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肝窦内皮细胞通过间充质转换调控肝纤维化的分子作用机制及药物预测
1
作者 蒋蕊竹 郑洋 +4 位作者 汪磊 张荣武 王佳慧 廖喜琳 陈琼 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第7期55-71,共17页
目的通过生物信息学、机器学习和细胞实验,探究肝窦内皮细胞(LSECs)经间充质转换(EnMT)调控肝纤维化的分子机制,并预测天然活性成分。方法获取肝纤维化(HF)与EnMT基因矩阵,Limma差异分析与WGCNA共表达网络分析后,提取交集基因,进行富集... 目的通过生物信息学、机器学习和细胞实验,探究肝窦内皮细胞(LSECs)经间充质转换(EnMT)调控肝纤维化的分子机制,并预测天然活性成分。方法获取肝纤维化(HF)与EnMT基因矩阵,Limma差异分析与WGCNA共表达网络分析后,提取交集基因,进行富集分析。结合随机森林、SVM-RFE和网络拓扑分析,筛选诊断基因,进行免疫浸润分析和天然活性成分预测,最后通过细胞实验对诊断基因的表达情况和预测成分的药理效果进行验证。结果差异分析得到EnMT相关差异基因3034个,HF相关差异基因4133个;WGCNA分析得到EnMT Hub基因4589个,HF Hub基因763个,提取到38个交集基因,主要富集于基底膜、ECM受体相互作用等机制上。多维度分析筛选出CFP、COL4A2、ITGA1和GRPEL1作为诊断基因。免疫浸润分析显示诊断基因与肥大细胞静息状态、记忆B细胞及记忆CD4+T细胞间密切相关。RT-PCR结果表明,在Jagged1诱导的模型组中,4个诊断基因的mRNA表达均显著增加(P<0.05)。预测成分谷甾醇、山奈酚和槲皮素与诊断基因间均具有良好的结合活性。ELISA实验进一步证实,3种活性成分均能显著降低Jagged1诱导LSECs中COL4A2蛋白的表达,以槲皮素的作用最为显著(P<0.01)。结论本研究阐述了肝窦内皮细胞通过间充质转换参与肝纤维化病理进程的分子机制,提出以CFP、COL4A2、ITGA1和GRPEL1为核心的诊断标志物体系,发现槲皮素等天然活性成分能够通过靶向诊断基因,发挥抗肝纤维化的药理作用。 展开更多
关键词 间充质转换 肝纤维化 机器学习 药物预测
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加味补阳还五汤抑制腹膜间皮细胞上皮-间充质转换防治术后腹腔粘连的实验研究 被引量：4
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作者 郑敏麟 范文江 +1 位作者 王亚楠 詹倩倩 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第6期1458-1470,共13页
目的探讨加味补阳还五汤治疗术后腹腔粘连(Postoperative abdominal adhesions,PAA)的疗效和机制。方法将108只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、透明质酸钠组、加味补阳还五汤组。模型组、透明质酸钠组及加味补阳还五汤组进行PAA模... 目的探讨加味补阳还五汤治疗术后腹腔粘连(Postoperative abdominal adhesions,PAA)的疗效和机制。方法将108只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、透明质酸钠组、加味补阳还五汤组。模型组、透明质酸钠组及加味补阳还五汤组进行PAA模型造模,透明质酸钠阳性对照组。分别于术后7、14、28天分批处死,在损伤部位进行目视评分,取材并进行苏木素-伊红染色、马松染色并进行粘连评级,扫描电镜观察腹膜间皮细胞的超微结构。应用免疫组织化学法观察粘连部位的上皮-间充质转换(EMT)相关细胞标志蛋白E-cadherin及α-SMA的表达情况。结果①加味补阳还五汤防治PAA的疗效评价:加味补阳还五汤组Diamod目视粘连积分降低(P<0.05),HE染色和Masson染色粘连等级降低(P<0.05)。②腹膜间皮细胞损伤修复情况:扫描电镜显示加味补阳还五汤组视野内能见到铺路状腹膜间皮细胞,表明加味补阳还五汤组能改善PAA盲肠浆膜侧腹膜间皮细胞的损伤。③腹膜间皮细胞EMT相关指标表达情况:加味补阳还五汤组E-Cadherin蛋白表达增多(P<0.05),α-SMA蛋白表达减少(P<0.05)。结论加味补阳还五汤及透明质酸钠均能有效防治PAA,其疗效可能是通过减轻腹膜间皮细胞EMT实现的。 展开更多
关键词 术后腹腔粘连 加味补阳还五汤 上皮间充质转换 E-钙黏蛋白 Α-平滑肌肌动蛋白
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磷酸三(2,3-二氯丙基)酯暴露诱发NRK-52E细胞纤维化的体外研究
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作者 董良佳 杨峰 +1 位作者 王京真 刘文华 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期329-336,共8页
自2004年禁止使用五溴联苯醚混合物阻燃剂以来,有机磷阻燃剂(organophosphorus flame retardants,OPFR)作为替代品开始被广泛生产和使用,因而成为当今阻燃剂研究的热点。目前,有机磷阻燃剂在水体环境及生物体中已有较高的检出率,而其对... 自2004年禁止使用五溴联苯醚混合物阻燃剂以来,有机磷阻燃剂(organophosphorus flame retardants,OPFR)作为替代品开始被广泛生产和使用,因而成为当今阻燃剂研究的热点。目前,有机磷阻燃剂在水体环境及生物体中已有较高的检出率,而其对生物体及生态环境的潜在毒性效应还知之甚少。本研究利用磷酸三(2,3-二氯丙基)酯(tri(2,3-dichloropropyl)phosphate,TDCPP)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)的毒性暴露实验,探讨TDCPP潜在的肾脏毒性。结果表明:一定剂量的TDCPP对NRK-52E的细胞活性有抑制作用,能诱导细胞内活性氧自由基(reactive oxide species,ROS)生成量增加,并触发上皮-间充质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及胞外基质沉积因子如波形蛋白(vimentin)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、胞外基质成分纤连蛋白-1(fibronectin-1,FN-1)等基因mRNA表达的显著上调以及上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)等基因mRNA表达的显著下调。上述研究结果表明,TDCPP可促进NRK-52E细胞发生上皮间充质转化及纤维化。本研究为进一步综合评估TDCPP的生物和环境毒理效应提供了基础实验数据。 展开更多
关键词 磷酸三(2 3-二氯丙基)酯 大鼠肾小管上皮细胞 毒理效应 有机磷阻燃剂 上皮-间充质转换
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