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牲畜链霉菌(Streptomyces cattleya)thienamycin合成阻断变株的筛选、阻断部位的确定及变株原生质体的研究 被引量:1
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作者 李戎锋 王以光 《中国抗生素杂志》 CSCD 北大核心 1996年第2期89-93,共5页
以thienamycin(TNM)产生菌S.cattleya为出发菌株,利用终浓度为1.5mg/ml强诱变剂亚硝基胍在pH9.0、37℃条件下对其孢子悬液处理30min,得到稳定的TNM生物合成阻断变株Y_3。纸层析... 以thienamycin(TNM)产生菌S.cattleya为出发菌株,利用终浓度为1.5mg/ml强诱变剂亚硝基胍在pH9.0、37℃条件下对其孢子悬液处理30min,得到稳定的TNM生物合成阻断变株Y_3。纸层析后进行茚三酮显迹和生物显迹表明Y_3变株积累一种无活性中间产物,其迁移率不同于TNM。建立了Y_3变株中间产物的分离纯化方法。酸水解和氨基酸组分分析表明Y_3中间产物为谷氨酸和丙氨酸组成的二肽,可能是形成碳青霉烯双环母核的底物,提示丙氨酸可能也是TNM的前体,Y_3变株阻断在形成碳青霉烯双环母核的环化步骤。Y_3变株具有较高的原生质体形成率和再生率。原生质体在40℃进行处理可以在不影响再生率的前题下提高DNA转化率。通过以上研究建立了以Y_3变株为宿主的TNM环化酶基因克隆受体系统。 展开更多
关键词 牲畜链霉菌 阻断变株 原生质体 thienamycin
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安普霉素生物合成途径的研究 被引量:11
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作者 李相丰 何建勇 +2 位作者 田威 韩果红 白秀峰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期97-100,共4页
安普霉素产生菌黑暗链霉菌 (S.tenebrarius) 1- 16经亚硝酸胍 (NTG)、硫酸二乙酯 (DES)诱变筛选获得了生物合成阻断变株。微生物转化实验结果表明 2 -脱氧链霉胺 (2 - DOS)、巴龙霉胺和安普霉胺是安普霉素生物合成的中间体。阻断变株共... 安普霉素产生菌黑暗链霉菌 (S.tenebrarius) 1- 16经亚硝酸胍 (NTG)、硫酸二乙酯 (DES)诱变筛选获得了生物合成阻断变株。微生物转化实验结果表明 2 -脱氧链霉胺 (2 - DOS)、巴龙霉胺和安普霉胺是安普霉素生物合成的中间体。阻断变株共合成实验结果明确了各阻断变株阻断位点间的关系及上述中间体在安普霉素生物合成中的衍生次序。依据以上实验结果 ,我们提出了安普霉素可能的生物合成途径。 展开更多
关键词 安普霉素 阻断变株 生物合成途径 抗生素 微生物转化
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新型抗肿瘤抗生素C1027生物合成相关基因克隆的研究
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作者 刘文 李元 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期166-169,共4页
C1027是由球孢链霉菌(Streptomycesglobisparus)C1027产生的一种新型大分子肽类抗肿瘤抗生素。以pIJ702为载体,变青链霉菌(S.lividans)TK54为宿主,建立球孢链霉菌C102... C1027是由球孢链霉菌(Streptomycesglobisparus)C1027产生的一种新型大分子肽类抗肿瘤抗生素。以pIJ702为载体,变青链霉菌(S.lividans)TK54为宿主,建立球孢链霉菌C1027总DNA的随机克隆文库。以C1027阻断变株AF40和AF44为互补对象,分别与随机克隆文库中的重组菌株进行共培养,经过抗菌和抗瘤活性检测,发现重组菌株No.28与阻断变株AF44,重组菌株No.74、No.101与阻断变株AF40分别进行共培养能恢复变株的生物活性,并且SDS-PAGE结果显示:变株辅基蛋白的分泌得以恢复,证明重组质粒pIJ28、pIJ74和pIJ101所含插入片段与C1027生物合成相关。重组菌株No.74和阻断变株AF40的共培养产物经纯化以后。 展开更多
关键词 辅基蛋白 发色团 互补 阻断变株 重组菌 共培养 生物合成 抗肿瘤抗生素
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