抑制长链非编码RNA MALAT1对糖脂毒性诱导的内皮细胞功能障碍的影响及可能机制

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作者 张志扬 刘芬 +5 位作者 张雪鹤 房彬彬 张冀鑫 谢骞 杨毅宁 李晓梅 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期185-193,共9页

目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、... 目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、高糖高脂组、高糖高脂对照组以及小干扰RNA(si-RNA)干预的高糖高脂+si-MALAT1组、高糖高脂+si-丝裂原活化蛋白激酶1(si-MAPK1)组。应用实时荧光定量PCR检测MALAT1、MAPK1的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测自噬、线粒体融合分裂、凋亡、通路相关蛋白的表达水平;免疫荧光共聚焦定位检测自噬及溶酶体相关蛋白的荧光共定位情况;透射电镜观察内皮细胞中自噬溶酶体的数目;线粒体探针染色检测线粒体形态;免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)的产生;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡;细胞增殖及划痕实验检测不同时间点各组细胞的增殖及迁移能力;血管形成试验检测各组细胞中新生血管数量。结果:与对照组相比,高糖高脂组、高糖高脂对照组的MALAT1 mRNA、磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶1(p-MAPK1)的表达水平增加,磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达水平下降,P均<0.05。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MALAT1组微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、ROS、剪切后活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、p-MAPK1的表达水平均下降,线粒体融合蛋白视神经萎缩蛋白1(OPA1)、BCL-2、p-mTOR的表达水平均增加,P均<0.05;LC3和溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)蛋白的荧光共定位阳性颗粒增加(P均<0.01),溶酶体数目减少;细胞增殖、迁移、成管能力均增加(P均<0.01)。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MAPK1组内皮细胞中p-MAPK1的表达下降,p-mTOR的表达上升(P均<0.01)。结论:抑制MALAT1表达,可降低糖脂毒性环境中线粒体的自噬水平,减少内皮细胞的凋亡及改善内皮细胞的功能,可能与调节MAPK1/mTOR信号通路有关。 展开更多

关键词 长链非编码rna人类肺腺癌转移相关转录本1 丝裂原活化蛋白激酶1 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 糖脂毒性 内皮细胞功能 线粒体自噬 凋亡

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长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其相关功能 被引量：4

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作者 耿玉东 王树斌 +1 位作者 卢泰青 滕薇 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期594-601,共8页

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其对OSCC细胞生物行为学的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测OSCC患者(55例)... 目的分析长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其对OSCC细胞生物行为学的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测OSCC患者(55例)癌组织、癌旁正常黏膜组织及人口腔鳞状细胞癌SCC25、人正常口腔角质细胞株(NOK)细胞中lncRNA AFAP1-AS1的表达,分析AFAP1-AS1与OSCC患者病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier生存曲线分析AFAP1-AS1与患者预后的关系。AFAP1-AS1 siRNA转染SCC25细胞,细胞计数(CCK-8)及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭的变化,蛋白质印迹(Western blot)检测侵袭相关蛋白、肌动蛋白纤维相关蛋白1(AFAP1)及Rho GTP酶家族成员蛋白的表达情况,免疫荧光染色检测细胞骨架肌动蛋白微丝结构的变化。结果OSCC组织中AFAP1-AS1的表达高于癌旁正常黏膜组织,SCC25细胞中AFAP1-AS1的表达高于NOK细胞(P<0.001)。AFAP1-AS1的表达与OSCC的分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),AFAP1-AS1高表达患者的生存率低于AFAP1-AS1低表达者(P<0.05)。AFAP1-AS1 siRNA转染后AFAP1-AS1的表达水平下调,SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低,AFAP1、RhoA、Rac2、Rab10、RhoGDI和Pfn1的表达上调,RhoC的表达下调,细胞骨架中应力纤维丝减少,肌动蛋白完整性丢失。结论lncRNA AFAP1-AS1在OSCC组织及SCC25细胞中高表达,与OSCC的发生进展及预后相关。下调AFAP1-AS1能够抑制OSCC的增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过调控肌动蛋白纤维丝的完整性实现的。 展开更多

关键词 口腔鳞状细胞癌 长链非编码rna 肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义rna1 预后 增殖 侵袭

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敲低长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制TPC-1甲状腺乳头状癌细胞上皮间质转化及其侵袭和迁移 被引量：5

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作者 范慧洁 董其娟 +4 位作者 于江红 殷璐 孙晓菲 杨雪 张闻宇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期54-60,共7页

