猪圆环病毒3型Cap蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA检测方法的建立 被引量：1

1

作者 张宝戈 黄雅琴 +2 位作者 蔡金双 朱晨光 李玉峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1170-1178,共9页

旨在建立检测猪圆环病毒3型(PCV3)抗体的阻断ELISA方法,本研究利用原核表达的PCV3Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备获得了一株分泌阻断效果良好抗体的杂交瘤细胞株2E6。以重组Cap蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的2E6单克隆... 旨在建立检测猪圆环病毒3型(PCV3)抗体的阻断ELISA方法,本研究利用原核表达的PCV3Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备获得了一株分泌阻断效果良好抗体的杂交瘤细胞株2E6。以重组Cap蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的2E6单克隆抗体作为检测抗体,经条件优化后建立了一种检测PCV3抗体的阻断ELISA方法。用建立的阻断ELISA方法检测50份临床阴性血清,计算阻断率(PI)的临界值,以此来确定该方法的判定标准:当PI≤28.30%时,判定结果为阴性;当PI≥35.05%时,判定结果为阳性;当28.30%<PI<35.05%时,判定为可疑,重复一次试验后如果结果仍为可疑,则判定为阳性。特异性试验表明该方法与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)以及猪瘟病毒(CSFV)的阳性血清均无交叉反应;敏感性试验表明其检测效价可达到1:128;重复性试验表明批内与批间的变异系数均小于10%;符合性检验表明该方法与PCV检测金标准免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)比对的Kappa值达0.9,具有高度的一致性。综上所述,本研究建立的阻断ELISA方法具有良好的特异性与较高的符合率,可用于后期进行PCV3抗体的检测,为PCV3的流行病学调查与临床诊断提供技术支持。 展开更多

关键词 猪圆环病毒3型 Cap重组蛋白 单克隆抗体 阻断elisa

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液相阻断ELISA在口蹄疫病毒抗体水平检测中的应用 被引量：19

2

作者 刘俊林 祁淑芸 +1 位作者 马军武 崔燕 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第3期18-20,共3页

分别利用口蹄疫病毒Asia-I型和O型液相阻断ELISA方法,对健康猪、牛、羊血清,O型、Asia-I型免疫血清,以及人工感染Asia-I型FMDV的猪、羊血清和人工感染O型FMDV牛血清进行了抗体水平检测,同时利用3ABC-I-ELISA对液相阻断ELISA方法所选的... 分别利用口蹄疫病毒Asia-I型和O型液相阻断ELISA方法,对健康猪、牛、羊血清,O型、Asia-I型免疫血清,以及人工感染Asia-I型FMDV的猪、羊血清和人工感染O型FMDV牛血清进行了抗体水平检测,同时利用3ABC-I-ELISA对液相阻断ELISA方法所选的部分阴性血清进行了验证试验.结果显示:利用Asia-I型和O型液相阻断ELISA方法筛选的阴性动物,在免疫和攻毒后,血清抗体水平显著升高,表明该法可完全用于口蹄疫阴性动物筛选及口蹄疫病毒抗体水平的检测. 展开更多

关键词 口蹄疫 抗体水平 液相阻断elisa

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新霉素阻断ELISA试剂盒的研制与应用 被引量：5

3

作者 王爱萍 李发弟 +6 位作者 胡骁飞 曾巧英 李金录 郭艳丽 赵启法 陈玉梅 范璐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期857-864,共8页

