材料,建立了长臀扩增酶切片段长度多态性(AFLP)分析体系,对其分析过程中的DNA提取、双酶切、单酶切、连接、预扩增、选择性扩增、银染等步骤进行了检测,并对反应条件进行了优化。用PstI/Taq... 以珠江长臀(Cranoglanis bouderius)为试验材料,建立了长臀扩增酶切片段长度多态性(AFLP)分析体系,对其分析过程中的DNA提取、双酶切、单酶切、连接、预扩增、选择性扩增、银染等步骤进行了检测,并对反应条件进行了优化。用PstI/TaqI、EcoRI/MseI等2组双酶切组合构建长臀的AFLP指纹图谱,条带清晰可辨,扩增信号强,得到清晰的长臀AFLP指纹图谱。 展开更多

关键词 长臀鮠 扩增酶切片段长度多态性(AFLP) 条件优化 DNA指纹

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应用PCR/RFLP对山东地区恙虫病东方体的基因型分析 被引量：3

19

作者 刘运喜 赵仲堂 +4 位作者 高媛 张景兰 杨占清 步秀萍 苏静静 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期425-428,共4页

目的　鉴定山东地区恙虫病东方体的基因型。方法　采用聚合酶链反应 /限制性片段长度多态性分析 (PCR/RFLP)技术对恙虫病东方体山东分离株、小盾纤恙螨匀浆及恙虫病病人全血中提取的DNASta5 6基因进行分析研究 ,并与NestedPCR基因分型... 目的　鉴定山东地区恙虫病东方体的基因型。方法　采用聚合酶链反应 /限制性片段长度多态性分析 (PCR/RFLP)技术对恙虫病东方体山东分离株、小盾纤恙螨匀浆及恙虫病病人全血中提取的DNASta5 6基因进行分析研究 ,并与NestedPCR基因分型的结果进行比较。结果　山东地区 35份标本 ( 2 3株恙虫病东方体山东分离株、2份采自黑线姬鼠体外的小盾纤恙螨匀浆及 10份恙虫病人全血 )提取的DNA群引物扩增产物经HinfⅠ、HhaⅠ、SnaBⅠ酶切后呈现 2种不同的RFLP图谱 ,经与已知序列的Ot内切酶图谱相比 :33份Ot内切酶图谱与文献报告的日本地方株—Kawasaki株具有相似的酶切图谱 ,但缺乏HhaⅠ的酶切位点 ;另 2份与Karp参考株具有相同的酶切图谱。该结果与NestedPCR基因分型的结果相一致。结论　山东地区恙虫病东方体流行株主要基因型与日本地方株Kawasaki型类似 ,但与日本地方株存在遗传差异 ;同时还有Karp型Ot存在。采用PCR/RFLP方法可以准确对Ot-Sta5 6基因分型。 展开更多

关键词 聚合酶链反应/限制性片段长度多态性分析(PCR/RFLP) 恙虫病东方体 基因型

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传染性喉气管炎病毒(ILTV)gI-gE基因的PCR-RFLP分析

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作者 何召庆 王云峰 +3 位作者 张绍杰 孟松树 童光志 黄骏明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期52-54,共3页

根据 ＵＳＤＡ（美国农业部）标准攻毒株 ＩＬＴＶ ｇＩ－ｇＥ基因的序列，在 ＩＬＴＶ ｇＩ基因、ｇＥ基因及 ｇＩ－ｇＥ基因连接部的上下游分别设计了一对引物。以 ＳＤＳ－蛋白酶 Ｋ法提取的 ８株 ＩＬＴＶ ＤＮＡ为模板，分别用这 ... 根据 ＵＳＤＡ（美国农业部）标准攻毒株 ＩＬＴＶ ｇＩ－ｇＥ基因的序列，在 ＩＬＴＶ ｇＩ基因、ｇＥ基因及 ｇＩ－ｇＥ基因连接部的上下游分别设计了一对引物。以 ＳＤＳ－蛋白酶 Ｋ法提取的 ８株 ＩＬＴＶ ＤＮＡ为模板，分别用这 ３对引物进行 ＰＣＲ扩增，均获得了与预期片段大小一致的ＤＮＡ片段。然后，用４种限制性内切酶（Ａｖａ Ⅱ、ＨｉｎｆⅠ、ＤｄｅⅠ和ＨａｅⅢ）对所有ＰＣＲ产物进行ＲＦＬＰ分析。结果发现， ＨｉｎｆⅠ和 ＤｄｅｌⅠ可以分别将 ８株 ＩＬＴＶ ｇＥ基因的酶切图谱分为两类， ＨａｅⅢ可将 ８株 ＩＬＴＶ的ｇＩ－ｇＥ基因连接部的酶切图谱分为两类。这表明不同的ＩＬＴＶ毒株的ｇＥ基因变异较大，而ｇＩ基因则相对比较保守。 展开更多

关键词 传染性喉气管炎病毒 gI-gE基因 聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析

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