目的检测甲状腺乳头状癌组织长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白丝相关蛋白1反义RNA1(AFAP1-AS1)的表达,敲低TPC-1甲状腺乳头状癌细胞AFAP1-AS1,研究其对TPC-1细胞上皮间质转化(EMT)的影响及相关分子机制。方法采用实时定量PCR检测60例甲状... 目的检测甲状腺乳头状癌组织长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白丝相关蛋白1反义RNA1(AFAP1-AS1)的表达,敲低TPC-1甲状腺乳头状癌细胞AFAP1-AS1,研究其对TPC-1细胞上皮间质转化(EMT)的影响及相关分子机制。方法采用实时定量PCR检测60例甲状腺乳头状癌组织lncRNA AFAP1-AS1表达;利用RNA干扰技术(RNAi)敲低TPC-1甲状腺乳头状癌细胞AFAP1-AS1,设置AFAP1-AS1敲低(shAFAP1-AS1)组和阴性对照RNA(shNC)组及未转染的TPC-1细胞为对照组。通过集落形成实验检测TPC-1细胞集落形成能力、 TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;通过实时定量PCR检测敲低AFAP1-AS1后,细胞上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、β联蛋白(β-catenin)、锌指转录因子snail2的mRNA水平, Western blot法检测其蛋白水平。结果与癌旁组比较,甲状腺乳头状癌组中AFAP1-AS1 mRNA表达水平显著增加;敲低AFAP1-AS1后, TPC-1细胞的集落形成能力、侵袭和迁移能力均显著降低;与shNC组和对照组相比,敲低AFAP1-AS1后,细胞snail2、 vimentin和β-catenin的mRNA和蛋白表达显著降低,而E-cadherin的mRNA和蛋白表达显著增加。结论 lncRNA AFAP1-AS1在甲状腺乳头状癌组织高表达,敲低TPC-1细胞AFAP1-AS1后,癌细胞的集落形成能力、侵袭和迁移能力显著下调,可能与抑制细胞EMT过程有关。 展开更多

关键词 甲状腺乳头状癌 长链非编码rna(lncrna) 肌动蛋白丝相关蛋白1反义rna1(AFAP1-AS1) TPC-1细胞 上皮间质转化(EMT) 集落形成实验 细胞侵袭 细胞迁移

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长链非编码RNA AFAP1-AS1在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量：6

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作者 熊钢 龚江波 +1 位作者 周靖 刘焰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期290-294,共5页

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白-1反义RNA1(actin filamentassociated protein 1-antisense RNA1,AFAP1-AS1 RNA1)在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用Real-time PCR方法检测2010... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白-1反义RNA1(actin filamentassociated protein 1-antisense RNA1,AFAP1-AS1 RNA1)在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用Real-time PCR方法检测2010年1月至2014年12月宜昌市第二人民医院及三峡大学仁和医院手术切除的274例胃癌组织及相应癌旁正常胃组织中AFAP1-AS1的表达,并分析AFAP1-AS1表达量与临床及病理特征的关系。结果:AFAP1-AS1在胃癌组织比癌旁正常组织显著高表达(P<0.01)。AFAP1-AS1在早期胃癌组织中平均表达量明显低于进展期胃癌(P<0.01)。在不同病理类型胃癌中,AFAP1-AS1的表达量没有差异(P>0.05)。AFAP1-AS1表达量和胃癌淋巴侵袭或远处转移密切相关,在伴有淋巴结侵袭或远处转移的胃癌组织中,AFAP1-AS1明显高表达(P<0.01)。结论:AFAP1-AS1可能是胃癌发生发展的一个重要因素;有望成为新的胃癌预后标志物,用于胃癌的临床诊断和预后判断。 展开更多

关键词 长链非编码rna 肌动蛋白纤维相关蛋白-1反义rna1 胃癌

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长链非编码RNA AFAP1-AS1在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量：16

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作者 付丛 张行炜 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期983-986,共4页

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在口腔鳞癌及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法:利用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测75例口腔鳞癌组织及其配对癌旁正常组织中lncRNA AFAP1-AS1的表达情况,并... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在口腔鳞癌及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法:利用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测75例口腔鳞癌组织及其配对癌旁正常组织中lncRNA AFAP1-AS1的表达情况,并分析其与口腔鳞癌临床病理学特征之间的联系;应用小干扰RNA(siRNA)干扰lncRNA AFAP1-AS1表达,CCK-8实验检测lncRNA AFAP1-AS1对口腔鳞癌细胞株Tca8113细胞增殖能力的影响。结果:RT-qPCR检测结果显示lncRNA AFAP1-AS1在癌组织中的相对表达水平是癌旁组织的5.16倍,差异有统计学意义(P<0.01)。lncRNA AFAP1-AS1的表达与临床分期、分化程度及淋巴结转移显著相关(P<0.05)。CCK-8实验结果显示,转染48h、72h实验组A450值较对照组显著降低(P<0.01),表明siRNA沉默AFAP1-AS1表达后,抑制了Tca8113细胞的增殖。结论:lncRNA AFAP1-AS1在口腔鳞癌中的表达上调可能与口腔鳞癌的发生发展有关。 展开更多

关键词 口腔鳞状细胞癌 长链非编码rna 肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义rna1 细胞增殖

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长链非编码RNA ZFAS1和SNHG5在鼻咽癌组织中的表达及对预后的影响分析 被引量：1

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作者 李满意 黄海平 +2 位作者 程付伟 胡晓清 刘济生 《中国医学前沿杂志（电子版）》 2019年第2期109-112,共4页