本研究旨在建立新霉素(Neomycin,NEO)免疫学检测试剂盒。以制备的抗NEO单克隆抗体(NEO mAb)为基础,建立阻断ELISA分析方法,组装新霉素阻断ELISA试剂盒,并对试剂盒的性能进行鉴定。结果表明,NEO试剂盒(NEO-kit)标准曲线呈典型的S型,符合... 本研究旨在建立新霉素(Neomycin,NEO)免疫学检测试剂盒。以制备的抗NEO单克隆抗体(NEO mAb)为基础,建立阻断ELISA分析方法,组装新霉素阻断ELISA试剂盒,并对试剂盒的性能进行鉴定。结果表明,NEO试剂盒(NEO-kit)标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.990 3;检测范围为1.0～64.0μg.L-1,半数抑制浓度(IC50)为2.59μg.L-1,灵敏度为0.75μg.L-1,检测限为1.0μg.L-1。试剂盒除了和NEO阳性样品反应呈阳性外,与庆大霉素、链霉素、土霉素、沙丁胺醇、环丙沙星、二氟沙星、磺胺嘧啶及磺胺甲噁唑等其他药物均无交叉反应性。奶样、饲料样及肉样的平均添加回收率为89.50%、89.58%和87.92%;平均批内和批间变异系数均小于15%,而且批间变异系数小于批内变异系数;基质对NEO-Kit的检测结果影响比较小;NEO-Kit在4℃可保存6个月以上。试剂盒和HPLC-MS-MS对牛奶中新霉素回收率没有显著差异(P≥0.05)。试剂盒和HPLC-MS-MS对饲料样检测结果也无显著差异(P≥0.05)。本研究成功研制出敏感、特异、准确的NEO检测试剂盒。 展开更多

关键词 新霉素 单克隆抗体 阻断elisa 试剂盒

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监测口蹄疫抗体的液相阻断ELISA法的改进和体会 被引量：4

4

作者 孙燕 黄洪英 +4 位作者 骆璐 董春霞 杨泽林 曾政 熊仲良 《中国动物检疫》 CAS 2012年第4期58-60,共3页

液相阻断ELISA(LBE)法由于具有高度的敏感性、特异性和重复性,目前被广泛应用于动物免疫抗体效果监测实践工作中,特别是为防控牛、羊亚洲I型口蹄疫(FMD)做出了积极的贡献。但该方法操作繁琐,稍有不慎就会导致实验结果发生偏差或试验失败... 液相阻断ELISA(LBE)法由于具有高度的敏感性、特异性和重复性,目前被广泛应用于动物免疫抗体效果监测实践工作中,特别是为防控牛、羊亚洲I型口蹄疫(FMD)做出了积极的贡献。但该方法操作繁琐,稍有不慎就会导致实验结果发生偏差或试验失败,笔者就该方法应用于亚I型口蹄疫抗体检测中的改进和体会作一总结。 展开更多

关键词 口蹄疫 液相阻断elisa 免疫抗体

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猪嗜血支原体酶标单抗阻断ELISA检测方法的建立 被引量：3

5

作者 张长莹 李玉峰 姜平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1591-1597,共7页

为确定猪嗜血支原体(M.suis)在临床的感染情况和进行流行病学调查提供检测方法,本研究以纯化的猪嗜血支原体重组MSG1蛋白和辣根过氧化酶标记的MSG1蛋白单抗建立了检测猪嗜血支原体的阻断ELISA方法。经筛选确定,抗原最佳包被浓度为0.5μg... 为确定猪嗜血支原体(M.suis)在临床的感染情况和进行流行病学调查提供检测方法,本研究以纯化的猪嗜血支原体重组MSG1蛋白和辣根过氧化酶标记的MSG1蛋白单抗建立了检测猪嗜血支原体的阻断ELISA方法。经筛选确定,抗原最佳包被浓度为0.5μg.mL-1,待检血清最佳稀释度为1∶1,作用时间为37℃1.5h,酶标单抗最佳稀释度为1∶10 000,作用时间为37℃1h。通过对100份M.suis阴性血清阻断ELISA检测结果进行统计学分析,确定本方法的判定标准为当阻断率PI≥23.71%时判为阳性,PI≤36.35%时判为阴性,23.71%<PI<36.36%时判为可疑。敏感性、特异性和重复性试验证明该检测方法敏感性高、特异性强、可重复性好,可用于M.suis流行病学调查和疾病诊断。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 MSG1蛋白 酶标单抗 阻断elisa

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非洲猪瘟病毒CD2v蛋白阻断ELISA候选单克隆抗体的筛选及免疫学特性鉴定 被引量：2

