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结核分枝杆菌阿拉伯糖基转移酶AftA的原核表达及鉴定
被引量：
2
1
作者
王爽
朱道银
+2 位作者
帖儒修
李娜
王渝伟
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期400-403,共4页
目的构建高效表达菌株,以大量表达结核分枝杆菌AftA蛋白,为后续的抗结核药物的筛选奠定基础。方法采用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出AftA的基因片段,将其插入原核表达质粒PQE30,构建重组质粒PQE30-aftA。将PQE30-aftA转化...
目的构建高效表达菌株,以大量表达结核分枝杆菌AftA蛋白,为后续的抗结核药物的筛选奠定基础。方法采用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出AftA的基因片段,将其插入原核表达质粒PQE30,构建重组质粒PQE30-aftA。将PQE30-aftA转化大肠杆菌,用IPTG诱导目的基因表达。Western-blotting免疫印迹法鉴定后纯化该表达产物。结果经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功构建了重组质粒PQE30-aftA。在大肠杆菌M15中用IPTG诱导表达后,获得了AftA蛋白。蛋白经SDS-PAGE分析约为69.5kD。免疫印迹分析证实目的蛋白与阳性结核病患者抗血清产生特异性反应。结论成功制备出重组的AftA蛋白,为新型抗结核药物的筛选奠定了物质基础。
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关键词
结核分枝杆菌
阿拉伯糖基转移酶
aftA基因
原核表达
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职称材料
题名
结核分枝杆菌阿拉伯糖基转移酶AftA的原核表达及鉴定
被引量：
2
1
作者
王爽
朱道银
帖儒修
李娜
王渝伟
机构
重庆医科大学免疫学教研室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期400-403,共4页
文摘
目的构建高效表达菌株,以大量表达结核分枝杆菌AftA蛋白,为后续的抗结核药物的筛选奠定基础。方法采用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出AftA的基因片段,将其插入原核表达质粒PQE30,构建重组质粒PQE30-aftA。将PQE30-aftA转化大肠杆菌,用IPTG诱导目的基因表达。Western-blotting免疫印迹法鉴定后纯化该表达产物。结果经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功构建了重组质粒PQE30-aftA。在大肠杆菌M15中用IPTG诱导表达后,获得了AftA蛋白。蛋白经SDS-PAGE分析约为69.5kD。免疫印迹分析证实目的蛋白与阳性结核病患者抗血清产生特异性反应。结论成功制备出重组的AftA蛋白,为新型抗结核药物的筛选奠定了物质基础。
关键词
结核分枝杆菌
阿拉伯糖基转移酶
aftA基因
原核表达
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
arabinofuranosyltransferase
αftA genelprokaryotic expression
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
结核分枝杆菌阿拉伯糖基转移酶AftA的原核表达及鉴定
王爽
朱道银
帖儒修
李娜
王渝伟
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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