目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)锌指蛋白反义链1(zinc?nger antisense 1,ZFAS1和核仁小RNA宿主基因5(small nucleolar RNA host gene 5,SNHG5)在鼻咽癌组织中的表达及对预后的影响。方法选择2013年6月至2015年6月本... 目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)锌指蛋白反义链1(zinc?nger antisense 1,ZFAS1和核仁小RNA宿主基因5(small nucleolar RNA host gene 5,SNHG5)在鼻咽癌组织中的表达及对预后的影响。方法选择2013年6月至2015年6月本院收治的109例鼻咽癌患者为研究对象,所有患者均行鼻咽活检且经病理检查证实为鼻咽癌。采用实时定量PCR和荧光定量PCR检测并比较鼻咽癌组织、癌旁组织以及不同临床病理特征、不同预后患者ZFAS1和SNHG5的相对表达量。结果鼻咽癌组织中ZFAS1的相对表达量显著高于癌旁组织(P <0.05),而SNHG5的相对表达量显著低于癌旁组织(P <0.05)。不同性别、年龄患者ZFAS1和SNHG5的相对表达量比较均无显著差异(P_均> 0.05)。TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者ZFAS1的相对表达量显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P <0.05),有淋巴结转移患者ZFAS1的相对表达量显著高于无淋巴结转移患者(P <0.05);TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者SNHG5的相对表达量显著低于Ⅰ～Ⅱ期患者(P <0.05),有淋巴结转移患者SNHG5的相对表达量显著低于无淋巴结转移患者(P <0.05)。107例患者完成随访,随访率为98.17%。随访3年,死亡19例,存活90例。死亡患者ZFAS1的相对表达量显著高于存活患者(P <0.05),且SNHG5的相对表达量显著低于存活患者(P <0.05)。结论在鼻咽癌组织中,lncRNA ZFAS1表达上调,且预后越差,其表达水平越高;lncRNA SNHG5表达下调,且预后越差,其表达水平越低。lncRNA ZFAS1和SNHG5在评估鼻咽癌预后方面具有重要的研究意义。 展开更多

关键词 长链非编码rna 锌指蛋白反义链1 核仁小rna宿主基因5 鼻咽癌 预后

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长链非编码RNAβ分泌酶1反义转录物在七氟醚诱发老年大鼠认知功能下降中的作用 被引量：2

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作者 宋俊杰 范军朝 +1 位作者 陈英 陈勇 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期957-963,共7页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)β分泌酶1反义转录物(BACE1-AS)在七氟醚诱发老年大鼠认知功能下降中的作用。方法SPF级健康雄性SD老年大鼠64只,18月龄,体重480~580 g。采用随机数字表法分为四组:对照组(C组)、七氟醚组(S组)、七氟醚+阴... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)β分泌酶1反义转录物(BACE1-AS)在七氟醚诱发老年大鼠认知功能下降中的作用。方法SPF级健康雄性SD老年大鼠64只,18月龄,体重480~580 g。采用随机数字表法分为四组:对照组(C组)、七氟醚组(S组)、七氟醚+阴性对照质粒组(SN组)和七氟醚+BACE1-AS抑制剂(siRNA-BACE1-AS)组(ST组),每组16只。SN组和ST组分别侧脑室注射阴性对照质粒和siRNA-BACE1-AS,C组和S组注射等体积PBS溶液,注射后1 d C组吸入30%氧气6 h,S组、SN组和ST组吸入3.6%七氟醚与30%氧气的混合气体6 h。气体吸入后1 d,采用水迷宫实验测实验第1~5天逃避潜伏期和实验第6天穿越平台次数。水迷宫实验结束后1 h内处死大鼠,取海马组织,采用ELISA法检测海马组织TNF-α、IL-1β、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)浓度,可见分光光度计法检测海马组织caspase-3活性,Western blot法检测海马组织Bax、Bcl-2和BACE1蛋白含量,RT-qPCR法检测海马组织lncRNA BACE1-AS、miR-124和BACE1 mRNA表达量,TUNEL法测定海马组织神经细胞凋亡百分比,苏木素伊红染色法观察海马组织病理结构。结果与C组比较,S组、SN组和ST组水迷宫实验第3~5天逃避潜伏期明显延长(P<0.05),实验第6天穿越平台次数明显减少(P<0.05),海马组织TNF-α、IL-1β和MDA浓度、BACE1和Bax蛋白含量、lncRNA BACE1-AS和BACE1 mRNA表达量、凋亡细胞百分比明显升高(P<0.05),SOD浓度、Bcl-2蛋白含量、miR-124 mRNA表达量明显降低(P<0.05),caspase-3活性明显增强(P<0.05)。与S组比较,ST组水迷宫实验第3~5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),实验第6天穿越平台次数明显增多(P<0.05),海马组织TNF-α、IL-1β和MDA浓度、BACE1和Bax蛋白含量、lncRNA BACE1-AS和BACE1 mRNA表达量、凋亡细胞百分比明显降低(P<0.05),SOD浓度、Bcl-2蛋白含量、miR-124 mRNA表达量明显升高(P<0.05),caspase-3活性明显减弱(P<0.05)。S组和SN组上述指标差异均无统计学意义。结论长链非编码RNAβ分泌酶1反义转录物参与七氟醚诱导老年大鼠认知功能下降,其机制与神经细胞炎症、氧化应激损伤、调控miR-124和BACE1表达和促进细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 七氟醚 长链非编码rna β分泌酶1反义转录物 老年大鼠 认知障碍

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长链非编码RNA TTN-AS1在肺腺癌中的表达及其临床意义

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作者 贾云泷 刘琰 +3 位作者 王郁 刘天旭 王佳丽 刘丽华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期653-657,共5页