6

作者 王彩霞 史喜菊 +7 位作者 冯春燕 于浩洋 仇松寅 刘晓飞 陈冬杰 贾红 吴绍强 林祥梅 《中国动物检疫》 CAS 2023年第7期95-102,共8页

为制备非洲猪瘟病毒CD2v蛋白阻断ELISA候选单克隆抗体,并探究其免疫学特性,以真核表达的CD2v蛋白免疫BALB/c小鼠,经两次免疫后采集小鼠血清,以间接ELISA检测小鼠多抗血清效价。对血清效价最高的小鼠进行加强免疫后,取脾脏进行细胞融合... 为制备非洲猪瘟病毒CD2v蛋白阻断ELISA候选单克隆抗体,并探究其免疫学特性,以真核表达的CD2v蛋白免疫BALB/c小鼠,经两次免疫后采集小鼠血清,以间接ELISA检测小鼠多抗血清效价。对血清效价最高的小鼠进行加强免疫后,取脾脏进行细胞融合。通过有限稀释法筛选能够稳定分泌CD2v单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用小鼠体内诱生腹水法和辛酸-硫酸铵法获得纯化的CD2v单克隆抗体,对其进行免疫学特性检测。间接ELISA试验显示,4号小鼠血清效价最高(1:72900),选取该小鼠脾脏进行细胞融合,经过筛选得到4株杂交瘤细胞,分别命名为21D10、21G8、36A3和38G8,亚型鉴定均为IgG_(1)/κ,经检测36A3 ELISA效价最高,可达1:2.187×10^(5)。免疫荧光试验显示,36A3抗体能与细胞内表达的CD2v蛋白发生特异性反应,而与携带His标签的p30蛋白无交叉反应;特异性鉴定结果显示,36A3抗体特异性良好,与猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒以及非洲猪瘟病毒p72蛋白均无反应;亲和力检测显示,36A3抗体亲和力较高,亲和常数(Ka)为9.68×10^(8)L/mol。初步建立的阻断ELISA试验显示,36A3能够有效区分阴阳性血清,N/P高达12.53,提示其为非常有效的阻断ELISA候选抗体。本试验结果为深入研究非洲猪瘟病毒CD2v蛋白功能及研发非洲猪瘟病毒阻断ELISA血清学检测试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 CD2v蛋白 动物免疫 单克隆抗体 阻断elisa

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阻断ELISA与中和试验检测猪瘟疫苗免疫猪血清抗体的比较 被引量：11

7

作者 李素 李尚波 +3 位作者 王文成 苗玉和 马振宇 马秀玲 《动物医学进展》 CSCD 2007年第10期40-43,共4页

应用阻断ELISA和中和试验2种不同的方法对猪瘟疫苗免疫前后的猪血清抗体进行了检测,在所检测的6头仔猪免疫前和免疫后的12份血清中,2种方法的检测结果相符。应用Western blot对部分血清进行了验证,结果与2种方法检测结果一致,表明阻断EL... 应用阻断ELISA和中和试验2种不同的方法对猪瘟疫苗免疫前后的猪血清抗体进行了检测,在所检测的6头仔猪免疫前和免疫后的12份血清中,2种方法的检测结果相符。应用Western blot对部分血清进行了验证,结果与2种方法检测结果一致,表明阻断ELISA和中和试验结果确实、特异,能真实反映免疫猪群的抗体水平。 展开更多

关键词 猪瘟疫苗 抗体 阻断elisa 中和试验

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口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒与其改进型试剂盒的比对试验 被引量：2

8

作者 梁素联 王金含 +2 位作者 黄丽娟 黄婵娟 廖跟东 《中国动物保健》 2021年第6期108-109,共2页

为了评估田东县动物疫病预防控制中心兽医实验室检验质量,了解同一检测项目不同检测试剂盒检验结果的差异情况,实验室于2020年11月25日进行了口蹄疫O型抗体检测试剂盒比对试验。目的在于检验口蹄疫O型抗体不同检测试剂盒对检验结果的影... 为了评估田东县动物疫病预防控制中心兽医实验室检验质量,了解同一检测项目不同检测试剂盒检验结果的差异情况,实验室于2020年11月25日进行了口蹄疫O型抗体检测试剂盒比对试验。目的在于检验口蹄疫O型抗体不同检测试剂盒对检验结果的影响及敏感度,以及时发现存在问题,解决问题,不断提高实验室检测能力水平。 展开更多

关键词 口蹄疫O型抗体液相阻断elisa检测试剂盒 改进型口蹄疫病毒O型液相阻断elisa抗体检测试剂盒 比对试验

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猪流行性腹泻病毒N蛋白阻断ELISA抗体检测方法的建立及初步应用 被引量：8