目的:研究肺腺癌组织中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肌联蛋白反义RNA1(titin antisense RNA1,TTN-AS1)的表达情况,并分析其与肺腺癌患者临床病理特征和预后的关系。方法:使用TCGA数据库对肺腺癌数据集中TTN-AS1的表达情... 目的:研究肺腺癌组织中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肌联蛋白反义RNA1(titin antisense RNA1,TTN-AS1)的表达情况,并分析其与肺腺癌患者临床病理特征和预后的关系。方法:使用TCGA数据库对肺腺癌数据集中TTN-AS1的表达情况进行分析;收集在2014年1月至2015年1月期间在河北医科大学第四医院胸外科行肿瘤切除并经病理证实的52例肺腺癌患者肿瘤组织及其相应癌旁组织标本,使用q PCR检测其TTN-AS1的表达水平并分析其与患者临床病理特征的相关性,生存分析探讨其在患者预后中的临床意义。结果:TCGA数据库分析和qPCR检测结果均显示,TTN-AS1在肺腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(均P<0.01)。TTN-AS1的表达与肺腺癌患者的TNM分期和淋巴结转移相关联(均P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤侵犯范围无关联(P>0.05)。Kaplan-Meier单因素分析结果显示,高表达TTN-AS1较低表达TTN-AS1的肺腺癌患者术后DFS和OS显著缩短(均P<0.01)。Cox比例风险回归模型分析结果显示,肿瘤高侵犯范围、阳性淋巴结转移和TTN-AS1高表达是影响患者术后PFS和OS的独立危险因素(P<0.01)。结论:TTN-AS1在肺腺癌组织中高表达,与患者TNM分期、淋巴结转移以及与患者较差的DFS和OS密切关联(均P<0.05),高表达TTN-AS1可能是提示肺腺癌患者预后不良的生物标志物。 展开更多

关键词 肺腺癌 长链非编码rna(lncrna) 肌联蛋白反义rna 1(TTN-AS1) 预后 生物标志物

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干扰长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制人鼻咽癌HNE2细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的研究 被引量：3

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作者 谢天飞 王凌云 +1 位作者 刘丽 桑建中 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期2742-2746,2752,共6页

目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA... 目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA-NC)与lncRNA AFAP1-AS1干扰组(sh-AFAP1-AS1),通过试剂盒转入对应目的片段,进行RT-PCR验证;结晶紫染色法检测细胞增殖,FCM检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平,免疫组织化学法检测VEGF表达TUNEL检测肿瘤组凋亡,将转染sh-AFAP1-AS1成功的HNE2细胞及其阴性对照细胞悬浮液分别于右腋下静脉注入裸鼠体内,以成瘤直径超过5 mm为抑制成功。2周后比较2组裸鼠肿瘤重量、AFAP1-AS1表达量、肿瘤组织细胞凋亡、VEGF表达变化。结果:sh-AFAP1-AS1细胞AFAP1-AS1表达水平和细胞增殖率低于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞凋亡率高于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞的侵袭率低于Control组(P<0.05),sh-AFAP1-AS1细胞中VEGF和MMP-9蛋白表达水平较Control组显著降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤质量、AFAP1-AS1表达量均较Control组降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤组织的细胞凋亡率高于Control组(P<0.05),肿瘤组织中VEGF表达量低于Control组(P<0.05)。结论:AFAP1-AS1可能通过调控癌细胞增殖、转移及侵袭相关蛋白表达参与NPC HNE2细胞的增殖、侵袭及转移过程。 展开更多

关键词 鼻咽癌 HNE2细胞 长链非编码rna 肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义rna1

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长链非编码RNA OSER1-AS1对缺氧环境下胃癌细胞上皮间质转化的机制研究 被引量：3

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作者 喻卉 关李稳 刘真义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1617-1622,共6页

目的:探讨长链非编码RNA氧化应激反应丝氨酸丰富1反义RNA 1(LncRNA OSER1-AS1)对缺氧诱导的胃癌细胞上皮间质转化(EMT)的作用机制。方法:缺氧组(Hypoxia)、对照组(Hypoxia+NC)细胞转染si-LncRNA OSER1-AS1-NC,实验组(Hypoxia+si)细胞转... 目的:探讨长链非编码RNA氧化应激反应丝氨酸丰富1反义RNA 1(LncRNA OSER1-AS1)对缺氧诱导的胃癌细胞上皮间质转化(EMT)的作用机制。方法:缺氧组(Hypoxia)、对照组(Hypoxia+NC)细胞转染si-LncRNA OSER1-AS1-NC,实验组(Hypoxia+si)细胞转染si-LncRNA OSER1-AS1后,Hypoxia、Hypoxia+NC、Hypoxia+si组细胞的培养基中添加CoCl2构建缺氧微环境;另取细胞转染si-LncRNA OSER1-AS1-NC后,常规培养,为正常组(control)细胞。qRT-PCR检测各组细胞中LncRNA OSER1-AS1、E-cadherin和α-SMA mRNA表达,检测各组细胞形态的改变,CCK-8法检测细胞的增殖能力;Transwell侵袭检测各组细胞的侵袭能力;免疫荧光和Western blot检测各组细胞中E-cadherin、α-SMA以及对应蛋白的表达水平。结果:与control组相比,Hypoxia、Hypoxia+NC、Hypoxia+si组细胞中LncRNA OSER1-AS1的表达、E-cadherin的mRNA和蛋白的表达以及细胞中E-cadherin与α-SMA荧光强度的比值明显降低,细胞中发生EMT细胞比例、细胞增殖性能、侵袭能力、α-SMA的mRNA和蛋白表达明显升高,与Hypoxia+NC组相比,Hypoxia+si组细胞中LncRNA OSER1-AS1的表达、E-cadherin的mRNA和蛋白表达以及细胞中E-cadherin与α-SMA荧光强度的比值明显降低,细胞中发生EMT细胞比例、细胞增殖性能、侵袭能力、α-SMA的mRNA和蛋白表达明显升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:LncRNA OSER1-AS1在胃癌组织中呈低表达,沉默其表达RNA能明显增强其侵袭能力,推动肿瘤细胞的EMT过程。 展开更多

关键词 长链非编码rna氧化应激反应丝氨酸丰富1反义rna 1 胃癌 缺氧 上皮间质转化

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lncRNA Rpph1对糖尿病肾病足细胞AMPK/Nrf2通路、焦亡的影响

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作者 古丽鲜·吐尔洪 姑丽孜巴·塔衣尔 《科学技术与工程》 北大核心 2025年第22期9305-9311,共7页

探讨长链非编码RNA(lncRNA)Rpph1促进糖尿病肾病(diabetes nephropathy,DN)足细胞损伤,是否与腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路以及细胞焦亡和凋亡有关。体外培养人肾小球足细胞... 探讨长链非编码RNA(lncRNA)Rpph1促进糖尿病肾病(diabetes nephropathy,DN)足细胞损伤,是否与腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路以及细胞焦亡和凋亡有关。体外培养人肾小球足细胞(Human glomerular podocytes,HGPC)随机分为对照组、模型组、lncRNA Rpph1过表达组、低表达组和空载体组,5 mmol/L的D-葡萄糖孵育HGPC为对照组,其他三组采用30 mmol/L的D-葡萄糖孵育细胞建立DN模型。脂质体转染法将携带lncRNA Rpph1过表达、低表达与空载体的稳定质粒与HGPC共孵育。qRT-PCR检测lncRNA Rpph1表达,Western blot检测p-AMPK/AMPK和Nrf2蛋白,以及细胞焦亡相关蛋白包括Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)和GSDMD-N的表达量,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测凋亡率。与对照组相比,模型组lncRNA Rpph1表达量显著增加(P<0.05)。模型组p-AMPK/AMPK、Nrf2、NLRP3、caspase-1和GSDMD-N蛋白表达量显著增加(P<0.05)。模型组细胞存活率显著减少,凋亡率增加(P<0.05)。与模型组和空载体组相比,lncRNA Rpph1过表达组lncRNA Rpph1、p-AMPK/AMPK、Nrf2、NLRP3、caspase-1和GSDMD-N蛋白表达量显著增加,细胞存活率显著减少,凋亡率增加(P<0.05);lncRNA Rpph1低表达组lncRNA Rpph1、p-AMPK/AMPK、Nrf2、NLRP3、caspase-1和GSDMD-N蛋白表达量显著下降,细胞存活率显著增多,凋亡率下降(P<0.05)。DN中lncRNA Rpph1高表达可以促进足细胞损伤,可能通过AMPK/Nrf2信号通路激活细胞焦亡和凋亡有关。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 足细胞 长链非编码rna Rpph1 腺苷酸激活蛋白激酶 核因子E2相关因子2 细胞焦亡

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LncRNA GNAS-AS1通过调节miR-449a/Notch1轴参与胃癌细胞的增殖和迁移 被引量：1

12

作者 徐俐 胡珊珊 赵海明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期483-489,共7页

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GNAS反义RNA1(GNAS-AS1)通过调节miR-449a/缺刻基因1(Notch1)轴对胃癌(GC)细胞增殖和迁移的影响。方法收集四川省人民医院2013年9月至2017年9月30例确诊为GC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本;将GC细胞AGS随... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GNAS反义RNA1(GNAS-AS1)通过调节miR-449a/缺刻基因1(Notch1)轴对胃癌(GC)细胞增殖和迁移的影响。方法收集四川省人民医院2013年9月至2017年9月30例确诊为GC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本;将GC细胞AGS随机分为对照组(Control组)、si-NC组、si-GNAS-AS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组、si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组。实时荧光定量PCR检测GNAS-AS1、miR-449a和Notch1 mRNA的表达;MTT实验、平板克隆形成实验检测增殖;wound healing实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭。Western Blot检测Notch1、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-449a和GNAS-AS1、Notch1的关系。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中GNAS-AS1、Notch1 mRNA表达升高,miR-449a表达降低(P<0.05)。与Control组、si-NC组相比,si-GNAS-AS1组AGS细胞GNAS-AS1表达、OD_(490)值、克隆形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin蛋白表达表达降低,miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。与si-GNASAS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组相比,si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组OD_(490)值、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin表达升高(P<0.05),miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。GNAS-AS1靶向负调控miR-449a表达,miR-449a靶向负调控Notch1表达。结论沉默GNAS-AS1可能通过上调miR-449a来抑制Notch1蛋白的表达,从而抑制GC细胞增殖、迁移、侵袭过程。 展开更多

关键词 长链非编码rna GNAS反义rna1 miR-449a 缺刻基因1 胃癌 迁移 增殖

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LncRNA MYLK-AS1调节miR-141-3p/STMN1轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

13

作者 刘洁 谢兴明 +1 位作者 钮洪霞 杨先智 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期276-282,共7页