9

作者 万颖 周改静 +9 位作者 麻园 石正旺 肖书奇 罗俊聪 宋锐 曹丽艳 杨波 王丽娟 田宏 郑海学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1173-1181,共9页

旨在建立一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白阻断ELISA抗体检测方法。本研究将纯化的N蛋白作为包被抗原,通过棋盘滴定法优化ELISA反应条件,建立了检测PEDV抗体的阻断ELISA方法,并对其进行特异性、敏感性和重复性试验。对140份临床血清样... 旨在建立一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白阻断ELISA抗体检测方法。本研究将纯化的N蛋白作为包被抗原,通过棋盘滴定法优化ELISA反应条件,建立了检测PEDV抗体的阻断ELISA方法,并对其进行特异性、敏感性和重复性试验。对140份临床血清样品进行检测,并将检测结果与市售IDvet PEDV间接ELISA抗体检测试剂盒试剂盒进行比较。结果显示,建立的阻断ELISA方法的抗原最佳包被浓度为625 ng·mL^(-1),血清最佳稀释比例为1∶1;酶标抗体的最佳工作浓度为1∶5000;检测健康猪血清以及猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)等常见猪病病原的阳性血清,均无交叉反应;PEDV阳性血清的灵敏度为1∶16,与市售IDvet PEDV间接ELISA抗体检测试剂盒(效价1∶32)的敏感性相当;批内、批间重复性试验的变异系数均小于10%,说明具有良好的重复性和稳定性;对140份临床血清样品的检测并与商品化试剂盒检测结果进行比较,两者的kappa值为0.87,为高度一致。综上表明,本研究建立的阻断ELISA抗体检测方法可以应用于PEDV的防控、流行病学调查以及疫苗免疫后抗体水平的监测。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 抗体检测 阻断elisa

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非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA抗体检测方法的建立 被引量：8

10

作者 周改静 罗俊聪 +6 位作者 石正旺 万颖 杨波 曹丽艳 宋锐 田宏 郑海学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期4337-4345,共9页

为建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的阻断ELISA方法,本研究利用原核表达的ASFV p30重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体。以重组p30蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的p30单克隆抗体作为检测抗体,经条件优化,建立了一种检... 为建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的阻断ELISA方法,本研究利用原核表达的ASFV p30重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体。以重组p30蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的p30单克隆抗体作为检测抗体,经条件优化,建立了一种检测ASFV抗体的阻断ELISA方法。ROC曲线分析显示,该方法最佳阻断率临界值为16.63%。该方法与CSFV、FMDV-O/A、PRRSV、PEDV、SVA的阳性血清均无交叉反应;最低能检出1∶128稀释的阳性血清;批内和批间变异系数(CV)均<10%。用本方法与商品化试剂盒平行检测208份血清样品,Kappa值为0.96,表明具有高度一致性。上述结果表明,本研究建立的阻断ELISA方法具有较高的特异性和敏感性,可用于血清ASFV抗体的检测,为ASFV流行病学调查及猪群疫情监控提供技术支持。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 p30蛋白 单克隆抗体 阻断elisa

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一种检测乙型脑炎病毒抗体阻断ELISA的建立及其初步应用 被引量：2

11

作者 江雅 牛季琛 +3 位作者 倪慧 韦冬妹 周国栋 曹瑞兵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1961-1968,共8页

流行性乙型脑炎是由日本脑炎病毒(JEV)引起的蚊媒传播人畜共患传染病,严重危害人类和猪、马等动物的健康。为建立检测多种动物血清中JEV抗体的ELISA,应用重组囊膜蛋白和辣根过氧化物酶标记的JEV单克隆抗体建立了检测JEV抗体的阻断ELISA... 流行性乙型脑炎是由日本脑炎病毒(JEV)引起的蚊媒传播人畜共患传染病,严重危害人类和猪、马等动物的健康。为建立检测多种动物血清中JEV抗体的ELISA,应用重组囊膜蛋白和辣根过氧化物酶标记的JEV单克隆抗体建立了检测JEV抗体的阻断ELISA。结果显示:通过对100份JEV抗体阴性猪血清的检测结果进行统计学分析,确定阻断ELISA的判定标准:阻断率(PI)≥34%时判定为阳性,PI≤25%时判定为阴性,25%<PI<34%时判定为可疑。该阻断ELISA与其他常见猪病毒病抗体阳性血清无交叉反应;批内和批间重复试验的变异系数均小于5%;与商品化ELISA试剂盒的对比检测表明,敏感性为98.5%、特异性为94.3%,两者的符合率为97.2%。应用该阻断ELISA对临床收集的猪、牛和羊共515份血清样品进行检测,JEV抗体阳性检出率分别为74.5%、13.3%和9.2%,抽样的血清中和试验结果与阻断ELISA检测结果的符合率为100%(9/9)。本研究成功建立了可适用于猪、牛和羊临床血清JEV抗体检测的阻断ELISA方法。 展开更多