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肌球蛋白轻链激酶反义RNA1(myosin light chain kinase antisense RNA1,MYLK-AS1)调节miR-141-3p/微管不稳定蛋白1(stathmin 1,STMN1)轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:将H... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肌球蛋白轻链激酶反义RNA1(myosin light chain kinase antisense RNA1,MYLK-AS1)调节miR-141-3p/微管不稳定蛋白1(stathmin 1,STMN1)轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:将HGC27细胞分为NC组、si-NC组、si-MYLK-AS1组、si-MYLK-AS1+inhibitor NC组、si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor组。双萤光素酶报告基因实验检测LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1的关系;qRT-PCR检测HGC27细胞中LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p表达;CCK-8法检测HGC27细胞增殖情况;流式细胞术检测HGC27细胞凋亡;使用Transwell实验评估了HGC27细胞的侵袭和迁移能力,并统计了穿透基质膜的细胞数量;同时采用Western blot技术检测了HGC27细胞中STMN1、E-cadherin、Vimentin及N-cadherin这几种蛋白表达量的变化。结果:HGC27细胞中LncRNA MYLK-AS1、STMN1水平高于GES-1细胞(P<0.05),miR-141-3p水平低于GES-1细胞(P<0.05)。si-MYLK-AS1组HGC27细胞A_(450 nm)值、迁移、侵袭细胞数量、LncRNA MYLK-AS1表达量、STMN1、N-cadherin、Vimentin蛋白水平低于NC组、si-NC组(P<0.05),HGC27细胞凋亡率、miR-141-3p表达量、E-cadherin蛋白水平高于NC组、si-NC组(P<0.05);而miR-141-3p低表达减弱了沉默LncRNA MYLK-AS1抑制HGC27细胞发展的作用;LncRNA MYLK-AS1靶向调节miR-141-3p/STMN1轴。结论:LncRNA MYLK-AS1可能通过上调microRNA-141-3p的表达水平,间接导致STMN1基因表达受到抑制,这一过程可能对胃癌细胞的增殖、凋亡及侵袭特性产生明显影响。 展开更多

关键词 长链非编码rna肌球蛋白轻链激酶反义rna1 微小rna-141-3p/微管不稳定蛋白1轴 胃癌 增殖 凋亡 侵袭

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lncRNA MIF-AS1调节miR-423-5p/PYCR1轴对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响 被引量：2

14

作者 杨剑波 邵继春 +2 位作者 曾治军 赵涛 王兴 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第18期2544-2549,共6页

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)巨噬细胞移动抑制因子反义RNA1(MIF-AS1)调节miR-423-5p/吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)轴对前列腺癌(PC)细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养PC3细胞,敲低MIF-AS1或下调miR-423-5p表达,检测PC患者肿瘤... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)巨噬细胞移动抑制因子反义RNA1(MIF-AS1)调节miR-423-5p/吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)轴对前列腺癌(PC)细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养PC3细胞,敲低MIF-AS1或下调miR-423-5p表达,检测PC患者肿瘤组织与癌旁组织和细胞中MIF-AS1、miR-423-5p和PYCR1 mRNA的表达;检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭;Western blot检测PYCR1蛋白表达;验证miR-423-5p和MIF-AS1、PYCR1的关系。结果MIF-AS1、PYCR1 mRNA在肿瘤组织中呈高表达,miR-423-5p呈低表达。沉默MIF-AS1可抑制PC3细胞增殖、迁移、侵袭及PYCR1表达,上调miR-423-5p表达,诱导细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-423-5p表达可逆转沉默MIF-AS1对PC3细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05)。MIF-AS1、PYCR1与miR-423-5p存在靶向调控关系。结论沉默MIF-AS1可能通过上调miR-423-5p来抑制PYCR1表达,抑制PC细胞的恶性行为。 展开更多

关键词 长链非编码rna巨噬细胞移动抑制因子反义rna1 miR-423-5p 吡咯啉-5-羧酸还原酶1 前列腺癌 恶性生物学行为

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lncRNA PCED1B-AS1通过靶向FUS调控MAPK信号通路并影响甲状腺乳头状癌细胞生物学功能

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作者 许晶晶 张峰源 +3 位作者 李家政 李眯 梁嘉辉 陈盛霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2022-2030,共9页

目的:探讨长链非编码RNA PCED1B反义链1(long noncoding RNA PCED1B antisense strand 1,lncRNA PCED1B-AS1)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡的影响及作用机制。方法:体外培养人PTC细胞,R... 目的:探讨长链非编码RNA PCED1B反义链1(long noncoding RNA PCED1B antisense strand 1,lncRNA PCED1B-AS1)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡的影响及作用机制。方法:体外培养人PTC细胞,RT-qPCR检测PCED1B-AS1和肉瘤融合蛋白(fused in sarcoma,FUS)的表达情况;Transwell检测敲减/过表达PCED1B-AS1与FUS对PTC细胞迁移与侵袭的影响;CCK-8和平板克隆实验分析敲减PCED1B-AS1或过表达FUS对PTC细胞增殖的影响;流式细胞术测定敲减PCED1B-AS1对PTC细胞凋亡的影响;生物信息学和RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)实验确定PCED1B-AS1和FUS的靶向结合;荧光原位杂交实验验证PCED1B-AS1和FUS是否存在共定位;Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated pro⁃tein kinase,MAPK)信号通路相关蛋白的表达。结果:(1)与正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1相比,PTC细胞PCED1BAS1表达水平显著升高,FUS表达水平显著降低(P<0.05);(2)敲减PCED1B-AS1与过表达FUS均抑制细胞迁移、侵袭和增殖,促进细胞凋亡(P<0.05);(3)生物信息学分析和RIP验证了PCED1B-AS1与FUS存在靶向结合(P<0.05);(4)PCED1B-AS1和FUS在细胞质中存在共定位;(5)抑制PCED1B-AS1降低MAPK家族蛋白p-ERK1/2、p-JNK和p-P38水平(P<0.05)。结论:lncRNA PCED1B-AS1可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移与侵袭,促进其凋亡,其机制可能与FUS的表达及MAPK信号通路有关。 展开更多