关键词 日本脑炎病毒 囊膜蛋白 酶标单抗 阻断elisa

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非洲猪瘟病毒p72蛋白阻断ELISA检测方法的建立 被引量：3

12

作者 张路捷 高雁怩 +2 位作者 夏婷婷 白娟 姜平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1509-1516,共8页

本研究旨在建立一种非洲猪瘟病毒(ASFV)p72蛋白阻断ELISA抗体检测方法。以纯化的重组p72蛋白作为包被抗原,HRP标记的6E5抗体作为阻断抗体,通过对反应条件进行优化,建立了基于ASFV p72蛋白的阻断ELISA方法。用建立的阻断ELISA方法检测11... 本研究旨在建立一种非洲猪瘟病毒(ASFV)p72蛋白阻断ELISA抗体检测方法。以纯化的重组p72蛋白作为包被抗原,HRP标记的6E5抗体作为阻断抗体,通过对反应条件进行优化,建立了基于ASFV p72蛋白的阻断ELISA方法。用建立的阻断ELISA方法检测119份临床阴性血清,计算血清阻断率确定临界值,确定了该方法的判定标准:当阻断率PI≥50%时判定为ASFV抗体阳性;PI≤40%时判定为ASFV抗体阴性;当阻断率介于两者之间时,判定为可疑。该方法与猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、A型塞内卡病毒、猪口蹄疫病毒、猪大肠杆菌、猪多杀性巴氏杆菌、副猪格拉瑟菌和猪胸膜肺炎放线杆菌的抗体阳性血清无交叉反应,批间、批内试验的变异系数均小于15%。用该方法与商品化ASFV抗体检测试剂盒同时检测447份猪临床血清样品,两种方法的相对敏感性和相对特异性分别为95.3%和94.5%,符合率为94.9%。本研究建立的阻断ELISA方法具有较高的敏感性和良好的特异性,可用于ASFV感染诊断和流行病学调查。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 p72蛋白 单克隆抗体 阻断elisa

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非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA方法的建立 被引量：5

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作者 徐玲玉 曹琛福 +4 位作者 李中圣 陈俊宏 柳腾飞 王新凯 贾伟新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期813-821,共9页

旨在建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)血清抗体的阻断ELISA方法。采用原核表达的ASFV p54蛋白作为包被抗原,并制备了针对p54蛋白的单克隆抗体,采用方阵滴定法确定了阻断ELISA方法的最佳反应条件,并对建立的方法进行了敏感性、特异性、重复性... 旨在建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)血清抗体的阻断ELISA方法。采用原核表达的ASFV p54蛋白作为包被抗原,并制备了针对p54蛋白的单克隆抗体,采用方阵滴定法确定了阻断ELISA方法的最佳反应条件,并对建立的方法进行了敏感性、特异性、重复性和符合性评价。结果显示,抗原最佳包被浓度为2.0μg·mL^(-1),抗原包被温度及时间为4℃过夜,被检血清稀释度为1∶40,酶标单抗稀释度为1∶1000,被检血清作用时间为1 h,酶标单抗作用时间为30 min,底物作用时间为10 min。经阴、阳性样品检测和特异性、敏感性试验,当临界值阻断率≥55.2%时,判定为阳性,当阻断率<43.4%时,判定为阴性,介于两者之间判定为可疑。该方法与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、口蹄疫病毒、猪流感病毒、猪伪狂犬病病毒阳性血清不发生交叉反应,特异性好。批内重复试验及批间重复试验的变异系数(CV)均在10%以内。将该方法进行初步应用,并与商品化ELISA试剂盒进行符合性试验,两者的检测符合率为98%。综上表明,建立的阻断ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于ASFV临床样品的抗体检测。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 ASFV 阻断elisa p54蛋白 单克隆抗体