关键词 甲状腺乳头状癌细胞 长链非编码rna PCED1B反义链1 肉瘤融合蛋白 MAPK信号通路

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LncRNA RP1通过调控细胞周期蛋白质促进结肠癌细胞增殖 被引量：6

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作者 钟梨 李楠 刘海鹰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1127-1134,共8页

长链非编码RNAs(long non-coding RNAs, lncRNAs)是一类无蛋白质编码功能,长度大于200 nt的RNAs。qRT-PCR实验证实,lncRNA RP1-506.5(命名为RP1)在人结肠癌细胞株中的表达量明显高于人正常结肠上皮细胞。RP1在结肠癌组织中的表达量为癌... 长链非编码RNAs(long non-coding RNAs, lncRNAs)是一类无蛋白质编码功能,长度大于200 nt的RNAs。qRT-PCR实验证实,lncRNA RP1-506.5(命名为RP1)在人结肠癌细胞株中的表达量明显高于人正常结肠上皮细胞。RP1在结肠癌组织中的表达量为癌旁组织表达量的8.5倍。在HCT116细胞中,上调RP1的表达,同时在HCT8细胞中沉默RP1的表达,探讨RP1对结肠癌细胞生物学特性的影响。MTS检验、活细胞工作站增殖实验,结合平板克隆检测发现,过表达RP1能明显促进结肠癌细胞HCT116的增殖能力。而在HCT8细胞中沉默RP1表达后,该细胞的增殖能力明显减弱。流式细胞周期分析的结果表明,RP1能促进细胞周期快速通过G_1/S检测点,并能加速S期进程。荧光定量PCR、Western印迹检测发现,在HCT116细胞中上调RP1的表达,P21的表达水平下调,细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、依赖细胞周期蛋白激酶6(CDK6)表达水平上调;当沉默LncRNA RP1的表达时,能上调P21的表达水平,下调cyclinD1、CDK6的表达水平。上述结果表明,LncRNA RP1可通过调控周期相关蛋白质的表达促进结肠癌细胞增殖。 展开更多

关键词 长链非编码rna RP1 P21 细胞周期蛋白D1 依赖细胞周期蛋白激酶6 结肠癌

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恶性肿瘤中MNX1反义RNA 1的作用及机制研究进展

17

作者 关沧海 赵俞乔 +3 位作者 郭靓 陈雨竹 王微娜 姜兴明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1908-1912,共5页

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类广泛存在于细胞核和细胞质内、长度在200 nt以上、缺少开放阅读框、不参与或很少参与蛋白质编码、主要从蛋白编码基因的反义链及间隔区转录出来的RNA[1-6]。已有大量研究证实,lncRNA涉... 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类广泛存在于细胞核和细胞质内、长度在200 nt以上、缺少开放阅读框、不参与或很少参与蛋白质编码、主要从蛋白编码基因的反义链及间隔区转录出来的RNA[1-6]。已有大量研究证实,lncRNA涉及调控多种生物学功能,比如细胞增殖、凋亡及血管生成[7-9]。表达异常的lncRNA与诸多肿瘤的发生发展密切相关[10-11]。lncRNA可通过调节甲基化、组蛋白修饰和染色质重塑改变细胞周期和增殖免疫等在诸多肿瘤中发挥促癌或抑癌的作用[12-15]。MNX1反义RNA 1(MNX1 antisense RNA 1,MNX1-AS1)是一种新发现的与恶性肿瘤发生发展密切相关的lncRNA。 展开更多

关键词 长链非编码rna 肿瘤 MNX1反义rna1

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lncRNA TTN-AS1通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭 被引量：3

18

作者 刘华 张素兰 +5 位作者 梁天嵩 王娟 赵静宜 郑颖娟 张相娴 杨道科 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1789-1795,共7页

目的:观察肺腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)TTN反义RNA 1(TTN-AS1)的表达情况,以及沉默TTN-AS1表达对肺腺癌A549细胞活力和侵袭的影响。方法:RT-qPCR法检测32例肺腺癌和癌旁正常组织中TTN-AS1、微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)和基质金... 目的:观察肺腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)TTN反义RNA 1(TTN-AS1)的表达情况,以及沉默TTN-AS1表达对肺腺癌A549细胞活力和侵袭的影响。方法:RT-qPCR法检测32例肺腺癌和癌旁正常组织中TTN-AS1、微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA表达水平。将未转染的A549细胞设为空白组,转染si-NC的为si-NC对照组,转染沉默TTN-AS1表达的siRNA为si-lncRNA组(n=5),采用CCK8和Transwell方法检测沉默TTN-AS1表达对A549细胞活力和侵袭的影响。使用双萤光素酶报告基因实验、RNA免疫沉淀实验、RT-qPCR和Western blot测定TTN-AS1对miR-519d-3p和miR-519d-3p对MMP2的靶向调控作用。结果:32例肺腺癌组织中TTN-AS1的表达水平显著高于对应癌旁正常组织(P<0.05)。沉默A549细胞中TTN-AS1的表达可抑制细胞的活力和侵袭。TTN-AS1可通过海绵吸附的方式负调控miR-519d-3p的表达;MMP2是miR-519d-3p的靶基因,受其负调控。过表达MMP2可部分逆转沉默TTN-AS1和过表达miR-519d-3p对A549细胞侵袭的抑制作用。结论:肺腺癌组织中lncRNA TTN-AS1呈现高表达情况,它可能通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭能力。 展开更多