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口蹄疫病毒O型抗体液相阻断ELISA试验的测量不确定度评估 被引量：6

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作者 杜鹃 《中国动物检疫》 CAS 2018年第4期82-87,共6页

为探索一种较为合理的兽医实验室ELISA试验的测量不确定度评估模式,应用液相阻断ELISA试验方法,对口蹄疫O型抗体进行检测,依据《测量不确定度评定与表示》(JJF1059.1—2012),分析试验的不确定来源并评定各分量的标准不确定度、合成标准... 为探索一种较为合理的兽医实验室ELISA试验的测量不确定度评估模式,应用液相阻断ELISA试验方法,对口蹄疫O型抗体进行检测,依据《测量不确定度评定与表示》(JJF1059.1—2012),分析试验的不确定来源并评定各分量的标准不确定度、合成标准不确定度和扩展不确定度。结果显示:最终cutoff临界值与样品判定浓度的OD_(450 mm)值的比值为1.390,U=0.221(k=2);测量不确定度的加入提升了测量结果的可信度,并有效降低了假阳性、假阴性出现的风险;分析不确定度各分量对测量结果的相对贡献,可以找出影响检测质量的主要因素,从而有利于实验室的质量控制和检测质量的提高。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒O型 液相阻断elisa 测量不确定度

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流行性出血病病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒的研制

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作者 董仙兰 王琼 +10 位作者 韩佃刚 董俊 杨云庆 祝贺 叶玲玲 张冲 尹尚莲 李瑶瑶 何昌霖 罗倩敏 艾军 《中国动物检疫》 CAS 2021年第10期92-97,共6页

为研制流行性出血病病毒(epidemic hemorrhagic disease virus,EHDV)ELISA抗体检测试剂盒,用饱和硫酸铵浓缩EHDV灭活病毒作为包被抗原,以EHDV鼠源单克隆抗体作为阻断抗体,商品化的IgG-HRP羊抗鼠二抗作为检测抗体,通过优化检测试剂中各... 为研制流行性出血病病毒(epidemic hemorrhagic disease virus,EHDV)ELISA抗体检测试剂盒,用饱和硫酸铵浓缩EHDV灭活病毒作为包被抗原,以EHDV鼠源单克隆抗体作为阻断抗体,商品化的IgG-HRP羊抗鼠二抗作为检测抗体,通过优化检测试剂中各组分含量和反应程序,建立了一种EHDV阻断ELISA抗体检测方法。用研制的试剂盒与ID Screen参考试剂盒分别检测实验室保存的血清样本,结果发现该方法的特异性、敏感性与ID Screen参考试剂盒一致,二者符合率为97.00%。结果表明,研制的EHDV阻断ELISA抗体检测试剂盒可作为EHDV抗体检测的候选试剂盒,代替国外试剂盒使用,从而降低EHDV检测成本,这对该病防控具有重要意义。 展开更多

关键词 流行性出血病病毒 单克隆抗体 阻断elisa

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口蹄疫O型液相阻断ELISA免疫抗体检测方法的应用 被引量：7

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作者 胡珊莲 《浙江畜牧兽医》 2015年第1期3-5,共3页

应用液相阻断ELISA试验方法检测上海光明荷斯坦牧业有限公司牧场牛群经口蹄疫O型灭活疫苗免疫的奶牛血清样品2412份。经检测,2412份样品中规模奶牛场牛群免疫抗体滴度≤1∶64样品42份,抗体滴度≥1∶128样品2370份,抗体保护率为98%。

关键词 液相阻断elisa O型口蹄疫 抗体检测 奶牛

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用抗传染性法氏囊病毒单克隆抗体建立夹心阻断ELISA检测鸡血清抗体及初步应用 被引量：5

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作者 朱红 《动物科学与动物医学》 2000年第5期51-52,共2页