关键词 肺腺癌 长链非编码rna TTN反义rna 1 微小rna-519d-3p 细胞活力 细胞侵袭

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LncRNA CCAT1通过PI3K/AKT信号通路影响子宫内膜癌细胞的增殖和凋亡 被引量：8

19

作者 李林 刘晶 +1 位作者 王景 杨睿 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期2737-2741,共5页

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路影响,阐明CCAT1在子宫内膜癌生长中的作用及可能机制。方法:将HEC-1-A细胞分为空白对照组(BC)、阴性对照组(NC)和CCAT1... 目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路影响,阐明CCAT1在子宫内膜癌生长中的作用及可能机制。方法:将HEC-1-A细胞分为空白对照组(BC)、阴性对照组(NC)和CCAT1-siRNA组,CCAT1-siRNA组细胞转染CCAT1-siRNA,NC组转染阴性对照siRNA,BC组不转染。RT-PCR测定细胞中CCAT1水平。CCK8测定HEC-1-A细胞增殖情况。流式细胞术测定HEC-1-A细胞凋亡。Western blot测定HEC-1-A细胞PCNA、活化的cleaved caspase 3、Bax、Bcl-2、PI3K、AKT、p-AKT蛋白水平。结果:HEC-1-A细胞中CCAT1水平(2.15±0.24)高于T-HESC细胞(1.00±0.13)(t=11.147,P<0.001)。与BC组和NC组相比,CCAT1-siRNA组HEC-1-A细胞中CCAT1水平降低(P<0.001),细胞增殖率降低(P<0.001),细胞凋亡率降低(F=112.080,P<0.001),PCNA和Bcl-2蛋白水平降低(P<0.001),cleaved caspase 3和Bax蛋白水平升高(P<0.001),PI3K和p-AKT蛋白水平降低(P<0.001)。BC组和NC组HEC-1-A细胞中各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默子宫内膜癌细胞中CCAT1可抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与沉默CCAT1可抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 长链非编码rna CCAT1 子宫内膜癌 增殖 凋亡 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B

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LncRNA CCAT1通过MAPK/ERK通路影响子宫内膜癌细胞的侵袭转移 被引量：5

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作者 李林 魏旭静 +1 位作者 路素双 刘晶 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1477-1481,共5页

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞侵袭迁移和丝裂原活化激酶/胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路影响,阐明CCAT1在子宫内膜癌侵袭迁移中的作用及可能机制。方法:将KLE细胞分为空白对照组(BC组)、阴性对照组(NC组)... 目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞侵袭迁移和丝裂原活化激酶/胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路影响,阐明CCAT1在子宫内膜癌侵袭迁移中的作用及可能机制。方法:将KLE细胞分为空白对照组(BC组)、阴性对照组(NC组)、CCAT1-siRNA组和CCAT1-siRNA+EGF组,CCAT1-siRNA组转染CCAT1-siRNA,CCAT1-siR-NA+EGF组转染CCAT1-si RNA并加入30 ng/ml EGF处理,NC组转染阴性对照si RNA,BC组不转染。实时荧光RT-PCR测定细胞中CCAT1水平,采用Transwell测定KLE细胞侵袭能力,采用划痕实验测定KLE细胞迁移能力,采用Western blot测定各组KLE细胞上皮钙黏蛋白(E-cadhrein)、波纹蛋白(Vimentin)、锌指蛋白转录因子(Snail)、扭曲蛋白(Twist)、ERK和磷酸化ERK(p-ERK)蛋白水平。结果:KLE细胞中CCAT1水平(1.83±0.17)高于T-HESC细胞(1.00±0.09)(t=11.416,P<0.001)。与BC组(1.00±0.11)和NC组(0.98±0.09)比较,CCAT1-si RNA组KLE细胞中CCAT1水平(0.37±0.08)降低(F=101.237,P<0.001)。与BC组和NC组比较,CCAT1-si RNA组KLE细胞侵袭细胞数降低(P<0.05),细胞迁移距离降低(P<0.05),E-cadhrein蛋白水平升高(P<0.05),Vimentin、Snail、Twist和p-ERK蛋白水平降低(P<0.05)。与CCAT1-si RNA组比较,CCAT1-si RNA+EGF组KLE细胞侵袭细胞数升高(P<0.05),细胞迁移距离升高(P<0.05),E-cadhrein蛋白水平降低(P<0.05),Vimentin、Snail、Twist和p-ERK蛋白水平升高(P<0.05),BC组和NC组KLE细胞各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默CCAT1可抑制子宫内膜癌细胞侵袭和迁移,其机制可能与沉默CCAT1可抑制MAPK/ERK信号通路有关。 展开更多

关键词 长链非编码rna CCAT1 子宫内膜癌 侵袭 迁移 丝裂原活化激酶 胞外信号调节激酶

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