用酶标记抗传染性法氏囊病毒 (IBDV)单克隆抗体 ,建立夹心阻断 EL ISA,检测 IBDV鸡血清抗体。用 D78细胞毒免疫 2 4日龄的雏鸡 ,每周采血一次 ,共 4次 ,用夹心阻断 EL ISA、微量细胞中和试验(VN)、琼脂扩散试验 (AGP)检测鸡血清抗体 ,... 用酶标记抗传染性法氏囊病毒 (IBDV)单克隆抗体 ,建立夹心阻断 EL ISA,检测 IBDV鸡血清抗体。用 D78细胞毒免疫 2 4日龄的雏鸡 ,每周采血一次 ,共 4次 ,用夹心阻断 EL ISA、微量细胞中和试验(VN)、琼脂扩散试验 (AGP)检测鸡血清抗体 ,结果表明 :夹心阻断 EL ISA同 VN之间具有较高的相关性 (r=0 .812 6 ) ,与 AGP的相关性较低 (r=0 X.75 75 ) 展开更多

关键词 IBDV 单克隆抗体 夹心阻断elisa 鸡

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外调猪、牛和羊口蹄疫液相阻断ELISA免疫抗体检测方法的改进和应用 被引量：3

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作者 张雁 邢作志 《国外畜牧学（猪与禽）》 2019年第12期50-52,共3页

因具有较高的敏感性和重复性,口蹄疫液相阻断酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)抗体检测方法已被广泛应用于牛、羊和猪等动物免疫抗体效果监测工作中。但是,由于甘肃省甘州区的猪、牛和羊等动物饲养量大,调出... 因具有较高的敏感性和重复性,口蹄疫液相阻断酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)抗体检测方法已被广泛应用于牛、羊和猪等动物免疫抗体效果监测工作中。但是,由于甘肃省甘州区的猪、牛和羊等动物饲养量大,调出调入频繁,所以当地的检测工作量大,口蹄疫试剂盒用量也大。因此,为了节约成本,提高工作效率,我们对液相阻断ELISA免疫抗体检测方法进行了改进。 展开更多

关键词 液相阻断elisa 外调动物 抗体检测 节约成本

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口蹄疫病毒3ABC单抗阻断ELISA抗体检测方法应用 被引量：2

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作者 胡珊莲 王传蓉 《浙江畜牧兽医》 2018年第2期48-48,共1页

根据新型口蹄疫疫苗生产工艺,用灭活疫苗免疫的动物不会产生病毒非结构蛋白3ABC抗体。因此,采用口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC单抗阻断ELISA试验,可以区分免疫抗体与自然感染抗体。1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物随机抽取基地牧场3-4... 根据新型口蹄疫疫苗生产工艺,用灭活疫苗免疫的动物不会产生病毒非结构蛋白3ABC抗体。因此,采用口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC单抗阻断ELISA试验,可以区分免疫抗体与自然感染抗体。1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物随机抽取基地牧场3-4月龄经过口蹄疫灭活三价疫苗免疫健康犊牛30-40头。1.1. 展开更多

关键词 单抗阻断elisa 抗体检测方法 口蹄疫病毒 elisa试验 非结构蛋白 应用 疫苗免疫 实验动物

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2种口蹄疫O型抗体阻断ELISA检测试剂盒应用比较 被引量：2

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作者 朱爱发 《现代农业科技》 2021年第6期197-198,共2页

为评估2种常用口蹄疫O型抗体检测试剂盒的性能差异,对2020年春季随机抽检的3家规模养殖场提供的60份猪血清分别用液相阻断ELISA试剂盒和抗体阻断(固相)ELISA试剂盒进行了检测,并比较了2种试剂盒的阳性检出率和符合率。结果表明,2种方法... 为评估2种常用口蹄疫O型抗体检测试剂盒的性能差异,对2020年春季随机抽检的3家规模养殖场提供的60份猪血清分别用液相阻断ELISA试剂盒和抗体阻断(固相)ELISA试剂盒进行了检测,并比较了2种试剂盒的阳性检出率和符合率。结果表明,2种方法检测结果总符合率为91.67%,符合程度高。在基层畜牧兽医部门日常定性检测中,推荐使用抗体阻断(固相)ELISA检测试剂盒。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 液相阻断elisa 抗体阻断(固相)elisa 检测试剂盒 符合率

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